小麦粉加工车间芽孢杆菌的分布及其防治

芽孢杆菌在自然界中分布广泛，且部分芽孢杆菌易产生胞外毒素。小麦粉面团中易存在芽孢杆菌芽孢，因其耐高温特性，导致在正常烹饪环节中不易被完全消杀，增加了食用健康风险。本研究对某高校食堂小麦粉加工车间进行了全链条跟踪，采集相关环境样本，并采用16S rDNA扩增测序的方法评估污染，显示芽孢杆菌为主要污染源，且以蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、枯草芽孢杆菌(B.subtilis)、贝莱斯芽孢杆菌(B.velezensis)为主；研究发现芽孢杆菌主要来源于小麦粉原料。通过单独及联合使用天然防腐剂乳酸链球菌素、ε-聚赖氨酸盐酸盐(ε-PLH),探究了乳酸连球菌素和ε-PLH对于该菌群抑制效果。结果显示ε-PLH对芽孢杆菌及其在面粉中的抑菌效果强于乳酸连球菌素。乳酸连球菌素不仅不能抑制B.velezensis,反而促进其生长。两种抑菌剂的联合使用显示出协同抑菌效果；其中当乳酸连球菌素和ε-PLH质量分数同时大于0.75 g/kg或者乳酸链球菌素质量分数大于1.25 g/kg且ε-PLH质量分数大于0.5 g/kg时，对小麦粉的抑菌率都能达到100%。该研究为建立基于时空菌群分布的芽孢杆菌污染全链条...     

浓香型大曲中蛋白酶产生细菌的分离鉴定

从浓香型大曲中分离纯化得到5株产蛋白酶细菌,对其进行了生化分析,结合《伯杰细菌鉴定手册》对这5株细菌的鉴定。鉴定结果为：A苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）;B枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）;C蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）;D多粘芽孢杆菌（Bacillus polymyxa）;E枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。对产酶能力最强的C菌株用Biolog微生物自动分析系统进行鉴定,鉴定结果与生化鉴定结果相符合。     

β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株筛选、鉴定及酶基因克隆和序列分析

目的:筛选和鉴定β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株并对酶基因进行克隆和序列分析。方法:利用透明圈法从食堂锅炉排水口污泥中分离筛选菌株,并采用形态和生理生化特征鉴定菌株。通过PCR方法扩增酶基因,将其克隆于T-载体,用Sanger双脱氧链终止法测定序列。结果:分离筛选的β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株呈长杆状、革兰氏染色可变、兼性厌氧、产芽孢(次端生、孢囊膨大)。生理生化试验结果表明:该菌株与浸麻芽孢杆菌(Bacillusmacerans)最为相近,命名为BacillusspA3。PCR扩增获得的酶基因全长734bp,其中开放阅读框架为717bp,编码238个氨基酸。经Blast分析,该序列与多粘芽孢杆菌(B.polymyxa)和浸麻类芽孢杆菌(B.macer-ans)相似性较高,分别为98%和82%。结论:成功分离了β-1,3-1,4-葡聚糖酶酶源菌株BacillusspA3,酶基因序列与多粘芽孢杆菌和浸麻类芽孢杆菌有较高的同源性。     

胀桶番茄酱中腐败微生物的分离及鉴定

为了研究胀桶番茄酱中腐败微生物种类,采用梯度稀释法、选择性培养法和划线纯化法对番茄酱中主要的腐败微生物进行分离纯化,利用形态学特征观察、16S rDNA和ITS序列分析,并结合生理生化性质对分离菌株进行鉴定。结果显示编号为B001、B002、B003、B004的4株细菌有1株厚壁类芽孢杆菌(Paenibacillus cineris)、2株蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)和1株蕈状芽孢杆菌(Bacillus mycoides)。标号为F001的1株酵母为奥默毕赤酵母(Pichia kudriavzevil)。因此,胀桶番茄酱中的主要腐败微生物为厚壁类芽孢杆菌、蜡样芽胞杆菌、蕈状芽孢杆菌和奥默毕赤酵母。     

蒲公英不同溶剂提取物体外抑菌效果的研究

采用不同溶剂对蒲公英中的有效成分进行提取,利用平板打孔法对黑曲霉菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、蜡样芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、多黏芽孢杆菌等进行体外抑菌实验,研究不同溶剂提取物的抑菌能力,并测定其抑菌直径、最小抑菌浓度和最小杀菌浓度。结果表明,2种提取物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、藤黄微球菌、多黏芽孢杆菌等几种细菌均有不同程度的抑制作用,且表现出蒲公英的醇提液的抑菌能力大于蒲公英水提液。     

