二步酶解法制备鱼鳞明胶抗氧化肽及其抗氧化活性研究

通过碱性蛋白酶进行第一步酶解,胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶分别进行第二步酶解制备鱼鳞明胶抗氧化肽。结果表明,二步酶解法能有效提高酶解物的水解度,降低水解物的分子量,碱性蛋白酶—胰蛋白酶水解物具有显著的自由基清除能力和Fe~(2+)螯合能力。通过响应面优化的胰蛋白酶最佳二步酶解工艺为:底物浓度100 mg/mL、pH 7.8、温度53℃、时间50min,该条件下制备的水解物的Fe~(2+)螯合率为65.72%,清除DPPH·、·OH和O_2~-·的IC_(50)值分别是7.39,0.68,1.84mg/mL。     

猪皮明胶肽抗小鼠外周肌肉疲劳作用的研究

试验在研究酶解猪皮明胶制备抗疲劳肽较适条件和较佳工艺的基础上,通过负重游泳运动建立动物肌肉外周疲劳模型,经过对小白鼠灌胃饲养明胶肽实施营养干预,在检测血乳酸、血尿素氮、肝(肌)糖原含量和运动时间的基础上分析、评价明胶肽抗外周疲劳功效。试验结果证实:和蒸馏水饲养组对比,明胶肽能延长动物运动时间(P<0.01),降低疲劳后的血乳酸(P<0.01)和尿素氮含量(P<0.01),提高肝肌糖原(P<0.01)含量,具有显著的抗疲劳功效,可作为抗疲劳功能食品的添加剂。     

明胶抗氧化肽的分离、纯化及其清除羟自由基活性的研究

为制备具有抗氧化活性的明胶肽,本实验采用不同的酶水解明胶,并对酶解产物采用超滤技术分离,利用分光光度法检测超滤后所得多肽组分对羟基自由基(·OH)的清除能力;进一步对抗氧化活性较强的组分利用葡聚糖Sephadex C-25阳离子交换色谱、Sephadex G-50凝胶过滤色谱和C18反向高效液相色谱进行分离、纯化,并对其各组分清除·OH活性进行了研究,最后对所得洗脱组分中具有最强清除自由基活性的多肽组分的分析氨基酸组成,结果显示:组分中甘氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸含量较高的肽具有较好的抗氧化活性,·OH清除率达到55.37%。     

覆盆子糖蛋白粗提物体内抗氧化作用研究

研究覆盆子糖蛋白粗提物对小鼠体内抗氧化作用。采用试剂盒测定小鼠血清、肝脏、脑中的丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）的活性。实验结果表明:覆盆子糖蛋白粗提物可以提高受试小鼠血清、肝脏、脑中SOD、CAT及GSH-Px的活性,而降低这些组织中MDA的含量。说明覆盆子糖蛋白具有一定的抗氧化活性。      

猪骨抗氧化肽的酶解制备研究

本文以水解度和自由基清除率为双指标,较深入地研究了两种蛋白酶在生产猪骨抗氧化肽中的应用特性,结果表明中性蛋白酶比木瓜蛋白酶适合水解猪骨明胶制备抗氧化肽,其最佳酶解工艺参数为:pH7,温度40℃,[E]/[S]=10%,[S]=2%,水解时间4h,该条件下制备的抗氧化肽对O2-·有很强的清除作用,清除率达到83.22%.     

胶原三肽的抗氧化功能研究

研究CTP(胶原三肽)的抗氧化功效并与两种大分子胶原肽进行比较.体外试验采用螯合Fe2+和清除DPPH自由基能力的方法;体内试验采用"D-半乳糖皮下注射制备小鼠衰老模型",以受试小鼠SOD和GSH-PX活力、MDA含量为检测指标,考察CTP等胶原肽产品的抗氧化性能.结果表明,在相同浓度下,CTP螯合Fe2+和清除DPPH自由基的能力均高于对照产品;在相同剂量下,胶原三肽能显著提高衰老小鼠体内SOD活力,降低MDA含量,并优于对照产品.与大分子胶原肽相比,胶原三肽具有较强的抗氧化活性.     

发酵芝麻粕小肽体内抗氧化和免疫活性

研究从发酵芝麻粕中提取分离出的小肽体内抗氧化和免疫活性。将56 只4 周龄健康昆明小鼠随机分成7 组,分别灌胃生理盐水,低、中、高3 个剂量的小肽（三肽和四肽）,连续灌胃28 d后取血,测定肝脏、脾脏、胸腺系数,血清中丙二醛含量,肝匀浆中的丙二醛含量、超氧化物歧化酶与谷胱甘肽过氧化物酶的活性,脾脏中T淋巴细胞CD3＋、CD4＋和CD8＋数量。灌胃发酵芝麻粕三肽和四肽后,血清和肝脏中丙二醛含量显著下降（P＜0.05）,肝脏中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著升高（P＜0.05）,四肽高剂量组小鼠的CD4＋/CD8＋值显著升高（P＜0.05）。结果表明发酵芝麻粕三肽和四肽均具有体内抗氧化能力,四肽在本实验设定中的高剂量条件下能在一定程度上增强机体的免疫活性。     

