黄芪多糖衍生物的制备及乳化性能研究

本实验以黄芪为原料,提取、分离、纯化得到黄芪多糖后并对黄芪多糖进行硫酸化、乙酰化和羧甲基化,采取体外实验的方法,研究黄芪多糖及其衍生物的乳化性能并探究其对羟自由基的清除能力。实验结果表明,红外光谱分析结果显示黄芪多糖及其衍生物都具有多糖共同的光谱特性,硫酸化黄芪多糖、乙酰化黄芪多糖和羧甲基化黄芪多糖的取代度分别为0.779、0.305和0.246。结果表明,黄芪多糖、乙酰化黄芪多糖、硫酸化黄芪多糖和羧甲基化黄芪多糖对羟自由基的清除率分别为36.0%、63.50%、62.87%和56.43%,多糖衍生物的自由基清除作用均高于原多糖,说明硫酸化修饰、乙酰化修饰和羧甲基化修饰均可提高其抗氧化活性;乳化活性在同等浓度下,羟甲基化黄芪多糖的乳化活性>乙酰化黄芪多糖>硫酸化黄芪多糖>黄芪多糖;在浓度为2.0mg/ml的条件下,黄芪多糖、乙酰化黄芪多糖、羟甲基黄芪多糖有最大值,分别为70min、86.67min、65.48min;硫酸化黄芪多糖在1.5mg/ml的浓度时有最大值,为77.50min。     

油茶籽粕多糖不同分子修饰产物的抗氧化活性

为比较不同修饰方法对油茶籽粕多糖抗氧化活性的影响,通过硫酸酯化、羧甲基化及乙酰化3种方法对纯化的油茶籽粕多糖(COP)进行分子修饰,以制备具有不同取代度的COP。采用体外实验法,以羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(·O^-₂)及DPPH自由基(DPPH·)清除率为指标,探究COP及其分子修饰产物的抗氧化活性。结果表明：较低取代度的硫酸酯化修饰能提高COP对·OH、·O^-₂以及DPPH·的清除能力;高取代度的羧甲基化修饰能提高COP对·OH的清除能力,低取代度的羧甲基化修饰则能提高COP对DPPH·的清除能力;高取代度的乙酰化修饰COP对·OH和DPPH·的清除效果更好;羧甲基化修饰和乙酰化修饰COP均会削弱其对·O^-₂的清除能力。总之,适度的分子修饰能提高COP的抗氧化活性。     

铁皮石斛多糖化学修饰及其对免疫活性的影响

采用水提醇沉法结合冻融制备高纯度铁皮石斛多糖,并利用硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修饰方法对铁皮石斛多糖进行化学修饰,探讨不同方法修饰的铁皮石斛多糖对RAW264.7巨噬细胞免疫活性影响。结果表明,铁皮石斛纯多糖(purified polysaccharides of Dendrobium officinale,DOP)的中性糖含量较高,而糖醛酸及蛋白质含量则较低,分别为87.37%、3.19%和0.51%,羧甲基化及硫酸化显著降低了铁皮石斛多糖的中性糖含量。红外分析结果显示硫酸化、脱乙酰化及羧甲基化修饰衍生物均已成功制备。高性能凝胶渗透色谱法测定铁皮石斛多糖分子质量为960 k D,硫酸化及羧甲基化修饰显著增加了其分子质量。体外实验研究发现,硫酸化和脱乙酰化修饰的铁皮石斛多糖能够增强RAW264.7巨噬细胞的免疫活性,而羧甲基化修饰则表现为显著的抑制作用,表明不是所有的官能团接枝改性都可以改善铁皮石斛多糖对免疫活性的影响。     

