橙汁腐败酵母菌的分子鉴定及其形态特征分析

目的：结合多种酵母菌鉴定方法,分析腐败橙汁中酵母菌的种类,为快速检测和控制商品橙汁中酵母菌污染奠定基础,也为酵母菌种类的快速鉴定提供参考。方法：以分离自腐败橙汁的8株酵母菌株为材料,观察菌落和细胞形态。用引物ITS1/ITS4扩增菌株5.8S rDNA 及其ITS间隔区(5.8S-ITS),对扩增产物用HhaⅠ、Hae Ⅲ 和 HinfⅠ进行限制性酶切片段多态性(RFLP)分析和测序;用引物NL1/NL4扩增26S rDNA D1/D2区并测序。结果：菌落特征观察将菌株初分为6组,细胞学观察粗分为3组,分子方法都分成4组。用限制性内切酶HhaⅠ、Hae Ⅲ和HinfⅠ对5.8S-ITS区产物进行 RFLP分析,观察到4种不同的图谱类型。5.8S-ITS 区和26S rDNA D1/D2区的序列分析结果相似,8株分离菌与GenBank中的4种酵母菌参考菌株序列一致性达99%以上。分离株与参考菌株以两区序列构建的NJ系统树都分成4枝：Y1与克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri),Y12-3、Y18-1与发酵毕赤酵母(Pichia fermentans),Y22、Y23、Y26和Y56与Meyerozyma guilliermondii,Y47与Wickerhamomyces anomalus分别聚为一枝。结论：结合形态分析和核酸分析,将8株腐败橙汁分离菌鉴定为P. kluyveri var. kluyveri、P. fermentans、M. guilliermondii和W. anomalus 4个种,其中M. guilliermondii在腐败橙汁中首见报道;ITS- RFLP分析、26S rDNA D1/D2区测序与菌株形态特征结合能有效鉴定酵母菌,核糖体DNA分析可鉴定酵母到生物学种,菌落形态特征可反映种以下的遗传差异,因此,采用分子方法鉴定时不能忽视形态特征分析的重要性。     

橙汁中的条件致病酵母菌及其控制策略

橙汁中普遍存在酵母菌,其中部分对人体是无害的。但是近年来的研究发现,一些酵母菌的存在不但会引起橙汁腐败,还会导致人体感染患病。酵母菌是橙汁中最常见的条件致病菌之一,随着人们对橙汁饮用安全和人体健康潜在威胁的深入认识,条件致病酵母菌日趋受到重视。对致病酵母菌的研究也成为生命科学研究的热点。目前已知的橙汁酵母致病菌有14种：近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)、星形假丝酵母(C.stellata)、热带假丝酵母(C.tropicalis)、无名假丝酵母(C. famata)、小丘假丝酵母(C. colliculosa)、涎沫假丝酵母(C. zeylanoides)、葡萄牙棒孢酵母(Clavispora lusitaniae)、新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)、汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)、葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)、异常汉逊酵母(Pichia anomala)、粘质红酵母(Rhodotorula mucilaginosa)、阿萨希丝孢酵母(Trichosporon asahii)。本文对这些橙汁中条件致病酵母菌的种类、鉴定方法及其控制策略进行了系统地的综述与评述,为橙汁生产、储藏、销售和消费提供参考。     

大曲中主要酵母菌的分子鉴定

采用添加去氧胆酸钠的选择性培养基,从大曲中分离获得了7株酵母菌纯培养。以NL1和NL4为引物,对分离得到的酵母菌进行了26srDNAD1／D2区域序列扩增、同源性比较和系统发育分析。研究结果表明：6株分离酵母菌与GenBank数据库中已知酵母有较高的相似性和相近的亲源关系,如DQY-1与Saccharomyces cerevisiae;DQY-2与Pichiadeserticola DQY-3与Zygosaccharomyces bailii;DQY-4与Debaryomyceshansenii;DQY-5与Candida pseudolambica;DQY-6与Endomycesfibuliger。另外1株酵母菌DQY-7与Uncultured fungusclone FS10有较高的相似性,而与已知酵母菌相似性较低,说明大曲中还存在一种以前尚未被认识的酵母菌。     

