利用16SrDNA序列分析和Biolog快速鉴定方法鉴定产脂肪酶菌株

采用16S r DNA序列分析和Biolog快速鉴定两种方法对分离得到的7株产脂肪酶菌株进行了分类鉴定.16S rDNA序列分析结果表明,7株产脂肪酶菌株中TCCC 11087、TCCC 11167、TCCC 11170、TCCC 11180,TCCC 11181属于不动杆菌属,株TCCC 11092、TCCC 11168属于假单胞菌属.Biolog快速鉴定结果显示,TCCC 11087、TCCC 11167、TCCC 11170.TCCC 11180、TCCC 11181 属于溶血不动杆菌,TCCC 11092属于假单胞菌属,TCCC 11168属于荧光假单胞菌.说明两种鉴定方法得到的结果一致,但16S rDNA序列分析方法只能鉴定到属,而Bioiog快速鉴定方法能对多数菌株鉴定到种.     

产脂肪酶细菌的筛选及产酶条件优化

从富油土壤中分离到9株产脂肪酶杆菌,其中BD3菌株产脂肪酶能力较强,通过测定其生理生化特征,初步鉴定该菌为假单胞菌属.对BD3菌株的发酵培养条件进行了优化,以橄榄油作碳源,蛋白胨为氮源,其发酵最佳温度为40℃,最佳pH值为6.5.     

电极生物膜脱氮工艺中反硝化菌相分析

对电极生物膜反硝化脱氮反应器中存活的反硝化菌进行了初步的分离及菌相分析研究,实验共分离出40株菌株,通过对菌株的形态观察及生理生化特征的研究表明,这些菌株分别属于假单胞菌属(Pseudomonas), 不动杆菌属(Acinetobacter), 肠杆菌科(Enterobacteriaceae)3个属,肠杆菌科、假单胞菌属为主要优势菌,占总鉴定菌数的82.5%.在异养环境中分离的24个菌株中,肠杆菌科为优势菌,具有反硝化能力的有18株,占75%;反硝化能力强的有8株,占33.3%.在自养环境中分离的16个菌株中,假单胞菌属为优势菌,其中具有反硝化能力的有12株,占75%;反硝化能力强的有8株,占50%.     

仿刺参体表微生物的菌相分析

采用3种培养基对大连仿刺参体表微生物进行分离,并通过细菌形态、生理生化特性和16SrD-NA分子生物学相结合的方法对分离纯化的细菌进行鉴定,从而了解大连仿刺参体表的菌群组成。结果表明,从仿刺参体表分离纯化了105株细菌,鉴定出10种不同的菌属分别为交替假单胞菌属(Pseud-oalteromonas)、希瓦氏菌属(Shewanella)、假单胞菌属(Pseudomonas)、弧菌属(Vibrio)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),变形菌属(Proteobacterium)、Alteromonadacea、不动杆菌属(Acinetobacter)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloiquefaciens),腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus),其中交替假单胞菌属和弧菌属分别占分离菌株的23.8%和22.9%。     

BAF反应器中好氧反硝化菌的分子鉴定及分析

从处理高浓度蛋白质废水的BAF反应器中经富集分离出一株能以KNO3为唯一氮源生长的好氧反硝化菌N1。为进一步研究其分子生物学特性,采用传统的生理生化特征鉴定法及16SrDNA序列分析法对该菌株进行研究,并与已知种和相关种的菌株进行比较,得到系统发育树状图。结果表明,菌株N1的16SrDNA的核苷酸序列与蒙氏假单胞菌（Pseudomonas monteilii strainCIP 104883）的同源性为99.2%,在细菌系统发育分类学上属于假单胞菌属,蒙氏假单胞菌。好氧反硝化菌株N1的序列已向GenBank提交并得到登录号为HQ840771。关于蒙氏假单胞菌的反硝化研究在国内尚未见报道,此研究对于利用微生物技术治理环境中的氮污染具有较高的研究和应用价值。     

A/O工艺中水解段污泥中菌的分离及鉴定

为了深入了解印染废水的水解酸化-好氧活性污泥处理工艺,需要对水解酸化段污泥中分离得到的菌株,进行菌属鉴定.本文对两种印染废水进水时的水解酸化段污泥进行菌属的鉴定,在蒽醌染料废水进水时,有两株菌株为链球菌属,其余3株分别为奈瑟氏球菌属、杆状菌属、假单胞菌属;在偶氮染料废水进水时,有两株为假单胞菌属,其余4株分别为甲基单胞菌属、葡萄球菌属、副球菌属、诺卡氏菌属.     