羧甲基化茯苓多糖的抗氧化性分析

通过溶媒法对碱溶性茯苓多糖进行羧甲基化结构修饰,浓缩干燥后得到白色羧甲基化茯苓多糖固体,对改性后的茯苓多糖进行抗氧化性研究,探究羧甲基化茯苓多糖抗氧化活性与其浓度梯度变化的关系。结果表明:羧甲基化茯苓多糖样品溶液与同浓度的维生素C相比,样品的总抗氧化性及对DPPH自由基清除率明显高于维生素C,但对超氧离子自由基和羟基自由基的清除能力略低于维生素C。其中,样品浓度在1.0g/L时对DPPH自由基清除率最大,为91.74%,比维生素C高出31.34%。样品溶液对超氧阴离子自由基和羟基自由基清除率最大值分别为49.39%和72.62%,对超氧阴离子自由基清除效果明显低于相同浓度的维生素C,二者最大值相差25.97%。修饰后的茯苓多糖样品溶液相比修饰前对三个自由基的最大清除率分别提高了33.91%、52.86%和72.62%,总还原能力也有所提高,羧甲基化结构修饰使茯苓多糖的抗氧化活性明显增强。     

蛹虫草多糖的酶法修饰及其抗氧化活性

为了提高蛹虫草多糖的抗氧化活性,采用α-淀粉酶对蛹虫草多糖进行酶法修饰。以DPPH自由基清除率为响应值,运用响应面分析法对α-淀粉酶修饰蛹虫草多糖的工艺进行优化,研究酶修饰后蛹虫草多糖清除DPPH自由基、螯合Fe2+和还原力等抗氧化活性,并对其三螺旋体结构进行分析。结果表明:对修饰多糖抗氧化活性的影响因素从大到小依次为:加酶量、酶解温度、酶解pH值;α-淀粉酶修饰蛹虫草多糖的最优工艺条件为:酶解温度48.5℃、酶解pH 5.8、加酶量259.5U/g,在此条件下,酶修饰后蛹虫草多糖对DPPH自由基的清除率预测值为81.4%,验证值为(81.6±1.6)%,结果重现性好,可用于实际预测。抗氧化实验表明,α-淀粉酶法修饰后,蛹虫草多糖清除DPPH自由基和螯合Fe2+的EC50值分别为:0.0247、1.0120mg/mL,分别比酶法修饰前提高了55.1%和39.8%;同时,蛹虫草多糖的还原力也得到了显著提高(P<0.05)。三螺旋体结构分析表明,蛹虫草多糖经α-淀粉酶修饰后,其三螺旋体结构有轻微破坏,但仍然保持三螺旋体结构。     

红枣多糖羧甲基化修饰及其抗氧化活性研究

本研究对红枣多糖进行羧甲基化修饰,探究羧甲基化修饰红枣多糖的结构特征及抗氧化活性变化。以红枣粗多糖为原料,采用Sevage法脱蛋白,大孔树脂AB-8脱色处理,对除杂后的多糖进行羧甲基化修饰。以羧甲基取代度为指标,通过单因素和响应面试验对NaOH浓度、一氯乙酸添加量及温度进行优化,以修饰前后多糖对DPPH、羟基自由基的清除能力及其还原力和对Fe2+的螯合能力为指标,探究羧甲基化修饰对红枣多糖抗氧化特性的影响。结果显示,羧甲基化修饰最佳工艺参数为:反应温度70 ℃,一氯乙酸添加量3.5%,NaOH浓度3 mol/L,此条件下羧甲基化红枣多糖分子修饰取代度高达1.157。浓度5 mg/mL时,羧甲基化修饰的红枣多糖DPPH和羟基自由基清除率达93.83%和44.7%,还原力和对Fe2+的螯合能力分别为0.462和44.05%。红枣多糖抗氧化性的显著提升表明羧甲基化修饰可改善多糖的抗氧化性,可为红枣多糖的深入研究提供一定的理论依据。     

