10-HDA微生物菌株的选育

本论文对从鲜王浆、蜂巢、蜂尸中筛选得到3株产10-HDA菌株进行了产酸性能测定.利用梯度稀释和平板涂布法在培养基上30℃培养60h,.挑单菌落30℃、160r/min摇床培养用64h,提取,HPLC和GC-MS法确定发酵液中10-HDA,结果表示QYF005产10-HAD,含量能达0.25%.     

10-羟基-2-癸烯酸在桶装小麦啤酒中的抑菌作用

10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)是一种非常重要的不饱和脂肪酸,在自然界中只能从蜂乳中得到。天然的10-HDA具有多种生物活性如抗癌性及时抗急性辐射性损伤。本研究中建立了一种从蜂乳中提取10-HDA的方法,并通过流式细胞仪和抑菌(纸片分析)实验研究了10-HDA对啤酒腐败细菌及酵母的抑菌活性,通过倍比稀释法确定了10-HDA的最低抑菌浓度。结果显示10-HDA对啤酒中常见的细菌如短乳杆菌属和足球菌属具有抑制作用,但对酵母没有抑制作用。作者开发了一种应用上面酵母菌株303和下面酵母菌株308发酵桶装小麦啤酒的新方法。啤酒在桶中进行二次发酵,酒中仍有活酵母存在,不能进行巴氏杀菌,要保持啤酒在发酵和桶装过程中洁净、不被污染是十分困难的。本实验中将10-HDA加入嫩啤酒中,提高了桶装啤酒的清洁度、微生物稳定性和啤酒的货架期,经证实10-HDA起了抗微生物剂的作用。     

生物合成10-HDA的代谢途径

本文在已有的10-HDA和其他比虫生物信息素与脂肪酸等生物合成研究的基础上，通过将10-HDA的生物合成分为起始脂肪酸、碳链长度的修饰、双键的形成，羟基的形成和10-HDA的转化等几个过程进行分析和讨论，推导得到10-HDA可能的生物合成途径。     

蜂王浆制品中10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)测量的不确定度评估

本文主要对蜂王浆制品中10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)的测量结果不确定度进行评估,找出影响测量结果不确定度的主要因素。阐述蜂王浆制品中10-羟基-2-癸烯酸(10-HDA)测定结果的不确定度评估,通过建立数学模型,分析不确定度的来源、因素及过程,对各个不确定度分量进行评估,计算合成标准不确定度和扩展不确定度。     

10-HDA对枯草芽孢杆菌的抑菌机理研究

为了确定与分析10-羟基-2-癸烯酸（10-HDA）的抑菌性能及其作用机制,采用牛津杯法,倍半稀释法进行抑菌性能测定实验。以枯草芽孢杆菌为供试菌,采用凝胶阻滞实验及原子力显微镜观察10-HDA与菌体DNA结合情况,并采用DNA琼脂糖凝胶电泳观察10-HDA作用后菌体DNA含量的变化,以及10-HDA对菌体基因组PCR的影响。结果表明,10-HDA对多种病原细菌具有明显的抑制作用,表现出广谱抗菌活性,且抑菌效果随着10-HDA浓度的增加显著提高。其中,对枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度（MIC）为0.62 mg/mL。DNA琼脂糖凝胶电泳和原子力显微镜结果显示,当10-HDA浓度达到0.62 mg/mL时,菌体中基因组DNA的合成量明显减少,而且10-HDA与细菌基因组DNA紧密结合。对基因组DNA的PCR影响实验进一步证明,当PCR体系中10-HDA的浓度达到1.0 mg/mL时,DNA的合成被完全阻碍。通过实验,我们得出10-HDA通过与细菌基因组DNA的结合,进一步阻碍DNA的合成,最终达到抑菌效果。     

从蜂王浆中提取蜂王酸的研究

目的探讨从蜂王浆中提取蜂王酸（10-HAD）的工艺。方法二次有机溶剂提取，二次调pH，用高效液相色谱法对10-HDA进行定性分析。结果蜂王浆中10-HDA的最佳提取条件为：蜂王浆水溶液pH10，加入乙醚提取杂质，再调pH2加入乙醚提取10-HDA。结论此法可从蜂王浆中高效提取10-HDA。     

蜂王浆产品中10-羟基-2-癸烯酸的稳定性比较

10-羧基-2-癸烯酸(10-HDA)是蜂王浆特有的不饱和脂肪酸,在其质量标准中特别规定了含量要求.采用纳米技术制备纳米脂质体可提高其稳定性,以包封率为评定指标,采用乙醇注入-超声法制备了10-HDA纳米脂质体,并用液相色谱测定其中的10-HDA含量,比较5种蜂王浆产品中10-HDA的含量稳定性.结果发现,10-HDA纳米脂质体包封率可达98.3％,同时其含量最为稳定,而其它4种蜂王浆产品中10-HDA含量不稳定,随着时间的延长呈下降趋势.     

发酵液中提取10-HDA的研究

10-HDA为10-羟基-2-癸烯酸（10-Hydroxy-2-Decenoic酸）,是蜂王浆中的特殊活性物质,抗菌、灭菌、强壮肌体和具有强烈抑制移植性AKR白血病、TA3乳腺癌及多种腹水型艾利虚癌等癌细胞生长的作用。蜂王浆中10-HDA的提取方法有乙醚萃取法、乙醇提取法、溶液沉淀结晶法、醇中沉淀结晶法及从发酵液中提取法等。不同浓度、不同体积的乙醇对产率及质量有影响;不同体积的反萃取剂水对产率也有影响;不同温度对结晶有影响。     

蜂王浆10-HDA提取和饮料加工技术研究

本论文研究峰王浆10-HDA饮料的加工技术。蜂王浆浓度在2％-10％，10-羟基癸烯酸(10-HDA)提取率高，蜂王浆提取液10-HDA有效成分利用率最好。蜂王浆10-HDA提取温度为75℃，pH值为5．0左右。以6000-7000r／min离心10min蜂王浆悬浮液变的透明。蜂王浆饮料的配方为蜂王浆澄清液80份，蜂蜜10份，蔗糖10份，柠檬酸0．1份，加水240份，哈蜜瓜香精适量。此饮料含10-HDA0．82mg/g。     

10-HDA对金黄色葡萄球菌的抑菌机理研究

利用倍半稀释法确定10-HDA对金黄色葡萄球菌的最小抑菌质量浓度为0.062 mg/m L。通过对金黄色葡萄球菌生长曲线、细胞膜通透性、细胞超微结构、细胞代谢、菌体蛋白表达的影响研究,探讨10-HDA对金黄色葡萄球菌的抑菌机理。结果表明10-HDA可破坏金黄色葡萄球菌细胞的完整性,使细胞膜通透性增加,胞内大量离子以及具有紫外吸收的大分子物质泄漏,细胞代谢发生紊乱。原子力显微镜结果表明,10-HDA可破坏菌体细胞结构,导致细胞表面凹陷,形成褶皱。SDS-PAGE电泳结果显示,10-HDA对金黄色葡萄球菌蛋白表达有明显影响,可抑制部分蛋白的正常表达。结论:10-HDA通过使金黄色葡萄球菌细胞膜通透性增加,破坏菌体正常形态及代谢活力,进而使细胞生长受到抑制,最终导致死亡。