不同生境中芽孢杆菌的分离鉴定及药敏性检测

为了给农业生产(发酵饲料、堆肥、污水处理)及微生态调节剂的制备提供前期理论依据和优良的微生物资源,本研究以土壤、饲料和肥料为材料,分离筛选出22株优良的芽孢杆菌菌株,按《伯杰氏细菌学鉴定手册》和芽孢杆菌特有的生理生化指标对其进行了初步鉴定,结果显示,其中的T-1为多粘类芽孢杆菌(Bacillu spaenibacillus polymyxa);T-2为桥石短芽孢杆菌(Bacillus choshinensis);T-6为软骨酸类芽孢杆菌(Bacillus paenibacilluschondroitinus);T-8为解淀粉类芽孢杆菌(Bacillus paenibacillus amyloyticus);S-4为饲料类芽孢杆菌(Bacilluspaenibacillus pabuli);S-6为哥本类芽孢杆菌(Bacillus paenibacillus kobensis)。其余的16株芽孢杆菌还有待于进一步鉴定。在此基础上,采用纸片琼脂扩散法测定了已鉴定出的6株芽孢杆菌对常用的12大类35种抗生素的药敏性。结果显示,分离自土壤、饲料及堆肥中的芽孢杆菌均对喹诺酮类、氨基糖甙类、大环内酯类和糖肽类抗菌素表现出敏感性,大部分对多肽类抗菌素表现出耐受性,其他抗菌素则在不同芽孢杆菌菌株间表现出差异性。     

Biolog GEN Ⅲ微孔板在烟草青枯病、黑胫病生防细菌鉴定中的应用

采用Biolog全自动微生物鉴定系统的Biolog GEN III微孔板对24株烟草青枯、黑胫病未知生防细菌进行了鉴定。结果表明,鉴定准确率为100%,其中解淀粉芽孢杆菌12株(Bacillus amyloliquefaciens)、饲料类芽孢杆菌3株(Paenibacillus pabuli)、枯草芽孢杆菌2株(Bacillus subtilis)、萎缩芽孢杆菌2株(Bacillus atrophaeus)、地衣芽孢杆菌2株(Bacillus licheniformis)、短小芽孢杆菌1株(Bacillus pumilus)、亨氏普罗威登斯菌1株(Providencia heimbachae)。     

餐饮食品中蜡样芽孢杆菌的实时荧光PCR检测方法研究

文章研究开发了一种可在18 h内完成餐饮食品中蜡样芽孢杆菌检验的方法。本研究采用胰酪胨大豆多黏菌素肉汤培养基培养蜡样芽孢杆菌,通过热裂解法提取菌液DNA,运用实时荧光PCR法检测样液中的蜡样芽孢杆菌基因成分,建立了完整系统的餐饮食品中蜡样芽孢杆菌的检测方法,方法的检出限达0.01 ng/μL的蜡样芽孢杆菌DNA,整个检测过程在18 h内完成。文章将方法应用于市场售卖餐饮食品中蜡样芽孢杆菌的筛查检测,结果表明,在抽样检验的315份餐饮食品中有25份样品(25/315,检出率为7.93%)中检测出蜡样芽孢杆菌特异性基因成分。该方法具有检测时间短、效率高,一次PCR反应可同时检测90份样本,方法适合于餐饮食品等食品中蜡样芽孢杆菌的高通量筛查检测。     

酿造环境中细菌的筛选及代谢产物研究

研究酿造环境中细菌组成,并进一步筛选出10株产风味物质明显的细菌,通过菌种形态特征、生理生化鉴定、16s rDNA测序分析,1#菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);2#、5#、6#、8#、9#菌株为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans);3#菌株为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis);4#菌株为多粘类芽孢杆菌(Bacillus polymyxa);7#、10#菌株为环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)。分析这10株细菌的固态培养代谢产物,能够产生多种芝麻香典型呈味物质。     

凉茶中腐败微生物的分离纯化及初步鉴定的研究

将在凉茶中培养出的可疑微生物进行分离纯化和生理生化鉴定,初步判定导致凉茶腐败的主要微生物为多黏芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌。     

芽孢杆菌细菌素的研究进展及应用

芽孢杆菌种类多,分布广,是动植物微生态的优势菌之一。由于其具有形成芽孢(内生孢子)的能力,因而芽孢杆菌对外界有害因子抗性较强。此外,芽孢杆菌可以产生大量的抗菌物质,如核糖体合成的细菌素和次级代谢产物等。细菌素作为核糖体合成的天然抑菌产物,具有安全、高效、特异性强等特点,可以作为抗生素的一种有效代替产物来解决耐药性细菌的产生、增殖和传播。本文概括了目前产细菌素芽孢杆菌的种类及芽孢杆菌细菌素的分类,阐述了芽孢杆菌细菌素的抑菌机制及其在食品加工、生物防治以及医疗领域等方面的应用,最后对其未来发展方向进行了展望,旨在为细菌素的进一步开发研究及应用提供基础科研数据。     