扇贝抗氧化肽对衰老小鼠体内抗氧化活性研究

目的研究扇贝副产物抗氧化肽对衰老小鼠体内抗氧化活性。方法采用D-半乳糖构建小鼠衰老动物模型,分别以不同性别小鼠肝脏中特征酶超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),过氧化氢酶(catalase, CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性及丙二醛(alondialdehyde, MDA)含量为指标,评价扇贝抗氧化肽的体内抗氧化功能。结果与模型组比较,灌胃剂量为0.5 mL/kg的样品组能够显著提高模型小鼠(雌性和雄性)中肝脏中SOD、CAT、GSH-Px等特征酶的活性,并降低MDA含量水平。同时以脾脏指数、胸腺指数、吞噬指数为指标评价扇贝抗氧化肽对小鼠免疫能力的影响。结果显示灌胃剂量为0.50mL/kg和1.0mL/kg的扇贝抗氧化肽能够提高小鼠的脾脏指数、胸腺指数和吞噬指数。结论扇贝抗氧化肽具有良好的增强机体抗氧化功能作用。     

益生菌契达干酪抗氧化肽的结构及其体内代谢稳定性

本实验分别向契达干酪中添加瑞士乳杆菌和鼠李糖乳杆菌制备益生菌干酪,研究其体内抗氧化活性,并将干酪中的抗氧化肽进行分离纯化,利用高效液相色谱-质谱联用法鉴定其结构,采用荧光标记示踪法研究抗氧化肽体内代谢途径及稳定性。结果表明,与衰老模型组相比,喂养干酪提取液的小鼠血清超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力显著升高（P＜0.05）,其中含瑞士乳杆菌契达干酪提取液体内抗氧化活性最好,小鼠血清中的SOD、CAT、GSH-Px活力较衰老模型组分别提升了45.98%、35.33%和37.93%,且与正常对照组和VC组无显著差异（P＞0.05）。从瑞士乳杆菌契达干酪提取液中鉴定出6 种抗氧化肽,其中肽段QPHQP抗氧化活性最高。该抗氧化肽在体内的作用顺序为：胃、肠→肾、肝、肺→心脏、脾→脑。除胃肠道外,小鼠肝脏中标记肽蓄积量最高且下降缓慢。由此说明,益生菌干酪在体内仍可起到抗氧化活性,干酪中的抗氧化肽进入体内后经胃肠道消化,随血液循环到达靶器官,且主要蓄积在肝脏并发挥活性。     

猪皮胶原蛋白抗氧化肽的分离纯化及体外抗氧化活性研究

采用碱性蛋白酶对猪皮胶原蛋白进行酶解,制备抗氧化肽。为了得到抗氧化活性高且纯度高的抗氧化肽,本实验采用多种体外抗氧化评价体系研究超滤获得的各分子质量段猪皮胶原蛋白抗氧化肽的体外抗氧化活性;依次采用离子交换色谱、凝胶色谱对猪皮胶原蛋白酶解液进行分离纯化。结果显示:超滤分离获得5~10ku的抗氧化肽较其他分子量范围的抗氧化肽具有较好的抗氧化活性;采用离子交换色谱、凝胶色谱两种分离方法分步分离能达到较好的分离纯化效果,离子交换色谱分离得到7个组分,其中组分P1对O-2·清除率最高,多肽浓度为0.85mg/mL时,清除率为46.30%,IC50值为1.24mg/mL;该组分经过凝胶色谱分离后得到2个组分,其中组分P1-B对O-2·清除率最高,多肽浓度为0.9mg/mL时,清除率为49.43%,IC50值为0.98mg/mL。     

猪皮明胶酶解工艺优化及其清除羟自由基能力评价

利用6种不同的蛋白酶水解猪皮明胶并检测所用酶的酶活,根据水解产物对·OH自由基的清除率,筛选最佳的水解蛋白酶为胰蛋白酶.通过单因素试验和L9(34)正交试验对胰蛋白酶解猪皮明胶的条件进行优化,单因素考察了酶料比、水解时间、水解温度、pH值对羟自由基清除率的影响.得到最佳酶解工艺条件为水解温度34℃,酶解时间3.0h,pH值7.0,酶料比6.0％.在此条件下,木瓜蛋白酶水解产物对·OH自由基的清除率为98.80％.     

