鲣鱼蛋白肽谱效关系研究

采用鲣鱼为原料,以蛋白质回收率为指标,酶解制备不同工艺条件的样品。通过测定其黄嘌呤氧化酶(XOD)抑制活性、ORAC值、分子质量分布图谱和总氨基酸含量,构建鲣鱼蛋白肽体外化学活性与其分子质量分布图谱、总氨基酸含量图谱之间的谱效关系。结合超高效液相-质谱联用(LC-MS/MS)方法研究其降尿酸肽和抗氧化肽的分布。研究表明,鲣鱼蛋白肽的XOD抑制活性与其ORAC值具有显著的相关性。由多肽分子质量<1ku所占含量的分布区段和脂肪族氨基酸的含量可初步预测鲣鱼蛋白肽的化学活性。质谱分析表明,纯化组分的质谱基峰图在不同时间段的信号强度与鲣鱼蛋白肽的降尿酸活性和抗氧化活性具有明显的相关性。     

扁舵鲣鱼低聚肽降尿酸功效评价

该研究以高尿酸血症大鼠模型为对象,来评价扁舵鲣鱼低聚肽(Auxis thazard oligopeptide,ATO)降尿酸功效.结果表明,通过对比模型组、ATO 1.6 g/kg、2.4 g/kg剂量组,发现脏器系数并不存在显著差异.血清黄嘌呤氧化酶(xan-thine oxidase,XOD)的变化趋势为先降后升再...     

载鲣鱼鱼籽肽微球模拟消化过程中黄嘌呤氧化酶抑制活性变化

在体外模拟鲣鱼鱼籽肽不同消化阶段对黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase,XOD）的抑制活性,分析不同消化阶段鱼籽肽的分子量分布、氨基酸组成;并利用海藻酸钙对鱼籽肽进行包埋,分析鱼籽肽微球在模拟胃/肠液中的累计释放率及XOD 抑制活性变化。结果表明,经胃消化后鱼籽肽XOD 抑制活性最高,为（76.09±0.12）%;肠消化后,鱼籽肽XOD 抑制活性下降到（53.02±0.48）%;分子量小于3 000 Da 的多肽以及疏水性氨基酸在鱼籽肽XOD 抑制活性中起重要作用;载鱼籽肽海藻酸钙微球在肠液中的累计释放率为（88.79±0.65）%,肠液中XOD 抑制活性为（81.82±0.28）%,利用海藻酸钙包埋鱼籽肽明显提高了其对XOD 的抑制活性。     

超声辅助酶解制备大米蛋白黄嘌呤氧化酶活性抑制肽的工艺条件优化

摘 要: 本文以大米蛋白为原料,研究了碱性蛋白酶酶解法制备黄嘌呤氧化酶（Xanthine Oxidase,XOD）活性抑制肽,并对其体外功能活性进行评价。研究了蛋白酶种类、底物浓度、酶解温度、加酶量、酶解pH、酶解时间对大米蛋白水解度（degree of hydrolysis,DH）及酶解产物对黄嘌呤氧化酶活性抑制率的影响,探讨了不同超声处理方式对酶解过程的影响,通过响应面法对实验条件进行了优化结果如下：采用碱性蛋白酶,底物浓度5 %,酶解温度为56 ℃,加酶量为8000 U/g,酶解pH为10,超声功率70 W,超声酶解60 min,对所制备的大米蛋白黄嘌呤氧化酶活性抑制肽的功能活性进行了评价。在最优条件下其黄嘌呤氧化酶抑制活性的IC50为1.55 mg/mL, ABTS自由基清除作用、羟基自由基清除作用、DPPH自由基清除作用的IC50值分别为0.49、12.48、3.88 mg/mL。     

青占鱼黄嘌呤氧化酶抑制肽制备工艺优化

目的 本研究以青占鱼为原料,对黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)抑制肽的制备条件进行优化。方法 选用五种蛋白酶对其水解制备黄嘌呤氧化酶抑制肽,测定XOD抑制率和水解度并用以评价效果,通过单因素和响应面分析相结合的实验方法优化酶解条件,最后对其分子量分布情况进行了检测分析。结果 结果表明复配酶制剂为最适酶,最佳酶解工艺为：加酶量4000U/g,酶解时间4h,酶解温度55℃,pH 7.0,料液比1:2;同时测得最优工艺下XOD抑制率和水解度的实际值分别为65.21%和18.5%,与理论值基本无差别。采用该法制备的青占鱼XOD抑制肽分子量分布情况为：5500~3000Da的肽段占比56.44%,3000~1500Da的肽段占比31.07%,＜1500Da的肽段占比12.49%。结论 本研究可为青占鱼制备XOD抑制肽的生产工艺与机理研究提供一定的技术参考与理论支持。     

