柱前衍生化RP—HPLC测定中药野马追中的氨基酸

采用柱前衍生反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定了江苏地产药材野马追茎叶及其花蕾中的总氨基酸和游离氨基酸。用邻苯二甲醛(OPA)与一氯甲酸芴甲酯(FMOC)联用全自动柱前衍生化反相高效液相色谱仪，liozosphezeC18柱，pH=7．2的醋酸钠缓冲溶液和甲醇为流动相，流速为1．OmL／min，荧光检测器，波长为Ex=340nm、Em=450nm，样品中的氮基酸在30min内得到分离和检测。结果表明：野马追茎叶及其花蕾中含17种氨基酸，游离氨基酸17种，总氨基酸含量分别为2．40％和6．5l％，游离氮基酸含量分别0．185％和0．508％，半胱氨酸(cys)和谷氨酸(glu)含量较高，其中7种为人体必需氨基酸。     

水苏碱的柱前衍生化HPLC测定

选择含水苏碱的中药复方制剂前列泰片为对象 ,研究水苏碱的柱前衍生化HPLC测定方法。以对溴基溴化苯乙酮为衍生化试剂 ,18 冠醚 6为相转移催化剂 ,流动相为V(甲醇 )∶V(水 )=75∶2 5 ,检测波长 2 5 4nm ,用外标法定量。线性范围 0 5～ 5 μg(n =5 ) ,相关系数r =0 9992 ,平均回收率 10 0 1% (n =3) ,相对标准偏差 (RSD)为 0 6 4 %。重现性好 ,灵敏度高 ,为中成药中水苏碱的含量测定提供了参考方法。     

HPLC柱前衍生化测定泡腾片中牛磺酸含量

建立测定泡腾片中牛磺酸含量的方法。牛磺酸经邻苯二甲醛衍生,采用Diamondsil C18（5μm×250mm×4．6mm）色谱柱分离;流动相为乙腈-甲醇-水（1：1：8）;流速1．0mL·min^-1;波长330nm．外标法定量。牛磺酸在40μg·mL^-1～200μg·mL^-1峰面积与进样量的线性关系良好（R^2=0．9991）,回收率在98．85％～101．15％,RSD=0．749％。本法精密度高,重现性好,定量准确,可用于测定泡腾片中牛磺酸的含量。     

柱前衍生HPLC法测定人凝血因子Ⅷ中氨基酸的含量

目的建立人凝血因子Ⅷ中氨基酸含量的柱前衍生HPLC检测方法。方法采用6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯(6-aminoquinoline-N-hydroxysuccinimide carbamate,AQC)在一定条件下与氨基酸形成稳定的衍生产物(柱前衍生),再通过高效液相色谱仪,采用氨基酸分析柱(150 mm×3. 9 mm,4μm)检测,以不同流动相进行梯度洗脱[在《中国药典》三部(2015版)的基础上进行调整],柱温为37℃,流速为1. 0 mL/min,检测波长为248 nm。同时验证方法的系统适应性、专属性、线性范围、精密性及准确度。结果甘氨酸及盐酸赖氨酸均可在25 min内获得较好分离,与相应相邻色谱峰之间的分离度均 1. 5,拖尾因子在0. 95～1. 40之间;各样品的氨基酸种类均能正确检出,混合样品与单纯样品出峰时间保持一致,且供试品溶液与对照品溶液主峰保留时间相对偏差均2%;当甘氨酸浓度在12. 5～62. 5μg/mL,盐酸赖氨酸浓度在4. 0～20. 0μg/mL时,与相应氨基酸与内标峰面积比呈良好的线性关系,相关系数(r)分别为0. 999 9和0. 999 8;甘氨酸及盐酸赖氨酸重复性的相对标准偏差(RSD)分别为0. 4%和0. 5%,中间精密度RSD分别为1. 3%和1. 0%;两种氨基酸的回收率均在95%～105%范围内,RSD均≤2%。结论建立的方法具有良好的专属性、精密性及准确度,可用于测定人凝血因子Ⅷ中的氨基酸含量。     

柱前衍生化HPLC法分析马卡列丙多糖中单糖的组成

建立了柱前衍生化测定马卡列丙多糖中单糖组成的方法,采用柱前1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化结合高效液相色谱法(HPLC),分析侗药马卡列丙多糖中单糖的组成及摩尔比值。马卡列丙多糖经硫酸水解,PMP衍生化后,采用Thermo Scientific BDS Hypersil C_(18)(250 mm×4. 6 mm,5μm),以0. 5%的磷酸水和乙腈为流动相,在245 nm波长下检测,测得马卡列丙多糖主要由甘露糖,葡萄糖,阿拉伯糖,木糖组成,其摩尔质量比为0. 10∶3. 87∶1. 00∶0. 07。该方法重现性良好,能够快速对多糖样品进行组成分析。     

