海参蛋白酶解工艺条件的优化

为获得多肽含量高的海参蛋白水解液,研究了3种蛋白酶对海参蛋白水解的能力,确定以A．S1398中性蛋白酶为最佳用酶。又通过正交实验得出A．S1398中性蛋白酶的最佳酶解工艺条件;温度50℃;pH7．0;底物浓度8％;加酶量1．5％;水解时间1．5h。     

海参肠道组织蛋白酶B粗酶提取条件的优化

为了获得具有较高活力的海参肠组织蛋白酶B,研究了其粗酶的提取条件。以Z-Arg-Arg-MCA为特异性底物,采用荧光光度法测定了酶活力。对提取海参肠组织蛋白酶B的浸提缓冲液、浸提时间和硫酸铵饱和度进行优化。结果表明,采用含5 mmol/L L-半胱氨酸、1 mmol/L EDTA、0.2%TritonX-100的50 mmol/L pH5.0的NaAc-HAc缓冲液浸提7 h后,选择80%饱和度的硫酸铵进行沉淀,能够有效地从海参肠道中提取组织蛋白酶B;同时研究了巯基保护剂对酶活力的影响。结果表明,巯基保护剂可提高酶的活力,这符合组织蛋白酶B结构中含有巯基的特性。在提取粗酶的过程中,添加巯基保护剂可有效地保证酶活力。     

海参肠道组织蛋白酶B粗酶提取条件的优化

为了获得具有较高活力的海参肠组织蛋白酶B,研究了其粗酶的提取条件。以Z-Arg-Arg-MCA为特异性底物,采用荧光光度法测定了酶活力。对提取海参肠组织蛋白酶B的浸提缓冲液、浸提时间和硫酸铵饱和度进行优化。结果表明,采用含5 mmol/L L-半胱氨酸、1 mmol/L EDTA、0.2%TritonX-100的50 mmol/L pH5.0的NaAc-HAc缓冲液浸提7 h后,选择80%饱和度的硫酸铵进行沉淀,能够有效地从海参肠道中提取组织蛋白酶B;同时研究了巯基保护剂对酶活力的影响。结果表明,巯基保护剂可提高酶的活力,这符合组织蛋白酶B结构中含有巯基的特性。在提取粗酶的过程中,添加巯基保护剂可有效地保证酶活力。     

胰蛋白酶酶解法制备海参肽的工艺条件

以海参肽得率为指标,分别考察了酶解加酶量、时间、pH、温度、底物浓度对胰蛋白酶酶解海参蛋白质反应的影响.通过正交实验确定了胰蛋白酶酶解海参蛋白的最佳工艺条件：酶加量6 000 U/g,水解反应时间3 h,温度55 ℃,pH 8.0,底物浓度1.0%,在此条件下,海参肽得率可达32.93%.     

用响应曲面法优化豌豆蛋白酶解条件

旨在应用响应曲面试验设计优化豌豆蛋白酶解条件,以期得到准确的酶解预测模型。本文以含水量为30%的豌豆蛋白为原料,以DPPH和·OH清除率为评价指标,利用响应曲面设计优化中性蛋白酶的酶解条件,得出酶解最佳条件为加酶量10.60%、温度40.30 ℃、pH 7.02、底物质量分数6.80%。在此条件下,得到DPPH清除率、·OH清除率分别为99.10%、97.60%。经验证,所建模型预测准确可靠,酶解产物抗氧化性高,可为相关生产和工艺产品开发提供参考。     

海参卵中类胡萝卜素提取条件的优化

采用有机溶剂浸提法,通过单因素试验结合正交试验,对海参卵中类胡萝卜素的提取条件进行了优化。结果表明,在以乙酸乙酯为提取溶剂、二次提取,提取温度40℃,提取时间3h,料液比1∶12的提取条件下,可以达到最优提取,类胡萝卜素质量分数可达63.20μg/g。     

多元线性回归正交设计优化啤酒酵母蛋白酶解工艺

以啤酒酵母蛋白为底物,以中性蛋白酶的酶解效果为衡量指标,采用对比分析和多元线性回归正交组合设计试验方法,优化出中性蛋白酶可控酶解啤酒酵母蛋白的工程化回归模型。优选出最佳工艺参数如下:啤酒酵母蛋白质量分数为1.13%,中性蛋白酶质量分数为5.02%,酶解温度为54.3℃,酶解pH值为6.1时,经过3次验证发现水解度均在44.71%以上,证明了回归模型具有工程化生产指导意义。     

胰蛋白酶酶解法制备海参肽的工艺条件

以海参肽得率为指标,分别考察了酶解加酶量、时间、pH、温度、底物浓度对胰蛋白酶酶解海参蛋白质反应的影响。通过正交实验确定了胰蛋白酶酶解海参蛋白的最佳工艺条件:酶加量6 000 U/g,水解反应时间3 h,温度55℃,pH 8.0,底物浓度1.0%,在此条件下,海参肽得率可达32.93%。     

