高效液相色谱法测定大鼠血浆中厄洛替尼的浓度及其口服药动学研究

本实验建立了以高效液相色谱法测定大鼠血浆中厄洛替尼浓度的方法,研究大鼠口服给予厄洛替尼后的体内药物动力学。采用C_(18)柱作为色谱柱;乙腈-水为流动相;流速1.0mL/min;柱温35℃;检测波长249nm。经测定,厄洛替尼血药浓度在100～7000μg/L与峰面积线性关系良好,r=0.9998,最低检测限为80μg/L;日内、日间精密度RSD均小于15%;提取回收率与方法回收率均分别为74.5%～88.0%和92.0%～97.8%;6只SD大鼠灌胃给予厄洛替尼(15mg/kg)后药物动力学参数为:C_(max)=1.11×10~3μg/L;t_(1/2)=4.55h;AUC_(0-t)=1.54×10~4μg·h/L;AUC_(0-∞)=1.55×10~4μg·h/L;Cl=0.195L/h;MRT=9.33h;Vd=1.43L。本方法灵敏、可靠、专属性强,在临床上和实验中都有较强的适用性,对于评价厄洛替尼疗效和安全性有重要意义。     

铅染毒大鼠血液中铅与其他元素含量的相关性研究

研究了铅染毒大鼠血液中铅与其他元素之间的关系。选取75只健康的4周龄雄性Sprague Dawley大鼠(SD大鼠),随机分为25组,各组染毒剂量均不相同。在实验开始的第40、80、120天,分别从各组中随机选取1只大鼠,乙醚麻醉后取股动脉血。用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法测定血中的24种元素含量,并对铅与其他元素做相关分析。研究发现：在不同染毒周期,染毒剂量与血铅浓度的关系各有不同。血铅浓度随染毒时间的延长而升高,但染毒剂量在5~70 mg•kg^-1时,80天染毒组的血铅浓度反而高于120天染毒组;血铅与其他元素含量的相关性随染毒周期的变化而变化。     

高分离快速液相色谱-四极杆飞行时间质谱法检测人参皂苷Re在大鼠体内的分布

建立了高分离快速液相色谱-四极杆飞行时间质谱（RRLC-Q-TOF MS）法检测大鼠尾静脉注射人参皂苷Re（G-Re）后,不同组织（心、肝、脾、肺、肾、脑）中G-Re的分布情况。样本经蛋白沉淀处理,Supelco Ascentis® Express C18色谱柱（50 mm×3.0 mm×2.7 μm）分离,采用含0.1%甲酸的水溶液（A）-乙腈（B）为流动相,梯度洗脱,以人参皂苷Rc（G-Rc）作为内标,在电喷雾负离子模式下检测。结果表明：组织匀浆标准曲线的线性范围为10~20 000 μg/L,线性关系良好（r>0.99）,最低检出限（S/N=3）为3 μg/L,最小定量限为10 μg/L;准确度、日内和日间精密度、提取回收率均符合生物样品的分析要求。大鼠尾静脉注射20 mg/kg G-Re溶液后,在大鼠体内不同组织中均能检测到G-Re,主要分布在肺、脾、肾、心、脑、肝等器官,其中在肺中分布最多,在肝中分布最少。该方法简单、灵敏、快速、检出限低,适用于检测人参皂苷Re在生物体内的分布。     

LC-MS/MS法研究厚朴酚与和厚朴酚在大鼠体内的药动学行为

建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法同时测定半夏厚朴汤中厚朴酚与和厚朴酚在大鼠血浆中的浓度。采用Waters XTerra C₁₈色谱柱,以V(乙腈)∶V(0.1 mmol/L乙酸铵)=75∶25的溶液为流动相,流速为0.2 mL/min,进样量5 μL,等度洗脱方式进行分离,检测模式为负离子条件下的选择性反应监测。厚朴酚与和厚朴酚在1~1 000 μg/L浓度范围内线性关系良好,定量下限均为1 μg/L,方法的检测限（S/N=3）为0.1 μg/L。 准确度与精密度结果显示,方法日间、日内变异均小于15%,相对偏差为厚朴酚3.4%~6.6%,和厚朴酚0.5%~4%。低、中、高3个浓度提取回收率均大于90%。该方法可用于灌胃给予半夏厚朴汤复方水煎液后目标成分厚朴酚与和厚朴酚在大鼠血浆中浓度的同时监测,进而进行半夏厚朴汤中厚朴酚与和厚朴酚在大鼠体内药代动力学研究。     