珍珠贝肉抗氧化肽制备工艺优化及其对酪氨酸酶的抑制活性

以马氏珠母贝肉为研究对象,采用ABTS自由基清除率为评价指标,通过单因素试验和响应面法优化制备抗氧化肽酶解物的工艺,并对酶解物冻干粉的抗氧化能力和酪氨酸抑制能力进行研究.结果表明,珍珠贝抗氧化肽的最优酶解工艺为温度50℃,pH 7.25,时间3 h,料液比1:1,酶底比0.4％,所得酶解液的ABTS自由基清除率为98....     

筛选降尿酸肽的体外测定方法的建立与优化

由于紫外分光光度法、NBT/PMS显色法、荧光分析法,MTS/PMS还原法等黄嘌呤氧化酶(XO)抑制活性检测方法对多肽检测的局限性,本文建立了适用于筛选降尿酸多肽类物质的体外测定方法,采用双酶偶联法联合高效液相色谱法(HPLC法)测定多肽类物质的体外黄嘌呤氧化酶抑制活性。以双酶偶联法优化样品测定的反应体系,得到最适反应条件:黄嘌呤浓度0.22 mmol/L,酶浓度0.52 u/m L,缓冲液pH 8.0,反应温度30℃,反应时间20 min;优化尿酸分离的液相条件,确定最适检测条件:95%15 mmol/L NH4H2PO4+5%甲醇,pH 6.5,流速1 m L/min,柱温25℃,检测波长290 nm。实验表明,最适条件下双酶偶联法和HPLC法检测精密度良好,准确度达95%以上。双酶偶联法联合HPLC法可高效、准确进行多肽降尿酸活性检测。双酶偶联法联合HPLC法证明还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)具有黄嘌呤氧化酶抑制活性,可作为降尿酸肽。     

牡蛎功能短肽的制备及ACE抑制活性

以新鲜无壳牡蛎为原料,采用酶水解的方法制备牡蛎短肽,经SephadexG 15分离,并用HPLC测定其相对分子质量分布,通过HPLC法定量马尿酸测定各组分的ACE(血管紧张素转化酶)抑制活性。结果表明,牡蛎水解液中相对分子质量较大和较小部分的ACE抑制活性偏低,只有相对分子质量在一定范围内的短肽,对ACE具有较好的抑制作用,质量浓度为0.4mg/mL的牡蛎功能短肽的ACE抑制率为51.4%.     

酶解乳清蛋白制备降胆固醇活性肽的工艺研究

利用生物酶技术酶解乳清蛋白,制备具有降胆固醇活性的多肽,通过响应面试验、二次旋转回归设计建立回归模型,以胆固醇胶束溶解度抑制率为评价指标,对乳清蛋白的酶解条件进行了优化。结果表明,乳清蛋白的最佳酶解条件为：酶解时间8.5 h、酶解温度55 ℃、酶解pH 8.0、加酶量4.7%、乳清蛋白含量5.8%,在此条件下,酶解乳清蛋白得到的活性肽的胆固醇胶束溶解度抑制率为18.21%。     

英红九号茶蛋白降尿酸肽的酶解制备及不同分子量组分的活性对比

以英红九号红茶渣为原料,通过碱提酸沉提取茶叶蛋白,以黄嘌呤氧化酶抑制率为指标,采用单因素和响应面实验优化酶解制备降尿酸肽,对其氨基酸组成进行分析,并对最优酶解物进行超滤分离和活性评价。结果表明,在底物浓度2%（m/V）、加酶量0.3%（m/V）、温度39 ℃、pH值7.5和酶解时间3.4 h条件下,得到的降尿酸肽的黄嘌呤氧化酶抑制率为85.42%。氨基酸分析表明,降尿酸肽中必需氨基酸含量丰富（38.49%）,高比例的疏水性氨基酸（48.00%）和碱性氨基酸（13.67%）对黄嘌呤氧化酶抑制活性有重要作用。酶解物经过超滤分离后,与原酶解物的活性（IC50 0.72 mg/mL）比较,<3 ku组分的黄嘌呤氧化酶抑制活性显著提升（IC50 0.41 mg/mL）。该研究可为茶叶蛋白的高值化利用提供参考,为茶叶源新型降尿酸健康食品的开发提供了理论依据。     

Optimization of conditions for myofibril preparation from mechanically recovered chicken meat

