水产品中微囊藻毒素ELISA和LC/MS/MS检测

建立了水产品中微囊藻毒素ELISA和LC/MS/MS测定方法,样品经过提取、净化后,测定结果显示:ELISA最低检测限量为1.00μg/kg,1.00、5.00和10.0μg/kg 3个浓度添加水平,测定回收率范围为75.7%-98.7%,平均回收率为88.0%,RSD范围为5.52%-9.21%;LC/MS/MS最低检测限量为0.3μg/kg,5.00、15.0和20.0μg/kg 3个浓度添加水平,测定回收率范围为86.0%-109%,平均回收率99.1%,RSD范围0.65%-2.37%。两种方法20份实际样品测定结果显示:阴性样品和阳性样品符合率为100%,共有5份样品中含有MC-LR,当地监管部门应引起足够的重视,定时开展监测和信息公布。     

钌联吡啶-硫酸铈铵化学发光法测定果蔬中的甲胺磷

本文研究了在碱性介质中,甲胺磷对Ru(bpy)32+-Ce(IV)化学发光体系发光淬灭的现象,结合流动注射技术,建立了测定甲胺磷的新方法。甲胺磷溶液浓度在5.0×10-4μg/mL-1.0μg/mL范围内与化学发光强度呈现良好的线性关系。该方法的检测限为5.78×10-5μg/mL,加标回收率在99%-106%对实际样品进行回收实验,结果令人满意。     

高效液相色谱法检测鱼肝中维生素A

鱼肝经添加无水硫酸钠研磨、均质后,用无水乙醚提取维生素A(视黄醇,Retinol),用高效液相色谱法检测。流动相:乙腈:甲醇=80:20,流速:0.8mL/min,柱温:40℃,紫外检测波长325nm,进样量20μL。该方法浓度检测低限0.007μg/mL,浓度定量低限0.023μg/mL,在0.05μg/mL至10.0μg/mL之间线性良好,相关系数0.9998,回收率为91～96%,相对标准偏差为2.0～3.1%。该方法步骤简易、结果准确。     

高效液相色谱法鉴定嫌疑药丸中西地那非

本文研究了药丸中西地那非的高效液相色谱法鉴定。色谱柱为XDB-C18,5μm,4.6×150mm,二极管阵列检测器检测230nm(带宽4nm),流动相为35%乙睛+65%0.025mmol/L KH2PO4(含0.1‰v/v乙二胺)(pH5.57),流速1mL/min。样品用水溶解,外标法定量。检出限(LOD,S/N=3)为3μg/mL,定量限(LOQ,S/N=5)为4μg/mL。1000μg/mL、600μg/mL和200μg/mL的回收率分别为98.8%、101.3%和99.9%。6次测定600μg/mL和200μg/mL的相对标准偏差(RSD%)分别为2.4%和2.6%。在20～1000μg/mL范围内线型回归方程为Y=16.692X+50.17(Y为相应信号,mAU;X为浓度,μg/mL),回归系数R2为0.9998。该方法样品处理简单,定量准确度高,干扰小,可用于药丸中西地那非的法庭科学鉴定。     

基于LC-MS/MS同时测定畜禽肉中11种新型喹诺酮药物残留量

本研究以畜禽肉为实验基质，建立一种基于LC-MS/MS同时测定畜禽肉中11种新型喹诺酮药物残留量的检测方法。采用1%甲酸乙腈提取，冷冻离心和正己烷除脂的简便前处理方法，11种新型喹诺酮药物残留在7min内能完全分离。该方法检出限在0.1～0.6μg/kg之间，在1～50ng/mL浓度范围内线性相关系数R²>0.99，加标浓度为0.5μg/kg、1.0μg/kg、2.5μg/kg三水平的回收率在73.2%～118.3%，相对标准偏差RSD(n=6)在1.1%～9.7%范围。该方法能满足畜禽肉中新型喹诺酮类药物残留量检测，为我国畜禽肉中新型喹诺酮类残留监测提供参考。     

液相色谱-串联质谱法测定饮用水中的丙烯酰胺

建立了用液相色谱-串联质谱法测定饮用水中丙烯酰胺的方法。该法使用Cole-Parmer PTFE滤膜过滤样品,采用Acquity HSS T3(1.8μm,2.1X50mm)柱分离,以0.1%甲酸和甲醇为流动相(体积比95:5)分离。采用UPLC/MS/MS电喷雾电离正离子模式(ESI+),多反应检测(MRM),以外标法定量分析。该方法在0.10μg/L到0.60μg/L有良好线性范围。最低检测下限(LOD)0.10μg/L。加标回收率范围为88.9%-106.7%。相对标准偏差均低于8.2%。方法适用与水中丙烯酰胺的测定,具有灵敏度高、重现性好的特点,在水质监测中有重要作用。     

