烟草拮抗内生细菌的筛选与防病促生长效果

为了获得能促进烟草生长和防治黑胫病的稳定菌株,通过常规方法从烟草茎、叶中分离到478株内生细菌,其中65株能拮抗烟草黑胫病菌,占13.60%。菌株YN201408、YN201442、YN201448和YN201458对烟草疫霉的抑菌率分别为63.85%、60.82%、64.72%和76.07%,用1.0×107 cfu/mL拮抗菌液浸烟苗根系30 min,移栽后浇灌1次,在温室盆栽试验中控病效果分别为68.24%、65.47%、69.12和41.40%。YN201448对烟草种子萌芽率和烟草的生长都有促进作用,烟草的发芽率、第5~6真叶期苗高和地上部鲜重分别高于清水对照10.95%、29.31%和67.24%。依据菌体形态、生理生化特征和16S rDNA序列,YN201408、YN201442和YN201448鉴定为解淀粉芽孢杆菌,YN201458为铜绿假单胞菌。YN201448因良好的促生长和控病效果而具有继续开发应用的潜力。     

烟草内生促生细菌的筛选及在漂浮育苗中的应用效果

通过培养皿发芽试验,从127株烟草内生细菌中初步筛选出4株能提高烟草种子发芽率、根长、根体积的内生细菌。对这4个菌株进行了漂浮育苗试验复筛,发现它们对烟苗的生长具有明显促进作用。其中促生作用最好的wy2菌株使烟苗茎直径增加了33.3%,根长增加了49.2%,与对照相比差异显著。通过16S rDNA序列同源性分析将wy2菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。     

一株烟草花叶病毒生防细菌的鉴定及代谢物活性研究

从烟田土样中分离到1株对TMV有拮抗作用的细菌By33,通过形态观察、生理生化试验及16SrDNA同源性序列分析,鉴定该菌为解淀粉芽孢杆菌。通过对By33代谢产物对TMV抑制作用测定发现,其代谢物质对温度敏感,80℃处理30min,丧失大部分活性,遇酸沉淀,碱性条件下稳定,对蛋白酶不敏感。     

一株拮抗储粮真菌的细菌菌株鉴定和初步研究

在粮库仓储玉米中分离到一株强烈拮抗储粮真菌的细菌,初步研究表明该菌株对储粮中的主要产毒真菌如黄曲霉菌、赭曲霉菌、三线镰刀菌等都具有强烈的拮抗作用。利用生理、生化等常规技术并结合16S rDNA分子鉴定方法,最终确定该菌株为一株解淀粉芽孢杆菌,命名为Bacillus amyloliquefaciens ASAG1。进一步确定了ASAG1菌株的摇瓶发酵最适培养基、发酵条件,并对发酵液中,活性抑菌物质的性质进行了初步研究和纯化。该研究的开展为进一步明确活性抑菌组分提供了借鉴,同时也为利用生物技术防控粮食中的产毒真菌提供了一个新思路。     

枯草芽孢杆菌SH7 抑菌蛋白的分离纯化及对烟草青枯病菌的抑制作用

采用硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow 离子交换层析、Sephadex G-75 凝胶层析及聚丙烯凝胶电泳,从 枯草芽孢杆菌SH7 代谢物中分离纯化出一种相对分子质量为33.6 kD 的蛋白,该活性物质具有淀粉酶活力,对烟草青枯病菌 具有一定的抑制作用。     

拮抗细菌AR03在烟草根部及根际土壤中的定殖与鉴定

以抗利福平为标记,采用浇灌根基部接种的方法测定AR03菌株在烟草植株根际的定殖。结果表明,在灭菌土条件下,AR03经人工引入可以有效的定殖于烟草根际土壤和根部,并在一定时间内可维持相当的数量,在根际土壤和根部的定殖动态趋势是先升后降;它们在根部的定殖力均比根际土壤中强。依据传统形态学、生理生化特征及16s rDNA基因序列,菌株AR03为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。     

堆积醅中耐高温细菌的分离与鉴定

从江苏双沟酒业股份有限公司堆积醅中筛选得到7株耐高温细菌。形态特征观察、生理生化特性测定结果结合16S rDNA序列同源性分析以及部分基因特异性序列分析,结果表明,7株菌株中3株为地衣芽孢杆菌,3株为枯草芽孢杆菌,1株解淀粉芽孢杆菌。     