重组海带面产品中腐败微生物的分离纯化及种类鉴定

以新型重组海带面产品为研究对象,对其贮藏过程中的腐败微生物进行了分离、纯化,并通过菌落形态观察、生理生化初步鉴别、VITEK微生物全自动系统分析对其种类进行了鉴定。结果表明,导致重组海带面产品腐败的微生物为产芽孢菌,分离到的6株菌分别为：短芽孢杆菌（Brevibacillus choshinensis）、枝芽孢杆菌（Virgibacillus proomii）、溶淀粉芽孢杆菌（Paenibacillus amylolyticus）、环状芽孢杆菌（Bacillus circulans）、凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans）和缓慢芽孢杆菌（Bacillus lentus）。     

虾酱源芽孢杆菌的筛选及其益生特性

从市售农家制作传统虾酱中筛选分离5株芽孢杆菌，经鉴定后命名为解淀粉芽孢杆菌Y11、贝莱斯芽孢杆菌Y12、枯草芽孢杆菌Y13、沙福芽孢杆菌Y32和蜡样芽孢杆菌BI6Y。5株菌都可在10%的盐质量分数下正常生长，具有不同产蛋白酶和脂肪酶的能力以及抑菌特性。其中，蜡样芽孢杆菌BI6Y具有β溶血性，对氯霉素、万古霉素、诺氟沙星不敏感，不适合作为益生菌。其它4株芽孢杆菌具有γ溶血性，对氯霉素不敏感，自聚集率在25%~35%之间，可耐受酸和胆盐；分泌表面活性素surfactin；人工胃肠液处理后的存活率多数集中在50%~70%之间，枯草芽孢杆菌Y13在人工胃液(pH 2.0)的存活率最高为95.3%，沙福芽孢杆菌Y32在人工肠液中的存活率最高为85.1%；其菌体、无细胞提取液、细胞内容物分别具有不同的抗氧化活性，其中无细胞提取液可同时清除1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和羟自由基，清除率在40%~60%之间。研究结果表明:除蜡样芽孢杆菌BI6Y外，解淀粉芽孢杆菌Y11、贝莱斯芽孢杆菌Y12、枯草芽孢杆菌Y13、沙福芽孢杆菌Y32具有作为益生菌的潜力。研究结果为基于芽孢杆菌的益生菌产品开发提供了一定理论依据。     

短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus）基因鉴定及畜血Hb降解技术

从多年被畜禽血液污染的土样中分离筛选出一株降解Hb能力强的自然菌株,并对其进行连续5代定向诱变.利用PCR扩增法和Neighbor-joining方法测定和分析了诱变菌种16S rDNA序列,对筛选出的自然菌株及诱变菌株进行了鉴定,为短小芽孢杆菌(B.pumilus);二阶导数红外光谱法探测到其分子结构具有短小芽孢杆菌(B.pumilus)典型分子结构特征;SDS-PAGE凝胶电泳中发现短小芽孢杆菌(B.pumilus)产蛋白酶对Hb降解的断裂位点发生了变化.对Hb降解产物及产蛋白酶活力的测定结果表明:经连续5代诱变的短小芽孢杆菌(B.pumilus)对Hb降解能力比筛选出的自然菌株强,其蛋白酶活力比自然菌株提高了近3倍,Hb降解产物中的可溶性蛋白质质量分数、游离氨基酸质量浓度分别从3.69%、14.4 mg/dL 提高到4.12%、24.6 mg/dL.     