The influence of various conditions affecting the isolation of a myofibrillar preparation (MP) from chicken mechanically recovered meat (MRM), i.e. the time of additional chopping in a bowel chopper, washing time, the number of washings, and the water to MRM ratio, on the recovery of dry matter and myofibrillar protein, and fat content in the preparation was investigated. The following particular steps were determined to be the most desirable parameters: chopping MRM for 10 minutes, washing time of 15 minutes, 3 (or 2) consecutive washings, 3:1 water to MRM ratio (v/w). Under these conditions a significant decrease of fat content (93% on average) was found in comparison to the content in MRM. The removal of fat, sarcoplasmic protein and connective tissue increased the concentration of myofibrillar protein. The number of aqueous washings of MRM had the biggest influence on the protein and fat content in the concentrate. Electrophoretic analysis (SDS-PAGE) of protein in the preparation obtained under optimal conditions showed that myosin heavy chains (MHC) and actin constituted approximately 50% of all the proteins in the preparation.     

鲢鱼蛋白制备ACE抑制肽的工艺优化

研究制备鲢鱼蛋白ACE抑制肽工艺条件,利用高效液相色谱法测定不同蛋白酶水解鲢鱼蛋白的ACE抑制率,筛选出风味蛋白酶为最佳酶源。在单因素试验的基础上,采用Box-Beknken中心组合设计建立响应面数学模型。得出鲢鱼蛋白制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为初始pH 7.54,酶解温度50.56℃,时间4.5h,加水量46.67mL/10g.鱼肉。经优化后,鲢鱼蛋白ACE抑制肽的抑制率实际值可达81.35%。     

鱼皮胶原蛋白中透明质酸酶抑制肽的制备工艺优化

目的：高效提取胶原蛋白中的透明质酸酶抑制肽。方法：以剑鱼（Xiphias gladius）鱼皮为原料,使用胃蛋白酶提取酶溶性胶原蛋白并使用盐析法进行纯化,经聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定胶原蛋白种类;通过单因素和响应面法优化透明质酸酶抑制肽的提取工艺。结果：使用胃蛋白酶提取的胶原蛋白为I型胶原,透明质酸酶抑制性胶原蛋白肽的优化提取条件为复合酶比（m_{胶原蛋白酶}∶m_蛋白酶）8∶2,酶解温度32 ℃,酶解时间6 h,加酶量6%。在此条件下胶原蛋白肽的透明质酸酶抑制率为42.35%,响应面模型拟合性好,透明质酸酶抑制率的预测值与实际值无显著差异（P>0.05）。结论：该工艺可应用于对剑鱼鱼皮中具有透明质酸酶抑制性的胶原蛋白肽的提取。     

超声辅助核桃饼脱脂和多肽制备工艺的优化

采用超声辅助核桃饼脱脂,并以脱脂核桃粉为原料制备核桃蛋白,采用碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备多肽。通过单因素实验和正交实验对超声辅助核桃饼脱脂和核桃多肽制备工艺条件进行优化,并对最优条件下制备的核桃多肽的特性进行分析。结果表明:超声辅助核桃饼脱脂最优条件为料液比1∶20、超声功率500 W、超声时间140 min,在最优条件下脱脂率为91.23%,蛋白损失率为11.32%;酶解制备核桃多肽的最优工艺条件为酶解温度50℃、酶解pH 9、加酶量3.0%、酶解时间5.0 h,在最优条件下水解度达到22.63%,多肽得率为88.24%。核桃多肽粗蛋白质含量约为95%,相对分子质量小于1 000 Da的多肽占比达91.61%。     

响应面优化鱼鳔胶原肽制备工艺及其抗氧化活性研究

鱼鳔富含胶原蛋白,营养价值高,但目前对鱼鳔的加工利用不足,造成资源浪费、环境污染。以草鱼鱼鳔为原料,以DPPH自由基清除能力为评价指标,通过单因素和响应面实验优化酶解鱼鳔胶原蛋白制备抗氧化活性肽的最佳工艺,并研究其体外抗氧化活性。结果表明:抗氧化活性肽的最佳制备工艺为,以风味蛋白酶为酶制剂,酶解时间79.34 min,料液比为3.09∶100(g∶m L),酶添加量为6 343.43 U/g,在此条件下制备的鱼鳔胶原肽的DPPH自由基清除能力达79.98%。鱼鳔胶原肽清除DPPH自由基、羟自由基的IC50分别为8.05 mg/m L和3.54 mg/m L,并且具有较强的还原力。因此,鱼鳔胶原肽具有较强的抗氧化活性,草鱼鱼鳔是制备抗氧化活性肽的良好原料。     