联苯苄唑的兔药代动力学研究及组织残留量测定

采用 GC/ MS单离子检测的方法测定了联苯苄唑溶液剂和霜剂在家兔皮肤抹药后的血药浓度和在肝、胃、皮肤等组织中的药物浓度 ;并用 3P87软件对血药浓度进行了拟合 ,估算了药物动力学参数。结果表明 ,溶液剂和霜剂的体内过程均符合二室开放模型 ,Tmax 分别为 2 .88h和 5 .84h,Cmax 分别为35 6 .1 8ng/ ml和 1 82 .81 ng/ ml。在组织联苯苄唑含量测定中 ,只有用药局部皮肤有残留 ,而肝、胃和肌肉等组织中没有联苯苄唑残留。     

UPLC-MS/MS法分析柴胡郁金香颗粒中9个药效成分在抑郁症大鼠体内的药代动力学研究

采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法分析柴胡郁金香颗粒中柴胡皂苷a、柴胡皂苷c、柴胡皂苷d、甘草次酸、甘草苷、异甘草素、甘草素、芒柄花素、甘草酸等9个药效成分在抑郁症大鼠灌胃给药后血浆中的含量变化，并计算药代动力学参数。以乙腈沉淀血浆蛋白，选用Thermo Hypersi 1 GOLD Aq C18色谱柱（2.1 mm×100 mm×1.9 μm）分离，乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱，采用电喷雾离子源（ESI），多反应监测（MRM）模式进行质谱检测，DAS 3.1.6软件计算药代动力学参数。结果表明，9个成分在大鼠血浆中呈良好的线性关系，方法学考察符合要求。随着时间的增加，大鼠体内9个成分的含量呈规律性变化，达峰时间Tmax、半衰期t1/2、药时曲线下面积AUC(0-t)、平均驻留时间MRT(0-t)分别为0.27〜4.06 h、3.51〜7.76 h、70.06〜1 280.4 μg·h/L、7.13〜11.48 h。除甘草次酸外，其余成分在大鼠胃肠道吸收较快，其中6个成分产生了第2个吸收峰；9个成分在体内的消除速度均较快，药物安全性良好。本方法快速、灵敏、准确，适用于柴胡郁金香颗粒中9个成分在抑郁症大鼠体内的药代动力学研究。     

新型睡眠促进剂褪黑激素 (Melatonin)的药代动力学研究(英文)

测定新型睡眠促进剂 Melatonin的药代动力学参数的方法是以咖啡因为内标、以 GC/ MS的SIM(选择性离子监测 )为检测手段 ,定量测定家兔体内 Melatonin的含量及药代动力学参数。其结果为家兔灌胃给予 Melatonin3 0 mg· kg- 1后 ,Melatonin在家兔体内呈二室分布 ,药代动力学参数为t1/ 2α=0 .3 1 h,t1/ 2β=8.58h,t1/ 2 Ka=0 .3 4h,Tmax=0 .6 3± 0 .47h,Cm ax=3 2 2 .2 3± 2 55.40 ng/ m L,K12= 0 .81 h- 1,K2 1=2 .80 h- 1,K10 =2 .1 0 h- 1,AUC=6 97.49(ng/ m L) * h,CL(s) =0 .0 97± 0 .0 54 (mg/kg) / h/ (ng/ m L) .这种测量方法灵敏度高、特异性强、准确性好 ,为测定 Melatonin药代动力学参数提供了有效实用的分析方法。 Melatonin在家兔体内分布及消除都很快 ,不会在体内蓄积     

同位素示踪法研究~(125)Ⅰ-NGF在小鼠体内的吸收、分布及排泄

本文应用放射性同位素示踪法与电泳分离法相结合的方法研究125I-NGF在小鼠体内的吸收、分布和排泄。结果显示:静脉注射和肌肉注射125I-NGF在小鼠体内的代谢规律均符合二房室开放模型。肌肉注射10μg/kg,20μg/kg,40μg/kg 3个剂量达峰时间分别为0.71h,1.66h,3.78h;峰浓度分别为1.74ng/mL,2.82ng/mL,4.23ng/mL;曲线所围面积分别为8.44μg/h/L,21.6μg/h/L,43.12μg/h/L,消除相半衰期分别为4.83h,4.49h,4.43h。肌肉注射10μg/kg125I-NGF生物利用度为52.7%。静脉注射125I-NGF 10μg/kg,分布相半衰期为0.13h,消除相半衰期为3.68h,表观分布容积为0.697L/kg,曲线所围面积为16.01μg/h/L。125I-NGF在所测的14种组织中均有分布,其中肾、胃、肠中放射性浓度最高,脑和脊髓最少。肌肉注射125I-NGF主要随尿液排出体外。     

