纳米羟基磷灰石颗粒固定化漆酶的研究木

利用羟基磷灰石对漆酶进行了固定化研究,确定了羟基磷灰石对漆酶固定的最适条件,并研究了不同温度下游离漆酶与固定化漆酶活力的差异,同时也对游离漆酶与固定化漆酶的Km值进行了研究.结果表明:0.08 g羟基磷灰石固定1 mL粗酶液,当固定化过程pH为6,交联剂戊二醛浓度为6%,固定化时间为1 h时,酶活力达到最大.当温度在3...     

明胶膜固定化脲酶的制备及性质

以明胶为载体,戊二醛为交联剂,采用包埋-交联联用法制备了明胶膜固定化脲酶,其酶活力为6 07U/g载体,酶活力收率为66 1%。最优固定化条件是包酶量为10mg酶/g明胶,ρ(明胶)=100g/L,φ(戊二醛)=0 5%。研究了固定化酶的性质,并与游离酶作了比较,游离酶的最适pH=7 0,固定化酶的最适pH=6 5;游离酶的最适温度为60℃,固定化酶的最适温度升至70℃;固定化酶与游离酶的米氏常数Km分别为11 7mM和12 4mM;固定化酶在80℃下180min仍保留初始活力的10%,而游离酶几乎完全失活。固定化酶重复使用20次其活力仅下降15%,4℃下贮存35d后仍保持初始活力的55%。     

多酚氧化酶的改性蛭石固定化及其催化特性研究

以马铃薯为原料,提取其中的多酚氧化酶,采用改性蛭石为载体,对其进行固定化,研究游离与固定化酶的最适催化温度、pH值,固定化酶的储存稳定性、重复使用稳定性及对苯酚的清除性能。结果表明,改性后蛭石出现了较多沟壑状孔隙,颗粒质感疏松,有利于固定化酶分子;最佳固定化条件为:改性蛭石含量0.4 g,戊二醛浓度2.0%,搅拌时间2 h,在此条件下,酶活力回收率可达到60.67%;游离与固定化酶的最适催化温度均为50℃,最适催化pH值均为7.0;固定化酶4℃下储存28 d后酶活力可保留52.1%,具有较好的储存稳定性;重复使用5次后,仍能保持61.0%的初始活性,说明固定化酶构象较稳定,固定化马铃薯多酚氧化酶对苯酚具有较好的清除性能。     

多酚氧化酶的改性蛭石固定化及其催化特性研究

以马铃薯为原料,提取其中的多酚氧化酶,采用改性蛭石为载体,对其进行固定化,研究游离与固定化酶的最适催化温度、pH值,固定化酶的储存稳定性、重复使用稳定性及对苯酚的清除性能。结果表明,改性后蛭石出现了较多沟壑状孔隙,颗粒质感疏松,有利于固定化酶分子;最佳固定化条件为:改性蛭石含量0.4 g,戊二醛浓度2.0%,搅拌时间2 h,在此条件下,酶活力回收率可达到60.67%;游离与固定化酶的最适催化温度均为50℃,最适催化pH值均为7.0;固定化酶4℃下储存28 d后酶活力可保留52.1%,具有较好的储存稳定性;重复使用5次后,仍能保持61.0%的初始活性,说明固定化酶构象较稳定,固定化马铃薯多酚氧化酶对苯酚具有较好的清除性能。     

磁性琼脂糖微球固定化血管紧张素转化酶的制备及性质

采用反相悬浮包埋法制备磁性琼脂糖微球,然后以环氧氯丙烷为活化剂固定血管紧张素转化酶(ACE)。探讨了ACE固定化的影响因素,确定了固定化最适条件：酶溶液蛋白质量浓度为8g/L,pH为7.8,温度为50℃,固定化时间为2h,所得的固定化酶的活力达到0.128U/g;对磁性固定化ACE的性质进行了研究,固定化ACE最适温度为42℃ ,最适pH为8.3。同时,比较了磁性固定化与游离ACE对pH的耐受力和热稳定性,在 pH =5 的缓冲液中放置1h后,固定化ACE和游离ACE酶活力保留率分别为62.1%和40.7%,当pH= 9,两者酶活力保留率分别为95.7%和89.2%;60℃时,两者酶活力保留率分别为50.2%和20.7%;-20℃储存30d后, 两者酶活力保留率分别为90.3%和43.0%;连续操作10次后,固定化ACE活力仍保持53.0%。研究表明,磁性固定化ACE在外加磁场的作用下可快速重复回收利用,具有良好的应用前景。     