高效液相色谱法测定3种邻苯类增塑剂检测条件的研究

选择邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)3种标准物质为研究对象,建立了高效液相色谱法检测邻苯二甲酸酯的条件,对实验方法的准确程度进行了分析。结果表明,以甲醇-水为流动相,采用梯度模式洗脱,检测波长为225nm,柱温为30℃,流量为1.000mL/min,进样量为10μL时,可以很好地分离3种邻苯二甲酸酯,目标分析物质量浓度在0.5～100μg/mL范围之间时,得到的线性相关系数在0.999 96～0.999 98之间;重复性实验表明,10次实验的保留时间的相对标准偏差在0.0314%～0.0389%之间,峰面积的相对标准偏差在0.0942%～0.353%之间,DMP,DEP,DBP的方法检测限分别为0.0228,0.0277,0.0489μg/mL。     

微波消解-电感耦合等离子体发射光谱法测定松茸中9种金属元素

建立松茸中钾、钠、铝、锰、锌、铜、铁、钙、镁的微波消解-电感耦合等离子体发射光谱法测定方法。样品采用3 mL硝酸和2 mL过氧化氢作为消化液,微波消解后,用电感耦合等离子体发射光谱法进行测定。结果表明:各元素线性范围为钠0～2.00μg/mL,钾0～100.00μg/mL,铝、锰、锌、铜、铁、钙、镁均为0～5.00μg/mL,平均回收率在94.14%～102.30%之间,相对标准偏差(RSD)为0.23%～3.21%范围,检出限为0.33～5.25 mg/kg,定量限为1.10～17.50 mg/kg。测得四川省6个主产区松茸中钾、钠、铝、锰、锌、铜、铁、钙、镁的含量范围分别为21～35 g/kg、42.1～117mg/kg, 183～1210mg/kg, 10.2～91.8mg/kg, 23.1～69.5mg/kg, 21.6～37.2mg/kg, 159～1174mg/kg, 51.2～349 mg/kg,441～740 mg/kg。该方法简便、快速、准确,适用于松茸中上述9种元素的同时测定。     

土壤中矮壮素、缩节胺的残留对番茄酱品质的影响

采用HPLC-MS/MS技术,同时测定土壤中的矮壮素和缩节胺残留。土壤样品经缓冲溶液提取后,经Agilent ZORBAX Rx-Si(l100mm×3.0mm,1.8μm)色谱柱分离,以含浓度10mmol/L NH4Ac+0.2%HCOOH的水溶液和甲醇(60:40,V/V)为流动相进行等度洗脱,经正离子多反应监测模式测定目标化合物。结果表明:两种化合物在1.0-50.0μg/L浓度范围内线性关系良好,定量限(LOQ)矮壮素为0.8μg/L,缩节胺为0.6μg/L;加标回收率平均在97.6%-99.5%;相对标准偏差(RSD)平均在2.5%-2.9%,适用于检测土壤中矮壮素和缩节胺。     

高效液相色谱法测定扑热息痛药代动力学参数

采用反相高效液相色谱法测定扑热息痛在健康人体内的药代动力学参数。Zorbax ODS色谱柱,流动相为甲醇一水一冰醋酸(20:75:5),茶碱为内标,检测波长245nm,线性范围0.5～25μg/mL,r=0.9987,回收率101.58%,日内、日间测定 RSD 均小于10%,血浆中扑热息痛最低检测浓度小于0.1μg/mL。     

动物组织中新霉素残留快速检测方法

以兔抗新霉素多抗为包被抗体,以新霉素-HRP连接物为标记物,TMB为显色底物,三氯乙酸提取法为样品前处理方法,建立了一种适用于动物组织中新霉素残留量的竞争性直接酶联免疫快速检测方法.该方法可测定新霉素残留的线性范围为0.6~50.0 ng/mL,线性方程为y=-0.412 7x+1.185 9,相关系数为0.993 6,半抑制率IC50为5.0 ng/mL,板内变异系数小于5.6%,板间变异系数小于5.3%,检出限为0.6 ng/mL,回收率在80%~120%之间.     

顺序注射-化学发光联用技术测定氢化可的松含量

基于酸性条件下,氢化可的松对高锰酸钾-亚硫酸钠体系发光反应具有明显的增敏作用,本文研究建立了顺序注射化学发光测定氢化可的松含量的分析新方法。在优化的实验条件下,氢化可的松的质量浓度在1.0×10-9～1.0×10-6 g/mL范围内与发光强度呈良好的线性关系,检出限(3σ)为5.6×10-10g/mL。对浓度为5×10-8g/mL氢化可的松进行11次平行测定,其相对标准偏差为1.99%。经实验,本体系具有快速、准确、简便、试剂消耗少、灵敏度高、线性范围宽等特点,应用于注射液中氢化可的松含量的测定,结果与标准方法一致。     

Concentration of 17beta-estradiol using an immunoaffinity porous hollow-fiber membrane