谷朊粉钙离子螯合肽制备工艺优化及其结构表征

目的 优化谷朊粉钙离子螯合肽制备工艺并对其结构进行表征。方法 以水解度为指标,探究温度、时间、pH及加酶量等因素对谷朊粉酶解的影响;以钙离子螯合肽生成量为指标,探究不同因素对钙离子螯合肽生产量的影响;并根据结果进行Box-Behnken响应面实验优化螯合工艺。通过扫描电镜分析和红外分析对谷朊粉钙离子螯合肽进行表征。结果 最佳酶解工艺为:液料比17.5:1(mL/g)、碱性蛋白酶和风味蛋白酶添加比例为3:1、加酶量5000 U/g、酶解pH 9、酶解温度50℃、酶解时间4.0 h;优化后的最佳螯合工艺为:螯合温度38℃、肽液浓度13.5%、肽钙比5:1、螯合时间12.0 min、螯合pH 7、静置时间35 min、无水乙醇添加量为7倍体积,在此条件下钙离子螯合肽得率为50.85%。扫描电镜结果显示,螯合肽外观发生明显改变,更有利于吸收;红外光谱分析表明,钙离子可能与谷朊粉多肽上的-NH、-COOH结合。结论 本研究建立的谷朊粉酶解工艺、钙离子螯合工艺可行,可为谷朊粉深加工和产品研发提供思路与理论参考。     

酶水解制备猪血浆蛋白抗氧化肽工艺参数的优化

对猪血浆蛋白的水解条件进行优化,并对其不同水解条件下水解物的抗氧化性进行了研究.采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶以及木瓜蛋白酶制备猪血浆蛋白水解物,用pH-Stat法测定其水解度,通过测定卵磷脂脂质氧化体系的抑制作用和亚铁还原能力,来研究水解物的抗氧化能力.结果表明,猪血浆蛋白水解物的抗氧化能力与酶的种类、底物是否经预热处理及水解度的大小有关,筛选出碱性蛋白酶为最佳用酶;通过测定不同底物浓度、不同酶与底物浓度比以及不同水解时间的水解物的TBARS值(硫代巴比妥酸值)和还原能力,得出底物浓度为4%,酶与底物浓度比为2%,水解时间5h的水解物具有较高的抗氧化能力.     

玛咖多肽的制备及抗氧化活性研究

以水解度为考察指标,在单因素实验基础上,利用正交实验优化酶解玛咖粗蛋白制备玛咖多肽的工艺,同时通过·OH、DPPH·及O₂^-·清除实验研究提取过程中产生的玛咖醇提液以及在最适条件下制得的玛咖多肽的抗氧化活性,并对玛咖多肽进行氨基酸组成分析。结果表明,酶解玛咖粗蛋白的最适酶是碱性蛋白酶,酶解制备玛咖多肽的最适条件是酶解时间4 h、酶解pH为10.5、酶解温度55℃、加酶量1.6×10⁴ U/g,在此条件下,玛咖粗蛋白的水解度为(31.55%±0.74%)。稀释一倍的玛咖醇提液对各自由基清除率为最大,对DPPH自由基的清除率为94.44%,对·OH的清除率为85.05%,对O₂^-·清除率为53.85%。玛咖多肽对·OH、DPPH·及O₂^-·的IC₅₀值分别为0.85、0.44、0.86 mg/mL,且表现出一定的量效关系。另外,玛咖多肽中Tyr、His、Lys、Pro四种氨基酸含量为16.98%,其氨基酸组成与抗氧化活性存在一定关系。该结果说明玛咖醇提液及玛咖蛋白均具有一定的抗氧化活性。     

平菇多糖硫酸酯制备工艺优化及抗氧化活性研究

以取代度为考察指标,研究了浓硫酸加入量、反应温度和反应时间等因素对平菇多糖硫酸化的影响;在单因素的基础上,通过L9(34)正交试验优化平菇多糖硫酸酯的制备工艺条件;采用FT-IR光谱仪对平菇多糖和平菇多糖硫酸酯进行结构鉴定,并通过测定还原力、DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟自由基清除率探索了平菇多糖硫酸酯的抗氧化活...     

可控酶法制备河蚬抗氧化肽工艺优化

为优化酶法制备河蚬抗氧化肽的最佳工艺条件,在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken中心组合试验和响应面分析法,研究不同因素水平时酶解产物对羟自由基清除率的影响。获得河蚬抗氧化肽的最佳制备条件为:添加0.94%中性蛋白酶(以河蚬肉计),在料液比1∶2(m∶V),pH 6.00,温度54.70℃的条件下酶解3.91h,该条件下羟自由基清除率为81.63%。