AS1.398中性蛋白酶的固定化研究

利用壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂，对AS1．398中性蛋白酶进行了固定化研究，固定化反应的最佳条件是采用1％的戊二醛浓度，壳聚糖和戊二醛的交联反应时间为4h，加入酶固定化反应12h，固定化酶的最适温度35℃，最适pH值8．0。得到的固定化酶的活力回收平均为82．5％，固定化酶的稳定性能好于游离酶。     

陶瓷-壳聚糖复合材料固定真菌漆酶酶学性质研究

以陶瓷为第一载体、壳聚糖为二次载体、戊二醛为交联剂,采用共价结合和吸附联用法制备固定化漆酶,并研究了固定化漆酶的性质.固定化酶最适pH为3.0,最适温度分别为25℃和50℃,均与游离酶相同.在pH 3.0,温度25℃时,固定化酶对ABTS的表观米氏常数为66.64 μmol/L.与游离酶相比,固定化酶的热稳定性明显提高,并具有良好的贮存和操作稳定性.     

氨基树脂固定胃蛋白酶的方法及性质研究

采用氨基树脂作为载体,戊二醛作为交联剂,对胃蛋白酶的固定化进行了研究,并对固定化条件和固定化胃蛋白酶的部分酶学性质进行了分析。确定固定条件为：戊二醛浓度为5%,载体处理温度为室温（25℃）,处理时间为5h,m（胃蛋白酶）：m（氨基树脂）为1：25,pH为3.0,固定时间为12h。此条件下固定化的胃蛋白酶活力为30U/g,酶的活力回收率为60%。与非固定化相比最适水解温度由50℃升高到60℃,最适pH值由2.0升高到4.0,游离酶米氏常数3.08g/L,固定化酶米氏常数1.2g/L,固定化胃蛋白酶的储存半衰期约为25天。对珠蛋白的操作半衰期为9天。     

猪骨基多孔碳固定化酶的研究

本文以猪骨基多孔碳为载体,采用明胶包埋与戊二醛交联结合的方法,制备固定化过氧化氢酶,并对固定化酶制备条件的优化,酶作用最适条件及其稳定性进行研究。结果表明:以猪骨基多孔碳为载体吸附2h、1%明胶包埋、1%戊二醛交联过氧化氢酶制备的固定化酶,在最适的缓冲液浓度、溶液pH和体系温度下,虽然催化效率有所下降,但其贮存稳定性和操作稳定性都有所增加,重复使用8次后,活力仍保持在初始活力的90%以上。这对于过氧化氢酶进一步在食品工业和纺织工业的推广可能有潜在的应用价值。     

大孔树脂D380固定化硫酸软骨素裂解酶

目的以大孔树脂D380为载体,戊二醛为交联剂,进行硫酸软骨素裂解酶(ChSase)的固定化,并考察固定化酶的酶学性质。方法分别考察加酶量、吸附温度、吸附时间、吸附pH值、戊二醛交联浓度、交联时间及交联温度对ChSase固定化效果的影响,并分析该固定化酶的最适反应温度、最适反应pH值、米氏常数(Km)及其操作稳定性。结果ChSase的最佳固定化条件为:加酶量150U/g树脂,吸附温度15℃,吸附时间6h,吸附pH值7.0,戊二醛交联浓度0.01%,交联时间3h,交联温度4℃。以此条件制备的固定化酶,其酶结合效率可达79.1%。该固定化ChSase的最适反应温度为45℃;最适反应pH值为7.0;Km达1.46×10-1g/L,较游离酶高;具有较好的操作稳定性。结论以大孔树脂D380为载体固定化ChSase是可行的,所得固定化酶有较高的使用效率和稳定性,适合于工业化生产。