中华圆田螺肉抗氧化肽的分离纯化及小鼠体内外活性研究

采用超滤、大孔树脂、凝胶过滤色谱和半制备液相色谱对中华圆田螺肉的酶解液进行分离纯化,以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、铁离子还原能力(FRAP)、氧自由基吸收能力(ORAC)为指标,制备抗氧化肽,并通过小鼠体内抗氧化酶活性及MDA生成量进行测定试验。结果表明:分子质量1kDa部位的抗氧化活性最强,分离出的混合物抗氧化肽纯度达到90%。体外抗氧化活性显示,该抗氧化肽的DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、ORAC均为最高,且ORAC与谷胱甘肽相比效果无显著差异(P0.05),通过小鼠体内抗氧化酶及MDA增加值的测定显示,除GSH-PX外,试验组与谷胱甘肽阳性对照组无显著差异(P0.05),说明试验所获得的抗氧化肽具有和谷胱甘肽相当的抗氧化活性,具有深层的开发利用价值。     

不同酶对藜麦蛋白肽制备的影响及其抗氧化活性研究

本实验以藜麦蛋白为原料,采用碱性蛋白酶、复合蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶分别对藜麦蛋白进行水解,制备藜麦蛋白肽。通过单因素实验对五种酶水解制备的藜麦蛋白肽以蛋白水解度、DPPH自由基清除能力、·OH自由基清除能力、ABTS+自由基清除能力、·O2-自由基清除能力为测定指标,研究五种蛋白酶对藜麦蛋白的水解能力和抗氧化活性影响,选出效果相对较佳的酶水解工艺。综合各指标的结果表明,碱性蛋白酶和复合蛋白酶水解能力较强,制备的藜麦蛋白肽抗氧化活性较其他两种酶更好。碱性蛋白酶和复合蛋白酶最佳酶解工艺分别为:酶与底物比0.5%(w/w),底物与水为1∶25(w/v),水解温度50℃,水解时间5h,pH10.0;酶与底物比0.5%(w/w),底物与水为1∶25(w/v),水解温度55℃,水解时间5h,pH8.0。本研究为藜麦蛋白的后期的深加工利用提供一定理论依据。     

抗氧化肽作用机制研究进展

过量活性氧(reactive oxygen species, ROS)造成的氧化应激日益成为人们迫切需要解决的问题。而由于化学合成抗氧化剂存在诸多缺陷, 人们逐渐将焦点转移至天然抗氧化剂。抗氧化肽由于来源广泛、安全性高、吸收性好等优点而备受瞩目。本文综述了抗氧化肽可能的作用机制, 包括直接清除自由基、螯合促氧化金属离子、调节产ROS氧化酶、增强抗氧化防御系统、细胞保护作用、调节肠道菌群等。重点介绍了抗氧化肽在调节产ROS氧化酶以及细胞保护作用中发挥的作用, 并指出抗氧化肽研究过程中亟需解决的问题, 以期为抗氧化肽的进一步研究提供一定的理论支撑。     

蛋源性抗氧化肽研究进展

抗氧化肽具有活性强、分子质量小、易吸收等特点,已成为生物领域研究的热点之一。禽蛋蛋白质含量丰富,且其氨基酸组成与人类必需氨基酸比例接近,是制备抗氧化肽的一个良好来源。本文综述了蛋源性抗氧化肽的来源、抗氧化肽活性以及活性构效关系,提出蛋源性抗氧化活性肽研究中存在的问题,并对蛋源性抗氧化活性肽的研究与应用进行展望,以期为相关研究提供参考。      

抗氧化肽的研究现状

抗氧化肽在食品、保健品、医药以及化妆品等领域展现出巨大的应用潜力.该文综述了抗氧化肽的制备、分离纯化、结构鉴定、分子修饰、抗氧化活性评价及作用机理,分析总结了生物信息学工具在抗氧化肽研究中的应用,指出了抗氧化肽研究与开发中存在的问题,展望了抗氧化肽的发展前景,旨在为其深度开发利用提供参考.     

分步酶解制备鲢鱼抗氧化肽的工艺研究

用分步酶解法制备鲢鱼抗氧化肽,首先从碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶中筛选出碱性蛋白酶作为第一步酶解用酶,以水解度作评价指标,并得到酶解工艺条件:底物浓度15%,pH9.0,温度50℃,加酶量为24AU/kg。再从剩下的三种酶中筛选出胰蛋白酶与碱性蛋白酶复配,作为第二步酶解用酶,用响应面法进一步优化酶解工艺,考虑到成本和工艺的要求,最终确定的酶解工艺为:碱性蛋白酶水解时间为59.12min,胰蛋白酶水解时间为82.24min,两种酶的添加比例为1:1.48,即碱性蛋白酶添加量为24AU/kg,胰蛋白酶的添加量为35.5AU/kg。最终得到的鲢鱼抗氧化肽可溶性氮70.84%,多肽69.38%,水分4.21%,灰分25.67%;多肽浓度为2mg/mL时对DPPH自由基清除率为19.33%。      

大米蛋白抗氧化肽的活性以及组成鉴定研究

采用碱性蛋白酶酶解大米蛋白制备大米蛋白抗氧化肽。研究表明大米蛋白酶解产物具有螯合金属铁离子、清除H2O2、羟自由基、DPPH自由基、抑制亚油酸自然氧化的作用。通过应用高解析离子淌度质谱（HD-MS）分析鉴定米蛋白抗氧化肽的序列主要为Met-Pro-Pro-Ser-Ser-Pro-His（376.68u）,Leu-Ala-Gly-Pro-Lys-Phe-Ala-Leu（408.75u）和Met-Pro-Arg-His-Asp-Pro-Gln（440.70u）。