酶联免疫法检测婴幼儿配方奶粉中的维生素B_(12)

建立酶联免疫法检测婴幼儿配方奶粉中维生素B_(12)的分析方法,该方法线性相关系数大于0.996,范围在3~243μg/kg。奶粉样本经60%甲醇-水提取,再做1︰4稀释,通过酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定样本中维生素B_(12)。加标浓度为20μg/kg,奶粉中维生素B_(12)的回收率在95%~118%;加标浓度0,3,6,20和50μg/kg,样本的加标回收率在87%~102%;方法检出限为3μg/kg;与高效液相色谱法检测结果的相对标准偏差小于10%。方法操作简便,准确度和灵敏度高,可适用于婴幼儿配方奶粉中维生素B_(12)的检测。     

婴幼儿配方乳粉中维生素B_6的检测方法研究

本文对维生素B_6的测定标准GB5009.154-2016《食品安全国家标准食品中维生素B_6的测定》中的第一法HPLC法进行优化,并对优化后的方法进行相应的方法学验证。     

婴幼儿乳粉中维生素B_(12)检测的实验室间比对结果分析

通过婴幼儿乳粉中维生素B_(12)检测的实验室间比对,提高实验室对婴幼儿食品和乳粉中维生素B_(12)的检测能力。利用莱士曼氏乳杆菌对维生素B_(12)的特异性和灵敏性,定量测定试样C00076中维生素B_(12)的含量,并通过多种质量控制措施对测定结果进行分析评价。结果表明,本实验室检测结果为1.7μg/100 g,广州市食品检验所检测结果为1.7μg/100 g,再现性标准差为0。实验室间比对实验结果为满意,表明本实验室婴幼儿食品和乳粉中维生素B_(12)的测定能力良好,并对微生物方法提出改进建议,为今后维生素B_(12)的测定提供一定的参考。     

婴幼儿配方乳粉中VB_(12)的微量测定

目的:建立婴幼儿配方乳粉中VB12的快速微量检测方法。方法:样品加水复原后,95℃水浴提取30 min;0.2 ng/m L标准品贮备液混合0.5%的海藻糖无菌过滤分装后真空冷冻冻干,并随后制备成系列标准曲线浓度;VB12测定培养基无菌过滤后以1/200的比例加入2.0 MCF的菌种储备液;随后向一次性八连小管中加入150μL VB12测定培养基及样品和标准品,密封条件下37℃培养22~24 h,然后采用酶标仪读值。在建立的方法基础上分别做重复性实验和加标回收实验。结果:采用该方法建立的VB12的微量测定法线性R达到0.9993,重复性测试RSD在1.51%~5.39%,测量效果好,回收率在93.6%~106%内,试验灵敏度高。结论:建立了婴幼儿配方乳粉中VB12的快速微量检测方法,且该方法简化了检测步骤,缩短了检测周期,摒弃了GB5413.14-2010和商品化维生素检测试剂盒的缺点,结合两者优点,具有明显优势,适合在基层实验室推广。     

检测器串联法测定婴幼儿配方乳粉中多种B族维生素

建立了准确、灵敏的婴幼儿配方乳粉中维生素B2、B3和B6的液相色谱同时测定方法。前处理中运用等电点法去除蛋白质干扰,在流动相中添加辛烷磺酸钠离子对试剂并对其pH值进行优化,通过梯度洗脱程序,实现了多组分的分离。采用二极管阵列检测器(DAD)和荧光检测器(FLD)串联双检测器定性和多通道定量。结果表明,目标物检出限在0.05～1.0 mg/kg,在各自浓度范围内线性良好,线性相关系数均大于0.999,加标回收率在92.5%～106.4%范围内,相对标准偏差为0.84%～1.45%。用于实际样品的检测,结果满意。     

3种前处理-HPLC法测定婴幼儿配方食品中维生素B1

分别采用国标法(GB 5009.84-2016)、酸解法和等电点法处理试样,用高效液相色谱-荧光检测(HPLCFLD)法测定婴幼儿配方乳粉和婴幼儿谷类辅助食品中的维生素B1。结果表明,维生素B1在3.036~303.6 ng/mL范围内线性良好,相关系数R^2>0.999。3种方法的回收率和相对标准偏差(RSD,n=6)均符合要求。其中,国标法和酸解法的RSD值相对较小,等电点法的RSD值偏大。试样经国标法、酸解法处理测得维生素B1含量与标签一致,少数试样经等电点法处理测得维生素B1含量明显偏低。酸解法相较于国标法,省去了耗时最长的酶解步骤,仍获得良好回收率。可见,酸解法前处理简单,耗时短,结果准确度高,重现性好,适用于批量检测,总体优于国标法和等电点法。     

