免疫亲和柱净化-高效液相色谱法检测小麦中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇

建立了免疫亲和柱层析净化-高效液相色谱法(HPLC)检测小麦中DON的分析方法。小麦试样用水萃取,提取液稀释过滤后经过含有呕吐毒素特异性杭体的DON Test-P免疫亲和柱层析净化,甲醇洗脱,洗脱液氮吹至干,用流动相乙腈-水定容,用Cl8色谱柱分离,采用紫外检测。结果表明,当呕吐毒素质量浓度为0.1～5.0mg/L时,色谱峰面积与呕吐毒素质量浓度呈线性关系,方法的检出限为0.02mg/L,试样的平均回收率为84.0%～92.0%,测定值的相对标准偏差均小于5.0%。     

高效液相色谱法测定小麦中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇

小麦赤霉病的成因及危害,采用高效液相色谱法,应用安捷伦1100液相色谱仪检测小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇,进行准确定量,适用于对脱氧雪腐镰刀菌烯醇超标小麦及争议样品的确认.     

高效液相色谱法测定小麦中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇

小麦赤霉病的成因及危害,采用高效液相色谱法,应用安捷伦1100液相色谱仪检测小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇,进行准确定量,适用于对脱氧雪腐镰刀菌烯醇超标小麦及争议样品的确认。     

小麦和玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇与雪腐镰刀菌烯醇的免疫亲和净化-高效液相色谱检测方法研究

目的建立小麦和玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇与雪腐镰刀菌烯醇的免疫亲和净化-高效液相色谱检测方法。方法样品经纯水提取后,用免疫亲和柱净化,经甲醇洗脱,在C18色谱柱上等度洗脱分离,采用紫外检测器检测。结果标准曲线在0.1~2.0 mg/kg范围内线性良好。小麦基质中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的回收率为72.8%~110.1%,精密度为3.6%~10.8%,实验室内Hor Rat值为0.24~0.48;玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的回收率为72.2%~90.6%,精密度为1.2%~5.2%,实验室内Hor Rat值为0.07~0.31。小麦基质中雪腐镰刀菌烯醇的回收率为58.9%~100.4%,精密度为3.6%~11.3%,实验室内Hor Rat值为0.23~0.63;玉米中雪腐镰刀菌烯醇的回收率为56.9%~91.9%,精密度为2.5%~7.8%,实验室内Hor Rat值为0.11~0.43。结论该方法具有灵敏度高、重现性好、操作简便、准确可靠等特点,适用于小麦和玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇与雪腐镰刀菌烯醇的测定。     

高效液相色谱法测定粮谷类中脱氧雪腐镰刀菌烯醇

利用纯水溶解提取粮谷类样品中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇,经过免疫亲和柱净化,并优化提取净化条件,通过高效液相色谱检测其含量。结果表明,采用2 mL滤液上样,经氮吹仪在40 ℃吹干后,用1 mL乙腈-水（20∶80,V/V）定容,在波长220 nm条件下进行检测,色谱峰分离效果良好。脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量在20～500 ng/mL范围内线性关系良好（R2=0.999 8）,检出限2 μg/kg,精密度试验结果相对标准偏差（RSD）值为2.4%,回收率为87.6%～98.9%,RSD值为2.04%～2.68%,表明该方法具有良好的精密度和准确性,适用于粮谷类样品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量的定量分析检测。     

高效液相色谱法测定粮食中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇

本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A快速测定粮食中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的方法。玉米样品经磨碎后用水匀浆提取,提取液经过免疫亲和柱净化,超高效液相色谱LC-30A紫外检测器检测。试验结果表明：线性范围0.05~10.00μg/mL,相关系数大于0.999 9;标准样品的仪器检出限为0.016μg/mL,仪器定量限为0.05μg/mL;3个浓度标样的保留时间和峰面积相对标准偏差分别在0.041%~0.043%和0.11%~1.57%之间;玉米样品3个浓度加标回收率在81.2%~90.0%之间。该方法简便快速,且易操作。     

高效液相色谱法测定小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量的不确定度评定

对高效液相色谱法测定小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量的测量不确定度进行评定。依据JJF 1135-2005《化学分析测量不确定度评定》及CNAS-GL06-2006《化学分析中不确定度的评估指南》中不确定度评定的基本程序,建立数学模型,分析高效液相色谱法测定小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量过程中引入的各测量不确定度分量,计算得到测量结果的合成标准不确定度和扩展不确定度。评定结果表明：影响检测结果不确定度的因素主要是质量浓度因素,其次是体积因素及样品非均匀性因素,相对标准不确定度分别为0.040 3、0.019 7、0.019 6。     