酵母分离株分子鉴定及其挥发性香气成分检测分析

测定了8类不同食品来源的12株酵母分离株26S rDNA D1/D2序列,与Genbank登陆序列比较分析,12株分离酵母鉴定为:3株酿酒酵母,2株戴尔有孢圆酵母、1株马克斯克鲁维氏酵母、1株喜仙人掌毕赤酵母、1株鲁西坦念珠菌、1株膜噗毕赤酵母、2株Kudriavzevii毕赤酵母,1株疑似新种。选用固相微萃取-气质联用(SPME-GC/MS)方法,完成了各分离株挥发性成分的检测。结果表明,酵母发酵后的香气组分主要为酯类,包括乙酸乙酯、辛酸乙酯、乙酸苯乙酯、癸酸乙酯等,其中菌株A1发酵后产生多种含量较高的挥发性组分及独有组分己酸乙酯。结果表明,酵母产生的香气组分、含量与酵母分离来源、种类有关,这可能与不同酵母代谢途径的差异相关。     

南疆传统发酵酸奶中酵母菌的分子鉴定及抗氧化活性研究

以开发新疆地区传统发酵乳中的酵母菌为研究目的,对分离的78株酵母菌利用26SrDNA D1/D2区和ITS转录区间分析以及抗氧化活性检测试剂盒进行分子鉴定和抗氧化活性检测。结果表明,78株酵母菌中具有抗氧化活性的菌株有42株,其中NG-40综合抗氧化能力突出,其抗氧化活性为(106.41±3.92)U/mL,抑制羟基自由基能力为(651.24±3.75)U/L,抗超氧阴离子能力为(104.11±3.25)U/mL,而脂质过氧化物含量仅为(1.99±0.65)μmol/L;分子鉴定结果表明,38株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),36株为马克思克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus),4株属于毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)。     

一株沙棘果酵母菌株的分子鉴定及发酵特性研究

从天然沙棘果上成功分离到一株耐酸能力强、发酵力较高、凝聚性适中的酵母菌,命名为FBI#-2006.通过对酵母菌26S rDNA D1/D2区域序列比对和分析鉴定,菌株FBI#-2006属于Hanseniaspora uvarum种.该菌株可以直接利用沙棘果为原料,发酵生产特色沙棘果酒.     

浓香型大曲中两株酵母菌的分离及其Biolog微生物鉴定

采取传统微生物手段从浓香型大曲中分离纯化得到两株酵母菌,对其进行菌落特征观察和镜检后,利用Biolog微生物自动鉴定系统进行鉴定.鉴定结果表明,两株菌分别是约氏掷孢酵母A(Sporidiobolus johnsonii A)和葡萄牙棒孢酵母(Clavisopora lusitaniae).     

两种分子标识在酵母分子鉴定中的比较

rDNA序列同源性分析是一种通用的酵母分子鉴定方法,26S rDNA D1/D2区域和rDNA内部转录间隔区(Internal Transcribed Spacer,ITS)是rDNA序列同源性分析中最为常用的两种分子标识。同时使用这两种分子标识对20株分离自水果表面的酵母菌株进行分子鉴定,结果显示19株酵母分离物的鉴定结果相一致,两种分子标识序列在认定酵母种内和种间关系时都拥有足够的差异,能将大部分酵母菌株直接鉴定到种一级水平。      

两种分子标识在酵母分子鉴定中的比较

rDNA序列同源性分析是一种通用的酵母分子鉴定方法,26S rDNA D1/D2区域和rDNA内部转录间隔区(Internal Transcribed Spacer,ITS)是rDNA序列同源性分析中最为常用的两种分子标识。同时使用这两种分子标识对20株分离自水果表面的酵母菌株进行分子鉴定,结果显示19株酵母分离物的鉴定结果相一致,两种分子标识序列在认定酵母种内和种间关系时都拥有足够的差异,能将大部分酵母菌株直接鉴定到种一级水平。     

浓香型白酒醅中高产酒精酵母菌的定向筛选及分子鉴定

为了获得适用于酿酒生产的高产酒精酵母菌株,从浓香型白酒醅样品中,经不同浓度乙醇和pH条件下的定向富集和耐受性筛选以及发酵实验,获得3株能在酒精度13%vol、pH3.50的条件下稳定生长且产酒能力较强的酵母菌)XP-3、XP-7和XP-8,其中XP-3的产酒力达87.04%,粮食出酒率可达44.71%,高于一般酿酒酵母.18S rDNA序列分析结果表明,3株酵母菌均与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)具有极高的相似性.     

