高分子量透明质酸生产菌SH0201的诱变选育

以Streptococcus equi SHO为出发菌,通过5-BU、X-射线辐照诱变选育到1株无溶血性和透明质酸裂解酶双缺陷型菌株X103;以NTG为诱变剂对该菌进行化学诱变,选育到遗传稳定性好,无溶血性,产高分子量透明质酸(HA)的突变菌SH0201,其摇瓶发酵生产HA相对分子量达2.06×106Da,较之出发菌,所产HA分子量有大幅度的提高.     

微生物菌种的诱变选育

从自然界中分离筛选菌种有一定局限性,是比较缓慢的过程,往往达不到生产上的要求。通过诱变剂的处理,使微生物发生大量变异,从中选出具有优良特性的变异菌株,这种方法通常称为诱变育种。诱变育种是目前常用的方法,它具有速度快、收效大、方法简便等优点。以柠檬酸生产菌N—558来说,它的出发菌是产糖化酶的菌种,后经氮芥子气处理,改变了性能,由原来产糖化酶变为生产柠檬酸的菌种。而γ—144的出发菌原是从果园的烂梨上分离出     

透明质酸工业发酵染菌分析与处理

染菌是透明质酸工业发酵生产中最为棘手的问题,同时也是直接影响产品质量、提取收率和成本的关键因素.提出了透明质酸发酵染菌的检测方法,从染菌时间、类型、范围三方面探讨透明质酸发酵染菌的原因,并根据实际生产经验,分别从菌种、空气、管路配置、系统死角清理、培养基灭菌、车间环境等方面明确防止发酵染菌的具体措施,得出了斜面菌种、种子罐、发酵罐不同时期染菌后的补救措施.     

“睡得快”绵绵包的制备及品质研究

“睡得快”绵绵包采用直接发酵法以葡萄糖、甘蔗糖蜜等廉价原料为碳源,结合紫外线诱变育种在微生物育种中的应用,筛选色氨酸生产菌株,提高产酸水平,利用改良后的优质色氨酸产生菌来生产色氨酸,再将其加入到本产品中。在此基础上,对本产品进行品质研究。以期为失眠人群解决睡眠问题。     

微生物发酵优化透明质酸生产的研究进展

透明质酸是一种高分子糖胺聚糖,广泛应用于食品、化妆品和医疗等领域。微生物发酵生产透明质酸具有不受原料限制、产品质量稳定、纯度高和成本低等优点,已逐步取代动物组织提取法,同时育种技术和发酵优化实现了透明质酸的高产量和高分子量。综述近年来利用菌种诱变选育、基因工程育种、代谢工程改造、发酵优化等策略提高透明质酸产量和分子量的研究进展,阐述不同策略的作用机理与效果及存在的问题,并对发展前景进行展望。     

重离子辐照对红酵母的诱变作用

应用重离子加速器的 5 0MeV/u12 C6+ 重离子对胡萝卜素生产菌 -红酵母(RhodotorulaRYStrain )进行辐照处理 ,经酵母发酵实验 ,发现 5 0MeV/u12 C6+ 重离子对胡萝卜素生产菌———红酵母具有诱变作用 ,并初步筛选到产胡萝卜素有较大变化的辐照变异菌株 ,为工业上利用重离子对胡萝卜素生产菌进行诱变育种展现新的前景     

芽孢杆菌TF18的鉴定以及系统发育分析

目的对一株透明质酸酶高产菌株进行鉴定及系统发育分析。方法收集本公司空气沉降菌分离得到一株产透明质酸酶细菌TF18,对此菌株进行鉴定及系统发育分析。利用细菌16S r DNA通用引物进行PCR扩增,以获得该菌株的16S rDNA基因序列,并进行序列分析及系统发育分析;结合其形态特征、培养特征、生理生化特征,确定其种属。结果菌株TF18菌体杆状、好氧、产芽孢,应属于芽孢杆菌属,生理生化实验及系统发育分析结果也表明,此菌株属于芽孢杆菌属,但又不同于该属的其他已知菌种,故判定为新种。结论从自然界筛选得到的透明质酸酶高产菌株Bacillus sp.TF18为芽孢杆菌属一新种,为开发利用此菌种生产制备透明质酸酶及寡聚透明质酸(o-HA)提供了理论基础。     

低能离子注入法诱变微生物育种

低能离子注入诱变育种技术刚介入微生物品种改良,低能离子通过能量沉积、动量传递、离子注入及电荷交换等引起生物细胞内遗传物质发生非致死性、局部突变,突变率达10%～20%,回复突变率极低.该诱变育种技术操作简单、成本低廉、不污染环境.经离子注入诱变,糖化菌的糖化酶活力提高5000单位;产利福霉菌素的发酵水平提高40%;产Vc菌的摩尔转化率达97.5%;产VD菌的发酵水平提高50%;产红霉素菌的产量提高20%.     