一株海洋源菌细菌素CAMT2生物学特性研究

本文以解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）ZJHD3-06发酵产生的细菌素CAMT2为研究对象,以金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、大肠杆菌、副溶血性弧菌及芽孢杆菌作为指示菌,利用牛津杯扩散法测定不同温度、p H、蛋白酶、有机溶剂对CAMT2抗菌活性的影响,并对CAMT2的乳化特性进行了研究。结果表明:CAMT2具有很好的热稳定性,在100℃处理20 min抑菌活性仍保留60%以上。p H在6¹0时抑菌活性具有很强的稳定性,但p H在2、4时抗菌活性有一定的降低,活性降低率在9.4%⁵1.9%。CAMT2对4种蛋白酶有不同程度的敏感性,对二甲基甲酰胺和二氯甲烷两种有机溶剂有较高的耐受力。细菌素CAMT2对供试菌均有抑菌作用,表现出一定的抗菌谱,CAMT2所具有的这些特性为其进一步开发与应用奠定了一定的理论基础。      

解淀粉芽孢杆菌YP6对三种贝壳粉的促磷研究

研究了一株从贵州磷矿植物根际分离的溶磷菌Bacillus amyloliquefaciens YP6(YP6)的促生性能及其在贝壳粉和土壤溶磷中的作用。结果表明,菌株YP6具有较好的促生作用,并且经YP6发酵贝壳粉(牡蛎粉,蛤蜊粉和生蚝粉)、土壤和贝壳粉的混合物在第7天样品中可溶磷质量浓度分别为44.9、39.2、40.3、86.4、73.1、74.8 mg/L。说明YP6对土壤和3种贝壳粉均具有显著的溶磷作用。     

高产四甲基吡嗪细菌的筛选鉴定及应用研究

从宋河中高温大曲中筛选到1株产吡嗪类微生物,利用发酵培养基对该菌株进行发酵,气相色谱-质谱联用对发酵液成分进行分析,气相色谱对发酵液中四甲基吡嗪进行定量分析得出该菌株四甲基吡嗪含量高达25 mg/L,经形态学和分子生物学鉴定该菌株为Bacillus amyloliquefaciens（解淀粉芽孢杆菌）。该菌株应用于芝麻香白酒堆积过程能明显提升芝麻香白酒的焦香,提升芝麻香型白酒质量。     

生防菌解淀粉芽孢杆菌抗菌蛋白的研究进展

生防解淀粉芽孢杆菌具有强烈抑制真菌和细菌的能力,在果蔬采后病害防治方面具有巨大的应用潜力。该文对解淀粉芽孢杆菌产生的抗菌蛋白、蛋白的分离纯化、抑菌机理和生防应用等方面进行了综述,并对其在果蔬采后病害防治应用前景进行了展望。     

人参根腐病拮抗菌的筛选、鉴定及其抑菌活性

目的：从人参根际土壤中筛选出拮抗人参根腐病的菌株,初步研究其抑菌作用。方法：采用平板稀释法从人参根际土壤中分离获得菌株,以人参根腐病菌为靶标菌采用平板对峙法筛选出拮抗菌;通过形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列分析对筛选出的拮抗菌进行鉴定;检测拮抗菌无菌发酵液对根腐病菌菌丝生长、孢子萌发的影响,同时测定拮抗菌的抑菌谱。结果：分离获得一株对人参根腐病原菌拮抗作用较强的菌株HB-3,经鉴定菌株HB-3为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。菌株无菌发酵液对人参根腐病菌菌丝生长和孢子萌发均有显著抑制作用;菌株HB-3的抑菌谱较广,对根腐病菌、疫霉病菌、锈腐病菌、菌核病菌、灰霉病菌均有一定的抑菌活性。结论：筛选得到一株解淀粉芽孢杆菌HB-3,能显著抑制人参根腐病菌的生长,对人参根腐病有较强的生物防治效果。     

解淀粉芽孢杆菌施用方式对烟株根际土壤真菌群落的影响

通过大田试验和ITS扩增子测序技术,研究了解淀粉芽孢杆菌不同施用方式[兑水灌根（DS）、拌土围根（BT）、米糠+拌土围根（MK+BT）]对烟株根际土壤真菌群落的影响,旨在为解淀粉芽孢杆菌的科学施用提供理论基础。结果表明,BT和MK+BT均可显著提高烟株根际土壤真菌群落OTU数量及Sobs、Shannon、Chao1指数,对烟株根际土壤真菌群落结构具有显著影响,提高了土壤中子囊菌门和担子菌门的相对丰度,促使土壤中毛壳属（Chaetomium）、木霉属（Trichoderma）和赤霉菌属（Gibberella）等一些有益微生物比例上升。综合来看,在改善根际土壤真菌群落的作用中,MK+BT > BT > DS。     

