超声波辅助提取樟芝菌丝体活性物质的工艺研究

探索超声波辅助樟芝菌丝体活性物质的最佳提取工艺,为樟芝活性成分进一步深入研究提供依据。通过设置固液比、超声波功率、提取温度及提取时间4个因素,优化樟芝菌丝主要活性物质多糖和三萜化合物的提取工艺,获得超声波辅助提取的最佳条件。结果表明:樟芝菌丝多糖最佳提取条件为:固液比130(mV)、超声功率120 W、提取时间35min、提取温度55℃,该条件下菌丝多糖提取量为26.319mg/g;樟芝菌丝三萜化合物最佳提取条件为:固液比130(mV)、超声功率210 W、提取温度50℃、提取时间25min,该条件下菌丝总三萜提取量为38.624mg/g。     

三种单萜对皿式培养樟芝三萜合成的影响

三萜是药食用真菌樟芝野生子实体中主要的活性成分之一,但是人工皿式培养的樟芝菌丝体中三萜含量较低。为了提高樟芝皿式培养三萜的产量,该研究在培养基中添加了3种单萜作为刺激因子。通过添加浓度的优化,得到了对生物量具有显著促进作用的添加方式是0.08 g/L的α-松油醇;对三萜产率具有显著促进作用的最佳添加方式为0.16 g/L的松油烯、0.08 g/L的α-松油醇以及0.12 g/L的4-萜烯醇,三萜产率分别较对照组提高了55.68%、50.39%和28.56%;且在添加0.16 g/L的松油烯时,有两种三萜(去氢硫色多孔菌酸和去氢齿孔菌酸)在樟芝菌丝体中的含量显著升高,分别较对照组提高了5.56倍和0.96倍,在添加0.08 g/L的α-松油醇时,去氢硫色多孔菌酸的含量显著升高,较对照组提高了3.20倍。该研究发现了3种可以促进樟芝皿式培养三萜生成的单萜,为樟芝皿式培养提供了新的思路。     

樟芝真菌萜类物质提取研究及色谱指纹图谱的建立

利用不同方法对樟芝真菌菌丝体中的三萜类化合物进行提取,研究表明,乙醇微波提取法优于其它,最高提取量达到26.28mg/g;通过对不同浓度的乙醇微波法提取三萜类化合物的研究发现,乙醇浓度对三萜类化合物的提取有一定的影响,95％vol的乙醇最好;对各乙醇浓度下提取物的HPLC谱图分析可知,在相对保留时间为0.66、0.75、1.00、1.30、2.10(即出峰时间大体在7.420min、8.383min、11.172min、14.529min、23.411 min),各浓度提取条件均有相对面积,即有峰出现,确定此5点为乙醇微波提取樟芝真菌菌丝体中三萜类化合物的指纹图谱.     

低频交变磁场对樟芝液态发酵的影响

使用实验室自主研制的磁场设备,以樟芝为研究对象,以菌丝体生物量提高率为指标,通过单因素和正交优化试验,研究低频交变磁场对樟芝液态发酵的影响,确定最优磁场参数,并借助扫描电镜,对比常规液态发酵和磁场辅助液态发酵所得菌丝体的微观形态的差异。结果显示,当磁感应强度为80 Gs,磁处理初次介入时间为接种3 d后,每天磁处理时长为4 h时,磁场对樟芝菌丝体的生长促进作用最强。在此条件下,菌丝体生物量提高率为15.87%,多糖增长率为24.26%,总三萜增长率为26.85%。扫描电镜结果显示,磁场辅助樟芝液态发酵所得菌丝体比常规液态发酵菌丝体表面更加粗糙,结构更加松散,褶皱更为明显。实验结果表明,低频交变磁场辅助樟芝液态发酵可以提高其菌丝体生物量、多糖和三萜产量。     

响应面试验优化牛樟芝总三萜提取工艺

对牛樟芝总三萜提取工艺参数进行优化研究。采用单因素和响应面法优化最佳工艺条件。结果表明,牛樟芝总三萜提取最佳工艺参数为乙醇浓度78%、提取时间81 min、料液比1∶20(g/mL),在此条件下,牛樟芝总三萜得率为5.26%。方差分析表明,影响牛樟芝总三萜得率由大到小的因素为乙醇浓度提取时间料液比。研究结果表明响应面法可用来优化牛樟芝总三萜的提取工艺,通过牛樟芝总三萜的提取可为进一步开发药食同源类产品提供借鉴作用。     

樟芝深层发酵菌丝体提取物对食源性致病菌的抑制作用

樟芝是一种珍稀食药两用大型蕈菌,具有解酒保肝、抗肿瘤、抗病毒、调节免疫等多种生物活性.本文以成本低廉且易获得的樟芝深层发酵菌丝体为原料,用甲醇、乙醇、乙酸乙酯及水提取樟芝菌丝体中的活性物质,采用牛津杯法检测上述4种樟芝菌丝体提取物对15株食源性致病菌的抑制作用,结果表明樟芝菌丝体甲醇提取物抑菌谱最广,对其中7株致病菌(...     