L-缬氨酸的应用和育种研究进展

L-缬氨酸在医药、食品及饲料领域中有着广泛的用途.国内大多数菌株的产酸水平不高,选育新的高产菌种显得尤为必要.本文综述了L-缬氨酸的应用方向以及根据L-缬氨酸的生物合成途径及其代谢调节机制,利用代谢调控理论,重点阐述了L-缬氨酸生产菌的育种思路及目前国内外L-缬氨酸育种的最新进展,为缬氨酸发酵生产提供理论指导.     

透明质酸钠沙门菌检查方法的验证

目的 验证透明质酸钠沙门菌的检查方法.方法 以2005年版中国药典沙门菌检查方法为依据,验证透明质酸钠的沙门菌检查.结果 阴性菌对照组未检出金黄色葡萄球菌,试验组检出沙门菌.结论 10 g透明质酸钠溶入250 mL加有30 000 U透明质酸酶的营养肉汤中进行沙门菌检查是可行的.     

低能N~+离子注入谷氨酸产生菌诱变选育初步研究

离子束生物工程技术作为一种全新的诱变育种技术广泛地应用于生物育种方面。文中采用低能N+ 离子注入技术 ,进行了诱变选育高产谷氨酸菌种的试验研究。通过研究已经初筛到 2株高产菌株D52 2 1 和B32 6 3,比出发菌产酸分别提高 3 5 48%和 2 5 %。D52 2 1 的摇瓶最高产酸可以达到 8 8%。它们的一级种子生长曲线和发酵过程的pH值比原出发菌有明显变化。注入后的筛选菌株发酵对数期平均提前 2～ 3h ,代谢活力大大增强 ,倍增时间缩短 ,对缩短发酵周期有促进作用     

产甘露醇菌株的育种研究进展

甘露醇又称D-甘露糖醇,其作为一种功能性糖醇被广泛应用于医药、食品行业中。同时也应用于涂料、纺织和日化工业等方面。近几年,微生物发酵法成为制备甘露醇的研究热点。利用微生物发酵法制备甘露醇需要有适宜的菌株,本文从自然选育,诱变育种以及基因工程改造菌株三个方面对制备产甘露醇的菌株育种研究进行了综述,并对其前景进行了展望。      

微生物菌种选育中基因组重排技术应用的研究进展

基因组重排(genome shuffling)技术是通过传统诱变育种结合原生质体融合技术开发出的一种新型微生物菌种选育和改良技术,具有易操作、效率高和适用广等特点。本文对基因组重排技术的原理、操作过程及其在增加次生代谢产物产量、增强菌株耐受性和提高底物利用能力等方面的应用进行了综述。     

高产纤维素酶菌株的选育研究

利用黑曲霉为出发菌株,经过紫外线和亚硝酸复合诱变,选育出一株高产纤维素酶的菌株,与出发菌株相比,纤维素酶高产菌株CMC酶活力提高了58．7％,滤纸酶活力提高了60．6％,而且产酶性能稳定。     

原生质体融合技术

原生质体融合技术是在没有细胞壁阻碍的条件下,由PEG(聚乙二醇)助融,使两个亲株整套基因相互接触、交换、组合,得到多种类型的重组子,从而获得新的优秀菌株的技术。该项技术在细菌、酵母菌、链霉菌和霉菌等方面的研究和初步应用,为工业微生物遗传育种,开辟了广阔的前景。     

递推式ARTP-UV复合诱变筛选高产β-葡萄糖苷酶菌株

为了提高产酶能力,采用常压室温等离子体(ARTP)与紫外(UV)复合诱变技术对酿酒酵母G13、G21菌株进行递推式复合诱变,经过一轮ARTP诱变两轮UV诱变,摇瓶培养筛选到两株高产β-葡萄糖苷酶的菌株Dea-G13D1Z2、Dma-G21D1Z2,经连续5代发酵生产试验,产酶水平可分别稳定在240.93和173.38 U/mL,是出发菌株G13、G21酶活的4.61倍和3.59倍。递推式ARTP-UV是一种有效的微生物突变育种的方法,可有效应用于微生物育种工作。     