富硒纳豆芽孢杆菌发酵鹰嘴豆风味物质和活性成分研究

为了评价富硒纳豆芽孢杆菌发酵鹰嘴豆风味和活性成分,本文主要研究了富硒纳豆芽孢杆菌固态和液态发酵鹰嘴豆所产生的挥发性物质、游离氨基酸及其他活性物质组成和含量。结果表明,纳豆芽孢杆菌液态发酵鹰嘴豆（L-SD1）的主要挥发性成分是2 -甲基丁酸和3 -甲基丁酸,纳豆芽孢杆菌固态发酵鹰嘴豆（G-SD1）、富硒纳豆芽孢杆菌液态发酵（L-Se-SD1）及固态发酵鹰嘴豆（G-Se-SD1）的最主要挥发性成分均为2,5-二甲基吡嗪。液态发酵比固态发酵所产生的挥发性物质种类较多,富硒对主要挥发性物质的种类和相对含量影响较大（p<0.05）。采用氨基酸自动分析仪法检测出L-SD1、L-Se-SD1、G-SD1和G-Se-SD1中均含有16种氨基酸,包括7种人体必需氨基酸和9种其他氨基酸,且苦味氨基酸含量均最高。不同发酵方式对氨基酸种类影响无差异;液态发酵比固态发酵产生的总游离氨基酸含量高。富硒纳豆芽孢杆菌液态发酵鹰嘴豆总黄酮含量为(1.91±0.02）mg/mL,维生素K2含量为(755.7±0.11）μg/100g,卵磷脂含量为(2.41±0.03）%,相比于未富硒组,分别提高了80.2%,81.6%,10.6%。本研究有利于对鹰嘴豆纳豆的营养成分和风味物质进行评估。     

低糖腌制韭菜根中优势腐败菌的分离与鉴定

以胀袋变质的低糖腌制韭菜根为材料,对贮藏过程中的主要腐败微生物进行分离筛选与鉴定。利用纯培养法共筛选出菌落形态差别较明显的优势细菌菌株4株,经形态学观察、革兰氏染色、生理生化鉴定及16S rRNA序列分析鉴定确定了各菌株的种属。结果发现,腌韭菜根中的主要致腐菌由1株蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、1株巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、1株解淀粉芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus)和1株莴苣不动杆菌(Acinetobacter lactucae)构成。     

高盐酱腌菜坯致腐微生物的分离鉴定

对 6种高盐酱菜坯进行微生物分离培养 ,分离 3株G-杆菌 6株G+芽孢杆菌和 1株酵母菌 ,根据芽孢杆菌的生理生化试验结果 ,初步鉴定其分别为坚强芽孢杆菌 (B .firmus)、嗜热脂肪芽孢杆菌 (B .stearothermophilus)和巨大芽孢杆菌 (B .megaterium)。     

利用16S rRNA序列鉴定分离自芽菜中的芽孢杆菌

从宜宾芽菜中分离优势菌群,选取4株芽孢杆菌,分别为B1、B2、B3、B4.对4株菌的16S rRNA基因经PCR扩增测序,将测序结果同该属内菌株的16S rRNA序列作多序列比较,并建立芽孢杆菌属的系统发育树.结合细菌形态学生理生化特性鉴定结果,结果表明菌株B1、B3为枯草芽孢杆菌,菌株B2为解淀粉芽孢杆菌,菌株B4为乙酰微小杆菌.     

琼脂扩散法定量测定多黏菌素对霉菌的抑菌活力

本文研究抗菌肽抑制霉菌的活力定量测定方法,选用多黏菌素B和产黄青霉作为研究对象,采用琼脂扩散法优化指示菌浓度、抗菌肽添加量、培养时间等影响活力定量测定的条件,进一步以黑曲霉为指示菌进行方法验证;通过建立抗菌肽浓度对数值与抑菌圈直径之间的线性方程进行抗菌肽抑菌活力的计算。研究结果显示,琼脂扩散法测定多黏菌素B抑制霉菌活力的最佳条件:90 mm平板添加PDA培养基15 mL,指示菌孢子浓度(1～5)×106个/m L,多黏菌素B添加量100μL,4℃预扩散时间6～10 h,28℃培养时间24h。以黑曲霉为指示菌进行方法验证时发现方法重复性好、精密度高。在此条件下,多黏菌素B对产黄青霉和黑曲霉的抑菌活性分别为524.81 U/mg和605.76 U/mg。该研究为抗菌肽在试验和生产过程中的活力测定提供参考和依据。     

植物乳杆菌B_(28)产细菌素的发酵条件研究

从来自保加利亚传统燕麦饮料中分离得到的植物乳杆菌B28出发,以腊样芽胞杆菌Baeillus cereus为指示菌,研究了植物乳杆菌B28生长特性以及产生细菌素的最佳时期;不同氮源、碳源和磷酸盐对细菌素抑菌活性性影响以及不同浓度硫酸铵溶液对细菌素的盐析效果。结果表明,植物乳杆菌B28在37℃条件下培养,14~16 h,生长进入稳定期;产生细菌素最佳发酵时间为24 h;70%的硫酸酸铵是适植物乳杆菌细菌素的盐析质量分数为。与对照培养基对比,植物乳杆菌B28的生长情况是酵母提取物>大豆蛋白>胰蛋白胨、蛋白胨、肉膏;乳糖>D-果糖、蔗糖、D-麦芽糖>D-木糖;磷酸盐对植物乳杆菌B28的生长影响不大。并得到了产生细菌素的最佳培养基配方。