We describe attempts to achieve high throughput of 17beta-estradiol (E2) analysis, including the development of an immunocleanup membrane using polyclonal antibodies and an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using monoclonal antibodies. An epoxy-group-containing monomer, glycidyl methacrylate (GMA), was graft-polymerized onto a porous hollow-fiber membrane. Subsequently, anti-estrogen (ES) antibody, as a ligand, was coupled with the epoxy group. The ligand density ranged from 3.1 to 5.8 mg/g of the GMA-grafted porous hollow-fiber membrane. A 1.0 microg/L E2 solution was forced to permeate through pores rimmed by the anti-ES-antibody-immobilized polymer chains, at a constant permeation rate. A breakthrough curve, that is, the change in the E2 concentration of the effluent penetrating the outside of the hollow fiber with a change of the effluent volume, was determined. Bound E2 in amounts ranging from 0.42 to 0.80 microg was quantitatively eluted with 3-5 mL of methanol in the permeation mode. The higher permeation rate of the E2 solution resulted in the higher overall binding rate of E2 to the anti-ES-antibody-immobilized porous hollow-fiber membrane because of the negligible diffusional mass-transfer resistance of E2 to the antibody.     

超高效液相色谱法快速检测食品中胭脂树橙的含量

本文建立了食品中胭脂树橙含量的超高效液相色谱紫外检测方法.样品采用酸化乙腈溶液提取,提取液经乙腈饱和正己烷萃取净化后注入超高效液相色谱仪,由BEH C(18)柱(1.7μm,2.1×50mm)快速分离后进人紫外检测器检测.本方法胭脂树橙检测限为0.1mg/kg.5种食品样品回收率为83.8%-96.1%,相对标准偏差(...     

气相色谱脉冲火焰光度法快速测定茶叶中12种有机磷农药残留

本文建立了超声提取,固相萃取小柱净化,GC-PFPD快速测定茶叶中12种有机磷农药残留的分析方法,重点考察并优化了茶叶中有机磷农药的提取与净化。样品经丙酮提取,PSA/活性炭固相萃取柱净化,以乙腈/甲苯混合溶液洗脱。实验结果表明各组分在0.05μg/mL～1.0μg/mL浓度范围均具有良好的线性关系,相关系数r均大于0.99,样品回收率在92.5%～109.5%之间,相对标准偏差小于11.0%,12种有机磷农药的检出限在0.005mg/kg～0.01mg/kg。     

高效液相色谱法检测食品中的碱性桃红T染料含量

本文建立了食品中碱性桃红T染料含量的高效液相色谱检测方法。样品经碱化甲醇提取,在碱性条件下用聚酰胺固相萃取小柱富集、净化,酸化甲醇洗脱后经高效液相色谱仪分离、检测。该方法的碱性桃红T检测限为0.004mg/kg。6种食品样品回收率为76.1%～96.5%,相对标准偏差(RSDs)为0.8%～7.6%(n=6),在0.1～5μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系,线性回归系数r=0.9999。     

基于分子印迹技术的尿素仿生微传感器

设计了基于分子印迹与电化学微传感器的尿素仿生微传感器,采用MEMS工艺制作集成微型3电极系统,实现了传感器的微型化.通过电化学方法制备了分子印迹聚合物(MIP),印证了分子印迹聚合物的印迹效果.比较了3支传感器的响应曲线,得到了相近的灵敏度,灵敏度在0.10μA/(μmol.L-1)左右,线性度达到了0.95,检测下限为1.00μmol/mL,分析尿素溶液的标准偏差小于5%,达到和接近临床分析要求,为生物传感器向仿生生物传感器发展进行了具有临床意义的尝试.     

Development of a high-affinity anti-domoic acid sheep scFv and its use in detection of the toxin in shellfish

The potential of immunoassays as high-throughput screening tools for the detection of harmful substances in foods will only be realized when convenient methods are available for production of the high affinity antibodies needed for sensitive assay development. Recombinant antibodies offer advantages over traditional monoclonal antibodies in terms of ease of production, much greater antibody repertoire for selection, and versatility. We describe here the development of recombinant antibodies against the common shellfish toxin, domoic acid (DA), utilizing the sheep immunoglobulin system as an effective method for generating high affinity anti-hapten recombinant antibody fragments. A single-chain antibody fragment (scFv) library was generated from a sheep immunized with DA-bovine serum albumin conjugate, and anti-DA scFvs were isolated by phage-display. Three selected scFvs gave I50s of 2.6 to 58 ng/mL (8.3-186 nM) in competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Assay optimization with one of these scFvs gave a very reproducible standard curve with a range of 0.3 to 5.6 ng/mL (1.0 to 17.9 nM), a mean limit of quantification (LOQ, defined as the I20) of 0.5 ng/mL (1.6 nM), and a mean I50 of 1.2 ng/mL (3.9 nM). When the assay was used for the analysis of crude methanolic extracts of scallop tissues, results obtained correlated well with standard HPLC assay results (R2, 0.90, n = 40; R2, 0.81, n = 34), although ELISA results were lower than HPLC results. Adjusting the cutoff point for DA concentration accordingly from the regulatory 20 mg/kg, the potential of the sheep scFv-based ELISA for use as a screening assay for DA in shellfish extracts was demonstrated.