挤压和发酵对小米多肽ACE抑制活性及抗氧化作用的影响

以小米为原料,制备具有血管紧张素转换酶(ACE)抑制作用的食源性活性多肽。采用挤压和发酵的方法对小米粉进行处理,研究其对小米蛋白消化率的影响,同时对在胃蛋白酶-胰酶水解条件下得到的小米多肽进行ACE抑制活性和抗氧化能力分析。结果表明,相比于原粉,挤压和发酵对小米多肽的ACE抑制活性和抗氧化能力都有显著的影响(P<0.01);挤压对小米蛋白消化率的影响较大(53.11%);挤压小米蛋白水解肽具有较强的ACE抑制活性(IC50=0.057 mg肽/mL)、DPPH自由基清除能力(10.99μmol/g肽)和铁离子还原能力(82.92μmol/g肽)。     

超滤精制对芝麻蛋白水解液ACE抑制活性和抗氧化活性的影响

以芝麻饼粕为原料,采用超滤技术制备功能多肽,研究超滤对蛋白酶水解肽的氨基酸组成、肽谱、降血压和抗氧化功能特性等影响。结果表明:经截留分子质量为10 ku和3 ku的超滤膜过滤,所得到的3个组分(相对分子质量分布10 ku、3~10 ku和3 ku)的必需氨基酸质量分数分别为15.6%、14.9%、15.0%,显著高于未经超滤(12.9%),分子质量分布在3~10 ku组分的总氨基酸质量分数达53.1%,比未经超时提高了7.6%;其中分子质量分布为3~10 ku和3 ku酶解液的IC50值分别降低了6.6%和7.9%,血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性显著提高;分子质量分布为3~10 ku和3 ku酶解液的DPPH·自由基清除率IC50值与未经超滤时均降低了8.6%,羟自由基清除率分别降低4.20%和26.57%,抗氧化活性显著提高。     

卵白蛋白多肽的酶解制备及抗氧化活性研究

以DPPH自由基清除率和水解度为指标,采用碱性蛋白酶酶解卵白蛋白制备抗氧化活性肽,考察底物质量分数、酶解时间、加酶量、温度等因素对制备的影响。正交实验结果表明,碱性蛋白酶的最佳水解条件为:底物质量分数4%、酶解时间6h、加酶量5500U/g,温度65℃,此条件下DPPH自由基清除率达到96.92%、水解度为57.14%。酶解时间对DPPH自由基清除率的影响最大,而底物质量分数对水解度的影响最大。      

卵白蛋白多肽的酶解制备及抗氧化活性研究

以DPPH自由基清除率和水解度为指标,采用碱性蛋白酶酶解卵白蛋白制备抗氧化活性肽,考察底物质量分数、酶解时间、加酶量、温度等因素对制备的影响。正交实验结果表明,碱性蛋白酶的最佳水解条件为:底物质量分数4%、酶解时间6h、加酶量5500U/g,温度65℃,此条件下DPPH自由基清除率达到96.92%、水解度为57.14%。酶解时间对DPPH自由基清除率的影响最大,而底物质量分数对水解度的影响最大。     

小米多肽的制备及其抗氧化功能研究

采用碱性蛋白酶Alcalase水解小米蛋白,以二苯代苦味肼基(DPPH)自由基清除率为指标,通过单因素试验和正交试验确定小米多肽最佳制备条件,用硝基四氮唑蓝(NBT)还原试验、脱氧核糖法检测其对超氧阴离子自由基(O2·)和羟自由基(·OH)的清除能力,分光光度法测定小鼠红细胞溶血和肝线粒体MDA生成量。结果表明：碱性蛋白酶Alcalase制备小米多肽的最佳酶解条件为pH8.5、[E]/[S]5%、温度40℃、时间3.5h、对DPPH自由基、O2·和·OH的清除率分别为68.93%、40.06%和48.63%,并具有明显抑制氧化溶血现象和·OH诱导线粒体氧化损伤的功能,表明小米多肽具有较强的抗氧化功能。     

海蜇生殖腺酶解肽的抗氧化活性和ACE抑制活性研究

为实现海蜇加工副产物生殖腺的高值化利用,以海蜇性腺脱脂粉为原料,选用中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和碱性蛋白酶分别对海蜇生殖腺进行水解,以酶解产物（JGHP）的水解度、DPPH清除活性和ACE抑制活性为指标,选择制备海蜇生殖腺活性肽的工具酶。经超滤膜将酶解产物分成JGPH-P1（大于3000 u）、P2（1000³000 u）、P3（小于1000 u）三个部分,分别测定三部分的DPPH清除活性和ACE抑制活性。结果表明,中性蛋白酶水解所得产物的水解度、DPPH清除率和ACE抑制活性均优于其他三种蛋白酶;JGHP超滤后,其中组分JGHP-P3的活性较高。利用电子自旋共振（ESR）技术检测JGHP-P3对DPPH·、·OH、O-2·的清除活性。其ACE抑制活性IC50为1.06 mg/m L,DPPH·、·OH、O-2·的清除活性IC50分别为0.38、0.63、0.59 mg/m L。由此可见,经中性蛋白酶水解得到的JGPH中小于1000 u的组分具有较高的抗氧化和ACE抑制活性。      

