一株絮凝活性细菌的分离鉴定及其絮凝活性初探

絮凝剂是海水净化处理中的常用药剂,海水微生物絮凝剂是近年来崭新的课题。本研究自渤海湾采集样品,采用稀释平板法,分离菌种,运用改进的絮凝率检测方法,筛选出一株有较高絮凝活性的细菌,经16S rDNA鉴定与Biolog检测,确定为地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）,命名为地衣芽孢杆菌dhs-36（Bacillus licheniformis dhs-36）。对该菌种培养物,发酵上清液,细胞破碎产物的絮凝活性研究显示其絮凝活性仅存在于发酵上清液中,并在菌株发酵2 d后获得最高絮凝活性。对该菌株絮凝活性的稳定性进行初步研究,发现该菌株絮凝活性易受酸碱性影响,只在pH值为6～10范围内稳定;但其絮凝活性在较宽温度范围内保持稳定。糖类、蛋白质、脂类与核酸定性反应确定该菌株产生的絮凝活性物质为蛋白质。该絮凝活性细菌絮凝活性较高,絮凝成分获得比较方便,有望未来应用于海水净化处理。     

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)FS6摇瓶发酵条件优化

[目的]对解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)FS6的摇瓶发酵工艺进行优化。[方法]通过对发酵培养基成分和发酵条件的单因素试验和正交试验,测定生防菌株FS6对人参立枯丝核菌的抑菌效果和菌体生长量,来确定其最适发酵培养基和发酵条件。[结果]最适摇瓶发酵培养基配方为葡萄糖30 g,酵母浸粉40 g,Mg SO_4·7H_2O_2 g,甘油10 m L,K_2HPO_42 g,H_2O 1000 m L;最优培养条件为接种量6%,摇瓶装液量50 m L/250m L,摇床转速160 r/min,初始p H值6.0,培养温度28℃,培养时间12 h。[结论]解淀粉芽孢杆菌FS6在最适摇瓶发酵培养基及发酵条件下,对人参立枯病菌的抑菌活性最好,为该菌株的工业化生产奠定了基础。     

一株产普鲁兰酶芽孢杆菌的筛选鉴定及发酵条件优化

从甘肃定西某淀粉加工厂附近土壤中分离得到一株产普鲁兰酶酶源菌AI-1,通过形态学、生理生化试验及16S rRNA序列鉴定并对其进行系统发育分析,鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),对其发酵培养基成分和发酵条件进行了优化。优化后的发酵培养基成分为:可溶性淀粉1.5%,酵母膏1%,蛋白胨1%,NaCl0.5%,K2HPO40.1%,MgSO4·7H2O 0.05%;最佳发酵条件为:培养温度36℃,发酵培养基初始pH 7.0,接种量8%(V/V),摇床转速150 r/min,发酵周期72 h。在此优化条件下,菌株AI-1发酵所产普鲁兰酶的酶活由最初的2.45 U/m L提高到了4.52 U/m L。     

一株产普鲁兰酶芽孢杆菌的筛选鉴定及发酵条件优化

从甘肃定西某淀粉加工厂附近土壤中分离得到一株产普鲁兰酶酶源菌AI-1,通过形态学、生理生化试验及16S rRNA序列鉴定并对其进行系统发育分析,鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),对其发酵培养基成分和发酵条件进行了优化。优化后的发酵培养基成分为:可溶性淀粉1.5%,酵母膏1%,蛋白胨1%,NaCl0.5%,K2HPO40.1%,MgSO4·7H2O 0.05%;最佳发酵条件为:培养温度36℃,发酵培养基初始pH 7.0,接种量8%(V/V),摇床转速150 r/min,发酵周期72 h。在此优化条件下,菌株AI-1发酵所产普鲁兰酶的酶活由最初的2.45 U/m L提高到了4.52 U/m L。     

海洋生境芽孢杆菌HTTAZ10-03菌株的抑菌作用

[目的]研究海洋生境芽孢杆菌HTTAZ10-03的抑菌应用潜力。[方法]通过gyr B序列同源性等分析鉴定菌株,96孔板和抑菌率法测试MIC值和抑菌谱,PCR扩增菌株2个重要生防基因,盆栽实验测定菌株对番茄叶霉病和油菜菌核病的防治效果。[结果]HTTAZ10-03菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),菌株具有与抑菌活性有关的fen D,itu C基因簇,茄链格孢病菌抑菌MIC值为2 m L/L,对番茄灰霉等8种植物病原菌抑制率74.1%~85.4%,番茄叶霉病和油菜菌核病菌的防效为62.1%~63.6%。[结论]芽孢杆菌HTTAZ10-03具有较好的杀菌剂开发潜力。     

