时间分辨荧光免疫层析法定量检测谷物中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮残留

建立了一种快速定量检测谷物产品中黄曲霉毒素(Aflatoxin B1,AFB1)和玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)的时间分辨荧光免疫层析方法。采用时间分辨荧光微球标记黄曲霉毒素B1抗体和玉米赤霉烯酮抗体,研究了如p H值、标记抗体浓度、荧光探针使用量、检测T线包被原浓度、质控C线羊抗鼠Ig G浓度、样品前处理方法等因素对时间分辨荧光免疫层析方法灵敏度的影响。结果表明:AFB1的检出限为0.80 ng/mL,线性范围(IC20~IC80)为0.81~5.67 ng/mL,半抑制浓度(IC50)为2.15 ng/mL。在ZEN检出限为4.58 ng/mL,线性范围(IC20~IC80)为4.76~85.60 ng/mL,半抑制浓度(IC50)为20.19 ng/mL。方法特异性良好,与T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、伏马毒素、赭曲霉毒素A多种真菌毒素交叉率小于10%。通过选择玉米、麦麸、大豆、小麦进行添加回收试验,AFB1的添加回收率在97.1%~108.7%之间,ZEN的添加回收率在92.8%~109.1%之间,相对标准偏差小于15%。选取经HPLC-MS/MS检测过的FAPAS标准质控样本进行测试,检测结果与其结果一致。在实际产品检测对比中,与市售胶体金免疫层析卡,ELISA试剂盒的检测结果基本一致。本方法操作简单快速、可定量,检测过程约25 min,适用于谷物样品中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的现场快速筛。     

赭曲霉毒素A时间分辨荧光侧流层析试纸条的研究

目的 构建一种基于时间分辨荧光纳米微球的赭曲霉毒素A (ochratoxin A, OTA)侧流层析试纸条。方法 基于免疫层析原理, 以时间分辨荧光纳米微球为信号探针, 降低非特异性荧光的干扰, 提高检测灵敏度, 并通过优化样品提取液和样品稀释液, 进一步提高现场检测OTA的灵敏度和准确性。结果 OTA在1~50 μg/kg范围内, T线和C线荧光强度的比值与OTA浓度的对数值具有良好的线性关系, 相关系数r2为0.9981~0.9998。不同基质中OTA的检出限(limit of detection, LOD)和定量限(limit of quantitation, LOQ)分别为0.401 μg/kg~0.614 μg/kg和0.970 μg/kg~1.617 μg/kg, 加标回收率为89.53%~118.37%, 相对标准偏差(relative standard deviations, RSDs)小于12% (n=3), 且与呕吐毒素、伏马菌素B1、黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和T-2毒素的交叉反应率均小于5%, 特异性良好。基于荧光定量快速检测技术平台OTA侧流层析试纸条可在8 min内快速准确地定量检测出待测样本中OTA的含量。结论 本研究所制备的时间分辨荧光侧流层析试纸条可实现玉米、小麦和饲料中OTA的快速定量检测, 并具有成本低、灵敏度高、操作简便、准确高、重复性好、特异性好的优点, 可满足国内外OTA检测的技术要求, 为真菌毒素快检技术的发展提供技术支撑。     

量子点微球荧光免疫层析定量检测水产、畜禽肉组织中恩诺沙星

目的 建立一种快速定量检测水产、畜禽肉组织中恩诺沙星的新方法学。方法 以量子点荧光微球为新型标记探针,通过参数优化,制备获得量子点荧光微球免疫层析试纸条;进一步以T/C比值法建立定量检测恩诺沙星的新方法。结果 在最优条件下,该试纸条检测缓冲液中恩诺沙星半数抑制浓度为1.035 ng/mL,最低检测限为0.125 ng/mL;检测水产、畜禽肉组织中恩诺沙星的定量检测范围为8.75~560 μg/kg,半数抑制浓度为72.45 μg/kg,加标回收实验显示该方法定量检测组织样本中恩诺沙星的回收率在83.03~124%之间,变异系数小于15%,检测15个实际含有恩诺沙星的水产以及畜禽肉组织样本,其结果与LC/MS/MS方法检测结果高度一致;此外,加速保存实验结果显示该试纸条在室温下可保存一年。结论 本研究以量子点荧光微球为新型标记探针,构建了高灵敏定量检测恩诺沙星的新方法,实现了水产、畜禽肉组织中恩诺沙星的简单、快速、定量分析。     

同时检测玉米中黄曲霉毒素B1和赭曲霉毒素A的时间分辨荧光免疫层析试纸条的研制

研究制备了一种可同时快速定量检测黄曲霉毒素B1 (aflatoxin B1,AFB1)和赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的二联时间分辨荧光免疫层析试纸条.采用铕系时间分辨荧光微球分别标记AFB1和OTA单克隆抗体,优化荧光微球活化pH值、标记的抗体浓度、荧光探针使用量、检测线包被原浓度、质控线羊抗鼠Ig...     