樟芝多糖提取研究

乙醇浓度、醇沉时间、醇沉温度、pH值对樟芝多糖的提取有不同程度的影响,正交试验分析表明,优化组合提取条件中乙醇浓度影响极显著,醇沉时间、醇沉温度影响显著,适宜于樟芝多糖提取的工艺条件为乙醇浓度95%、醇沉温度4℃、醇沉时间10h,pH值为8.0.此条件下樟芝多糖提取量为16.32g/L.     

樟芝菌丝体胞内多糖提取条件的研究

为了提高樟芝菌丝体胞内多糖的提取率,试验采用二次通用旋转组合设计方法,研究樟芝菌丝体多糖提取工艺条件中的提取时间、料液比、提取温度对提取率的影响.建立了回归模型并进了验证.通过研究可知:当提取时间为4.7h、液固比46倍、提取温度76.8℃时,樟芝菌丝体胞内多糖提取率的理论值为8.8%.并通过试验验证最优组合.     

牛樟树水提物中促进樟芝无性产孢的效应物鉴定及其添加量优化

为明确牛樟树水提物（aqueous extract of Cinnamomum kanehirae Hay,CWE）中促进樟芝（Antrodia cinnamomea）深层发酵无性产孢的效应物。首先,采用醇沉法及不同有机溶剂分级萃取法对CWE进行分离,并以产孢量为检测指标,考察不同组分对樟芝无性产孢的影响。结果表明,30 μg/mL的CWE醇沉上清氯仿萃取物LFE和50?μg/mL的醇沉上清乙酸乙酯萃取物YZE对樟芝无性产孢有明显的促进效果,且LFE的促进效果明显优于YZE,表明效应物主要存在于LFE和YZE中。随后,采用液相色谱-质谱联用仪对CWE不同萃取组分进行成分分析,并结合不同组分对樟芝产孢的影响效果,确定主要效应物为赤藓糖醇。最后,考察赤藓糖醇（纯度98%）对樟芝深层发酵性能的影响,结果表明,赤藓糖醇对樟芝无性产孢有显著促进效果,且在最佳添加量（1.0?μg/mL）下,产孢量较对照组提高55.17%;同时,1.0 μg/mL赤藓糖醇显著促进樟芝深层发酵菌丝体生长及胞内多糖的合成,生物量和胞内多糖产量较对照组分别提高18.65%和260.13%,但对三萜的合成无显著影响。     

樟芝菌固态发酵生产三萜类化合物

通过单因素实验,考察了固态发酵基质、外加氮源、初始含水量、装料量,接种量及培养温度对樟芝菌(Antrodia cinnamomea)固态发酵生产三萜系化合物的影响。单因素实验结果显示,NH4Cl加量、初始含水量、装料量和接种量对樟芝三萜系化合物含量的影响较显著,以上述显著因素作为随机因子,进行均匀设计实验,采用逐步回归方法对实验结果进行分析。实验结果表明:以小米为固态发酵基质,添加NH4Cl0.2%,初始含水量65%(g水/g干基),1L三角瓶装料量为120g,接种量55%(v/w),培养温度为28℃的条件下,樟芝三萜系化合物含量达到87.62mg/g(干基),比未优化前提高1.56倍;固态发酵产物中三萜系化合物的含量是樟芝液态发酵产物中的5倍。     

药用真菌樟芝菌丝体多糖提取工艺及活性的研究

本实验对樟芝菌丝体粗多糖的提取工艺进行了研究,通过L9(33)正交试验,研究了料液比、温度、提取时间对多糖提取率的影响,结果显示提取时间是影响多糖提取率的主要因素,最佳工艺为料液比1:30,温度90℃,时间2h,多糖提取率为10%。结合动物体外实验进行了免疫活性研究,确定6号样品能显著促进小鼠脾淋巴细胞的增殖。     