免疫亲和柱净化高效液相色谱法与酶联免疫吸附法测定小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇

采用免疫亲和层析净化高效液相色谱(HPLC)法与酶联免疫吸附(ELISA)法测定小麦样品中的脱氧雪腐镰刀菌稀醇。结果显示:HPLC法和ELISA法的标准曲线线性相关性均良好,相关系数分别为0.999和0.994;三水平加标回收率分别为88.9%~92.3%和104.4%~119.4%,相对标准偏差(n=6)分别为1.73%~7.17%和2.25%~9.65%;进行F检验法和t检验法分析,说明两种方法检测结果无显著性差异性。此两种方法均具有回收率高、重现性好、特异性强等特点,ELISA法适合于大批量样品的检测和筛选,HPLC法适合于逐个样品的分析。     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇的检测

脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）又名呕吐毒素,是一种有很强细胞毒性、胚胎毒性、一定致畸性、弱致癌性且影响免疫系统的真菌毒素。重点介绍了脱氧雪腐镰刀菌烯醇ELISA试剂盒检测法,以及用此法检测的抚顺地区2008年产部分玉米样品在2009年夏季DON的平均含量。     

免疫亲和层析净化高效液相色谱法和胶体金快速定量法测定小麦中呕吐毒素含量的比较

采用免疫亲和层析净化高效液相色谱法和胶体金快速定量法测定小麦中呕吐毒素含量。结果表明:用这两种方法测定添加不同浓度呕吐毒素的小麦,测定结果的相对标准偏差分别为1.59%~3.08%和7.28%~11.50%,且两种方法测定呕吐毒素呈阳性的小麦样品的测定结果相对偏差小,相关系数为0.995,相关性好。这两种方法各有优缺点,免疫亲和层析净化高效液相色谱法精密度好,能够对呕吐毒素进行精准定量,但试验步骤较为复杂,耗时长;胶体金快速定量法检测简便快速,能用于大量样品的快速筛查,预期在粮食中真菌毒素检测方面具有很好的应用前景。     

液相色谱法测定谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇

建立检测谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的液相色谱方法,通过不同提取方法的比对来确定最佳的DON提取方案,并最终确定使用乙腈-水(体积比V/V,84/16)提取,经过DON专用净化柱的净化处理后,采用紫外检测器(λ=220 nm)及C18亲水分离柱测定。结果表明,用高速均质机均质4 min提取,可大幅度提高方法回收率,回收率达到90.7%~98.9%,方法最低检出限为50μg/kg。     

固相萃取柱净化-高效液相色谱法测定小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇

建立固相萃取-高效液相色谱对小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol,DON）进行测定的方法。从提取溶剂、净化方式、流动相组成以及流动相流速等条件优化DON检测方法。结果表明,当样品提取溶剂为乙腈-水（84∶16,V/V）,Bond Elut Mycotoxin固相萃取柱净化,流动相组成为乙腈-水（6∶94,V/V）,流速为0.9 mL/min时,DON检测结果最好,该检测方法的DON回收率达到90.12%～106.25%,日内和日间相对标准偏差分别为4.51%和6.12%。该方法快速、准确,重复性好,稳定性高,适合DON污染小麦样品的大批量检测。     

免疫亲和层析净化超高效液相色谱法测定玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量结果的不确定度评价

通过免疫亲和层析净化超高效液相色谱法测定玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇,对测定过程中可能引入的不确定度进行分析和评定。建立不确定度的数学模型,对各分量进行量化和合成,最终建立玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的不确定度分析方法。评定结果表明:影响检测结果不确定度的因素主要是标准曲线拟合、标准系列工作液配制和测量重复性等;玉米中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量为1 426μg/kg时,其扩展不确定度为158μg/kg(k=2)。     

高效液相色谱法测定潮州花生糖中的黄曲霉毒素B_1

建立免疫亲和层析净化-高效液相色谱法测定潮州花生糖中的黄曲霉毒素B1的检测方法。样品用甲醇-水(7+3)提取,定性滤纸和玻璃纤维滤纸2次过滤,过免疫亲和柱净化;洗脱液氮气吹干后加正己烷和三氟乙酸衍生,以水-乙腈(85+15)溶解,用高效液相色谱仪带荧光检测器检测。方法在0.002 5 ng/μL~0.100 ng/μL的范围内呈良好的线性关系,加标平均回收率为85.3%~92.9%,试验的RSD为0.61%~1.08%。该方法通过改进柱前衍生化的条件和优化仪器分析条件,实验结果重现性好,回收率高,结果准确,为黄曲霉毒素B1的检测提供了准确可靠的方法。     

免疫亲和柱净化-高效液相色谱法检测小麦中玉米赤霉烯酮

用50 ml乙腈-水(体积比90:10)萃取小麦试样,提取液稀释过滤后经含有玉米赤霉烯酮特异性抗体的Zearala Test免疫亲和柱层析净化,甲醇1.5 ml洗脱,洗脱液用C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm)分离,流动相为乙腈-水(体积比60∶40)混合溶液,流速为1.0 ml/min,采用荧光检测小麦中玉米赤霉烯酮.试验结果表明,玉米赤霉烯酮质量浓度在10.0～500.0 μg/L范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,方法的检出限(3S/N)为5.0 μg/L.应用此方法分析小麦加标样品,试样的平均回收率为83.7％～86.5％,测定值的相对标准偏差均小于5.0％,符合小麦中玉米赤霉烯酮的检测要求.     