一株防霉微生物的筛选及其产物性质初探

霉菌污染是粮食产后损失的重要原因,其产生的毒素可能引起严重的公共卫生问题。本试验从土壤中分离得到一株具有抑霉性能的菌株,经Biolog微生物自动分析系统鉴定、小鼠急毒试验,并对其代谢产物的理化性质初步分析。结果表明,菌株CG1.0062为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）;离心后的上清液对青霉有稳定的抑制能力,发酵天数、多倍稀释、80 ℃加热、pH调整、蛋白酶K处理均显著影响抑霉活力;抑霉代谢产物为胞外产物,推断是蛋白质类物质。     

内生拮抗细菌Itb57和Itb295菌株发酵条件初探

为了更好地利用内生拮抗细菌Itb57和Itb295菌株对烟草疫霉菌的抑制作用,利用不同的培养基以及各培养基不同的pH、时间、温度和通气量对菌株生长及其抗菌物质产生的适宜单因素培养条件进行了初步探讨。研究发现,培养基种类、pH、时间、温度和通气量均对菌株的生长及抗菌物质的分泌有一定的影响。结果表明,以花生饼为培养基,其pH为7.0、温度为2～28℃、培养时间为48～60h、并尽量增大通气量,为2个菌株的适宜单因素发酵条件。     

烟草青枯病生防菌YH-22抗病机制的初步研究

通过菌株生态定殖以及抗病物质分析,初步探究解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）YH-22抗青枯病（茄科雷尔氏菌所致）的机制。采用利福平抗性诱导,获得抗400 μg/mL的抗性菌株以利于定殖研究。盆栽试验结果表明,YH-22先在烟草根际土壤定殖,然后依次进入根部、茎部。对YH-22菌株发酵上清液进行理化性质分析,发现抗茄科雷尔氏菌活性物质不溶于氯仿和乙酸乙酯,能溶于甲醇,具有一定的耐热性,能耐受胃蛋白酶和紫外线,具有排油和使液滴坍塌的特性。综上所述,生防菌YH-22在烟草根际土壤、根、茎均具有一定的定殖能力,其抗菌物质可能为蛋白质和脂肽的混合物。     

猕猴桃广谱拮抗内生菌分离鉴定及其对樱桃圣女果采后的保鲜作用

筛选具有广谱抑菌效果的内生菌并研究其发酵液对樱桃圣女果采后保鲜效果的影响。采用研磨法从健康猕猴桃的根、茎、叶和果实中分离纯化了18株内生菌,通过平板对峙法选出强活性菌株MR-1,并对其进行菌体、菌落形态的观察、生理生化测定及16S rRNA测序分析,进行菌种鉴定。进一步研究该活性菌株对8种常见致病菌的抑制效果以及樱桃圣女果主要病害菌的抑制作用。结果表明,菌株MR-1对采后致病菌拮抗效果较强,初步鉴定其为解淀粉芽孢杆菌,其对8种植物病原菌均有较强的拮抗作用,对链格孢、灰葡萄孢、辣椒炭疽病菌3种圣女果主要病害菌表现出较强的抑制作用,经内生菌MR-1发酵滤液处理的樱桃圣女果保鲜效果最好,其次为复合果蔬保鲜剂。储藏第8 d,与空白对照组相比,其腐烂直径分别下降了50.6%、50.6%及44.9%。解淀粉芽孢杆菌MR-1次级代谢产物丰富,其在果蔬保鲜中有较好的应用前景。     

产β-葡聚糖酶淀粉液化芽孢杆菌的选育

通过对一株淀粉液化芽孢杆菌进行紫外和^60Co逐级诱变，使该菌株产β-葡聚糖酶酶活从80U／mL提高到105U／mL；对突变株进行多次单菌落分离及传代，对其传代稳定性的研究表明：该菌株产酶性能稳定；在5L发酵罐中突变株的产酶水平比摇瓶要高，可达120U／mL，产酶周期比摇瓶缩短了15h．