多酶协同作用生产大豆多肽的研究

以大豆多肽饮料的研制为着眼点，根据单酶水解大豆分离蛋白的研究，从中选择合适的酶复配组合成多酶，然后在多酶水解的基础上，分别采取分步加酶和同时加酶方式，对比Flavourzyme和Kojizyme这两种复合蛋白酶水解大豆分离蛋白的特点，最终确定了大豆分离蛋白用于多肽生产时的酶解工艺条件。     

酶解法制备大豆多肽的工艺研究

本实验以三种大豆制品豆饼、豆粉、豆皮为原料,选用Protease M"Amano"G酶作催化剂,探讨了分散浓度、分散时间、分散温度、水解温度、水解时间、水解pH值、酶用量等因素对酶解大豆多肽水解度(DH)、苦味和风味的影响.优选出了反应的最佳条件,并对三种原料酶解的最佳条件进行了比较,结果表明在水解度较大的情况下,大豆多肽有较好的风味并且无苦味.同时测定了大豆多肽的分子量分布和红外光谱.     

米曲霉发酵大豆多肽工艺条件研究

以大豆分离蛋白为原料,通过米曲霉的发酵生产大豆多肽,先以水解度为指标初步探索发酵工艺条件,然后通过正交试验,并以大豆多肽含量为指标确定摇瓶发酵的最佳工艺条件,即发酵液初始pH6.0,发酵培养温度28℃,培养基中大豆分离蛋白含量3%,摇瓶转速180r/min,发酵时间60h～70h,得到的大豆多肽发酵液具有良好的口感。     

风味蛋白酶和中性蛋白酶复合酶解大豆分离蛋白制备多肽的研究

为了改善大豆蛋白的功能性质,使其在食品工业中有更广泛的应用,用酶来水解大豆蛋白,可以提高大豆多肽的产率。本研究以大豆分离蛋白作为底物,配制不同浓度的大豆分离蛋白溶液,经预处理后,用风味蛋白酶、中性蛋白酶进行酶解,得出两种酶的酶解最佳条件,即大豆分离蛋白溶液质量分数为4%、风味蛋白酶和中性蛋白酶比例为3∶1,pH值为7.5、酶解温度为45℃、酶解时间为7h。在此条件下,溶液的水解度最高,经测定多肽含量为5.162%。     

双酶水解制备大豆多肽的研究

研究了双酶分步水解和双酶混合同步水解制备大豆多肽的效果,对双酶分步作用的加酶顺序以及在加第二种酶之前是否需要使第一种酶失活进行了讨论.     

Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味酶酶解大豆分离蛋白及脱苦工艺优化

以大豆分离蛋白为原料,选用Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法水解及脱苦工艺研究。以水解度和苦味分值为考察值,对酶解工艺进行优化,确定最佳条件。结果表明:Alcalase2.4L碱性内切酶最佳酶解条件为加酶量14 000 U/g、酶解温度60℃、酶解pH8.5、底物质量分数5%,酶解时间2h,最终水解度为45.34%,此时水解液苦味值为4。Flavourzyme风味蛋白酶对水解液进行二次水解的最优酶解条件为加酶量300 U/g、酶解温度55℃、酶解pH 7.0、酶解时间3 h,此条件下大豆分离蛋白水解液苦味值最低为1.2。Alcalase2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶水解大豆分离蛋白使水解度得到较大提高的同时也解决了水解液的苦味问题。     

乳酸菌发酵大豆多肽工艺条件研究

以大豆分离蛋白为原料,经乳酸菌的发酵作用生产大豆多肽,并以大豆多肽含量为评判指标,通过正交试验得到发酵的最佳工艺条件:在接种量5%,发酵液初始pH7.0,发酵培养温度40℃,培养基中大豆分离蛋白浓度3%,摇瓶转速100r/min的条件下,经过30h的发酵,发酵液中多肽含量达3.98 mg/mL.     