不同症状小麦赤霉病粒中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量分析

目的测定不同症状的小麦赤霉病粒中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的含量。方法采用免疫亲和层析净化高效液相色谱法测定健康、皱缩、皱缩发黑和皱缩发红的小麦籽粒中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量。结果健康麦粒中DON的含量为未检出,皱缩红色和皱缩发黑的麦粒中DON的含量均接近我国食品安全国家标准规定的食品中真菌毒素限量1000μg/kg;皱缩麦粒中DON的含量约为皱缩红色麦粒中的一半,极显著低于皱缩红色和皱缩发黑的麦粒(P0.01)。结论本方法能为粮食收购时判断DON毒素的含量提供理论依据。     

免疫亲和柱净化—高效液相色谱法同时检测小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其衍生物

建立脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)及其衍生物3-乙酰基—脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3-ADON)和15-乙酰基—脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-A-DON)的免疫亲和柱净化—高效液相色谱同时检测方法。小麦样品经超纯水提取、免疫亲和柱净化、吹干、定容后,用配有紫外检测器的高效液相色谱仪进行DON、3-A-DON和15-A-DON三种毒素的同时检测,并与液相色谱质谱法比对。结果表明:该方法检出限,DON、3-A-DON和15-A-DON均为100μg/kg,样品加标回收率范围86.6%~96.5%,变异系数小于10%,具有较好的准确性和精密度。该方法简单、快速、灵敏度高、选择性好,适用于小麦中DON、3-A-DON和15-A-DON的同时检测。     

高效液相色谱法与酶联免疫法检测小麦中呕吐毒素的比较研究

以小麦为样品,通过高效液相色谱法和酶联免疫法检测结果对比分析,改进高效液相色谱法中的洗脱方法,稀释酶联免疫法中的样品量.结果显示:高效液相色谱法与酶联免疫法检测小麦中呕吐毒素在200～1 500 μg/kg存在相关性,即呕吐毒素含量CHPLC＜CELISA,两者相差平均为149.2 μg/kg,RSD为12.6％.酶联免疫法操作简便快速,适用于大量样品的快速初筛,而高效液相色谱法检测时间较长,成本较高,更适合经ELISA法初筛后呈阳性样品的确证以及呕吐毒素含量的准确定量.     

小麦脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）检测方法的研究

建立了一种新的小麦脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)高效液相色谱检测方法。采用聚乙二醇和水对小麦样品进行振荡提取,提取液分别用活性炭、柱层析硅胶、中性氧化铝、酸性氧化铝、碱性氧化铝净化,比较几种吸附剂对小麦DON净化效果。结果表明,用酸性氧化铝净化效果最好,除杂率为66.3%,净化液通过0.22μm聚醚砜滤膜可直接用于HPLC检测;色谱条件:分离柱为C18柱;流动相为甲醇∶水(20∶80);波长为230 nm。三水平加标平均回收率为91.0%~103.7%,不同污染水平的小麦阳性样品精密度试验相对标准偏差(RSD)为2.3%~8.5%;与免疫亲和柱(IAC)净化方法比较,方法间误差为2.3%~8.4%。本方法具有操作简便、快速、准确、成本低,可满足小麦DON大宗样品定量测定的要求。     

过热蒸汽处理对赤霉病小麦麸皮中脱氧雪腐镰刀菌烯醇降解效果研究

为提高赤霉病小麦麸皮利用率,使用过热蒸汽技术对赤霉病小麦麸皮进行处理。研究过热蒸汽温度、处理时间、蒸汽流速、麸皮水分含量4个因素对过热蒸汽降解麸皮中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON)的影响。结果表明,过热蒸汽处理可以显著降低赤霉病小麦麸皮中的DON含量,蒸汽温度240℃、处理时间10 min、蒸汽流速3 m/s、麸皮水分含量10%时,DON降解率达到最高值91.12%;在一定范围内提高蒸汽温度、延长处理时间、增大蒸汽流速均可以显著提高DON降解率(P<0.05),而水分含量升高则会显著降低降解率。