酸枣多糖羧甲基化修饰及活性研究

为研究酸枣羧甲基化多糖的工艺和活性,采用单因素实验及响应面法优化其羧甲基化修饰工艺,并对其结构及其体外生物活性进行研究。得到最佳条件为:反应温度80 ℃,氢氧化钠浓度2.5 mol/L,氯乙酸添加量3%。酸枣多糖羧甲基化修饰前、后的溶解性分别为(48.63±1.23) mg/mL和(86.73±0.72) mg/mL,黏度分别为(2 698±99.8) mPa·s和(2 430.4±95.65)mPa·s。多糖经羧甲基化修饰后,可解决其因黏度高和溶解性低导致的不利于活性发挥的问题。酸枣羧甲基化多糖抗氧化活性研究表明,5 mg/mL酸枣羧甲基化多糖溶液总还原力为1.295,对DPPH自由基的清除率为81.9%,对羟基自由基的清除率为95.8%,羧甲基化修饰后对羟基自由基的清除能力有所提高。酸枣羧甲基化多糖对益生菌的促生长结果表明:酸枣羧甲基化多糖对嗜酸乳杆菌和鼠李糖乳杆菌有更好的促生长效果,且促生长作用与酸枣羧甲基化多糖的添加浓度有关。     

化学改性对山药多糖抗肿瘤活性的影响

利用多糖化学改性方法和动物移植性实体瘤实验,研究了5种化学改性方法(羧甲基化、乙酰化、甲基化、硫酸化以及部分降解)对山药多糖RDPS-1抗肿瘤活性的影响,结果发现化学改性对多糖的生物活性有显著的影响。低度羧甲基化、低度甲基化和中度乙酰化能显著地提高多糖的抗肿瘤活性,而部分降解和硫酸化使多糖的抗肿瘤活性显著降低。     

羧甲基化南瓜多糖的制备及抗氧化、降血糖活性研究

目的：提高南瓜多糖体外抗氧化活性和降血糖活性。方法：以南瓜为研究对象,考察一氯乙酸浓度、反应温度和反应时间对羧甲基化南瓜多糖取代度的影响,并进行抗氧化活性和降血糖试验。结果：羧甲基化南瓜多糖的最佳制备条件为一氯乙酸浓度1.9 mol/L、反应温度73 ℃、反应时间3 h,该条件下的羧甲基化多糖取代度为1.247。在一定质量浓度范围内,南瓜多糖(PP)、羧甲基化南瓜多糖(CM-PP)的抗氧化能力与质量浓度呈剂量依赖性,与修饰前南瓜多糖相比,多糖的羧甲基化修饰可以提高其对 α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结论：羧甲基化南瓜多糖的优化工艺合理可行,且具有较强的抗氧化活性和降血糖活性。     

麦冬多糖的修饰及其抗氧化活性与空间结构的研究

研究热水浸提和超声波辅助法提取的两种麦冬多糖以及它们修饰之后的抗氧化活性及三股螺旋结构。采用硫酸化、磷酸化、羧甲基化对多糖进行修饰,并用红外光谱表征,进行抗氧化性的测定,利用刚果红实验进行三股螺旋结构的检测。结果表明:各种多糖都有一定的体外抗氧化活性,其中超声提取的效果较优于热水浸提的。这几种多糖对DPPH和超养阴离子自由基的清除能力较强,但对羟基自由基的清除能力较弱,且经过修饰之后的多糖有一定程度的三股螺旋结构,而未经修饰的没有三股螺旋结构。     

虫草与富硒虫草多糖的体外抗氧化活性

采用Fenton法和邻苯三酚自氧化法测定虫草和富硒虫草多糖对.OH、O2-.和H2O2的清除率。结果表明:虫草多糖对O-2.和H2O2的清除能力依次为富硒虫草胞外多糖>富硒虫草胞内多糖>虫草胞外多糖>虫草胞内多糖,而对.OH的清除能力依次为:富硒虫草胞外多糖>虫草胞外多糖>富硒虫草胞内多糖>虫草胞内多糖;当100mg/L多糖溶液添加量分别高于80、40、90μL时,各组多糖对.OH、O2-.和H2O2 3种自由基的抑制率均可高于50%。     