超声和Alcalase 酶复合处理水解大豆分离蛋白工艺研究

以大豆分离蛋白为底物,通过单因素试验和正交试验,确定超声和Alcalase 酶复合处理对大豆分离蛋白水解的最佳条件。结果表明,最佳水解条件为大豆分离蛋白质量分数5.0%、超声处理时间30min、加酶量5.0%、酶解pH8.0、酶解温度55℃、酶解时间4.0h,在此条件下,大豆分离蛋白水解度为12.21%。     

Alcalase酶解制备大豆肽工艺条件的优化

以大豆分离蛋白为原料,研究了用Alcalase碱性蛋白酶水解制备大豆肽。以蛋白水解度和蛋白水解液等电点溶解度为指标,通过单因素试验及正交试验得出最佳水解条件为：料液比1：20,酶解pH8．5,酶解温度60℃,加酶量5400U／g蛋白。此条件下,蛋白水解度为18．79％,等电点溶解度是86．32％。     

梨形毛霉蛋白酶在大豆多肽制备中的应用

本文研究了腐乳生产菌种梨形毛霉所产蛋白酶对大豆分离蛋白的降解条件,并分析了酶解产物的疏水性、分子量分布及氨基酸组成。结果表明该蛋白酶酶促降解大豆分离蛋白的最佳条件是温度45℃、反应时间5h、pH6.0、酶用量750U;在此条件下制备的大豆肽经质谱检测其分子量在1000D左右,完全符合大豆肽产品的要求;经品尝,该产品无任何苦涩味,色泽淡黄,无需脱盐处理,可直接调配成酸性蛋白肽饮料。     

酵母蛋白肽酶解制备工艺研究

利用碱性蛋白酶-Alcalase酶解酵母细胞制备酵母蛋白肽,系统研究了酶用量、pH、反应温度、反应时间等因素对短肽得率的影响,建立了总氮及氨基态氮得率与各影响因素之间的回归模型,确定了Alcalase酶解制备酵母蛋白肤的最适工艺条件为:pH8.7,水解温度50.8℃,加酶量为0.17%(以酵母量计),水解时间24h.在此条件作用下,酶解产物的总氮得率为50.17%.氨基态氮得率为32.80%.     

Alcalase蛋白酶酶解大豆蛋白制备啤酒糖浆复配液的研究

采用Alcalase蛋白酶酶解大豆蛋白,通过测定酶解产物的蛋白质回收率、水解度、隆丁(Lundin)区分以及SDS-PAGE电泳图谱分析,确定在酶解条件为酶解温度55℃、底物质量分数5%、酶量750 U/g、pH 8.0、反应时间0.5～1.0 h时所得的酶解液为浅棕色,其Lundin分布较为接近麦汁Lundin区分分布的要求,蛋白质回收率约65%,可与啤酒糖浆复配作为啤酒发酵的氮源。     

Alcalase对高沟捆蹄肌肉蛋白质水解变化规律研究

以猪后蹄肉为原料,在腌制过程添加Alcalase作为酶解剂,并通过响应曲面实验法优化酶解工艺;通过SDSPAGE电泳分析及游离氨基酸组分分析Alcalase对捆蹄蛋白质的酶解作用规律。结果表明,Alcalase在腌制温度为4~16℃时,对促进高沟捆蹄蛋白质水解及提高其感官品质有显著的促进的作用(p<0.05),过量的Alcalase(大于1.6 U/g)会导致蛋白质过度水解,不利于产品的感官品质。响应曲面法优化捆蹄加工工艺结果为:Alcalase添加量1.32 U/g、腌制温度14.2℃、腌制时间21.3 d,产品蛋白质水解指数为14.81%,感官评分92.47。另外,添加Alcalase蛋白酶后,捆蹄中高分子蛋白(≥120 ku)有明显的分解作用,并且在30~40 ku及50~70 ku处,蛋白质条带逐渐累积;Ala、Leu、Val、Tyr、Phe、Ile、Gly、His有显著的增加,而Pro、Glu含量显著降低(p<0.05)。因此,Alcalase能显著促进捆蹄中蛋白质的分解,提高产品的感官品质,可以应用于捆蹄产业的生产加工。      

Alcalase水解酪蛋白制备磷酸肽和非磷肽的研究

研究了Alcalase水解酪蛋白制备磷酸肽和非磷肽的作用条件,同时分析了酪蛋白磷酸肽(CPPs)和酪蛋白非磷肽(CNPPs)的相对分子质量分布和氨基酸组成。结果表明,Alcalase水解酪蛋白的最佳条件是:底物浓度5%,加酶量0.03mL/g蛋白质,温度60℃,pH9.0。乙醇浓度和酪蛋白的水解度(DH)对CPPs的得率和N/P(摩尔比)均有影响:当乙醇浓度为70%,DH为18%时,CPPs得率达到最高,为23.94%,N/P(摩尔比)是9.61,CNPPs得率为76.06%。CPPs和CNPPs的相对分子质量都分布在200～5000之间,其中低于700的肽含量最高,分别为61.52%和67.26%。CNPPs中疏水性氨基酸含量远高于CPPs。     