A Continuous High Pressure Carbon Dioxide System for Microbial Reduction in Orange Juice

ABSTRACT: A continuous high-pressure carbon dioxide system, run at ambient conditions, was tested on its performance in reducing both natural and inoculated microbial loads. The prototype system continuously processes orange juice with carbon dioxide (CO₂) at high pressures. A central composite design was originally used to examine the variables of pressure, residence time, and CO₂/juice ratio. For microbial reduction, residence time was the major factor followed by pressure. The CO₂/juice ratio showed no influence on microbial load, and in this equipment, was difficult to control. The unit was able to cause a 5-log reduction of the natural flora in spoiled juice, and could attain a 5-log decrease in numbers of pathogenic Escherichia coli O157:H7, Salmonella typhimurium , and Listeriamonocytogenes . No viable cells of E . coli O157:H7 orS. typhimurium were cultured after the treated juices were stored at room temperature (22 °C) for 14 d. Thus, non-thermal pathogen reduction is possible with this system.     

DNA分子标记技术在酵母菌鉴定中的研究进展

介绍了RFLP、RAPD、AFLP以及微卫星DNA(Micro-satellite)4种DNA分子标记技术的方法和原理,及近年来在应用国内外酵母菌鉴定中的研究进展,指出了各种技术的优缺点.     

Flavor Losses in Orange Juice during Ultrafiltration and Subsequent Evaporation

Losses of volatile compounds in orange juice during ultrafiltration and subsequent evaporation were studied. Alcohols and esters predominated in the permeate, while terpenes (d-limonene and valencene) and nonpolar aldehydes (octanal and decanal) were distributed in the retentate from the ultrafiltration (UF) system. Fractions of some flavor compounds were lost during ultrafiltration process. An aqueous phase essence was recovered from the permeate during evaporative concentration. No oil phase was observed. When whole juice was concentrated, both oil and aqueous phases were recovered. Essence recovery efficiency of individual compounds was 3 to 13% when concentrating permeate and <5% when concentrating whole juice.     

中国甜橙果汁色泽的定量评价

色泽是甜橙及其橙汁的一项重要的感官指标,直接影响到消费者的选择。本研究采用国际公认的色差法定量测定我国主要甜橙产区目前栽培的具有代表性的94 个甜橙样品果汁的色泽参数,建立了我国橙汁色泽特征数据库。统计结果表明：我国的甜橙果汁的色泽普遍高于36,优于美国和巴西的同类品种;不同品种、不同产区甜橙果汁色泽差异显著,但不同年度采收的甜橙果汁色泽差异不显著(P ＞ 0.05)。     

柑桔汁超滤传质过程机理的研究

以"凝胶层阻力"及"渗透压阻力"理论为基础,根据柑桔汁在超滤过程中的通量变化规律,求出柑桔汁超滤过程的传质方程式,同时研究了操作压力对膜通量的影响,分析了造成传质阻力的主要因素,探讨了柑桔汁超滤过程的传质机理.     

自然发酵哈密瓜果汁中酵母分离与鉴定

从自然发酵的哈密瓜汁中分离得到25株形态较好的酵母菌株,经过初筛、复筛,得到1株产酒精能力好,产气较快,最适温度28℃,能耐受150mg／L的SO2,耐浓度为15％的酒精的酵母菌株HM02。经鉴定该酵母为酵母属的酿酒酵母（Saccharomyces cerevisive）。     

橙汁感官品质指标重要性调查分析

目的：了解消费者对橙汁感官指标的要求。方法：以18～36岁、具有食品专业的人群为评价人员,采用调查问卷的方式,分别按照成对偏爱比较检验法与排序法对市售橙汁饮料以及100％浓缩还原橙汁的偏爱性与橙汁感官指标的重要性排序进行分析。结果：与未调配的100％浓缩还原橙汁相比,调查人群更倾向于偏爱市售的橙汁饮料,并认为橙汁的感官品质指标中,外形的重要性低于滋味、香气和色泽。     

橙汁非酶褐变机制及控制措施

阐述了橙汁非酶褐变的机制——美拉德反应,焦糖化反应,抗坏血酸的氧化分解和多酚类化合物氧化缩合反应。通过对杀菌方式,贮藏方式,褐变剂抑制剂的添加及加工中吸附树脂使用的分析,重点综述了在橙汁加工储藏过程中控制非酶褐变的措施。