芝麻蛋白水解工艺优化及芝麻多肽组分抗氧化活性的研究

研究了芝麻多肽的水解工艺条件及其组分抗氧化活性.采用Box-Behnken试验设计,优化了芝麻蛋白水解条件,对芝麻多肽(SP)和不同分子质量的芝麻多肽(SP1、SP2和SP3)清除DPPH自由基活性、总抗氧化能力、抑制猪油和冷藏熟肉糜脂质氧化作用进行了研究.优化的水解条件为:6.91 g芝麻蛋白,0.082 g碱性蛋白酶,水解时间6.82 h,水解度为30.2%.芝麻多肽均有一定的抗氧化能力,SP3和SP的抗氧化活性明显高于芝麻蛋白.0.02%SP3和SP对DPPH自由基清除率分别为79.17%和52.54%,清除能力由高到低的顺序为SP3>SP>SP2>SP1.芝麻多肽的总抗氧化能力与清除DPPH自由基的活性一致.0.02%的芝麻多肽具有明显的抑制猪油氧化和冷藏熟肉糜脂质氧化的作用,可使猪油过氧化值从126.6 mmol/kg降低至45.4 mmol/kg,SP3和SP对冷藏熟肉糜脂质氧化的抑制率分别为74.68%和59.37%,抑制能力由强到弱的顺序为SP3>SP>SP2>SP1.     

超声波辅助酶解对玉米醇溶蛋白酶解产物抗氧化及ACE抑制活性的影响

作为玉米加工的副产物,玉米醇溶蛋白可以在酶的作用下形成具备生物活性的多肽物质,应用于药物的生产加工过程.而常规的酶解工艺存在酶的利用率低下、产物转化率低、耗费时间长等缺陷,本文研究了超声波辅助酶解对玉米醇溶蛋白酶解产物抗氧化及ACE抑制活性的影响.研究结果表明,超声功率为200W,超声时间为40min,料液比为1 ∶1...     

牡蛎酶解产物的ACE抑制活性和清除自由基活性研究

研究了牡蛎蛋白质分别经537酸性蛋白酶和Alcalase碱性蛋白酶作用所得酶解产物的ACE抑制活性以及对DPPH·、·OH、O2·三种自由基的清除作用。结果表明,两种酶的作用产物都具有一定的ACE抑制活性和清除自由基活性。综合评价工艺条件以及功能实验结果得出,采用537酸性蛋白酶可以简化工艺,对于水解度为16％的酸性蛋白酶酶解产物,蛋白浓度为1mg/mL时,对ACE的抑制率为71.71％;20mg/mL时,对DPPH·、O2·自由基的清除率分别为76.23％、24.36％;8mg/mL时,对·OH自由基的清除率为8947％。相对分子质量分布结果表明,体系主要存在2肽到5肽的多肽类物质,HPLC图谱中对应峰面积约占总面积的76.99％。      

鸡蛋壳膜多肽酶解工艺及抗氧化活性研究

试验以鸡蛋壳膜为原料,通过酶解法制备小分子肽,并对其生物活性进行研究。以水解度为评价指标,通过单因素试验确定蛋白酶种类、酶解时间、料液比以及酶添加量等因素对壳膜多肽水解度的影响,并通过响应面设计（Box-Behnken design,BBD）对酶解条件进行三因素三水平优化;通过高效凝胶过滤色谱测定酶解后壳膜多肽分子量的分布情况,并测定壳膜多肽对DPPH·、ABTS+·、·OH、O2-·的清除能力。结果表明,最佳酶解工艺条件为碱性蛋白酶（AP-200a）,酶添加量2.4%,料液比1∶9.5（g/mL）,酶解时间5 h;在此条件下,壳膜多肽水解度为27.15%,水解后相对分子质量小于1 000 Da的小分子肽所占比例为90.9%;且壳膜多肽对DPPH·、ABTS+·的清除率分别为（93.03±0.51）%、（94.53±0.92）%,与 VC的效果相当;但对·OH 和 O2-·的清除率分别为（43.33±1.10）%和（53.40±0.70）%。因此,通过该法酶解得到的壳膜多肽中小分子肽占比较高,易被人体消化吸收,且具有一定抗氧化活性。     

半固态酶解法制备全谷物多肽及其抗氧化、ACE抑制活性的研究

以燕麦、荞麦为原料,通过半固态酶解法制备谷物多肽并以液态酶解作为对照组研究其抗氧化、降血压能力.通过凯氏定氮法测定酶解产物中多肽含量,通过总抗氧化能力(Ferric ion reducing antioxidant power,FRAP法)、羟自由基清除能力及体外血管紧张素转换酶(Angiotensin I conve...     

