乳清蛋白抗氧化肽的制备及体外抗氧化活性研究

采用酶解法制备乳清蛋白抗氧化肽并研究其体外抗氧化活性。结果表明:以羟自由基清除率和多肽含量为指标,筛选出中性蛋白酶为最优酶;在单因素试验的基础上,通过响应面试验确定最佳酶解条件为pH 5. 50、酶解温度65℃、酶解时间1. 65 h、底物质量分数5%、加酶量5 000 U/g,此条件下乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基清除率为74. 54%;乳清蛋白抗氧化肽对羟自由基、ABTS+自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基都具有较好的清除能力,IC50值分别为2. 174、0. 709、2. 813mg/m L和4. 579 mg/m L。表明乳清蛋白抗氧化肽具有较强的体外抗氧化活性,具有一定的开发利用价值。     

乳清蛋白肽的制备及羟自由基的清除作用

以全乳清为原料，利用碱性蛋白酶对乳清蛋白进行降解。结果表明，水解后的蛋白多肽对Fenton体系产生的羟自由基有清除能力。并通过正交试验，得出最优水解条件，即碱性蛋白酶[E／S]=1％，温度为60℃，pH=8．0，时间为1h，水解度12．46％的条件下，乳清蛋白肽的羟自由基清除能力最强．达到93．50％。     

复合酶酶解乳清制备抗氧化肽的工艺优化及应用

以鲜牛乳为原料,预热杀菌,采用复合酶(中性蛋白酶和木瓜蛋白酶)一步酶解乳清蛋白制备抗氧化肽,为乳清的转化利用及提高其附加值提供一条可行的途径。以羟自由基清除率为指标,在单因素试验的基础上采用响应面法分析最佳酶解工艺参数。结果表明,最佳酶解条件为温度55.22℃,pH值为6.46,酶量比(中性蛋白酶∶木瓜蛋白酶)31∶10。在此条件下乳清抗氧化肽的实际羟基自由基清除率为67.70%,与预测值68.08%偏差较小,说明该模型可靠。将制得乳清在羟自由基清除率最高的条件下水解得乳清酶解液与枸杞子、桑葚、蜂蜜、柠檬酸等一起调配得到桑葚枸杞乳清多肽复合饮料。     

酶解法制备豌豆抗氧化肽及其稳定性的研究

以DPPH自由基清除率为指标,研究了豌豆蛋白经过碱性蛋白酶酶解后的豌豆多肽的抗氧化活性,并研究了温度、p H及胃肠模拟消化条件下对豌豆抗氧化肽活性的影响。试验结果表明,在p H为7,温度为37℃条件下,豌豆抗氧化肽的DPPH自由基清除率保持稳定。高温、过酸或过碱条件均可大幅度降低豌豆抗氧化肽的DPPH自由基清除率。胃蛋白酶处理对豌豆抗氧化肽的活性无显著影响,胃蛋白酶和胰蛋白酶共同处理后,豌豆抗氧化肽的活性显著提高(P0.05)。豌豆蛋白是潜在的制备抗氧化肽的优质资源。     

植物乳杆菌和蛋白酶协同发酵水解大米蛋白ACE抑制肽高活性组分的氨基酸序列分析

利用低大米蛋白制备过程发酵水解液中富含大米蛋白和肽。以乳杆菌L2-18+风味蛋白酶/菠萝蛋白酶+胃蛋白酶/酸性蛋白酶分步获得的大米蛋白水解液为研究对象,通过超滤获得小于3 kDa蛋白肽。经阳离子交换、凝胶柱层析和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)三步分离纯化,确定出高活性ACE抑制肽组分,IC_(50)值为33.81μg/mL。经液质联用(liquid chromatograph-mass spectrometer,LC-MS)鉴定分析,其多肽序列为VVFFAAAL。     

