源于食品蛋白质的血管紧张素Ⅰ转换酶抑制肽

血管紧张素I转换酶(ACE)是一种重要的血压调节因子,该酶的一些抑制剂有较好的降压效果,并作为预防和治疗高血压的食品和药物被广泛地使用。本文对不同食品来源的ACE抑制肽降压机理、结构和功能关系、应用前景进行了概述。     

我国豆酱血管紧张素转换酶抑制活性的比较

文章对我国三种市售豆酱的血管紧张素转换酶(ACE)抑制活性及其主要化学组成进行比较分析,所试样品的IC50值分别为1.373、0.876和1.691 mg/mL,活性最高样品中的多肽含量为24.09g/100g dry matter,不同样品间多肽分布无明显差异。样品的ACE抑制活性应为多种活性物质综合作用的结果,对其中ACE抑制剂构效关系的研究可为我国豆酱功能性的研发提供指导。     

酱油对血管紧张素转换酶抑制作用的研究

考察了若干酱油样品的血管紧张素转换酶(ACE)抑制活性,发现所试样品均表现出ACE抑制活性,其IC50值范围为0.7405～3.0265mg/mL。样品的ACE抑制活性与其蛋白质降解程度、多肽含量及颜色值无明显相关性,应为多种活性物质综合作用的结果。对我国酱油产品中ACE抑制剂的结构表征可为潜在降血压功能性食品的研发提供指导。     

2种蛋白酶的大豆蛋白水解物对血管紧张素转换酶的抑制作用

报道了 2种工业化酶ProteaseA和OrientaseB的大豆蛋白水解物的高活性ACEI肽的筛选工作 ,并且对所得到的活性较高的水解物进行了感官评价。这 2种酶的水解物的ACE抑制活性均随着水解时间的增加呈指数归律增加。其中OrientaseB水解大豆蛋白 1 0h ,其产物的ACE抑制活性最高达到 95 %,ProteaseA的最高也可达到 91 33%。ProteaseA水解 4～ 1 0h的产物以及Ori entaseB水解 6～ 1 0h的产物 ,是由 2～ 5个氨基酸组成的寡肽 ,ACE的抑制活性高 ,且苦味轻微或没有。这些肽因其天然、安全、作用温和而有望作为良好的降压成分进入人们的日常膳食。     

高血管紧张素转换酶抑制活性的豆酱中优势霉菌的分离

以具有高血管紧张素转换酶(ACE)抑制活性的我国传统豆酱为研究对象,对发酵过程中的霉菌分布进行研究.酱曲中的霉菌数为10a cfu/g,后酵过程中仍保持在较高水平.分离两株优势霉菌,井根据其菌落形态、菌丝和孢子形态及产孢结构等鉴定为米曲霉原变种(Aspergillus oryzae)和灰蓝毛霉(Mucor griseo-cyanus),这两种霉菌在整个发酵过程中的存在对豆酱中ACE抑制剂的生成发挥着重要作用,为纯种发酵生产功能性调味品提供指导.     

血管紧张素转化酶（ACE）抑制肽的研究进展

在人体血压调节方面,血管紧张素转换酶(ACE)起着重要的生理作用,最近天然食品来源的ACE抑制肽已成为生物活性肽领域的热点。综述了食品蛋白质降血压肽的研究进展,对结构与活性之间的关系及其重要性进行了讨论,并展望了其发展前景。      

血管紧张素转化酶（ACE）抑制肽的研究进展

在人体血压调节方面,血管紧张素转换酶(ACE)起着重要的生理作用,最近天然食品来源的ACE抑制肽已成为生物活性肽领域的热点。综述了食品蛋白质降血压肽的研究进展,对结构与活性之间的关系及其重要性进行了讨论,并展望了其发展前景。     

酶法制备牦牛乳酪蛋白源血管紧张素转换酶抑制肽

应用6种商业蛋白酶水解牦牛乳酪蛋白,研究其水解产物的血管紧张素转换酶抑制活性,结合蛋白水解度及蛋白回收率的结果,蛋白酶C适用于制备牦牛乳酪蛋白源血管紧张素转换酶抑制肽。     