酶解-超声协同提取茄蒂多糖及抗氧化研究

以茄蒂为原料,研究了酶解超声协同提取茄蒂多糖条件及抗氧化能力。在pH5、50℃水浴温度下用1%纤维素酶酶解30min,采用响应面法优化超声提取茄蒂多糖条件。通过测定对羟自由基、超氧自由基清除能力和总还原力,评价茄蒂多糖抗氧化活性。结果表明,茄蒂多糖最佳提取条件为:料液比1∶36(g/mL),超声时间22min,超声温度68℃。在此条件下多糖得率为5.49%。茄蒂多糖对羟自由基、超氧自由基清除能力和还原力均表现较好的效果,其清除羟自由基、超氧自由基的IC50值分别为0.12、0.22mg/mL。茄蒂多糖抗氧化性略低于VC。      

石斛多糖体外抗氧化活性的研究

本实验利用对邻苯三酚自氧化体系产生的超氧阴离子自由基(O2·)的清除作用、Fenton反应检测对羟基自由基(·OH)的清除作用以及对烷基自由基引发的亚油酸氧化体系的抑制作用,对霍山石斛和铁皮石斛多糖抗氧化活性能进行了研究。结果表明,两种多糖对超氧阴离子自由基和羟基自由基具有不同程度的清除作用,同时对烷基自由基引发的亚油酸氧化体系也有显著的抑制作用。研究还发现霍山石斛多糖的抗氧化能力显著强于铁皮石斛多糖。     

北虫草多糖提取工艺优化及其细胞氧化损伤保护作用

目的:优化北虫草多糖的提取工艺,研究北虫草多糖对血管平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用L₉(3⁴)正交实验法优化多糖提取工艺,利用羟自由基法、DPPH自由基法和FRAP法检测北虫草多糖清除自由基的能力。在细胞水平上构建过氧化氢诱导细胞氧化损伤模型,采用MTT法、ROS细胞染色法评估北虫草多糖对过氧化氢诱导大鼠主动脉平滑肌细胞氧化损伤的保护作用。结果:北虫草多糖的最佳提取条件为:提取温度90 ℃,料液比1:30 g/mL,提取次数3次,提取时间3.0 h,最高得率为7.94%±0.16%。在多糖浓度为1.6 mg/mL时对羟自由基和DPPH自由基的清除能力以及总抗氧化能力分别为75.57%±1.39%、80.23%±2.75%和(0.22±0.01) mmol/mg。细胞实验表明北虫草多糖可显著抑制过氧化氢诱导细胞内ROS生成,提高细胞存活率。结论:成功优化北虫草多糖提取工艺,北虫草多糖具备良好的体外清除自由基的活性,对由氧化应激所导致的心血管疾病中起到很好的防治意义。     

海芦笋提取物体外抗氧化活性的研究

通过测定海芦笋水提物、醇提物、海芦笋粗多糖和精多糖还原能力及对羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2·)的清除能力,研究海芦笋提取物的抗氧化活性。结果表明：海芦笋水提物、醇提物和多糖对·OH 都有较强清除作用,但清除能力均低于对照物VC;在相同浓度下,各提取物的还原能力和对·OH 的清除能力呈相同趋势,均是海芦笋水提物较醇提物强,粗多糖较精多糖强。但海芦笋水提物和多糖在实验所选浓度范围内,对邻苯三酚自氧化没有抑制作用,而醇提物显示出一定抑制活性。     

槐角多糖抗氧化活性研究

槐角通过超声-复合酶解法水解醇沉得到粗糖,经Sevage试剂纯化得到槐角多糖(sophorae fructus polysaccharides,SFP),再通过DEAE-52纤维素柱分离纯化得次级多糖SFP-1、SFP-2。以槐角多糖SFP、SFP-1及SFP-2为试验材料,采用自由基评定法,对ABTS+自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基进行抗氧化研究,并探究它们对DNA损伤的抑制作用。结果表明,槐角多糖及分离纯化组分(SFP、SFP-1、SFP-2)对4种自由基的抗氧化活性均呈量效关系。在浓度6.4 mg/mL时,对ABTS+自由基清除率均高于99.73%,对DPPH自由基清除率可达到87.05%,对超氧阴离子自由基清除率可达到50.92%,对羟基自由基清除率最高为96.54%,并有抑制DNA开链、解环作用。槐角多糖有较好的抗氧化作用,具有一定的开发价值。     

