苦丁茶对高胆碱饮食小鼠肝、肾及氧化应激的影响

研究苦丁茶水提物对高胆碱饮食小鼠体重、肝脏、肾脏以及氧化应激的影响。采用超高效液相色谱-飞行时间-质谱联用技术对苦丁茶的活性成分进行定性分析。将C57BL/6J小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、苦丁茶低中高剂量组进行饲养灌胃,监测小鼠进食量及体重变化;干预4个月后采集血液以及肝、肾标本进行分析。结果表明苦丁茶中含有黄酮类、酚类、三萜类、生物碱类活性成分。各组小鼠饮食、排泄正常,与模型对照组相比,各剂量组小鼠体重增长减缓,苦丁茶高剂量组小鼠血清中总蛋白含量上升,各剂量组丙二醛水平降低,苦丁茶中剂量组超氧化物歧化酶含量显著增加(P<0.05);各组小鼠脏器系数无统计学差异,未出现明显的慢性或急性肝、肾组织损伤。高胆碱饮食会造成小鼠体重异常增长,引发丙二醛水平升高及超氧化物歧化酶活力降低,适宜剂量的苦丁茶水提物可减轻小鼠体重、缓解氧化损伤等症状。     

微波水解-液相色谱串联质谱法测定16种氨基酸的含量

目的建立微波水解-液相色谱串联质谱法(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS)测定保健食品中16种氨基酸的含量。方法取适量样品,加入6 mol/L盐酸溶液15 m L,加入适量苯酚,于150℃微波消解4 h,冷却稀释至80℃减压干燥1 h。样品经0.1%甲酸溶解后经Agilent-C_(18)柱分离,以乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液为流动相进行梯度洗脱,以串联质谱的多反应监测模式进行检测,外标法定量。结果方法的线性范围0.01~0.05 nmol/μL;平均回收率为95.6%~100.7%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)小于3.0%。结论该方法分析速度快、灵敏度高、准确和重复性好,与现有技术对比,该方法通过微波技术辅助水解,缩短了样品的前处理时间,可适用于保健食品中16种氨基酸的快速检测。     

铁皮石斛多糖对高脂饮食小鼠肠腔菌群的影响

目的 探究铁皮石斛多糖(Dendrobium officinale polysaccharides,DOP)对高脂饮食小鼠肠腔菌群的影响,为其功能性食品的开发提供参考.方法 以水提醇沉法提取DOP,分别以高脂饮食(high fat diet,HFD)、高脂饮食联合DOP对昆明小鼠干预8周,收集小鼠小肠段的内容物进行16...     

桑叶生物碱对高果糖饮食小鼠糖脂代谢的影响

该研究旨在探讨桑叶生物碱(mulberry leaf alkaloids,MLA)对高果糖代谢综合征小鼠糖脂代谢紊乱的影响.建立高果糖饮食诱导的代谢综合征小鼠模型,以MLA 40、80、160 mg/(kg·d)三个剂量进行干预,检测糖脂代谢相关生化指标,观察小鼠肝脏组织结构,研究MLA对小鼠氧化应激和炎症的影响.结果...     

超高效液相色谱-串联质谱法直接测定啤酒中20种游离氨基酸含量

目的 采用超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS),建立高效、快速直接测定啤酒中20种游离氨基酸的方法。方法 啤酒样品经水稀释后,经CAPCELL PAK CR 1:4 ST色谱柱(150 mm×2.1 mm,5μm)分离,乙腈-0.3%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子模式,在多反应监测模式下进行检测。结果 20种游离氨基酸在各自相应线性范围内,线性关系良好,相关系数(r²)均大于0.99;加标回收率为81.3%～108.4%,相对标准偏差在2.5%～7.2%之间,方法检出限为1～6 ng/mL,方法定量限在3～15 ng/mL之间。结论 该方法灵敏、准确,具有良好的重复性和稳定性,可快速检测出啤酒中的20种游离氨基酸成分。     

绞股蓝茶皂苷对高胆碱饮食所致小鼠血管内皮损伤的保护作用

为了探索质量分数为3%高胆碱饮食对小鼠血管内皮功能的损伤程度以及绞股蓝茶皂苷潜在的心血管保护作用。连续8周饮食3%高胆碱后,小鼠血清中一氧化氮合酶(eNOS)、一氧化氮(NO)和前列腺素(PGI2)水平均显著降低(p0.01),内皮素-1(ET-1)和血栓素(TXA2)水平均显著升高(p0.01)。此外,小鼠胸主动脉血管组织的苏木精伊红切片也表明3%高胆碱饮食8周可导致典型的血管内皮损伤。然而,经连续8周的绞股蓝茶皂苷的营养干预后,血清生化指标及血管组织病理切片均得到显著缓解(p0.05,p0.01)。结果表明,高胆碱饮食可诱导小鼠血管内皮功能异常,而绞股蓝茶皂苷可有效干预高胆碱饮食导致的血管内皮损伤,是一种潜在的预防心血管损伤的营养物质。     