紫苏粕酶解工艺优化及其多肽抗氧化稳定性

为更好地利用紫苏粕中的蛋白质资源,采用碱性蛋白酶酶解脱脂紫苏粕制备紫苏粕多肽,以水解度为指标,在单因素试验基础上,采用响应面法优化紫苏粕多肽制备工艺,并对最优条件下制备的紫苏粕多肽进行氨基酸组成和抗氧化稳定性分析。结果表明,最佳酶解工艺为酶解时间8 h、初始pH11.5、底物浓度7.5%、酶解温度60 ℃、加酶量7 000 U/g。在此条件下,酶解液水解度为（23.462±0.237）%。紫苏粕多肽由17 种氨基酸组成,其中精氨酸含量最高,达（286.635±0.357）mg/g。紫苏粕多肽在20～100 ℃、pH2～8 保持较强的抗氧化活性。添加适量NaCl 和葡萄糖有助于增强紫苏粕多肽抗氧化活性,添加2%以上柠檬酸则导致ABTS+自由基清除活性显著下降。综上,该工艺制备的紫苏粕多肽具有良好的抗氧化稳定性,具有进一步开发潜力。     

谷朊粉酶解条件优化及其抗氧化活性

以溶解性为指标,采用单酶(Alcalase 2.4 L)和双酶(Alcalase 2.4 L+Flavourzyme 500 MG)2种方法水解谷朊粉,在单因素试验的基础上通过正交试验,优化了单酶和双酶水解的最佳条件,并分析了最优酶解条件下得到的2种产物的抗氧化活性、相对分子质量分布及其氨基酸组成。结果表明,单酶和双酶水解物的最大溶解性分别达到了61.38%和82.21%。水解物质量浓度为3.0 mg/m L时,单酶水解物的还原力、DPPH自由基、超氧阴离子、羟自由基的清除率分别达到0.81、71.82%、56.83%和70.82%,而双酶水解物相应的指标分别达到1.01、85.33%、74.84%和84.33%。结果表明,双酶水解不仅能提高谷朊粉的溶解性,而且也能明显提高其抗氧化活性。双酶水解物中小分子肽(分子质量1 500 u)和疏水性氨基酸的质量分数分别达到61.63%和33.74%,均高于单酶水解物,表明谷朊粉酶解物的抗氧化活性与小分子肽含量、疏水性氨基酸呈现正相关。     

复合酶分步水解法制备汉麻多肽及其抗氧化特性研究

汉麻籽由于其营养丰富,且不含有胰蛋白酶抑制剂等抗营养因子,近年来成为食品、医药等领域的研究热点。本研究以汉麻分离蛋白为原料,采用碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶复合酶分步酶解的方式对其进行酶解,通过响应面优化酶解参数,制取汉麻多肽。并采用分光光度计测定其DPPH自由基清除率与铁还原能力,对汉麻多肽抗氧化能力进行评价。结果表明,采用先碱性蛋白酶后木瓜蛋白酶的酶解方式,制得的汉麻多肽含量最高。酶解最优条件为：第一步碱性蛋白酶水解：底物浓度为5%,酶解时间2 h,pH为8.5,酶解温度为54℃,加酶量为10100 U/g;第二步木瓜蛋白酶水解：pH为6.5,温度为50℃,加酶量为5000 U/g,酶解时间1.5 h,最终获得汉麻多肽混合物的水解度为24.48%,肽含量为8.48 mg/mL;汉麻多肽的DPPH自由基清除率为82.32%,与汉麻分离蛋白相比具有较强的铁还原能力,表明汉麻多肽具备较强的抗氧化能力。本研究为汉麻多肽的开发利用提供理论基础。     

酶水解鲫鱼蛋白质及产物抗氧化活性初探

本实验主要研究了碱性蛋白酶对鲫鱼的水解作用及其水解液的抗氧化活性,探讨了酶浓度、底物浓度、水解温度、时间、pH对鲫鱼蛋白质水解度的影响,同时用DPPH(二苯基苦基苯肼)自由基法和改进的邻苯三酚法测定分析水解液的抗氧化活性。结果表明:酶解条件为E为4%,S为10%,pH8.0,时间为4h,温度为50℃时可以获得较高水解度,同时水解液对DPPH自由基和超氧阴离子自由基(O2·)具有较高清除率。     