一株产生广谱抗菌物质地衣芽孢杆菌的筛选与鉴定

采用异步培养法,从土壤样品中筛选到一株产抗菌物质活性较强的菌株F69．结合菌落形态、生理生化指标和16SrDNA序列分析对菌株F69进行菌种鉴定．菌株F69在系统发育上属于芽孢杆菌属,它和地衣芽胞杆菌菌株的16SrDNA序列相似性最高为99％,该菌株被鉴定为地衣芽孢杆菌（Bacilluslicheniformis）．菌株F69可作为抗菌物质产生菌进行进一步深入研究．     

两株啤酒生产线中易污染细菌的分离与鉴定

从啤酒生产线的装罐车间杀菌机内分离出两株细菌,通过形态特征观察、生理生化特征测定、16SrDNA序列及其系统发育分析,鉴定菌株T-1和菌株T-2分别属于气单胞菌属（AeromonasSp．）和假单胞菌属（PseudomonasSaponiphila）,并采用柠檬酸溶液对两株菌的抑菌性进行检验,结果表明,在柠檬酸的质量浓度低至0．00125g／mL时,对两株细菌都存在较好的抑制作用,这对啤酒生产的微生物控制具有一定的参考。     

一株低温碱性脂肪酶产生菌TS182的分离与鉴定研究

通过Tween-80平板初筛和摇瓶发酵复筛,从连云港海域海水及海泥样品中分离的菌株中筛选获得一株低温碱性脂肪酶高产菌株TS182。通过形态学、生理生化以及分子生物学鉴定菌株TS182为荧光假单孢菌（Pseudomonas fluorescens）。菌株TS182所产脂肪酶最适温度和最适pH分别为15℃和9．0。     

海洋壳聚糖酶高产菌株的筛选和鉴定

从采自连云港连岛海域的海泥中通过透明圈平板筛选法（以胶体壳聚糖为唯一碳源）筛出28株壳聚糖酶产生菌,经过复筛,选取了其中产酶能力最高的菌株为目的菌株,其酶活力达到3.89U/mL。经过形态观察、生理生化和16S rDNA鉴定,将该菌初步鉴定为交替假单胞菌（Pseudoalteromonas sp.）。     

海绵中生物表面活性剂生产菌的筛选及菌种鉴定

海绵(Marine sponge)是一大类低等多细胞动物,其体内及体表富集了大量的、不同种类的微生物。本文分别从繁茂膜海绵和南海海绵中,经富集培养、血平板分离、油扩散技术和表面张力测定等方法分离到高效产生物表面活性剂的菌株H10和菌株S6X。采用16S rDNA基因分析方法和传统生理生化实验方法对这两株菌进行了菌种鉴定,最后鉴定H10为短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus),S6X为帕氏假单胞菌(Pseudomonas palleronii)。     

仙鹤草内生真菌的分离鉴定与抗菌活性

植物内生真菌代谢产物丰富, 作为一种寻找开发药物的重要资源已受到人们的日益关注.本 实验对中药仙鹤草内生真菌进行分离, 获得30 株内生真菌, 其中由根中分离得到17 株, 茎中分离 得到7 株, 叶中分离得到6 株.并采用形态学观察方法, 对分离得到的内生真菌菌株进行初步鉴定, 其分别归属于青霉属, 顶孢霉属, 镰孢霉属, 根霉属, 酵母属, 珠网霉属, 毛霉属和核盘菌属等8 个真 菌属.采用平板对峙法, 研究各菌株对金黄色葡萄球菌的抗菌作用, 通过初步筛选, 共计9 株表现抑 菌活性.再进一步用内生真菌发酵萃取液做抑菌活性, 发现仅3 株菌株有抗菌活性, 都属于镰孢霉 属.为后续的活性物质分离奠定了基础.     

