费氏丙酸杆菌生物学特性及与5株益生菌拮抗性试验研究

为了评价费氏丙酸杆菌的益生特性,费氏丙酸杆菌活化后,划线和镜检观察其形态特征,然后利用体外共培养法测定费氏丙酸杆菌对3种致病菌的抑制效果,同时利用平板计数法研究费氏丙酸杆菌的耐酸性、耐胆盐和耐高温等生物学特性,以及5株益生菌拮抗性试验。结果表明,费氏丙酸杆菌对大肠杆菌和沙门氏菌没有显著的抑制作用,而对金黄色葡萄球菌的抑制效果明显（P＜0.01）;其在pH值为2.0条件下维持3 h,活菌数降低一个数量级;在胆盐含量为0.30%条件下维持6 h,存活率为18.67%;在60 ℃下处理20 min,存活率为12%,因此费氏丙酸杆菌具有一定的耐酸、耐高温能力以及很强的耐胆盐活性。除枯草芽孢杆菌与丁酸梭菌有拮抗作用外,其余菌株间均没有拮抗作用。     

一株具有拮抗作用的海洋放线菌筛选及其特性

为了探寻对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌具有拮抗作用效果的海洋微生物新菌种,作者采用平板稀释方法,经初筛与复筛从海洋淤泥中分离得到一株对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有较好拮抗作用效果的海洋微生物菌L菌株,并对该菌的生理生化特性、发酵过程参数的变化及抑菌效果进行了研究。结果表明:海洋微生物菌L菌经初步判断属放线菌,L菌适宜的发酵时间为9～10d,产生的发酵产物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有一定的拮抗作用。     

一株农用拮抗放线菌的分离与鉴定

为烟草土传病害生物防治研究提供菌株资源,采用稀释平板法分离洛阳地区烟草根际土壤样品中的优势拮抗放线菌,平板对峙培养法与抑制菌丝生长速率法测定放线菌菌株的拮抗作用,16S rDNA分析鉴定菌株种类。结果表明:从烟草根际土壤中共分离、纯化获得108个放线菌单菌落,其中22株对瓜果腐霉、烟草疫霉、尖孢镰刀菌的至少一种有拮抗作用,菌株SA74对3种病原真菌的抑菌率均大于50 %。根据形态特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析,该菌株被鉴定为金黄垂直链霉菌（Streptomyces aureoverticillatus）。      

烟草青枯菌拮抗放线菌的筛选及鉴定

为筛选出烟草青枯菌的有效拮抗菌,本研究从烟草根围土壤中分离了97株放线菌,通过平板对峙培养法筛选出抑菌圈直径均达20 mm以上的拮抗放线菌3株.根据其在鉴别培养基上的培养特征、孢子和孢子链的形态特征,生理生化特性以及16SrDNA序列分析对这3株拮抗放线菌进行鉴定.结果表明,3株拮抗放线菌都属于链霉菌属(Streptomyces),分别为粉红孢类群中的玫瑰暗黄链霉菌(S. roseofulvus Preobrazhenskaya)、绿色类群中的橄榄绿链霉菌(S. olivaceoviridis Preobrazhenskaya)和灰褐类群中的黄麻链霉菌(S. corchorusii Ahmed).其中,玫瑰暗黄链霉菌菌株对青枯劳尔氏菌的拮抗效果最好,其平均抑菌圈直径可达54.66 mm;橄榄绿链霉菌菌株的拮抗效果次之,其平均抑菌圈直径为43.20 mm;黄麻链霉菌平均抑菌圈直径为20.34 mm.     

九株谷氨酸生产菌的生物学特性研究

【目的】研究九株谷氨酸生产菌的生物学特性,为具有广域pH耐受性的谷氨酸高产菌筛选提供实验依据。【方法】考察九株菌的低pH生长、高pH产酸特性;对磺胺胍、酮基丙二酸、丙二酸和香豆素的耐受性以及发酵特性。【结果】Corynebacterium glutamicumS9114、Corynebacterium glutamicumATCC13761、Corynebacterium glutamicumT613-85均能在pH3·9下生长,而在pH10·5时S9114、Corynebacterium acetoacidophilum ATCC13870、T613-85依然能够产酸;抗性平板上具有明显生长优势的菌株如下:磺胺胍:S9114;酮基丙二酸:S9114、ATCC13870;丙二酸:ATCC13761、ATCC13870、Microbacterium ammoniaphilumATCC15354;香豆素:除ATCC13761和Corynebacterium melassecolaATCC17966,其他耐受程度相似;九株菌中产酸能力最强的是S9114,其次是T613-85。【结论】以S9114为出发菌株进行改造,确定筛选平板为含磺胺胍2%、酮基丙二酸0·25%、丙二酸1·6%、香豆素0·2%的低pH梯度（pH3·6～4·0）平板和高pH梯度平板（pH10·5～11·2）。      