一株产新型水溶性抗真菌化合物的海洋芽胞杆菌发酵动力学的研究

从浙江省台州市东海中筛选得到的一株对白色念珠菌有较好抑制作用的微生物,经16S r DNA鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens ZJU-2011)。采用单因素优化方法在5 L发酵罐进行分批发酵实验,得到了最佳发酵条件为:接种量为体积百分比10%,装液量为体积百分比60%,通气量500 L·h-1,转速500 r·min-1,温度28℃,发酵时间24 h。在此基础上,通过假设还原糖浓度是淀粉水解以及菌体生长和次级代谢物产生消耗的综合作用,根据培养基消耗、菌体生成量和抗真菌化合物产生与发酵时间的关系,采用Logistic方程和Luedeking-Piret方程建立底物消耗、菌体的生长和抗真菌化合物生成的动力学模型,并拟合了模型参数。结果表明,模型计算值与实验数据拟合度分别为0.978,0.99和0.90。该模型能较好地预测芽孢杆菌分批发酵生产抗真菌抗生素的动力学过程。     

产纤维素酶解淀粉芽孢杆菌固体培养条件优化

文章以解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amylolique faciens)为研究对象,在固体培养基上培养并改变其发酵条件,通过刚果红染色法,测量其透明圈直径与菌落直径,并计算其比值来比较产生的纤维素酶的酶活性,从而确定解淀粉芽孢杆菌的最适宜产酶条件。通过实验得出结论:在pH为7、35℃下培养4天的解淀粉芽孢杆菌产生透明圈与菌落的直径比值最大为5.446。由此可知,在pH为7、35℃下培养4天条件下解淀粉芽孢杆菌产酶能力最强,可获得更多的纤维素酶。     

内生解淀粉芽孢杆菌CC09可湿性粉剂的研制

通过考察载体吸附量、生物相容性、细度、润湿性和菌悬率等指标,研究了内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)CC09菌株可湿性粉剂的制备工艺。结果表明:以滑石粉为载体,SDBS和吐温60为润湿分散剂,CMC-Na为稳定剂,Vc为保护剂制备的CC09菌株可湿性粉剂(100亿活芽孢/g)符合国标要求。其30倍稀释液对小麦白粉病的防治效果与15%三唑酮可湿性粉剂相当。     

一株产絮凝剂菌株K8及其絮凝特性研究

从滨州港海域中分离到一株高效产絮菌株枯草芽孢杆菌K8,其絮凝产物发酵属于Ⅰ型发酵;发酵32 h时絮凝活性最高,对高岭土悬液的絮凝率可达86.30%,发酵上清液絮凝率达95.4%。研究结果表明,采用发酵液处理石化二沉池出水时絮凝率达84.61%,p H与温度适应范围宽,对小球藻液也有一定的絮凝沉降作用。该菌株在水处理工程尤其是石化污水处理中显示出较大的应用潜力。     

解淀粉芽孢杆菌BSK532的发酵条件优化及抑菌活性研究

通过单因素实验和响应面实验对解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) BSK532的发酵条件进行了优化。确定最佳发酵条件为：碳源淀粉浓度41.36 g·L^-1、氮源蛋白胨浓度26.13 g·L^-1、pH值7.24、装液量75 mL/500 mL,在此条件下,芽孢数达到195.33×10⁸ CFU·mL^-1,较优化前提高了94.36%;优化后发酵液的粒径分布范围为0～10μm,D₉₀为1.565μm,较优化前(粒径分布范围为0～200μm,D₉₀为95.44μm)大幅减小,减小发酵液粒径可以防止大疆T20植保无人机喷头堵塞;采用平板对峙法测定了优化前、后解淀粉芽孢杆菌BSK532发酵液对6种常见农作物病原菌的抑菌带宽度,优化后的抑菌带宽度较优化前增加了50%～60%,表明提高芽孢数可以增强抑菌作用。为解淀粉芽孢杆菌制剂的开发应用提供了一定的理论基础。     

短芽孢杆菌属絮凝剂发酵条件及絮凝效果研究

从重庆城南污水处理厂活性污泥中筛选得到一株产絮凝剂的杆菌RL-2,初步鉴定为短芽孢杆菌属Bacillusbrevis。在以葡萄糖为碳源,酵母膏+(NH4)2SO4为氮源,初始pH值7.0,培养温度30℃,搅拌速度120～150r/min的条件下,培养3d,可获得高絮凝活性的胞外生物絮凝剂。经研究发现该絮凝剂是一种对高岭土悬浊液具有高絮凝活性的生物高分子。在最佳操作条件下,对多种实际废水有明显的除浊净化效果。     

总状星珠霉絮凝剂培养及性能研究

从活性污泥中筛选出一株产絮凝剂的霉菌——总状星珠霉,该菌所产絮凝剂对高岭土的絮凝活性可达90%以上。发酵试验表明该霉菌产生絮凝剂的最佳条件为:碳源为葡萄糖,氮源为NaNO3,碳源与氮源的质量比为1∶1,生长和分泌絮凝剂的最适温度是30～34℃,该霉菌液体发酵24h絮凝活性可达到89.9%,在培养基初始pH值为3.0～10.0范围内所产絮凝剂对高岭土的絮凝活性始终保持在85%以上。絮凝剂理化性质试验表明该霉菌所产絮凝剂是一种多糖物质。实际废水处理试验表明该絮凝剂对啤酒废水和石化废水都有很好的处理效果,浊度去除率分别达到93.2%和87.4%,悬浮物去除率则分别达到81.3%和92.8%。     