高脂饮食对激素敏感脂肪酶基因表达的影响

目的探讨高脂饮食对白色脂肪激素敏感脂肪酶基因表达的影响。方法采用50只健康雄性SD大鼠，随机分为对照组和高脂组，分别用基础饲料和高脂饲料喂养13w，然后根据体重和能量摄入量筛选出肥胖抵抗（DIO-R）和肥胖（DIO）组，观察体脂含量的变化，应用酶法测定大鼠血清总胆固醇（CHO）、甘油三（TG）、高密度胆固醇（HDL-C），放免法测血清生长激素含量，RT-PCR法测定大鼠激素敏感脂肪酶mRNA水平。结果DIO-R大鼠体脂含量明显低于DIO大鼠（p〈0．05）；DIO-R大鼠体脂含量、TG、CHO均明显低于DIO大鼠（p〈0．05），DIO-R和DIO大鼠的HDL-C无明显差别（p〉0．05）；DIO-R大鼠血清生长激素水平明显高于DIO大鼠（p〈0．05）；高脂饲料可增加DIO-R大鼠白色脂肪激素敏感脂肪酶mRNA水平。结论高脂饮食使DIO-R大鼠白色脂肪中激素敏感脂肪酶表达增加。     

超高效液相色谱–串联质谱法测定特殊医学用途配方食品中胆碱含量

目的 建立超高液相色谱–串联质谱法(ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)测定配方食品中胆碱的分析方法, 为胆碱及其制剂的含量测定提供参考。方法 样品中的胆碱经过盐酸水解, 提取后, 以0.1%甲酸-甲醇作为流动相经kinetex 5u XB-C18柱(4.6 mm×100 mm, 5 μm)梯度洗脱分离, 流速0.45 mL/min, 采用UPLC-MS/MS在正离子模式下检测, 外标法定量。结果 在优化实验条件下, 测得胆碱在浓度为0.1~0.5 μg/mL有良好线性关系, 线性相关系数为0.9993。方法的回收率为96.1%~103.4%, 检出限为2.27 mg/100 g。结论 超高效高效液相色谱–串联质谱法简单快速、灵敏度高、准确性强, 适用于特殊医学用途配方食品中胆碱的分析。     

液相色谱串联质谱测定狗肉中的氯化琥珀胆碱

用Na_2CO_3—NaHCO_3缓冲盐震荡超声提取狗肉的氯化琥珀胆碱,过WCX固相萃取柱净化,液相色谱三重四极杆串联质谱定性、定量。结果表明,氯化琥珀胆碱在0.5~250.0ng/mL浓度范围内线性关系良好(r=0.999 87),回收率达96%以上,精密度小于13%,检出限为0.004 mg/kg。因此,该方法可用于狗肉中氯化琥珀胆碱快速、灵敏、准确的测定。     

金松酸对高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏脂质代谢的影响

目的：本研究旨在探究金松酸（sciadonic acid,SA）对高脂饮食诱导小鼠肥胖的改善作用。方法：将48只C57BL/6雄鼠适应性喂养一周后随机分为正常组（C）、阳性对照组（S）、模型组（M）、金松酸低剂量组（LSA）、金松酸中剂量组（MSA）和金松酸高剂量组（HSA）。造模和给药同时进行,持续16周,低、高剂量组每日固定时间灌胃不同剂量的金松酸溶液。实验结束后从血脂代谢、肝脏脂肪代谢、肝脏氧化应激、肝脏脂质合成和代谢相关基因的表达等几个方面探讨金松酸调节肥胖小鼠脂质代谢的潜在机制。结果表明,高剂量金松酸干预肥胖小鼠能显著降低血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量,增加高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）(P<0.05),抑制体重增长,减少附睾脂肪积累,对肝组织损伤具有改善作用。此外,金松酸能明显提高小鼠体内超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）等抗氧化酶的活性（P<0.05）,并显著降低氧化终产物MDA的生成（P<0.05）,缓解体内氧化应激反应,并通过调节脂质代谢相关基因的表达,抑制脂质合成,改善脂质代...     