拮抗菌AM6代谢产物防治烟草赤星病试验

为开发更多的生物农药,进行了球孢链霉菌AM6代谢拮抗物质防治烟草赤星病试验。采用不同的施用浓度、不同的施用次数在自然发病条件下进行田间小区防效试验。结果表明,含有AM6拮抗物质的制剂喷雾烟草叶片对烟草赤星病有较好防治效果。其防效随制剂中拮抗物质含量的增加而提高,以100倍液施用2次防效较好,田间防效为80.3%;400倍液施用1次、2次和3次的防效分别为46.9%、64 9%和69.3%。含有AM6拮抗物质的制剂对烟草无明显药害。     

放线菌对发酵过程产酱香功能菌的生物学特性研究

从酱香型白酒酒醅中分离到的30株放线菌中复筛出2株具有生物活性的菌株A2、A22,对2株放线菌代谢产物的生物学活性进行了比较研究,考察了放线菌发酵时间对其代谢生物学活性产物的影响,并且对其生物学活性物质进行了初步提取与生物活性检测。结果表明,放线菌A22、A2均能代谢产生生物学活性物质,A22代谢产物相对A2抑菌活性更强,在30℃、120 r/min摇床培养30~36 h时,代谢产物抑菌效果最强,初步结果表明此代谢产物极可能为一种非蛋白类和非肽类抗生素。     

一株海洋拮抗菌的筛选与鉴定

通过平板分离、摇瓶发酵,从样品中分离到1株对枯草芽孢杆菌、藤黄八叠球菌、大肠杆菌等指示菌具有较强拮抗作用的菌株HY4,通过菌落形态、镜检、生理生化试验和对菌株16S rRNA基因序列遗传分析对菌株进行鉴定,发现该菌株跟芽孢杆菌属（Bacillus）的多数菌株序列有99%的相似性,将该菌株命名为芽孢杆菌HY4。当培养时间为48 h时,菌株的生物量达到最大值,OD600nm为2.49,此时菌株对枯草芽孢杆菌和藤黄八叠球菌的抑菌活性也达到最高,透明圈直径分别为1.38 cm和1.13 cm,当培养至60 h时,菌株对大肠杆菌的抑菌活性也达到最大,透明圈直径为1.13 cm,之后随着培养时间的延长,抑菌活性反而逐渐降低。     

3株魏斯氏菌的分离鉴定与生物学特性研究

目的 对泡菜发酵初期魏斯氏菌进行分离鉴定,并探究其安全特性和益生特性。方法 采用平板对细菌进行分离,进行分离菌株生理生化鉴定和16S rDNA测序鉴定,检测其代谢产物毒性,抗生素敏感性,耐药基因,评价细菌的耐酸、耐胆盐、耐人工肠液、黏附能力、对胆固醇及甘油三酯的降解能力、抗氧化能力以及抑菌能力。结果 共筛选出3株魏斯氏菌,命名为融合魏斯氏菌C13、食窦魏斯氏菌G232和W212; 3株菌代谢产物无毒性,对14类21种抗生素表现出不同程度耐药,耐药基因检测C13携带四环素类耐药基因(tetM), G232和W212携带磺胺类耐药基因(sulⅡ); 3株菌能耐受pH 2～4和3.0 g/L以下的胆盐,在人工肠液中3 h后存活率超过76.80%; 3株菌的黏附能力好,疏水性为60.47%～62.69%,自凝聚率为43.76%～52.55%,共凝聚率为43.20%～61.58%;对胆固醇及甘油三酯的降解主要在前15 h;表现出一定的抗氧化能力,对1,1-二苯基-2-三硝基苦肼自由基清除率较高(清除率25.69%～58.12%),对超氧阴离子自由基清除率相对较低(10.08%～35.29%); ...     