A kinetic study on sesame cake protein hydrolysis by Alcalase

In the present study, the hydrolysis of sesame cake protein was performed by Alcalase, a bacterial protease produced by Bacillus licheniformis, to investigate the reaction kinetics of sesame cake hydrolysis and to determine decay and product inhibition effects for Alcalase. The reactions were carried out for 10 min in 0.1 L of aqueous solutions containing 10, 15, 20, 25, and 30 g protein/L at various temperature and pH values. To determine decay and product inhibition effects for Alcalase, a series of inhibition experiments were conducted with the addition of various amounts of hydrolysate. The reaction kinetics was investigated by initial rate approach. The initial reaction rates were determined from the slopes of the linear models that fitted to the experimental data. The kinetic parameters, K(m) and V(max), were estimated as 41.17 g/L and 9.24 meqv/L x min. The Lineweaver-Burk plots showed that the type of inhibition for Alcalase determined as uncompetitive, and the inhibition constant, K(i), was estimated as 38.24% (hydrolysate/substrate mixture). Practical Application: Plant proteins are increasingly being used as an alternative to proteins from animal sources to perform functional roles in food formulation. Knowledge of the kinetics of the hydrolysis reaction is essential for the optimization of enzymatic protein hydrolysis and for increasing the utilization of plant proteins in food products. Therefore, in the present study, the hydrolysis of sesame cake protein was performed by Alcalase, a bacterial protease produced by B. licheniformis, to investigate the reaction kinetics of sesame cake hydrolysis and to determine decay and product inhibition effects for Alcalase.     

杏仁蛋白Alcalase水解工艺及其体外抗氧化活性的研究

为深入开发利用杏仁蛋白资源,采用Alcalase蛋白酶水解杏仁蛋白,以水解度为指标对酶解过程进行研究,在单因素试验基础上以水解度和DPPH自由基清除率为指标进行酶解正交试验.结果表明制备抗氧化能力较强的杏仁蛋白水解物的最佳条件为:pH 8.0,温度55 ℃,酶底比4%,底物浓度5%.在此条件下进行水解试验,水解度为21.02%,水解物对DPPH自由基的清除率为66.13%.     

Alcalase 2.4L催化牛骨胶原蛋白水解反应及其动力学研究

对碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解牛骨胶原蛋白的工艺以及动力学特征进行了研究。探讨底物浓度、酶量、温度、pH、时间等因素对胶原蛋白水解度的影响,研究确定了碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解牛骨胶原蛋白的最佳水解条件为:在pH8.5,60℃,底物浓度为80g/L,加酶量为40μL/g条件下水解3h,水解度可达13.5%,优于其他蛋白酶。根据所建立的pH-stat酶解体系确定了Km为1.6362mol/L,Vmax为0.3444mol/L·h,为更有效地利用胶原蛋白资源奠定了理论基础。      

酶法水解生产大豆多肽研究

本文研究了Alcalase酶对大豆蛋白的有限水解作用 ,分析了酶加量、pH值、温度、底物浓度、反应时间等因素对大豆蛋白酶水解的影响 ,确定了Alcalase蛋白酶水解大豆蛋白的较佳条件范围 ;同时研究了Flavourzyme酶对大豆多肽的水解作用 ,及对大豆多肽风味的影响 ,提出了采用Alcalase酶和Flavourzyme酶双酶法分步酶解工艺来生产低苦味大豆多肽的方法     

碱性蛋白酶Alcalase凝固豆乳过程的流变学特性变化

在Alcalase凝固豆乳过程中pH值下降程度小于0.2,SDS-PAGE电泳表明大豆蛋白质各亚基在凝固过程中均降解为8～14 Ku的肽段,说明大豆蛋白的部分降解可能是Alcalase凝固豆乳的根本原因.对Alcalase与盐类凝固剂氯化镁和氯化钙凝固豆乳的主要流变学性质比较发现,Alcalase凝固豆乳的硬度比盐类凝固剂大,凝胶强度比盐类凝固剂低,粘附性比盐类凝固剂高10倍以上,使凝胶较粘,乳清不易排出.     

Alcalase水解猪皮胶原蛋白的研究

研究了Alcalase水解猪皮制备胶原蛋白寡肽时影响水解效果的各种因素。确定了Alcalase水解猪皮的最佳水解条件：pH值8．0,水解温度60℃,酶与底物比25μL／g,底物浓度60g／L,水解时间4h。在此最佳水解条件下,猪皮的降解率可达到97.3％,水解度可达到13．1％。