气相色谱-质谱联用测定大米中6种烟碱类农药残留

为了寻求烟碱类农药同时检测的新途径,建立了大米中烯啶虫胺、噻虫嗪、氯噻啉、吡蚜酮、吡虫啉、啶虫脒6种烟碱类农药气相色谱-质谱选择离子模式定性定量检测方法,并对比了提取溶剂、提取方法、固相萃取柱净化效果。结果表明,以乙腈超声提取、经Polymer Trap SPE净化,用气相色谱-质谱法对6种烟碱类农药进行定性定量检测,6种烟碱类农药在0.1~10 mg/kg质量浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数为 0.991 8 ~ 0.998 9。在大米中添加0.05、0.2、1 mg/kg 3个浓度的平均回收率为83.1%~101.4%,相对标准偏差为1.3%~8.9%,最小检出量为0.002~0.012 ng,最低检测浓度为0.05 mg/kg。     

高效液相色谱法测定大鼠全血中的灵芝酸单体Me

建立大鼠全血中灵芝酸单体Me的高效液相色谱测定方法。采用色谱柱Diamonsil~(?)C_(18)柱(250mm×4.6μm,5μm),流动相为甲醇-水(体积比为94:6,用醋酸调pH至3.6);流速为1mL/min;检测波长为245nm;内标为苯丙酸诺龙。灵芝酸单体Me血中浓度在0.05～40μg/mL范围内线性良好(r>0.99),定量限为50ng/mL,日内和日间测定的精密度(以相对标准偏差表示)均低于8.6%。该方法简便、灵敏、准确,适用于大鼠体内灵芝酸的药物动力学研究。     

序列磁共振颅脑影像的脑组织自动提取方法

为自动从MR脑影像中提取脑组织,提出一种新颖的脑组织提取算法.该算法在水平集算法的基础上,通过结合形态学方法,可以较为准确地截断脑组织与非脑组织粘连的部分.首先采用C-V模型对输入的影像进行预分割,由于某些脑组织会与视觉神经等部位的灰度相同,而C-V模型是基于区域平均灰度的分割,因此导致分割后无法提取脑组织.为了解决这一问题,采用一种形态学的腐蚀膨胀算法,通过循环腐蚀边界,得到粘连组织分离时刻的影像,再通过膨胀算法,使分离后的影像膨胀到腐蚀前的位置,与水平集算法结果取交集,从而完成脑组织的正确提取.为了提高实用性,采用改进后的水平集算法进行求解,在确保结果正确的基础上极大地提高了分割速度.算法适用于二维及三维的脑组织提取,实验结果表明,该算法具备良好的准确性、通用性与实用性.     

同轴骨组织工程支架降解特性研究

为使抗骨结核药物在病灶区长期维持一定浓度,并促进术后缺损处的骨修复,应用羟基磷灰石、聚乙烯醇、丝素蛋白作为药物载体材料,结合自制机械式挤出装置制备同轴梯度骨组织工程支架.为使骨组织工程支架顺利植入体内,且保证支架负载的药物持续缓慢地释放,现对药物载体材料骨组织工程支架降解性能进行测试.研究发现降解10周后,无丝素蛋白的...     

矿物药青礞石对PTZ点燃癫痫大鼠脑组织中氨基酸神经递质含量的影响

建立了超高效液相色谱-三重四极杆-线性离子阱质谱（Qtrap-UPLC-MS/MS）法同时测定大鼠脑组织中4种氨基酸类神经递质,研究了矿物药青礞石原药材粉末、水煎液、药渣对戊四氮（Pentylenetetrazol,PTZ）点燃癫痫模型大鼠脑组织中氨基酸类神经递质含量的影响。在ESI⁺电离模式下,采用多反应监测扫描方式测定脑组织（皮层,海马）中谷氨酸（Glu）、甘氨酸（Gly）、天冬氨酸（Asp）及γ-氨基丁酸（GABA）的含量。结果表明：4种氨基酸的线性关系良好,精密度、准确度均符合生物样品的分析要求。大鼠给予青礞石不同样品后,脑组织皮层和海马中兴奋性神经递质Glu、Asp水平显著降低。与模型组相比,皮层中Gly占氨基酸总含量的百分比均增加,Asp/Gly值、Glu/Gly值均降低;海马中,各组Glu、Asp、Gly、GABA的浓度均降低。这说明,矿物药青礞石能有效降低PTZ点燃大鼠脑内兴奋性氨基酸递质含量,调节皮层和海马区Gly含量。     

Electron dense granules and the role of buffers: artefacts from fixation with glutaraldehyde and osmium tetroxide

Electron dense granules may appear in tissues after glutaraldehyde prefixation and osmium tetroxide postfixation. In order to determine the conditions under which the granules are formed various vehicles in pre- and post-fixatives were tested on lymph node, thymus and heart. If granules appeared they were found in all cell types investigated, particularly in the nuclei. There was no difference in the distribution of the granules in the different compartments of these organs. The granules probably consist of complexes of glutaraldehyde, osmium and phosphate. The ultimate phosphate concentration in the tissues during the postfixation was shown to determine whether or not the artefacts appeared. Local conditions in the tissues also contributed to the appearance of the granules. It is concluded that phosphate buffers can be used in the double fixation procedure, but to avoid the granules in lymph node, thymus and heart, a concentration of 0·1 mol/l or less phosphate should be used. For brain and kidney other conditions apply.     