免疫亲和柱净化/色谱技术测定婴幼儿配方乳粉中V_(B12)

建立了婴幼儿配方乳粉中VB12的超高效液相色谱-串联质谱和超高效液相色谱测定方法。样品采用pH=4.0的醋酸钠溶液提取,经免疫亲和柱净化,采用Waters BEH C18色谱柱分离,液相法采用0.03 mol/L的磷酸缓冲盐(pH=3.5)和乙腈为流动相进行等度洗脱,紫外检测器波长为361 nm。质谱法以0.1%的甲酸水和甲醇为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾-正离子模式多反应监测进行定性和定量分析,外标法定量。VB12在10~500μg/L的质量浓度范围内线性关系良好,VB12的检出限均为0.5μg/kg,定量限均为1.5μg/kg,液相方法回收率为90.2%~98.3%,相对标准偏差为1.4%~2.5%,液相色谱-质谱法回收率为89.3%~95.7%,精密度在1.9%~3.1%。该方法简单、灵敏度高、分析时间短、定量准确,适用于婴儿乳粉中VB12的测定。     

HPLC法测定婴幼儿配方乳粉中羧甲基赖氨酸

乳由于热损伤而发生美拉德反应,产生羧甲基赖氨酸(CML)。研究显示,CML与糖尿病、动脉粥样硬化、人体细胞老化等均呈正相关。本文建立了HPLC方法对婴幼儿乳粉中羧甲基赖氨酸的测定方法。样品经预处理,采用高效液相色谱仪(HPLC)进行测定,色谱柱为C18柱,柱温为35℃,流动相为甲醇和醋酸钠缓冲液(p H 6.50,0.048 mol/L)(96∶4,体积比),流速为0.8 m L/min,荧光检测器,激发波长340 nm,发射波长455 nm,外标法定量。结果显示,CML在0.2μg/m L~35.0μg/m L范围内呈良好线性关系,相关系数(r)为0.999 1。最低检出浓度为0.16μg/m L。选择市售2种品牌奶粉进行加标回收试验,回收率分别为92%和107%。     

同时测定婴幼儿乳粉中维生素B_2、维生素B_3、维生素B_6的方法

本文建立了一种同时测定婴幼儿乳粉中维生素B_2、B_3和B_6的高效液相色谱法。前处理中运用等电点法去除蛋白质干扰,在流动相中添加辛烷磺酸钠离子对试剂,并对其pH进行优化,采用二极管阵列检测器(DAD),通过梯度洗脱程序,实现了多组分的分离。结果表明,目标物在各自浓度范围内线性良好,线性相关系数均大于0.999,加标回收率在92.48%~104.12%范围内,相对标准偏差为0.45%~2.16%。用于实际样品的检测,结果满意。     

婴幼儿配方乳粉中强化维生素工艺的研究

一前言自从国务院1980年以国发[80]262号文批转了轻工、粮食、商业三部《关于解决婴幼儿食品问题的报告》以来,婴幼儿食品得到了迅速发展,除全国有29个儿童食口厂生产儿童食品外,还有近50家乳品厂生产婴幼儿配方乳粉,到1990年全国婴幼儿配方乳粉的年产量已达25000T。这些配方乳粉的营养素比较全面。几乎所有的配方乳粉中都强化了维生素。维生素分为脂溶性和水溶性两大类,前得包括维生素A、D、E、K;后者有B_1(又称硫胺素)、     

婴幼儿配方乳粉中维生素K1的检测

研究了高效液相色谱法检测婴幼儿配方乳粉中维生素K1的关键技术。该方法利用脂肪酶降解试样中的不饱和脂肪酸,经碱皂化,采用正己烷提取,饱和氯化钠(含酚酞溶液)水洗至中性后,再进行浓缩处理,最后用甲醇进行复溶。以甲醇(含冰醋酸、氯化锌和无水乙酸钠)为流动相,通过反相C18色谱柱分离,锌粉还原柱柱后衍生,荧光检测器检测,外标法定量。实验结果表明:维生素K1在0.2~5μg/m L范围内线性关系良好(r≥0.999);添加浓度在5~100μg/100 g时,平均回收率为90%~110%;对三个不同含量的样品进行6次独立测定,其相对标准偏差均小于5%;最低检出限为1μg/100 g。该方法操作简单,结果准确,重复性好,可为企业质量控制和政府监管提供有力的技术支撑。     