橄榄提取物对肾素和血管紧张素转换酶的双重抑制作用

该研究探讨了不同溶剂橄榄提取物对肾素-血管紧张素系统中关键酶肾素和血管紧张素转换酶（ACE）的抑制作用,同时分析了其抗氧化能力和总酚、总黄酮的含量。结果表明：有机溶剂提取物的活性相较于水提物普遍较好,在0.50μg/μL质量浓度条件下,甲醇提取物的肾素抑制活性最高,为95.89%;在0.29μg/μL质量浓度条件下,丙酮提取物的ACE抑制活性最高,为92.71%。丙酮提取物的抗氧化活性最强,ABTS+自由基清除能力为384.86 mg TE/g DW,DPPH自由基清除能力为309.23 mg TE/g DW,铁离子还原能力为479.40 mg TE/g DW。同时丙酮提取物的总酚和总黄酮含量均最高,分别为318.14 mg GAE/g DW和45.46 mg CE/g DW。进一步相关性分析表明,总酚与肾素和ACE抑制活性显著相关（P<0.05）。该研究发现橄榄提取物显示出优良的肾素和ACE抑制活性,且有机溶剂提取物的活性优于水提取物,这为新型血压调控因子的研究提供了新思路,为橄榄资源的科学可持续开发提供了理论依据。     

分步酶解法制备菜籽肽及其分子量分布与抑制ACE活性关系研究

选取胰蛋白酶和Flavourzyme风味蛋白酶,采用超声波辅助分步酶解法制备菜籽肽;测试不同条件下的水解度、混合肽分子量分布和ACE活性抑制率。结果显示随着酶解液的水解度提高,混合肽中小分子量(3ku以下)的可溶性肽含量不断提高,ACE活性抑制率也不断升高,也说明使用该方法制备的菜籽肽具有ACE活性抑制作用。同时,这一结果有助于菜籽蛋白的开发将更加广泛。     

菜籽肽抗氧化活性的研究

用分光光度法测定大鼠红细胞溶血程度,用丙二醛(MDA)试剂盒测定MDA。结果显示,通过腹膜注射菜籽肽,可以使小鼠血清中MDA含量显著减少。高剂量组[100 mg/(kg.d)]与对照组相比,MDA的降低达到极显著水平(P<0.01)。离体实验结果显示,菜籽肽粗品及各级分对体外温育和H2O2诱导的小鼠肝组织匀浆MDA生成有较强的抑制作用,其中粗品RSP-R和级分RSP-1的作用最好,且有量效关系,而对Fe2 诱导的MDA生成的抑制作用稍差。另外,RSP-R还可抑制大鼠红细胞氧化溶血程度。以上结果表明,菜籽肽在体内外均具有明显的抗氧化作用。     

刺参ACE抑制肽制备及降压功效分析

以刺参（Stichopus japonicus）体壁为原料,利用复合蛋白酶对其进行酶解,运用单因素法优化血管紧张素转化酶（angiotensin I-converting enzyme,ACE）抑制肽的酶解制备工艺。获得最佳工艺参数为：料液比1∶6（g/mL）、加酶量0.8%（质量分数）、反应时间6?h、pH?7.0。将酶解产物用3?kDa膜超滤,其中小于3?kDa组分具有较高的ACE抑制活性,IC50为0.8?mg/mL,对ACE表现为非竞争性抑制作用。刺参ACE抑制肽在高温、酸性和碱性条件下均具有较好的稳定性,同时具有较强的抵抗胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶消化的能力。动物实验结果表明,刺参ACE抑制肽对雄性自发性高血压大鼠具有良好的降压功效。因此,利用复合蛋白酶酶解刺参体壁制备的ACE抑制肽在降血压功能性食品的开发利用方面具有研究价值。     

菜籽清蛋白小分子肽的制备

本文利用Alcalase和Flavourzyme双酶对菜籽清蛋白进行分步水解,将水解度由单酶的14.72%提高至28.10%。粗品肽(RSP-R)经SephadexG-25凝胶层析柱分离纯化,得到分子量大致分别为大于5000D的RSP-1,1050D的RSP-2和560D的RSP-3三个级分。RSP-2为主要成分,其蛋白质含量是79.23%,总糖含量是13.88%。这些为后续研究小分子菜籽肽活性功能提供了理想的原料和理论依据。     

三斑海马蛋白ACE抑制肽的制备及其二级结构的研究

以三斑海马为原料,经碱性蛋白酶酶解,获得富含血管紧张素转化酶(angiotensin I-converting enzyme,ACE)抑制肽的酶解液。酶解液经透析、Sephadex G-25凝胶过滤色谱和反相高效液相色谱得到进一步分离纯化。结果表明,透析产物的IC50值为(0.44±0.26)mg/mL,相比酶解液(0.81±0.12)mg/mL,其ACE抑制活性更强。透析产物经Sephadex G-25凝胶柱分离纯化后,得到3种组分,其中组分F2的ACE抑制活性最强,IC50值为(0.11±0.08)mg/mL。F2经反相高效液相色谱进一步分离后,得到6个具有ACE抑制活性的组分峰,其中组分F2-4的ACE抑制活性最强,IC50值为(0.005 7±0.000 9)mg/mL。经过3步分离纯化后,成功从三斑海马蛋白中分离得到一种活性较强ACE抑制肽:ProAla-Gly-Pro-Arg-Gly-Pro-Ala(PAGPRGPA),多肽分子量为721.39 Da。圆二色谱分析多肽二级结构表明其主要含无规则卷曲。因此,从三斑海马蛋白中分离得到的多肽可能成为营养保健品和抗高血压药品及相关疾病的一种有益成分,且对海马蛋白资源的开发利用具有重要意义。     