一株拮抗O157：H7放线菌的筛选鉴定及发酵培养基

为了筛选到拮抗O157:H7的放线菌并做形态和生理生化鉴定,先采用管碟法检测抑菌能力,筛选到2株明显拮抗O157:H7的放线菌AM-8和AM-10,并鉴定为放线菌目链霉菌科链霉菌属菌种。再用单因素试验筛选到抗菌物质产量最高的碳源玉米粉和氮源蛋白胨。响应面法优化AM-8的发酵培养基,最终确定发酵培养基为:玉米粉20.10 g/L,蛋白胨2.00 g/L,K_2HPO_4 0.50 g/L,MgSO_4·7H_2O 0.50 g/L,NaCl 5.92 g/L,FeSO_4·7H_2O 0.01 g/L,CaCO_3 1.89 g/L。     

灰霉病菌拮抗放线菌的筛选鉴定及对草莓的防腐保鲜效果

为丰富草莓采后病害拮抗菌资源,以草莓灰霉病菌（Botrytis cinerea）为指示菌,采用琼脂块法对草莓根际土壤分离的78 株放线菌进行筛选,并测定拮抗效果最强的菌株T3-5的拮抗谱。根据形态学特征、生理生化特性及16S rDNA序列进行鉴定,并初步研究其无菌发酵液对贮藏草莓腐烂发生及果实品质的影响。结果表明：草莓根际土壤分离的菌株T3-5对草莓灰霉病菌具有较强拮抗作用,拮抗圈直径为22.5 mm;对3 株常见细菌和6 株果蔬采后病原真菌均具有不同程度的抑制效果。该菌株经鉴定为黄暗色链霉菌（Streptomyces xanthophaeus）。菌株无菌发酵液能够显著降低贮藏草莓腐烂率（P＜0.05）,延缓果实硬度、可溶性固形物、可滴定酸及VC的降低。研究表明拮抗链霉菌T3-5对贮藏草莓具有良好的防腐保鲜作用,在草莓采后贮藏和生物保鲜中具有潜在的应用价值。     

一株海洋源菌细菌素CAMT2生物学特性研究

本文以解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZJHD3-06发酵产生的细菌素CAMT2为研究对象,以金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、大肠杆菌、副溶血性弧菌及芽孢杆菌作为指示菌,利用牛津杯扩散法测定不同温度、p H、蛋白酶、有机溶剂对CAMT2抗菌活性的影响,并对CAMT2的乳化特性进行了研究。结果表明:CAMT2具有很好的热稳定性,在100℃处理20 min抑菌活性仍保留60%以上。p H在6¹0时抑菌活性具有很强的稳定性,但p H在2、4时抗菌活性有一定的降低,活性降低率在9.4%⁵1.9%。CAMT2对4种蛋白酶有不同程度的敏感性,对二甲基甲酰胺和二氯甲烷两种有机溶剂有较高的耐受力。细菌素CAMT2对供试菌均有抑菌作用,表现出一定的抗菌谱,CAMT2所具有的这些特性为其进一步开发与应用奠定了一定的理论基础。      

腊肉拮抗菌分离及抗真菌脂肽特性分析

从传统腊肉中筛选拮抗菌株,纯化鉴定新型抗菌物质并对其抗菌特性研究,为抗菌脂肽在食品防腐中的应用提供理论依据.采用抑菌圈法筛选拮抗菌株;通过酸沉淀、硅胶柱层析和半制备反相高效液相色谱分离纯化抗菌脂肽;通过傅里叶红外光谱、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对脂肽鉴定.结果 表明,筛选得到12株拮抗细菌,其中菌株XLP27对革...     

烟草青枯病拮抗菌的筛选及发酵条件试验

为了筛选对烟草青枯病有拮抗作用的生防菌株,有效防治该病害,从青枯病发病较重田块的健康烟草根系周围土壤中取样,采用点接法筛选出6株对烟草青枯病有较强拮抗作用的菌株,其抑菌圈直径均8 mm,其中菌株XC4抑菌活性较强且拮抗效果稳定。通过单因素试验进行了发酵条件的初步研究,结果表明,当发酵时间48 h,发酵温度30℃,p H值7,接种量2%,转速190 r/min,碳源为牛肉膏,氮源为胰蛋白胨时,菌株XC4发酵效果最好。发酵条件经初步优化,菌株XC4对青枯病菌的拮抗效果由原来的抑菌圈直径12.5 mm增至21.5 mm,比优化前提高了72%。     