不同产地玫瑰花氨基酸成分分析与评价

目的 建立测定玫瑰花氨基酸成分的超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem triple quadrupole mass spectrometry,UPLC-TQ/MS),为不同产地玫瑰花溯源和品质评价提供思路.方法 采用UPLC-...     

游离氨基酸检测方法及其应用

游离氨基酸是动植物体中重要的活性成分和风味物质,随着现代科学技术的进步,游离氨基酸的检测方法多样且应用研究进展迅速,汇总整理各类检测方法及其相关应用不可或缺。综述了常用于检测分析游离氨基酸的分光光度法、离子色谱-积分脉冲安培法、氨基酸分析仪法、高效液相色谱法和液相色谱-串联质谱法5种方法,以及2种新技术,分析了各检测方法的原理及优缺点,并对各检测方法列举了相关应用研究。现代新型技术的发展和推广,多元化离子化方式、高分辨质谱、多级串联质谱等技术将会使游离氨基酸分析的灵敏度、准确度、分析速度及自动化程度均提高到一个崭新的水平,选择性好、准确度高、前处理简便的检测手段将是游离氨基酸检测分析技术的未来发展趋势。     

高效液相色谱串联质谱法测定酱油中水解氨基酸

建立了高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定天然酿造酱油原油(FSS)和酸水解植物蛋白调味液(HVP)中多肽的水解氨基酸的组成的方法。FSS多肽总量约是HVP的10倍,其中FSS中多肽的总量为2378.76mg/L,HVP中多肽的总量为247.57mg/L。天然发酵酱油原油中赖氨酸在多肽中的含量21倍高于酸水解植物蛋白液。FSS多肽中赖氨酸、组氨酸、酪氨酸相对百分含量约是HVP的2倍,HVP中丙氨酸、脯氨酸相对百分含量约是FSS的2倍。该研究为鉴别天然酿造酱油与酸水解酱油提供依据。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测中华圆田螺硝基呋喃代谢物残留量

目的建立了超高效液相色谱-串联质谱法同时测定中华圆田螺中呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因和呋喃西林4种硝基呋喃代谢物的方法。方法样品经50%甲醇水洗涤除杂后,进行衍生,用磷酸氢二钾溶液调pH后,经过乙酸乙酯提取,氮吹浓缩,乙酸铵和乙腈混合溶液定容,且正己烷除脂,吸取下层液体过膜待测。在正离子模式下,采用多反应监测模式同时测定中华圆田螺中的4种硝基呋喃代谢物。结果在优化后的仪器工作条件下进行测定,4种代谢物的质量浓度在1.0～10 ng/mL的范围内线性关系良好,相关系数为0.9994～0.9998,检出限为1.07×10~(-2)～7.02×10~(-2)ng/g。加标回收率为92.0%～104.0%,批内和批间相对标准偏差均小于10%,测定结果的相对标准偏差为0.7%～4.7%(n=6)。结论该方法具有良好的精密度、准确度和重现性,可用于同时测定中华圆田螺中的呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因和呋喃西林4种硝基呋喃代谢物。     

质谱技术在氨基酸及其代谢物检测中的应用

氨基酸作为生物体中的重要组成成分具有特殊的生理功能, 与人体的健康密切相关。为了更准确地分析食物中营养物质含量并探究氨基酸生理功能的分子机制, 就需要对氨基酸及其代谢物进行检测分析。但常规的氨基酸检测技术已经无法满足研究需要。近年来基于质谱技术的氨基酸检测新方法可以实现多种氨基酸或相关代谢物的同时定性和定量分析。为了更好的对氨基酸检测技术进行研究, 本文就质谱技术在氨基酸及其代谢物检测中的应用进行了综述, 以期为氨基酸的功能性研究提供技术保障。     

邻苯二甲醛柱前衍生化时间对反相高效液相色谱法测定稻米氨基酸含量的影响

目的确定反相高效液相色谱法(reversed-phase high performance liquid chromatography, RP-HPLC)测定稻米氨基酸含量最适柱前衍生化时间。方法以氨基酸标准品以及稻米氨基酸提取物为对象,对柱前衍生化时间与氨基酸检测结果之间的关系进行研究。结果邻苯二甲醛(O-phthalaldehyde, OPA)和3-巯基丙酸与氨基酸的衍生化反应进行到15 min时,氨基酸的峰面积达到最大值,不同OPA-氨基酸衍生化产物的稳定性存在很大的差异。在15～300min的衍生化反应中,酪氨酸和苯丙氨酸衍生物的峰面积保持在非常稳定的水平上;而侧链含有羟基的丝氨酸和苏氨酸对衍生化时间特别敏感,衍生化时间超过15min后,其衍生物的峰面积开始快速下降;当衍生化时间在15～60min之内时,15种氨基酸中,只有酪氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸和丙氨酸9种氨基酸的衍生物峰的面积下降幅度小于5%。结论柱前衍生化时间对稻米氨基酸衍生物峰面积的检测值较为敏感,衍生化时间控制在15 min之内能有效减小实验误差。     