柱前衍生化-HPLC测定蓝圆鲮蛋白的氨基酸组成

采用柱前衍生化反相高效液相色谱法测定蓝圆骖蛋白的氨基酸组成,以邻苯二甲醛-9-芴甲基氯甲酸酯为衍生化试剂,醋酸钠缓冲液,甲醇及乙腈为流动相,用HypersilODSC18柱和二极管阵列检测器。结果表明,18种氨基酸在38min内分离效果良好,在一定浓度范围内,氨基酸的峰面积与浓度线性相关系数在0．9932-0．9998,相对标准偏差为1．93％。4．89％（n=5）。并测定了蓝圆够蛋白的氨基酸组成。该方法简便快速、准确可靠,蓝圆够蛋白中含有至少18种氨基酸,其中8种必须氨基酸占总含量的42．68％。     

柱前衍生化-HPLC测定蓝圆鲹蛋白的氨基酸组成

采用柱前衍生化反相高效液相色谱法测定蓝圆鲹蛋白的氨基酸组成,以邻苯二甲醛-9-芴甲基氯甲酸酯为衍生化试剂,醋酸钠缓冲液,甲醇及乙腈为流动相,用Hypersil ODS C18柱和二极管阵列检测器。结果表明,18种氨基酸在38 min内分离效果良好,在一定浓度范围内,氨基酸的峰面积与浓度线性相关系数在0.993 2～0.999 8,相对标准偏差为1.93%～4.89%(n=5)。并测定了蓝圆鲹蛋白的氨基酸组成。该方法简便快速、准确可靠,蓝圆鲹蛋白中含有至少18种氨基酸,其中8种必须氨基酸占总含量的42.68%。     

柱前衍生化RP-HPLC测定中药野马追中的氨基酸

采用柱前衍生反相高效液相色谱法(RP HPLC)测定了江苏地产药材野马追茎叶及其花蕾中的总氨基酸和游离氨基酸。用邻苯二甲醛(OPA)与一氯甲酸芴甲酯(FMOC)联用全自动柱前衍生化反相高效液相色谱仪,liozosphezeC18柱,pH=7.2的醋酸钠缓冲溶液和甲醇为流动相,流速为1.0mL/min,荧光检测器,波长为Ex=340nm、Em=450nm,样品中的氨基酸在30min内得到分离和检测。结果表明:野马追茎叶及其花蕾中含17种氨基酸,游离氨基酸17种,总氨基酸含量分别为2.40%和6.51%,游离氨基酸含量分别0.185%和0.508%,半胱氨酸(cys)和谷氨酸(glu)含量较高,其中7种为人体必需氨基酸。     

常用磷矿浮选捕收剂分析柱前衍生化经验谈

柱前衍生化是采用气相色谱、液相色谱、质谱等毛细管柱分离技术成功分析磷矿浮选捕收剂最关键的步骤。简述了常用捕收剂(脂肪酸类化合物、脂肪胺类化合物、氧化石蜡皂类化合物)柱前衍生化的几点经验,并对其新技术应用作了简单介绍。     

RP-HPLC法测定护肤品中自藜芦醇的含量

建立RP—HPLC测定化妆品中自藜芦醇含量的方法。色谱柱为Shimadzu ODSC18柱（4．6mm×150mm,5m）,流动相为甲醇：0．05％磷酸水溶液（50：50）,等度洗脱,检测波长306nm,流速1mL／min,上样量10μL,柱温为室温。结果表明白藜芦醇在0～200mg／L呈良好的线性关系,相关系数为0．9997,护肤品样品平均加标回收率为98．8％,相对标准偏差为2．06％。本方法操作简便,结果准确可靠,适于化妆品中白藜芦醇的含量测定。     

反相离子对高效液相色谱法测定巴丹

建立了用反相离子对色谱法测定农药巴丹含量的方法。色谱柱为ODS C18柱,流动相为含1．0mmol/L十二烷基硫酸钠的甲醇／水（V／V＝70:30)溶液,用磷酸调节溶液pH值在3．3左右。紫外检测波长为225nm。分别考察了流动相中离子对试剂、甲醇浓度以及pH值对巴丹保留时间的影响。峰面积与浓度具有良好的线性关系,相关系数为0．0005,平均回收率为100．0％。方法简便、快速、准确,可用于巴丹原药的测定。     