微孔板法检测婴幼儿配方乳粉中维生素B12的含量

目的 建立用微孔板检测婴幼儿配方乳粉中维生素B12的方法。方法 基于微生物原理的检测方法, 缩小样品的培养体积。样品经提取后, 分装到96孔细胞培养板中, 在培养基中加入0.05%的菌悬液, 混匀后分配到含有样品和标准品的微孔中, 培养后直接用酶标仪测定吸光度值。结果 本方法标准曲线相关系数0.9987, 加标回收实验回收率在92.7%~98.7%之间, 重复性实验相对标准偏差在1.03%~1.73%之间, 6种不同含量的样品同时用GB 5413.14-2010方法和本方法检测维生素B12, 检测结果无显著性差异。结论 该方法快速, 操作简单, 稳定性高, 检测成本低, 可大批量样品同时检测, 适合测定婴幼儿配方乳粉中维生素B12的含量。     

微生物法测定婴幼儿乳粉中V_(B12)的优化研究

为解决传统微生物法测定婴幼儿乳粉中V_(B12)的含量试验过程操作繁琐、易受外部因素影响、方法重复性和准确度差等问题,该研究在GB 5413.14—2010的基础上,将菌株储备液分装于菌株保存管中,—70 ℃冻存备用,并确定该批次菌株试验中适宜菌浓度和培养时间。结合95 ℃水浴直接提取样品的优化方法进行准确度和重复性试验。结果表明,该批次菌株70%浓度、50 μL接种量、培养20 h以上的试验方式,在V_(B12)含量0.01～0.1 ng范围内,标准曲线线性关系优于国标方法,R~2值可达到0.99以上;优化方法和国标方法所测结果都与标准样品的标示值相符,且相对于国标方法结果更准确,RSD为3.1%;重复性试验的RSD分别为3.1%、2.6%、3.2%、4.8%和3.2%。该方法操作简便、结果准确、重复性好,能克服传统微生物法的缺陷与不足,为V_(B12)检测方法的改进提供参考。     

婴幼儿配方食品和乳粉中维生素C的测定

目的建立一种前处理简单、仪器条件稳定、准确高效的婴幼儿配方食品和乳粉中维生素C的检测方法。方法用含有三(2-羧乙基)膦(TCEP)的三氯乙酸(TCA)对样品中的维生素C进行提取,C18柱色谱分离,流动相为含TCEP与癸胺作为离子对试剂和pH 5.4的醋酸钠的混合水溶液,然后在紫外检测器265 nm处进行检测。结果本方法的相对标准偏差(n=6)在0.36%~3.2%之间,平均回收率为88.5%~97.9%,线性相关系数r~2大于0.9999。结论本方法实验前处理简单,干扰因素少;仪器条件稳定,灵敏度高,重复性好;适合婴幼儿配方食品和乳粉复杂基质样品的测定。     

身材矮小与维生素B_(12)

小艳这孩子长得特别可爱,不仅家长和亲属都喜欢她,左邻右舍的人也对她赞不绝口。美中不足的是,她比同年龄的儿童长得矮小。为这事,她的父母挺着急,抱着小艳到医院去看医生。一名医生详细询问了小艳的情况后,又对小艳进行了认真的身体检查,结果发现:这个小女孩子患了生长发育迟缓症,而她发育迟缓的主要原因是其体内维生素B_(12)的含量明显低于正常儿童。 医务人员的研究表明,当婴儿     