从非洲土壤中分离新的产生脂肪酶的细菌

从采自非洲（喀麦隆和加纳）的３３个土样中分离得到的产生脂肪酶的细菌Ｈ－１,初步鉴定为假单胞菌属,以菌株Ｈ－１为出发菌株,经紫外线照射和亚硝基胍处理,得诱变菌株Ｈ－５８,其脂肪酶产生能力达４０Ｕ／ｍＬ,对菌株Ｈ－５８进行生产能力的稳定性试验。结果良好,连续传代５次能保持良好的产脂肪性能。     

农户自制酸菜中益生潜力乳酸菌的分离鉴定

从农户自制酸菜中分离,鉴定具有益生潜力的优质乳酸菌菌株。根据菌落形态,革兰氏染色和透明圈,从酸菜汁中初步分离到40株乳酸菌菌株,以耐人工胃液为筛选指标,从初筛菌中选择耐酸能力强的乳酸菌,用16sRNA分子生物学方法鉴定菌种。比较筛选菌的耐胆碱能力,产酸性能以及抑菌能力,从中挑选出综合能力最好的菌株。分离得到一株耐酸,耐人工肠液,耐胆碱,产酸能力强,对大肠杆菌,金黄色葡萄球菌和烟曲霉都具有抑制能力的植物乳杆菌。     

海绵中生物表面活性剂生产菌的筛选及菌种鉴定

海绵（Marine sponge） 是一大类低等多细胞动物, 其体内及体表富集了大量的、不同种类的微生物.本文分别从繁茂膜海绵和南海海绵中,经富集培养、血平板分离、油扩散技术和表面张力测定等方法分离到高效产生物表面活性剂的菌株H10和菌株S6X.采用16S rDNA基因分析方法和传统生理生化实验方法对这两株菌进行了菌种鉴定,最后鉴定H10为短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）,S6X为帕氏假单胞菌（Pseudomonas palleronii）.     

豆豉纤溶酶产生菌的筛选及菌种鉴定

在收集的全国21个豆豉产品中分离到369株革兰氏阳性芽孢杆菌,对其进行产纤溶酶活性筛选,得到一株高产纤溶酶菌株HGD107．对菌株HGD107进行形态、生理、生化鉴定,初步鉴定为枯草芽孢杆菌．     

一株碱性果胶酶高产菌株的筛选与鉴定

对天津盐碱地土壤样品中分离筛选的碱性果胶酶高产菌株进行生理生化及分子生物学鉴定,确定其生物学分类地位。以果胶为底物从土壤中筛选碱性果胶酶生产菌株,对复筛获得的菌株L520进行16SrDNA基因测序和分析,结合Biolog微生物鉴定系统完成L520的菌种鉴定;常规的生理生化反应鉴定进一步阐明该菌株的生理生化特性。菌株L520在LB培养基上培养10 h左右产中生芽孢,能利用葡萄糖、甘露醇、木糖为碳源进行生长,降解淀粉,水解酪蛋白但不水解酪氨酸;16SrDNA（NCBI登陆号FJ906822）结果显示该菌株与枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌等有99%的相似性,Biolog鉴定系统中菌株L520培养16~24 h与Bacillus subtilis A相关数据为PROB 99%,SIM 0.853,DIST 2.06。该碱性果胶酶高产菌株分类学上属于芽孢杆菌属的枯草芽孢杆菌,命名为Bacillus subtilis L520,碱性果胶酶发酵活性达到45 U/mL。     

自生固氮菌的分离鉴定

从非豆科作物根际土壤中分离筛选得到２１３个在元氮培养基本能良好生长的菌标,通过酶测定,从中筛选得到１８株固氮能力较强的菌株,并对其中酸疼活最高的４株菌株进行了鉴定,结果表明它们属于固氮菌料的不同属。利用它们可望制成适合于不同农作物复合物。     

碱性脂肪酶生产菌假单孢菌4631菌株的筛选

从３２个土样中分离获得碱性脂肪酶产生菌１６６株，其中４６３１号菌株产酶能力最高，达到９．１ＩＵ／ｍｌ。初步鉴定为假单孢菌属。对研究结果统计分析表明，Ｄ／ｄ值与ＬＡ呈线性相关关系。     

海洋浪溅区混凝土SEM及表面微生物16S rRNA鉴定

针对目前海洋混凝土工程的腐蚀现状,为了探索海洋微生物对混凝土工程浪溅区混凝土的作用机理,在海洋防波堤浪溅区取样,进行混凝土的SEM,EDAX分析并对试样表面的微生物群落进行分子鉴定.SEM,EDAX结果表明,混凝土表面有很多的有机团聚物包裹在晶体的周围.并克隆了其中14株细菌的16S rRNA基因,通过其序列的测定和比较,对这14株细菌进行了分子鉴定,结果表明它们分属于弧菌、假单胞菌、弓形杆菌和假交替单胞菌等4个不同的菌属.