苹果醋优势醋酸菌株的诱变选育

以酒精含量为7%vol的苹果酒发酵醪液为驯化介质,对引进的醋酸杆菌20056进行驯化与诱变选育。采用紫外诱变的方法,确定最佳诱变条件为诱变时间40 s、诱变距离40 cm、菌液稀释度10-5,此时细胞致死率为82.15%。15株诱变菌株通过诱变效应、产酸实验、定性实验等验证,结果表明经过初步筛选的UV-3、UV-6、UV-11三株正突变菌株,产酸总量分别和诱变前的原菌株相比分别提高了20.45%、23.73%、24.61%,乙醇脱氢酶活性的峰值分别是原菌株的2.7、3.5、3.7倍。紫外诱变有效的提高了苹果酒发酵醪液中的酒精转化力,为优势醋酸菌的选育提供了简便、有效的育种手段。     

谷氨酸棒杆菌L-色氨酸营养缺陷型突变 及其高产菌株的选育

目的以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)HX-22为出发菌株,研究了目标发酵产物L-色氨酸合成途径交叉反馈抑制途径代谢突变与色氨酸分解代谢类似物抗性的营养缺陷型突变诱导过程及L-色氨酸高产复合突变菌株的筛选。方法采用硫酸二乙酯、紫外线、钴60γ-射线等诱变方法交叉处理起始与突变菌株,通过营养缺陷表型和自杀代谢底物抗性的筛选方法,定向突变和选育L-色氨酸合成与分解代谢突变的色氨酸高产菌株。结果通过多次连续营养缺陷型诱变选育,筛选出一株具有分支酸-Trp/Phe/Tyr代谢途径L-Phe和L-Tyr合成缺陷型和L-Trp分解代谢自杀代谢底物抗性的L-色氨酸高产菌HX22-118(ΔPhe~--ΔTyr~--5FT~r-4FP~r-SG~r);通过连续传代10次发酵,色氨酸产酸最高达到28.4 g/L,平均27.1g/L,较出发菌株HX22产酸水平提高81.8%。结论选育出的高产菌株具有多重代谢途径突变(ΔPhe~--ΔTyr~--5FT~r-4FP~r-SG~r),突变体具有良好的遗传稳定性,具有后续工业化生产应用潜力。     

复合诱变法选育生产乳果糖高产菌株的研究

选育生产乳果糖的高产菌株,为生物法（酶法）合成乳果糖提供技术保障。以乳酸克鲁维酵母变种（JN-187）为出发菌,经紫外线诱变选育出水解活性最高的JU74—09突变菌株;然后以JU74—09菌株为出发菌,经亚硝基胍（NTG）诱变选育出转糖基活性最高的JN91—08突变菌株;该菌株经7次传代实验,显示出良好的遗传稳定性。说明紫外线诱变与亚硝基胍（NTG）复合诱变是一种行之有效的用于生产乳果糖菌株选育的诱变方法。     

利用高能混合粒子场诱变选育高产Monacolin K、低产桔霉素的红曲霉菌株

利用北京正负电子对撞机直线加速器E2束流打靶产生高能混合粒子场,以64.3 Gy的剂量处理两株紫色红曲霉（Monascus Purpureus）M1和M2,经初筛、复筛后采用HPLC法检测诱变菌株中Monacolin K含量,并进行遗传稳定性实验,从而选育高产Monacolin K、低产桔霉素的突变株。结果表明:经混合粒子场辐照后,紫色红曲霉M1和M2分别筛选出43株和22株正突变株,突变率分别为74.64%和56.72%,其中正突变率分别为60.56%和32.84%。突变株M1-20、M2-4发酵液中Monacolin K含量分别达到了421.69 mg/L和406.68 mg/L,较出发菌株分别提高了142.14%和101.27%,经5次传代培养后产Monacolin K的能力仅下降了4.21%和1.65%,并且其发酵液中桔霉素的含量均在0.01⁰.04 mg/L之间,与出发菌株相比,桔霉素含量均明显下降。高能混合粒子场可引起紫色红曲霉菌落形态及色泽发生改变,突变率高,可获得遗传性能稳定的突变株,是一种可应用到微生物诱变育种的新方法。