超高效液相色谱-串联质谱法快速分析氰霜唑及其代谢物CCIM在水果中的残留

为评价氰霜唑及其主要代谢物4-氯-5-(4-甲苯基)-1H-咪唑-2-腈（CCIM）在水果中的安全性,建立了同时检测氰霜唑及其代谢物CCIM的高效液相色谱-串联质谱法。待测样品采用含体积分数1.0%乙酸的乙腈溶液提取,经十八烷基硅烷键合相（C18）粉末和弗罗里硅土粉末净化后,以Capcell PAK C18色谱柱（150 mm×2.0 mm,5μm）进行UPLC分离,采用质谱多重反应监测模式（MRM）进行测定。结果表明,氰霜唑和CCIM在0.001～0.040μg/mL时,质量浓度与峰面积呈良好的线性关系（R≥0.999 3）,在0.004～0.080 mg/kg添加水平内,氰霜唑和CCIM回收率分别为80.71%～103.27%和76.62%～100.20%;相对标准偏差分别为4.14%～11.15%和3.24%～11.16%,检出限和定量限分别为0.001 5～0.003 8 mg/kg和0.003 0～0.007 9 mg/kg。该方法简单快速、分析时间短、灵敏度及准确度高,能够满足快速定性、定量检测水果样品中氰霜唑及CCIM的残留量。     

HPLC-ICP-MS在线联用分析食品中无机硒和硒氨基酸的形态

以亚硒酸盐（Se（Ⅳ））、硒酸盐（Se（Ⅵ））、硒胱氨酸（Se Cys₂）、硒蛋氨酸（Se Met）、甲基硒代半胱氨酸（Me Se Cys）和硒代乙硫氨酸（Se Et）为硒形态的目标分析物,采用Dionex Ion Pac AS11色谱柱（250 mm×4.0 mm）为分离柱,通过优化流动相的p H、浓度、甲醇含量、流速和色谱柱的柱温等因素对六种目标硒形态分离及不同提取方法对目标分析物提取效率的影响,建立了高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱（HPLC-ICP-MS）在线联用同时测定食品中无机硒和硒氨基酸的分析方法。Me Se Cys、Se Met、Se Et、Se（Ⅳ）、Se Cys₂和Se（Ⅵ）的检出限分别为0.25、0.20、0.35、0.15、0.30、0.15μg Se/L;Me Se Cys和Se Cys₂的线性范围为2.0²500μg Se/L,Se（Ⅳ）和Se（Ⅵ）线性范围为1.2¹200μg Se/L,Se Met和Se Et的线性范围分别是1.5¹500μg Se/L和2.2²200μg Se/L,各硒形态的线性相关系数均不少于0.9997。将该方法应用于食品中硒形态的分析,其加标回收的回收率为80.8%¹06.7%,相对标准偏差（RSDs,n=3）为4.7%⁹.6%。方法具有操作简单、方便快速、灵敏度高和环境友好等优点,可满足食品中硒形态定量分析。      

超高效液相色谱-串联质谱法检测食品中腰果过敏原

基于超高效液相色谱-串联质谱系统建立食品中腰果过敏原的定量检测方法。腰果经提取、胰蛋白酶酶解、净化后,经Easy-nLC 1000纳升液相色谱分离,随后进入四极杆-静电场轨道离子阱高分辨质谱以全扫描模式进行数据采集,使用ProteinPilot软件结合Uniprot蛋白数据库对样品扫描结果进行分析,并基于基本局部比对搜索工具(BLAST)验证肽段特异性,最终筛选出6条腰果特异性肽段,利用超高效液相色谱-三重四极杆质谱系统的多反应监测模式对实际样品进行检测。结果表明,该方法在0.005～10 mg/mL范围内线性关系良好,R²均大于0.99,固体基质中定量限为2.5～5 mg/kg,饮料基质中定量限为0.005～0.01 mg/mL,平均回收率在82.5%～109.9%之间,相对标准偏差不大于8.9%。该方法灵敏度高、特异性好,可用于饼干、面包、蛋糕、桃酥、巧克力和饮料6种食品基质中的腰果过敏原检测。