利用荧光免疫层析卡测定黄曲霉毒素M1的研究

将量子点与抗黄曲霉毒素M1(AFM1)的单克隆抗体偶联,以AFM1-BSA偶联物包被于NC膜作为检测线,山羊抗鼠二抗包被于NC膜上作为质控线,构建了直接竞争检测AFM1的荧光定量免疫层析检测卡体系,在0.156μg/L~1.25μg/L范围内能够准确定量黄曲霉毒素B1,灵敏度达到0.156μg/L。     

量子点标记免疫层析试纸条快速检测谷物中赭曲霉毒素A

目的:根据竞争抑制免疫层析原理,构建一种基于量子点标记的免疫层析试纸条用于检测谷物中赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)的残留量。方法:通过活化酯法将羧基功能化的量子点(Quantum dot,QD)与赭曲霉毒素A多克隆抗体(Antibody,Ab)偶联制备量子点抗体偶联物(QD-Ab);通过分别添加不同量的QD-Ab和工作液,优化量子点标记免疫层析试纸条的工作条件;通过商品化试剂盒验证该方法的有效性。结果:当QD与Ab的摩尔比为1:10时,QD-Ab荧光特性最佳;在QD-Ab和工作液添加量分别为1、10 μL时,量子点标记免疫层析试纸条结果最佳;量子点标记免疫层析试纸条的检测限为0.5 μg/L,谷物样品中的检测限为5 μg/kg,整个检测过程不超过10 min;量子点标记免疫层析试纸条特异性良好且具有有效性。结论:该方法操作简便、检测快速、结果准确灵敏,易于判断,可以满足谷物中赭曲霉毒素A残留量现场快速检测的要求。     

免疫亲和层析净化荧光光度法快速检测鸡饲料中黄曲霉毒素

基于食品中采用免疫亲和层析净化荧光光度法测定黄曲霉毒素含量,建立了免疫亲和层析净化荧光光度法测定鸡饲料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量。该方法的检出限2.0 μg/kg,相对标准偏差低于10%,平均回收率85%~90%。     

时间分辨荧光免疫层析试纸条在油料饼粕黄曲霉毒素B_1检测中的应用

采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品瓶建立的检测技术。时间分辨荧光速测仪可内置标准曲线,直接输出检测结果。对6种油料饼粕做黄曲霉毒素B1添加回收率实验,回收率在70%~120%之间,批间、批内变异系数〈15%。在实际样品的检测中,时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术与液相色谱-串联质谱法相比,检测结果相对误差〈15%。时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术测定快速、准确,技术稳定、可靠,设备经济、小型,适用于大批量油料饼粕样品的快速检测和风险评估。     

无需衍生化样品处理快速测定食品中 黄曲霉毒素B1

建立无衍生-超高效液相色谱法测定食品中的黄曲霉毒素B1的快速检测方法。样品经甲醇-水提取,免疫亲和柱净化,C18色谱柱分离、大体积流通池荧光检测器检测。黄曲霉毒素B1在0.10 ng/ml~5.00 ng/ml范围内与峰面积呈良好线性关系,R2>0.999,在6种基质,0.50 μg/kg~2.00 μg/kg范围内加标,平均回收率在71.7%~111.2%之间,相对标准偏差(RSD)为3.8%~11.5%,检出限(LOD)为0.05 μg/kg。本方法灵敏、快速、无衍生、结果准确,能够满足食品中黄曲霉毒素B1残留的检测需求。     

食用油中黄曲霉毒素B1免疫亲和检测技术研究

采用国内自主研制的黄曲霉毒素专用荧光快速检测仪及配套的免疫亲和试剂盒建立一套快速的免疫亲和检测方法,对食用油中的黄曲霉毒素B1进行测定。用10 mL石油醚和15 mL70%甲醇对5.0 g样品进行初步提取,过滤后,萃取液用免疫亲和微柱纯化富集,洗脱液放入黄曲霉毒素专用荧光快速检测仪中自动读取结果。实验结果表明,该方法的直接读数的线性范围为0.3-25μg/kg,R2=0.999 5,方法的平均回收率为87.11%,相对标准偏差为1.44%-6.33%,最低定量浓度为0.3μg/kg;应用于食用油样品AFB1检测,方便快速,安全准确,测定全过程所需时间可以控制在30 m in左右,检测成本低于其他仪器方法。     

荧光腈纶纱线的荧光性能

针对荧光腈纶纱线经过普通工艺染色后荧光效果大大降低的问题,以荧光腈纶纱线为主要研究对象,分析染色工艺因素、三原色染料的单色染色以及荧光增白剂的加入对其荧光效果的影响。通过荧光反射率测试,确定纱线最佳染色工艺为染色温度85 ℃,染色时间75 min,染色pH值3.5;同时通过荧光光谱分析,研究纱线染色工艺与荧光性能的关系。试验结果表明,通过优化染色工艺并筛选合适的染料能获得具有较好荧光效果的有色荧光腈纶纱线,加入荧光增白剂后有助于进一步提高荧光黄10GFF和艳红X-5GN染色纱线的荧光效果。     