酶解与体外模拟胃肠消化对脱脂羊奶粉ACE抑制活性的影响

本研究旨在探究商业蛋白酶酶解与体外模拟胃肠消化对高消化率的脱脂羊奶粉释放ACE抑制肽的影响,以评价脱脂羊奶粉酶解必要性及所需酶解程度。采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、复合蛋白酶和风味蛋白酶对脱脂后的圭山羊奶粉进行酶解反应,并对脱脂羊奶粉及其酶解物进行体外模拟胃肠消化,测定酶解液及模拟胃肠消化液的多肽含量、ACE抑制活性以及分子量分布。研究发现,羊奶粉经过体外模拟胃肠消化后,消化液的多肽含量与ACE抑制率分别达到20.81 mg/mL和62.55%;而经过碱性蛋白酶和风味蛋白酶的适度酶解,其模拟胃肠消化液多肽含量与ACE抑制活性反而下降;经过复合蛋白酶的适度酶解,其模拟胃肠消化液的多肽含量与ACE抑制活性小幅度提高,分别达到22.67 mg/mL和69.29%;经过中性蛋白酶的适度酶解,其模拟胃肠消化液多肽含量与ACE抑制活性均显著提高,分别达到23.76 mg/mL和81.10%。分子量分布结果显示,经过体外模拟胃肠消化后,<1000 Da的小分子肽由酶解液中的70.77%提高到90%。综上,圭山羊奶粉经过体内胃肠消化就可以释放出较多的ACE抑制肽,而经过中性蛋白酶酶解至水解度8%后...     

小米多肽酶解工艺及其抗氧化和ACE抑制活性

以小米蛋白为原料，制备具有抗氧化活性和血管紧张素转移酶(ACE)抑制活性的食源性多肽。采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶酶解小米蛋白，选取最优酶解工艺。选用碱性蛋白酶酶解4 h，得到的蛋白水解液分别通过3 ku和10 ku的超滤膜，得到分子质量＜3，3~10 ku和＞10 ku的3种组分，测定其抗氧化活性和ACE抑制活性。结果表明:采用碱性蛋白酶酶解4 h得到的蛋白水解液经超滤后得到分子质量＜3 ku的多肽具有最高的抗氧化活性和ACE抑制活性，其DPPH清除能力为38.44%，ABTS自由基清除能力为81.62%，羟基自由基清除能力为68.49%，ACE抑制活性为87.53%。此方法得到的多肽分子质量小，功能氨基酸含量较高，具有良好的抗氧化活性和ACE抑制活性。本研究结果为抗氧化肽和ACE抑制肽的开发提供试验依据，对未来工业化的发展提供理论参考。     

不同蛋白酶对小麦蛋白酶解物抗氧化活性的影响

小麦蛋白是小麦淀粉加工的副产物,酶解是提高小麦蛋白溶解性和功能性的有效方式,而酶解用酶种类可能对酶解产物的功能性如抗氧化活性有一定影响。采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶6种常用的蛋白酶分别对小麦蛋白进行酶解,并对酶解4 h后酶解物的多肽得率、分子质量分布、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除率、羟自由基(·OH)清除率等反映水解程度和抗氧化能力的主要指标进行评价。结果表明,风味蛋白酶酶解物中多肽得率最高,达91.44%,且分子质量小于3 000 D的多肽含量达76.9%;酶解物质量浓度为3 mg/m L时,木瓜蛋白酶酶解物对DPPH自由基清除作用最好,清除率为65.12%(P0.01),其次是风味蛋白酶(58.43%)和碱性蛋白酶(55.29%);碱性蛋白酶酶解物对O_2~-·清除率效果最好,清除率为58.68%(P0.01),其次是风味蛋白酶(49.25%);碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解物对·OH清除效果最佳,清除率分别为59.23%和58.16%。结果说明,蛋白酶种类对小麦蛋白酶解物抗氧化活性影响显著,风味蛋白酶对提高蛋白水解程度和生成小分子质量多肽的作用明显,而碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶对提高酶解产物抗氧化活性效果较好。     

体外消化对玉米谷蛋白酶解物抗氧化活性的影响

以玉米蛋白粉为原料提取玉米谷蛋白,利用蛋白酶对其进行酶解,制备蛋白水解物,再用胃蛋白酶及胰蛋白酶对其进一步消化处理,以抗氧化活性为指标对消化过程中蛋白酶加量进行优化,制备富含谷氨酰胺的具有抗氧化功能的蛋白水解物。结果表明,玉米谷蛋白经复合蛋白酶水解后,蛋白收率(54.41±3.26)%,水解物的羟基自由基清除率、亚铁离子螯合能力及还原力分别达到(29.50±0.31)%、(73.33±0.62)%及0.50±0.01;二步消化后蛋白水解物羟基自由基清除率、亚铁离子螯合能力及还原力分别达到(55.88±0.94)%、(90.44±0.01)%及0.40±0.01。     

茶花花粉蛋白酶解物抗氧化性的研究

茶花花粉蛋白经过风味酶(外切酶)和中性蛋白酶(内切酶)组成的复合酶水解得到活性肽,并进一步研究活性肽的抗氧化特性。结果表明:茶花花粉多肽有很强的抗氧化性,总抗氧化能力、还原力、清除DPPH自由基的能力、抑制羟自由基的能力、清除超氧阴离子能力均随着水解度的增加而增强。