衍生化气相色谱-质谱分析樟芝菌粉中脂肪酸的组成及其指纹图谱分析

目的：分析樟芝菌粉脂肪酸的组成,并建立其气相色谱-质谱指纹图谱。方法：采用超临界CO2萃取法提取 樟芝菌粉中油脂类成分,甲酯化后用气相色谱-质谱联用技术分析脂肪酸组成;以棕榈酸为参照物,测定其指纹图 谱,并作相似度评价。结果：樟芝菌粉含33 种脂肪酸,其中不饱和脂肪酸有18 种,占脂肪酸含量的75.29%;初步 建立了以11 个共有峰为特征指纹信息的樟芝菌粉脂肪酸类成分指纹图谱。结论：为樟芝菌粉质量评价及其保健食 品研发提供实验依据。     

樟芝真菌发酵培养基优化研究

以麸皮、蛋白胨、MgSO4·7H2O、VB1、葡萄糖、酵母膏、KH2PO4。7种为影响樟芝真菌液体培养的影响因素,分别以菌丝体和胞外多糖为目的产物进行L18（3^7）正交试验,综合以胞外多糖和菌丝体为目的产物进行樟芝真菌液体培养的正交试验分析后得出,樟芝真菌液体培养时的适宜培养基为：麸皮40g／L、葡萄糖25g／L、蛋白胨4g／L、MgSO4·7H2O 0．4g／L、酵母膏2．0g／L、KH2PO4 0．6g／L、VB10．01g／L。     

不同发酵方式对樟芝真菌多糖产量的影响研究

通过深层发酵法,对比研究了连续、分批、补料分批3种培养方式对樟芝真菌菌体,胞内外多糖产量的影响,研究表明,补料分批相对于连续培养,菌体最大产量提高5.51%,胞内多糖最大产量提高11.25%。胞外多糖最大产量提高21.70%,补料分批培养优于连续培养和分批培养。     

响应面法优化牛樟芝高产总三萜发酵培养基

为提高牛樟芝(Antrodia camphorata)菌丝体产三萜类化合物的能力,采用筛选试验(Plackett-Burman,PB)试验和中心组合设计(central composite design,CCD)试验对发酵培养基进行优化。首先通过PB试验对影响菌丝体产三萜类化合物的8个组分进行筛选,确定玉米粉、牛肉膏、黄豆粉为3个主要影响因素,然后依次用最陡爬坡试验、CCD和响应面分析,确定主要因素的最佳浓度。由此得到最佳培养基配方:20 g/L葡萄糖,10 g/L大豆粉,16.07 g/L玉米粉,4.5 g/L牛肉膏,31.93 g/L黄豆粉,1 g/L MgSO4,2 g/L KH2PO4,50 mg/L VB1。采用基本发酵培养基培养牛樟芝其菌丝体中总三萜含量为(12.29±0.43)mg/g,经培养基优化处理后三萜类含量为(15.40±0.15)mg/g,相比初始其产量提高了25.3%。     

三种海藻内生真菌的分离及其抑菌活性研究

从烟台浅海处采集到的鼠尾藻、裙带菜、海带三种海藻表面消毒后用PDA培养基将内生真菌进行分离纯化,将纯化的内生真菌进行液体培养7d后离心,菌丝体烘干研磨后用无水乙醇提取,分别测定发酵液和菌丝体乙醇提取物对七种植物病原真菌的抑菌活性。结果表明:三种发酵液都至少对三种病原菌有大于50%的抑菌活性,裙带菜发酵液对六种病原菌都有大于50%的抑菌率,最高为78.8%,说明它们能产生广谱高效的胞外代谢产物;而菌丝体提取物的抑菌活性并不明显,说明三种海藻内生真菌产生的胞内代谢产物无明显的抑菌活性。     

Non-volatile taste components of Agaricus blazei,Antrodia camphorata and Cordyceps militaris mycelia

Three non-Ganoderma medicinal mushrooms are currently popular in Taiwan, including Brazilian mushroom (Agaricus blazei), chang-chih (Antrodia camphorata) and northern caterpillar fungus (Cordyceps militaris). The moisture contents of three dry mycelia ranged widely from 6.65 to 14.91%. All mycelia were high in carbohydrate content with chang-chih being the highest. The protein contents ranged from 9.49 to 29.1%. Soluble sugars found were arabitol, glucose and trehalose, and the contents exceeded 10%. Total free amino acid contents ranged from 7.01 to 11.1 mg g⁻¹ dry weight. Contents of monosodium glutamate-like components were relatively low and similar in Brazilian mushroom and chang-chih, but high in northern Cordyceps. Contents of bitter components were significantly high in Brazilian mushroom and northern Cordyceps. Contents of flavour 5′-nucleotides were similarly high in chang-chih and northern Cordyceps, and low in Brazilian mushroom. The three mushroom mycelia had different proximate compositions. However, northern Cordyceps and chang-chih might exhibit similar umami and sweet tastes.