纸张相对荧光强度的测定

将荧光粉(稀土铕有机配合物)与纸浆混合抄造出荧光纸张,并分别对荧光粉和荧光纸张的相对荧光强度进行定量测定,探讨了纸张相对荧光强度的定量测定技术。     

蓝色荧光喷墨油墨稳定性的研究

为了获得稳定性良好的荧光喷墨油墨,使用AZ-5391树脂和蓝色荧光粉制备荧光喷墨油墨样品,考察了不同含量的树脂和荧光粉对油墨稳定性的影响。通过控制变量法,得到二者分别在不同含量下对油墨稳定性的影响。研究结果表明,树脂和荧光粉的含量对荧光喷墨油墨稳定性有影响,荧光粉含量为0.4%,树脂含量为12%时,喷墨油墨的发光强度、黏度、表面张力均未出现骤增或突降现象,荧光喷墨油墨体系的稳定性较好。     

香豆素类荧光增白剂的研究进展

本文探讨了荧光增白剂的作用机理,概述了合成香豆素类荧光增白剂的经典方法以及几种最新研究成果。认为功能性的香豆类化合物具有巨大的应用潜力,如何简便、高效、绿色地制备此类物质是该领域的研究热点之一。     

荧光增白剂的荧光特性

详细地介绍了荧光增白剂的荧光特性及造纸中常见荧光增白剂的结构和荧光特性的关系 ;另外介绍了纸张中荧光增白剂含量的测定     

Optimized cassettes for fluorescent protein tagging in Saccharomyces cerevisiae

Green fluorescent protein (GFP) has become an increasingly popular protein tag for determining protein localization and abundance. With the availability of GFP variants with altered fluorescence spectra, as well as GFP homologues from other organisms, multi-colour fluorescence with protein tags is now possible, as is measuring protein interactions using fluorescence resonance energy transfer (FRET). We have created a set of yeast tagging vectors containing codon-optimized variants of GFP, CFP (cyan), YFP (yellow), and Sapphire (a UV-excitable GFP). These codon-optimized tags are twice as detectable as unoptimized tags. We have also created a tagging vector containing the monomeric DsRed construct tdimer2, which is up to 15-fold more detectable than tags currently in use. These tags significantly improve the detection limits for live-cell fluorescence imaging in yeast, and provide sufficient distinguishable fluorophores for four-colour imaging.     

荧光纳米探针在农药残留检测中的研究进展

免疫分析技术因具有快速、简便和低成本等特点在农药残留监测中发挥着重要的作用。基于纳米材料增敏的荧光免疫传感器因灵敏度高、特异性强等优点,近年来逐渐成为研究热点。本文总结近年来荧光免疫传感器的相关研究进展,针对不同种类荧光纳米探针建立的免疫传感器在农药残留检测中的研究进行综述,重点阐述酶基荧光免疫探针、荧光纳米材料免疫探针、纳米酶基免疫探针和纳米支架型免疫探针的原理、特点及应用现状,并展望荧光免疫传感器在农药检测中的应用前景,旨在为荧光纳米探针在食品农药残留检测中的发展、应用提供参考。     

荧光光谱法鉴别白色纤维

探讨法庭科学研究中白色纤维的检测方法。白色纤维都经荧光增白剂加工处理,采用荧光分光光度计测定白色纤维,根据荧光光谱的峰数、峰位、峰形和峰强来鉴别荧光增白剂的类别。它是法庭科学实验中分析白色纤维简便而迅速的方法。     

半纤维素荧光探针的构建与应用

该研究将绿色荧光蛋白（GFP）同木聚糖酶底物结合域（XBD）结合,构建了能够特异性结合半纤维素的荧光探针,经激光扫描共聚焦显微镜比较分析GFP和GFP-XBD荧光融合蛋白对玉米秸秆的结合差异,发现GFP-XBD荧光融合蛋白溶液处理玉米秸秆半纤维素所在区域荧光信号强度明显高于其他样品,表明所构建的半纤维素荧光探针可以与细胞壁中半纤维素特异性结合。荧光测定结果显示,GFP和GFP-XBD的蛋白含量与荧光强度之间有着良好的线性关系（R12 = 0.994 4,R22 = 0.995 1）,成功地表征了玉米秸秆预处理过程中半纤维素的变化规律,最终确定最佳的预处理温度为130 ℃。     

含荧光增白剂织物的三波段法配色

由于荧光增白剂的特殊光学性能,使得含有荧光增白剂的织物配色困难。通过分析荧光增白剂的反射率曲线,应用发射区荧光染料的反射率计算公式,研究了荧光增白剂的配色方法,提出了荧光增白剂计算机配色的三波段法———即对荧光增白剂的配色分发射区、激发区和无影响区分别进行。通过20个拼色试样的染色实验和计算,证明本方法适用于荧光增白剂的配色,且方法简便。最大色差为3.94。