两步酶解法制备小龙虾副产物多肽及其抗氧化性研究

该研究采用两步酶解法制备小龙虾副产物多肽,先用碱性蛋白酶水解提取小龙虾副产物中粗蛋白,利用单因素和正交试验确定粗蛋白的最佳制备条件：2%碱性蛋白酶,酶解2 h,料液比1∶20（g/mL）,酶解温度55℃、pH8.5,虾副产物蛋白得率最高为64.32%;胰蛋白酶二次酶解虾副产物粗蛋白制备多肽,以蛋白水解度为标准,利用正交试验优化得到酶解制备多肽的工艺条件：2%胰蛋白酶、酶解4 h,料液比1∶15（g/mL）,酶解温度37℃、pH8.0的条件下,虾副产物蛋白水解度为45.2%。二次酶解产物比一次酶解产物的总抗氧化能力强;Tricine-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）图谱显示二次酶解多肽的分子质量主要集中在3.3 kDa以下;多肽中含有18种氨基酸,其中必需氨基酸占总氨基酸的64.36%。小龙虾副产物多肽可用于功能食品及调味品的开发。     

酸枣仁ACE抑制肽酶解工艺优化

本试验以脱脂后的酸枣仁渣通过碱溶酸沉法提取得到的酸枣仁蛋白为研究对象,以血管紧张素转化酶(ACE)抑制率和水解度为指标,筛选复合酶种类,采用响应面分析法,以中性蛋白酶/碱性蛋白酶比例、pH、底物浓度、酶解温度、酶解时间为试验因素,优化酸枣仁ACE抑制肽最佳酶解工艺参数。结果表明:筛选出中性蛋白酶和碱性蛋白酶作为复合酶,最适酶添加量确定为6000 U/g,5个因素对ACE抑制率和水解度的影响由大到小的顺序为:酶解温度、酶解时间、pH、中性蛋白酶/碱性蛋白酶比例、底物浓度。通过拟合方程分析,得到酸枣仁ACE抑制肽酶解的最佳工艺条件为:中性蛋白酶/碱性蛋白酶比例为2.1:1、酶解温度为54 ℃,底物浓度为3.1%,pH为7.5,酶解时间为62 min。在此条件下,复合酶解酸枣仁蛋白酶解液的实际ACE抑制率和水解度分别为（79.46%±0.49%）和（31.45%±0.85%）,与理论值接近。制备得到酸枣仁ACE抑制肽与阳性对照组卡托普利对比,酸枣仁ACE抑制肽的ACE抑制率大小为（79.46%±0.49%）,与卡托普利的ACE抑制率偏差为（19.28%±0.12%）,证明酸枣仁ACE抑制肽具有显著降压效果。本研究证明了酸枣仁蛋白通过酶解有效得到ACE抑制肽并优化其酶解工艺,旨在为酸枣仁渣废物再利用提供参考方向和理论依据。     

龙须菜蛋白酶解制备ACE抑制肽的工艺优化

通过酶解法酶解龙须菜蛋白制备ACE抑制肽,考察风味蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶的龙须菜蛋白酶解液对ACE抑制活性,并对酶解工艺进行优化。最后选出胰蛋白酶为ACE抑制肽的适宜蛋白酶,在单因素的基础上,采用响应面分析法对胰蛋白酶的酶解工艺进行优化。结果表明：最佳酶解工艺为：pH为8.0,酶底比为6%,温度为35℃,在此条件下,制备的多肽（2.0 mg/mL）对ACE的抑制率为72.37%。     

富硒辣木叶蛋白ACE抑制肽的酶解工艺优化及活性研究

以富硒辣木叶为原料提取富硒辣木叶蛋白,通过单因素实验和响应面优化富硒辣木叶蛋白血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的制备工艺,并对最优酶解物的ACE抑制活性、氨基酸组成和硒含量进行分析表征。结果表明,富硒辣木叶蛋白ACE抑制肽的最佳酶解条件为时间3 h,pH7.5、酶底比0.23%、底物浓度5.97%、温度39.2℃。该条件下制备的ACE抑制肽的ACE抑制活性较强(IC50=0.522 mg/mL),富含必需氨基酸(24.05%)和疏水性氨基酸(20.6%),其硒含量是辣木叶原料中硒含量的1.86倍。富硒辣木叶蛋白ACE抑制肽具有功能因子和天然食物的双重特性,此研究可为降血压药物及相关功能性食品的开发提供理论依据。