中国蛤蜊多糖的抗氧化性及抑菌性

以中国蛤蜊全脏器为材料,碱提醇沉法进行多糖的提取,采用Sevag 法去除多糖中的蛋白,分别测定提取物中多糖的含量、清除羟自由基( ·OH)能力、清除超氧阴离子自由基(O2－ ·)能力及抑菌活性。结果表明：碱提法所提多糖含量较高,提取率为15.45%(以中国蛤蜊干粉计)。中国蛤蜊多糖具有较强的抗氧化能力,多糖质量浓度为0.8mg/mL时对O2－ ·的清除率达86.49%;对 ·OH清除率达49.31%。中国蛤蜊多糖对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌均有抑制作用,其最小抑菌质量浓度分别为12.5、25、25mg/mL,对金黄色葡萄球菌抑制作用最明显、枯草芽孢杆菌次之、大肠杆菌最不明显,。由此可知,中国蛤蜊多糖对 ·OH 和 O2－ ·具有一定的体外抗氧化性能,在一定实验质量浓度范围内,随着多糖质量浓度的增大,其抗氧化活性逐渐增强。多糖对革兰氏阳性菌的抑制效应强于革兰氏阴性菌。     

Electron spin resonance spectroscopy studies on the free radical scavenging activity of wine anthocyanins and pyranoanthocyanins

Anthocyanins are a group of natural occurring pigments responsible for the red-blue color of grapes and many fruits and vegetables. Anthocyanins and derived pigments are of double interest, one technological, as they can be used as natural colorants, and another one due to their implication on human health through their antioxidant activity. Although there are numerous studies regarding the antioxidant activity of grape extracts as well as red wine, the free radical scavenging activity of purified anthocyanins and pyranoanthocyanins is largely unknown. In the present study, the hydroxyl and superoxide anion scavenging activities of anthocyanins and their pyruvic acid adducts were systematically investigated by electron spin resonance spectroscopy and spin trapping. The 3-glucosides of delphinidin, cyanidin, petunidin, pelargonidin and malvidin, and the pyruvic adduct of the 3-glucoside of delphinidin exhibited a potent superoxide anion radical scavenging and, to a lesser extent hydroxyl anion radical scavenging activity. The pyranoanthocyanins of cyanidin, petunidin, malvidin and pelargonidin showed a high capacity to scavenge superoxide anion radicals but did not scavenge hydroxyl radicals. Current data indicate that formation of anthocyanin adducts with pyruvic acid, which may occur during wine ageing or fruit juice processing, decreases the hydroxyl and superoxide anion scavenging and thus could decrease the antioxidant potential of these compounds.     

两种羊肚菌胞内多糖体外抗氧化性

用水提醇沉法提取北京羊肚菌(MB)和淮阴羊肚菌(MH)菌丝体胞内多糖(IPS1),经脱色及脱蛋白得纯化多糖(IPS2)。采用水杨酸法测定IPS1 和IPS2 对·OH 的清除作用;邻苯三酚自氧化法测定IPS1 和IPS2 对O2·的抑制作用。结果表明： IPS1 和IPS2 均能明显地清除·OH 和抑制O2·的能力,在1～5mg/mL 质量浓度范围,抗氧化活性随质量浓度的增加而增加。MB 和MH 提取的IPS1 和IPS2 清除O2·能力差异不显著,MB 和MH 提取的IPS1清除·OH 能力的差异也不显著,MH 提取的IPS1 和IPS2 之间清除·OH 能力差异显著,质量浓度为5mg/mL 时,IPS1 清除能力只有22.57%,而IPS2 清除能力高达46.27%,表明MH 的胞内多糖的清除·OH 能力明显高于MB 胞内多糖。