反相高效液相色谱法直接测定离子液体中咪唑杂质含量

研究了高效液相色谱法测定离子液体中的杂质(4-甲基咪唑)含量的测定方法。在不同色谱条件下,分离效果不同。在AllsphereODSC18色谱柱上,以水-甲醇为流动相,两者流速比为水∶甲醇=1∶9,流速为1.0mL/min,在215nm处进行紫外检测,离子液体能与4-甲基咪唑很好的分离。另外,在HypersilBDSC18色谱柱上用类似的条件分离效果也较好。采用该法的线性范围,检出限分析考察,结果表明,其灵敏度高、定量准确、重现性好,适合于离子液体中4-甲基咪唑这种杂质含量的测定。     

反相高效液相色谱法测定乙羧氟草醚原药含量

采用Shim-pack C18反相色谱柱,以甲醇+水+冰乙酸为流动相,在283 nm紫外波长下对乙羧氟草醚原药进行反相高效液相色谱法测定,原药有效成分的相对保留时间约为18.2 min。以外标法定量测得本方法的变异系数为0.38%,平均回收率为100.10%,线性相关系数为0.9999。     

反相高效液相色谱法测定克瘟散原药含量

采用Waters Symmetry C18反相色谱柱,以乙腈+甲醇+水为流动相,在256 nm紫外波长下对克瘟散原药进行反相高效液相色谱法测定,原药有效成分的相对保留时间约为13.6 min。以外标法定量测得本方法的变异系数为0.19%,平均回收率为100.08%,线性相关系数为0.999 7。     

反相高效液相色谱法测定2,3-酸

研究采用反相高效液相色谱法,甲醇/水=70/30为流动相,在C18柱上分离并测定2,3-酸,用紫外检测器检测,波长220um,苯酚为内标物,内标法定量。该法操作简便、快速、准确,相对标准偏差为0.5％,回收率为99.0～101.5％。     

反相高效液相色谱测定3-苯氧基-4-氟苯甲醛的含量

目的:用反相高效液相色谱法测定3-苯氧基-4-氟苯甲醛含量。方法:在C18色谱柱上,以甲醇+乙腈+水(40+40+20,体积比)为流动相,对3-苯氧基-4-氟苯甲醛及各有机杂质组分进行反相高效液相色谱法分离。经紫外(206 nm)检测,用峰面积外标法测定3-苯氧基-4-氟苯甲醛含量,有机杂质含量的测定采用峰面积归一化法。结果:3-苯氧基-4-氟苯甲醛线性良好,回归方程为Y=0.04748+0.35797X,线性相关系数r=0.9998。结论:在该色谱条件下,3-苯氧基-4-氟苯甲醛与杂质峰能获得完全分离,本方法测定速度快,结果准确,重现性好。     

高效液相色谱法测定D-对羟基苯甘氨酸

建立了反应体系中 D-对羟基苯甘氨酸、N-氨甲酰 - D-对羟基苯甘氨酸、DL-对羟基苯海因 3者含量的测定方法。采用高效液相色谱法测定 ,以 Kromasil- C18为固定相 ,φ(乙腈 )∶ φ(水 )∶ φ(磷酸 (85 % ) ) =10∶ 90∶0 .0 1为流动相 ,紫外检测波长为 2 10 nm。3者回收率分别为 99.5 % ,98.6 %及 99.6 % ,RSD为 0 .11% ,0 .13%和0 .2 1%。实验结果表明该法简便、快速、结果可靠     

高效液相色谱法测定氟比洛芬酯

采用高效液相色谱法测定氟比洛芬酯含量。对方法的精密度、最低检出限度、重复性、稳定性进行了系统研究。本方法能够解决(S)-氟比洛芬酯与其异构体(R)-氟比洛芬酯的分离。方法快速,准确,灵敏度高。     

高效液相色谱法定量分析1-氨基-2-羟基萘-4-磺酸

本文建立反相高效液相色谱法定量分析1-氨基-2-羟基萘-4-磺酸的分析方法。采用ODS-C18色谱柱,以甲醇/水为流动相,配比为25∶75,检测波长228nm,线性范围20.00mg/L～100.00mg/L,r=0.9999,标准偏差0.16,回收率99.86%～100.09%。分析精度好,满足工业产品质量检测的要求。