海参酶解液中重金属铬的脱除

海参酶解液主要成分为海参多肽,海参多肽具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等活性,在多领域有着广阔的应用前景,但重金属污染是海参多肽应用过程中潜在的危害,对海参酶解液中的重金属脱除变得尤为重要。研究选用树脂法、壳聚糖及其衍生物法、络合法中的7种脱除材料对海参酶解液中的重金属铬进行脱除,结果表明,732型阳离子交换树脂、壳聚糖和植酸分别是3种脱除方法中的最佳脱除材料。经过正交试验与验证试验显示,732型阳离子交换树脂在实验条件为酶解液pH 6、脱除温度15℃、脱除剂添加量1 g、脱除时间2 h下,铬脱除率为(87±1.86)%,多肽保留率为(90±2.69)%,很好的脱除海参酶解液中的重金属铬,并能保留大部分多肽。该实验为高蛋白含量海洋动物酶解液中脱除重金属铬提供了参考。     

海参体壁酶促溶性胶原的提取工艺

以海参体壁为原料,采用胃蛋白酶水解法提取酶促溶性胶原.以酶促溶性胶原得率为指标,通过正交试验确定了胃蛋白酶水解法获取酶促溶性胶原的最佳条件温度为4 ℃,酶加量为14%,料液比为1∶500,提取时间为72 h;在此条件下酶促溶性胶原的得率可达到胶原纤维原料的73.44%.实验还确定盐浓度为0.8 mol/L时酶促溶性胶原的盐析效果最好.     

海参肠道中高产胞外多糖酵母的筛选及发酵条件

从大连海域的海参肠道中筛选得到一株产胞外多糖较高的酵母菌HS-J9,经形态学和26SrDNA序列分析,初步鉴定为季也蒙假丝酵母(Meyerozyma guilliermondii),GenBank检索号为KF668241。采用苯酚-硫酸法和响应面法对该高产菌株进行胞外多糖测定及发酵条件优化。通过单因素试验确定了pH、接菌量和发酵时间3个主要因素对发酵产糖量的影响,根据Box-Behnken中心组合设计原理确定显著性因子的最佳水平,并以胞外多糖产量为响应值进行回归分析。结果表明,当pH为6.6、接菌量4%、发酵时间41.3h时,HS-J9的胞外产糖量最大,为0.762 mg/mL,比优化前的产胞外多糖量(0.616mg/mL)提高了23.67%。     

重组海参溶菌酶基因工程菌的构建及原核表达

根据GenBank中海刺参溶菌酶的cDNA序列(Accession no.EF036468),利用RT-PCR技术扩增出海刺参溶菌酶的基因片段(SL),将其克隆到原核表达载体pET-32a(+),得到重组质粒pET-32a(+)-SL,再转化至E.coil Rosetta(DE3)pLysS。利用IPTG诱导表达,重组蛋白经SDS-PAGE分析,得到一条分子质量约为31ku的特异条带。经过Western blotting分析鉴定,结果显示重组海参溶菌酶成功在大肠杆菌中表达,并且有部分可溶性蛋白,占总菌体蛋白约10%。这些结果为进一步研究海参溶菌酶的作用机理奠定基础。     

3种微生态制剂对幼刺参养殖水体水质的影响

对3种微生态制剂改善幼刺参养殖水体水质的效果进行了研究。试验设3个处理组,分别在水体中泼洒芽孢杆菌、海洋红酵母和EM菌;另设1个对照组,只投喂基础饵料。试验水体20L,试验期间不换水,每隔2d对pH、化学需氧量、氨氮及亚硝酸盐氮进行检测,氨氮超过0.15mg/L时结束试验。结果表明,在水体中泼洒3种微生态制剂均可改善水质,其中,EM菌和海洋红酵母具有降低化学需氧量的作用,EM菌和芽孢杆菌具有降解氨氮和亚硝酸盐氮的功能,EM菌改善水质的效果最好。     

刺参体壁胶原蛋白的检测条件

为了缩短刺参体壁胶原蛋白含量的测定时间,简化实验操作,以及更加准确地检测刺参体壁胶原蛋白质中羟脯氨酸的质量分数,使得检测结果更为真实可靠,采用酸水解法分别对刺参体壁酶促溶性胶原蛋白和酸溶性胶原蛋白的水解条件进行了优化,在110、115、120、125和130℃分别水解2～30 h,确定其适宜水解时间为6 h,水解温度为120℃。在此水解条件下,对刺参体壁胶原蛋白中羟脯氨酸的质量分数进行了测定。结果表明,刺参体壁酶促溶性胶原蛋白中羟脯氨酸的质量分数为8.29%,酸溶性胶原蛋白中羟脯氨酸的质量分数为8.16%。     

海参肠自溶水解物抗氧化活性的研究

为了提高海参肠的利用率,利用海参自溶技术制备海参肠自溶水解物.分析了自溶水解物的分子质量分布范围和氨基酸组成,并通过体外化学模拟体系测定其1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)清除能力、Fe2+螯合能力和还原能力.结果表明,海参肠自溶水解物主要由分子质量小于3 ku的组分组成,含有17种氨基酸,其具有一定的DPP...     

海参体壁酶促溶性胶原的提取工艺

以海参体壁为原料,采用胃蛋白酶水解法提取酶促溶性胶原。以酶促溶性胶原得率为指标,通过正交试验确定了胃蛋白酶水解法获取酶促溶性胶原的最佳条件:温度为4℃,酶加量为14%,料液比为1∶500,提取时间为72 h;在此条件下酶促溶性胶原的得率可达到胶原纤维原料的73.44%。实验还确定盐浓度为0.8 mol/L时酶促溶性胶原的盐析效果最好。