微孔板式微生物法测定婴幼儿配方乳粉中泛酸含量

目的：通过对国标微生物法的改进,采用微孔板的方法对婴幼儿配方乳粉中泛酸的含量进行测定研究。方法：采用国标微生物法的改进方法-微孔板法,将合适浓度的植物乳杆菌液接种至含有试样液与培养液的无菌微孔板中,培养一定时间后测定吸光度值,根据泛酸含量与吸光度值的标准曲线计算出试样中泛酸的含量。通过精密度实验、准确度实验、加标回收实验对此方法进行评价。 结果：实验室所采用微孔板式微生物法的标准曲线线性良好,相关系数r=0.9965,精密度实验的相对标准偏差RSD为1.90%-5.32,准确度实验结果表明质控样品的泛酸含量各平行检测值均在定量值范围内,且平均值为6.91mg/100g,测定值结果间RSD为1.08%,回收率为89.7%-108.2%,说明方法精密度较高,对样品检测结果准确性较高,方法的系统误差小。结论: 采用的国标物法改进的微孔板式微生物法操作简便、结果准确、能够降低工作量,提高工作效率,能够应用于实验室对婴幼儿配方乳粉中泛酸含量的测定。     

微生物法测定婴幼儿乳粉中维生素B12含量的不确定度评定

目的建立微生物法测定婴幼儿乳粉中维生素B₁₂含量的不确定评定方法。方法依据JJF1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》及GB 5413.14—2010《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中维生素B₁₂的测定》分析微生物法测定婴幼儿乳粉中维生素B₁₂含量过程中产生的各测量不确定度分量,计算测量结果的合成标准不确定度和扩展不确定度。结果当样品中维生素B₁₂含量为3.97μg/100 g时,其扩展不确定度为0.53μg/100 g(k=2)。结论标准溶液配制和标准曲线拟合计算待测溶液含量产生的不确定度对检测结果影响较大。     

HPLC法测定婴幼儿配方奶粉中维生素C

建立婴幼儿配方奶粉中Vc的高效液相色谱测定法.方法采用C18(5μm,4.6mm×250mmi.d)反相色谱柱,流速1.0 mL/min;柱温30℃;流动相:v(甲醇):v(6.8 g/L KH2PO4水溶液,用盐酸调pH2.3)=1:99;进样量5 μL;检测波长215 nm.方法的检出限50μg/g,线性范围20～200 μ/mL,加标回收率80.4～86.2%,相对标准偏差为2.90%.该法具有样品预处理简单、灵敏度高、分析时间短等优点,可用于婴幼儿配方奶粉中Vc的直接测定.     

微生物法测定婴幼儿配方乳粉中的泛酸含量

目的采用微生物法测定5种市售婴幼儿配方乳粉中的泛酸含量,探讨测定过程中的关键步骤、主要影响因素及容易出现的问题。方法利用泛酸标准工作液制作泛酸标准曲线。将乳粉样品进行水解处理得到样品溶液。向试管中分别加入等体积的培养基及不同体积的样品溶液,稀释至10 m L,得到样品待测液。样品待测液和泛酸标准曲线溶液灭菌后,加入植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum,L.plantarum)ATCC 8014菌悬液进行培养,将培养物混匀后测其吸光度值,根据标准曲线计算出对应的泛酸含量,并进行方法的重复性和加标回收率实验。结果在0?50 ng/m L范围内,泛酸标准曲线的线性关系良好,相关系数r2为0.9982。标准对照品(standard reference material,SRM)1849a中的泛酸含量为(6807?93)?g/100 g,与其标签标示值[(6820?190)?g/100 g]相符;泛酸加标实验回收率在94.20%?102.40%之间,RSD在1.82%?4.63%之间,分析效果较好。结论在对市售婴幼儿配方乳粉的检测中发现,泛酸含量均符合要求,但有的样品中泛酸含量高于标示值。     

同位素内标稀释液质法测定婴幼儿配方乳粉中维生素K1

建立一种测定婴幼儿配方食品中维生素K1的同位素内标稀释超高效液相色谱-质谱准确定性定量方法。样品经脂肪酶酶解,碱液皂化,正己烷提取,浓缩后用甲醇复溶,以甲醇和甲酸水作为流动相进行梯度洗脱,在BEH C18色谱柱上进行分离,电喷雾电离（ESI）-三重四级杆质谱正离子MRM方式检测,以维生素K₁-D₇同位素内标稀释法准确定量。在5～500μg/L质量浓度范围内维生素K₁线性关系好,线性相关系数为0.9998,该方法检出限为1 ng/g,定量限为2 ng/g,不同加标水平平均回收率在88.0%～102.5%之间,变异系数为1.75%～5.26%（n=6）。该方法快速、准确、灵敏,适用于婴幼儿配方食品的测定。