血管紧张素转换酶抑制肽RLSFNP脂质体的制备工艺优化

本实验以脂质体作为包埋载体,研究血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽Arg-Leu-Ser-Phe-Asn-Pro(RLSFNP)脂质体的制备工艺。以包封率为考察指标,采用单因素试验和响应面试验优化RLSFNP脂质体的制备工艺。得出最优制备条件为:大豆卵磷脂用量120.0 mg、胆固醇用量24.6 mg、RLSFNP用量15.3 mg、乙醚用量15.0 m L、磷酸盐缓冲液(p H 7.4)用量5.8 m L、探头超声时间5.2 min。在此条件下制备的脂质体平均粒径在168 nm左右,电位为-31.2 m V,实际包封率为(67.5±0.8)%,由脂质体包埋后的RLSFNP具有一定的缓释效果。     

酶法生产大豆蛋白ACE抑制肽的研究

研究了Alcalase碱性蛋白酶、Neutrase中性蛋白酶、Protames复合蛋白酶、Flavourzyme风味蛋白酶对大豆分离蛋白的水解效果和ACE(血管紧张素转化酶)的抑制活性。水解能力用pH-start法检测,水解度大小依次为:Alcalase碱性蛋白酶>Protames复合蛋白酶>Neutrase中性蛋白酶>Flavourzyme风味蛋白酶;ACE抑制活性用高效液相法检测,ACE抑制率强弱依次为:Alcalase碱性蛋白酶>Flavourzyme风味蛋白酶>Protames复合蛋白酶>Neutrase中性蛋白酶。综合考虑,选定Alcalase碱性蛋白酶为生产大豆ACE抑制肽的最适酶,并对其酶解条件进行了优化,确定生产大豆ACE抑制肽的最佳条件为:温度60℃、pH8.0、[S]=4%、[E]/[S]=4%,这时的水解度为14.4%。     

酶解虾壳蛋白制备ACE 抑制剂的工艺优化

以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明：碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。     

液态发酵法制备菜籽ACE抑制肽培养基条件优化

以菜籽粕为原料,通过枯草芽孢杆菌液态发酵生产菜籽ACE 抑制肽。先以肽得率、ACE 抑制率为指标通过单因素试验得到液态发酵的培养基条件,再以响应面分析法,优化枯草芽孢杆菌液态发酵培养基中的3 种成分,确定枯草芽孢杆菌发酵生产菜籽肽的最佳培养基工艺条件为：磷酸二氢钾0.45g/100mL、葡萄糖0.8g/100mL、料液比1:23、初始pH7.0。优化后的ACE 抑制率可达69.79%。     

源于皱纹盘鲍裙边胶原蛋白ACE抑制肽的制备

为了提高皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai)裙边的利用率,以其为原料纯化胶原蛋白,并通过胰蛋白酶和胃蛋白酶共酶解制备血管紧张素转换酶(angiotensin I-converting enzyme,ACE)抑制肽。酶解液经超滤、Superdex^TM peptide10/300GL凝胶柱和高效液相色谱分离纯化,获得了3条来源于皱纹盘鲍胶原蛋白的肽段SGEVGQ、QRGPAGAQGPQ和GPPGPAGAR。其中结合能力最强的肽为GPPGPAGAR,对ACE的IC50值为177.1μmol/L,分子对接结果显示其主要作用于ACE的S1活性口袋,抑制模式与赖诺普利类似,并且经模拟胃肠液消化后仍能发挥较强的ACE抑制作用。本研究通过酶解皱纹盘鲍裙边胶原蛋白制备ACE抑制肽,为鲍鱼裙边的精深加工和ACE抑制肽的开发提供了参考。     

超滤技术分离双低油菜ACE抑制肽及其性能研究

采用超滤技术对双低油菜酶解物中的ACE抑制肽进行了分离提纯研究,考核了分离参数对分离效果的影响,分析了不同分子质量段多肽HPLC肽谱的变化,研究了双低油菜高ACE抑制活性多肽的耐消化性、酸碱稳定性和耐热性。结果表明,超滤分离能明显提高双低油菜ACE抑制肽的活性,截留分子质量为3 ku的超滤膜透过液IC50值下降了15%,活性多肽回收率超过58%,酶解物中有4个高活性的组分峰,小于3 ku分子质量段的ACE抑制肽有良好的耐热性、酸碱稳定性和耐消化性。