Dose–response and histopathological study,with special attention to the hypophysis,of the differential effects of domoic acid on rats and mice

The effects of the neurotoxin domoic acid (DA) in the central nervous system of rodents (essentially rats and mice) after intraperitoneal administration have been profusely studied in the past. These observations have shown that the toxin induces similar symptoms and pathology in both species, but the lethality varies greatly. This article addresses the common and specific histopathological effects in rats and mice and the difference in sensitivity of these species to DA. Various sublethal and lethal doses were employed in mice (from 3 mg/kg to 8 mg/kg) to observe their neurotoxicity by using different histological techniques, and these results were compared with the pathological effects after the administration of LD50 in rats (2.5 mg/kg). Additionally we also detected the presence of this toxin in various tissues by means of immunohistochemistry. Our results showed that rats are more vulnerable than mice to the neurotoxic effects of DA after intraperitoneal inoculation: lethality was extremely high in rats and the toxin produced hippocampal damage in rats surviving the intoxication, while lesions were not observed in DA‐inoculated mice. As for similarities between rats and mice, both displayed similar clinical signs and in both the toxin was detected in the hypophysis by immunohistochemistry, a brain region not reported to date as target of the toxin. Microsc. Res. Tech. 78:396–403, 2015. © 2015 Wiley Periodicals, Inc.     

基于高分辨质谱技术的整体动物体内药物成像分析新方法研究

质谱分子成像技术作为体内药物分析的新兴工具受到越来越多的关注,其中生物体内复杂基质的干扰是面临的关键问题之一。本研究利用高分辨质谱技术的优势,采用空气动力辅助离子化质谱成像方法（AFAI-MSI）,建立了高特异性的整体动物体内药物成像分析新方法,以提高体内药物成像分析结果的准确性和可靠性。以候选新药右旋娃儿藤宁碱（S-(+)-deoxytylophorinidine, CAT）为研究对象,采用高分辨质谱全扫描与靶向扫描相结合的方式,对整体动物体内药物的分布进行AFAI-MSI分析。结果表明,该方法能够准确地反映药物特异性分布和处置情况。通过一次质谱成像实验,从整体动物水平同时实现了候选新药体内分布和药物干预下内源性代谢物的成像分析,为候选新药的早期研发提供思路与手段。     

气相色谱-质谱联用法测定植物组织中糖与糖醇

糖醇类物质广泛存在于植物组织中,是重要的初生代谢物,具有提供能量、清除自由基以及调节植物细胞渗透压等生理功能,其含量的变化直接反映了植物组织的生理状况。本研究以植物组织中含量极少的核糖醇作为内标物,采用气相色谱 质谱（GC/MS）选择离子监测（SIM）模式法测定枸杞样品根系和叶片中果糖（Flu）、葡萄糖（Glu）、半乳糖（Gal）、纤维醇（Ino）、甘露醇（Man）、山梨醇（Sor）、蔗糖（Suc）等7种常见的糖和糖醇含量。结果表明,除果糖的检出限为5.5 mg/L外,其他均在0.11 mg/L以下,相对标准偏差介于2.3%~4.9%之间。在枸杞组织中的应用检测表明,枸杞根中果糖、蔗糖和葡萄糖含量是叶子的2倍以上,而半乳糖和纤维醇的含量相当。     

分子影像技术活体追踪移植干细胞的研究进展

干细胞具有分化、再生能力,通过体外扩增和体内移植,可以治疗各种组织坏损和退化性疾病(如心脑血管疾病、脑脊髓外伤和糖尿病等),具有极大的应用前景,是目前国际、国内的研究热点。利用核素显像、磁共振成像和光成像等分子影像技术,通过体外直接标记、报告基因或功能显示等追踪策略,可以显示干细胞在活体内的分布和变化,明确其最终归宿和产生的功能。合理选择这些分子影像技术和追踪策略,或通过互补结合,将有助于阐明干细胞在活体内的作用机制和相关的影响因素,指导临床干细胞治疗抉择和疗效评估。