一株野生口蘑的鉴定及生物学特性

对1 株采自青海的野生口蘑菌株进行形态学观察和真菌种属（internally transcribed spacer,ITS）鉴定,并研究其菌丝生长阶段的最适母种培养基、碳源、氮源、无机盐、生长因子、pH 值和温度。结果表明,形态学观察及ITS 鉴定该菌株为中国美味蘑菇,属担子菌纲,伞菌目,蘑菇科,蘑菇属。最佳母种培养基配方为马铃薯葡萄糖琼脂（potato dextrose agar,PDA）综合培养基配方,即马铃薯200 g,葡萄糖20 g,磷酸二氢钾2 g,硫酸镁1 g,琼脂20 g,水1 000 mL;最适碳源为葡萄糖和麦芽糖;不添加氮源的条件下更利于其菌丝生长;在PDA 培养基中添加不同无机盐和生长因子对菌丝长速影响不大;最适温度为25 ℃;最适pH 值为7。     

6种农药和2种拮抗菌对葡萄灰霉病的防治试验

对目前生产上常用的6种农药和实验室分离的2株拮抗菌进行了室内和田间葡萄灰霉病防治效果试验,以明确目前常用药剂和2株拮抗菌的防效,为葡萄灰霉病的防治提供科学的依据。结果发现:这些药剂和拮抗菌对葡萄灰霉病的防效测定结果基本一致,对葡萄灰霉病均表现一定程度的防病效果,其中,速克灵、施佳乐、多抗霉素和百泰效果最好,宁南霉素、F2和BJ-6次之,武夷菌素的效果相对较差。     

哈密瓜拮抗菌筛选及拮抗效果的研究

通过拮抗菌对哈密瓜主要采后病害的生物防治研究,探讨拮抗茵对果蔬采后病害的生物防治作用及其机制,确定最佳的生物防治形式、建立哈密瓜采后生物防治的微生物学方法.     

两株益生菌生物学特性的研究

研究了两株益生菌植物乳杆菌ST-Ⅲ和干酪乳杆菌BD-Ⅱ的生物学特性，特别是对其在模拟消化环境下的耐受性进行了研究。结果表明，ST-Ⅲ和BD-Ⅱ是性能优良的两株益生菌。     

一株副溶血性弧菌拮抗菌的筛选、鉴定及其抑菌物质特性研究

副溶血性弧菌是一种常见的食源性病原菌和水产致病菌。该研究通过琼脂扩散法从芦潮港海泥中筛选对副溶血性弧菌具有较强抑制作用的菌株,对其进行形态观察和16S rDNA分子鉴定,并对其所产抑菌物质进行抑菌谱和理化特性研究。结果表明,筛选出的枯草芽胞杆菌H5对副溶血性弧菌ATCC 17802具有强烈的抑制作用,抑菌圈直径达（32.05±0.10）mm,其产生的抑菌物质具有广谱抑菌活性,对革兰氏阳性菌的抑制作用大于革兰氏阴性菌。通过理化性质研究发现,H5所产抑菌物质在121℃处理30 min和较宽的pH值范围内（2～12）可保持良好的稳定性,并具有良好的紫外线稳定性和有机溶剂稳定性,且Mn²⁺和Zn²⁺可提高其抑菌活性而Ca²⁺和Mg²⁺可抑制其活性。H5所产抑菌物质经过蛋白酶处理后活性下降,证明其是一种抗菌肽。综上所述,枯草芽胞杆菌H5所产抗菌肽不仅具有良好的稳定性,而且抑菌谱广、抑菌活性强,在食品工业和医药行业具有广阔的开发和应用前景。     

5株植物乳杆菌生物学特性及安全性评价

通过对不同分离源的5株植物乳杆菌进行产酸、抑菌、耐酸耐胆盐、耐药性、溶血性、产生物胺能力测定,结果显示:5株菌的产酸及抑菌能力较强,差异显著（p<0.05）;耐酸性能较强,2 h的存活率在85.67%⁹8.00%,PBIL1-002与其他各菌株之间差异显著（p<0.05）;耐胆盐能力相对较弱,2 h的存活率在21.17%⁵1.20%,除PBIL1-002与PBIL1-006外,其余各菌株间差异显著（p<0.05）;5株菌均对链霉素和万古霉素耐药,PBIL1-009和PBIL1-018对复方新诺明耐药;PBIL1-006和PBIL1-009对庆大霉素耐药;菌株不具溶血性能;定性检测菌株产生物胺能力显示,PBIL1-009代谢产生精胺,PBIL1-018代谢产生精胺和酪胺。说明不同分离源的菌株特性及安全性有一定差异,生产应用时需选择生物学特性佳且无安全隐患的菌株。