胞外多糖生物絮凝剂RL-2的性能研究

从重庆城南污水处理厂活性污泥中筛选得到一株具有较高絮凝活性的菌株RL-2;根据其个体形态特征、菌落特征及生理生化实验,初步鉴定为短芽孢杆菌Bacillus brevis。发酵液絮凝活性分布测定表明：絮凝剂是在菌的对数生长期分泌到胞外的生物高分子物质;初步确定为胞外酸性多糖,多糖的基本结构单元可能包含葡萄糖,半乳糖醛酸和苷露糖等单糖;该胞外多糖絮凝剂可用乙醇和氯化十六烷基吡啶铵沉淀得以部分纯化,能溶于酸、碱溶液中但不溶于有机溶剂中,其分子量大约为286000．与无机及有机高分子絮凝剂对高岭土悬液的絮凝活性相比,性能优,用量少。     

微生物絮凝剂产生菌的筛选及对镇江古运河水的应用研究

从土壤、活性污泥等试样中筛选得到5株具有絮凝活性的菌种,其中从沉淀池活性污泥中筛选出的菌株B2絮凝活性最高。并研究了pH值、碳源量以及氮源量的变化对该菌株絮凝活性的影响。结果表明：菌株B2的最佳培养条件是pH值为7．0、葡萄糖浓度为30．0g／L、酵母膏浓度为0．25g／L。同时该菌株对镇江古运河水的絮凝活性由68．4％提高到81．6％。     

微生物絮凝剂菌株的筛选和絮凝活性影响因素的考察

本文进行了不同来源菌种的分离，得到1株有较强絮能力的菌株凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans)。以该株为研究对象，将该菌株摇床培养后对石油一厂隔油池出水、高岭土悬浊液等进行絮凝评价，探讨了培养时间、金属离子的价态、金属离子的浓度、絮凝剂投加量、pH值等因素对絮凝活性的影响。     

利用啤酒废水培养生物絮凝剂产生菌的研究

从空气和活性污泥中筛选出絮凝剂产生菌,对其进行筛选并纯化得到絮凝活性较高且稳定的菌株M3。以啤酒废水为廉价培养基,对絮凝剂产生菌M3进行培养,考察外加碳源、氮源、培养基pH值、培养时间等因素对絮凝剂产生菌絮凝效果的影响。得出了M3的最佳培养条件:直接利用啤酒废水,无需另外添加碳源和氮源,只需添加0.5%的KH2PO4,温度为30℃,培养基初始pH值为8.5,培养时间为48 h,摇床转速为160 r/min。在此条件下所产生的絮凝剂对高岭土悬液絮凝率高达93.5%。     

混合菌絮凝性能的研究

从猪场污泥中筛选一组混合菌微生物絮凝剂——（xn10＋xn9）,结果表明,该混合菌对高岭土絮凝效果良好,其絮凝率高达95%以上;且具有良好的热稳定性和pH稳定性,在废水pH值为2～8时絮凝效果良好;与其金属离子相比,Ca2＋、Al3＋、Mg2＋对其助凝作用明显。对猪场废水和碱性品红溶液有良好的去除效果,其浊度去除率和脱色率分别为83.93%9、7.26%;其絮凝活性物质主要分布在发酵液中,主要成分为非酮糖多糖,不含蛋白质。     

微生物絮凝剂产生菌的筛选及培养条件优化

从某印染废水处理系统二级沉淀池污泥中筛选得到菌株C-6,其发酵产生的生物絮凝剂絮凝活性高且稳定,对高岭土、蒙脱土、活性炭和泥浆4种悬液的絮凝率分别达95.31%、93.49%、89.89%、93.49%。经形态学鉴定,该菌种可初步确定为黑曲霉。培养基组成及发酵条件优化试验表明,以葡萄糖为碳源,硫酸铵+酵母粉+尿素为氮源,初始p H值为7.0,接种量为2%,培养温度为35℃,以150 r/min的转速振荡培养52 h,菌株质量浓度可达4.803 g/L,发酵液对高岭土悬液絮凝率增至98.61%。扫描电镜显示分散的高岭土颗粒经絮凝产生的絮体大而密实,可快速沉降。     

普鲁兰酶产生菌的筛选鉴定及其发酵条件优化与酶学性质研究

从淀粉厂附近土壤中筛选得到5株产普鲁兰酶的菌株,与实验室已有保藏菌株做活性对比,结果筛选得到的S1117产酶活性较高,根据其形态特征及16S rRNA序列分析,初步鉴定为芽孢杆菌。对其产酶条件进行了优化,确定了该菌株的最适发酵培养条件,其发酵54 h时酶活达到最大2.5 U/mL。初步研究了其酶学性质,其所产普鲁兰酶反应最适温度与pH分别为40℃,5.2;在60℃仍保持有80%以上酶活。