夏枯草水溶性多糖体外抗氧化活性研究

目的研究夏枯草水溶性多糖乙醇分级组分的抗氧化活性。方法采用水提醇沉法得到夏枯草水溶性粗多糖,再经不同体积分数(20%、30%、40%、50%、60%、70%,v/v)的乙醇溶液逐级沉淀,依次得到不同分子量的六个夏枯草多糖组分(依次记为PVLP-1、PVLP-2、PVLP-3、PVLP-4、PVLP-5、PVLP-6)。进一步测定了其中四个组分(PVLP-2、PVLP-3、PVLP-4、PVLP-5)对DPPH、O~(2-)·和·OH的清除效率。结果从夏枯草中得到的PVLP-2、PVLP-3、PVLP-4、PVLP-5四个多糖组分对DPPH自由基清除效果最明显,在质量浓度为3.2mg/mL时,清除率依次为98.09%、90.05%、88.56%和87.71%。各组分对O~(2-)·以及·OH自由基的清除作用相对较差些,除PVLP-4清除·OH自由基的EC_(50)值为13.24 mg/mL外,其余均小于10 mg/mL。四个多糖组分中,PVLP-2的总体抗氧化效果优于其他各个组分。结论乙醇分级可以作为一种简便易行的分离纯化方法,制备具有良好抗氧化效果的水溶性夏枯草多糖。     

鸭趾草水溶性多糖的提取纯化及纯化前后抗氧化性能研究

对鸭跖草中的水溶性多糖进行分离纯化,采用SephadexG-100凝胶层析初步分离纯化鸭趾草多糖,利用D-脱氧核糖法测定鸭跖草水溶性多糖对·OH清除作用;结果表明鸭趾草中水溶性多糖的含量为2.95％,主要由4种成分组成,主要的集中在第1种组分,其在体外对羟自由基具有一定的清除作用,并且粗多糖对羟自由基的清除作用要略强于纯化多糖,二者对羟自由基的清除率达500时所需质量浓度为84.85 mg/L和91.51 mg/L.结论是鸭跖草多糖具有开发利用价值.     

羧甲基茯苓多糖的抗氧化研究

通过对茯苓药材中提取的茯苓多糖进行羧甲基修饰,制备一种水溶性羧甲基茯苓多糖(CMP),并对其抗氧化性进行研究.测定样品的还原能力和抗氧化能力两个指标:利用H2O2和Fe2+混合发生Fenton反应测定CMP对·OH的清除能力,采用邻苯三酚自氧化法测定CMP对·O2-的清除能力.结果显示在质量浓度为0.1g/L～5g/L的有效范围内该多糖具有一定的还原能力.在有效范围内CMP对·OH的清除50%羟自由基的多糖浓度(EC50)为2.5 g/L,CMP浓度为5 g/L时对·O2-的清除率为17%.     

枯草芽孢杆菌LY-05发酵玉竹产水溶性多糖工艺优化及其抗氧化活性研究

为了考察益生菌发酵玉竹产水溶性多糖的最佳工艺条件并比较发酵与未发酵多糖的抗氧化活性。本文以枯草芽孢杆菌LY-05为发酵菌株,水溶性多糖含量提高率为指标,研究了玉竹添加量、氮源种类、无机盐种类、接种量、培养温度、摇床转速及发酵时间等发酵条件对发酵玉竹产水溶性多糖的影响。在单因实验结果的基础上,选择对多糖含量提高率影响较大的因素,采用响应面试验法对发酵条件进行了优化;并通过检测DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率,OH自由基清除率及总还原能力,评价发酵与未发酵的玉竹多糖抗氧化活性的变化。结果表明:最佳的发酵工艺参数为:玉竹添加量4%,酵母提取粉3%,NaCl 1%,接种量3%,温度35 ℃,转速160 r/min,发酵时间48 h。在此条件下,多糖含量达到7.83 mg/mL,较未发酵（4.56 mg/mL）提高了71.78%。抗氧化试验表明,在一定浓度下,发酵后玉竹多糖的DPPH、ABTS、OH由基清除率及总还原力均有所提高,且呈现多糖浓度依赖性。发酵后多糖POP₂对ABTS自由基清除的半抑制浓度（IC₅₀）2.21 mg/mL,对OH自由基清除的IC₅₀为0.49 mg/mL。此项研究表明,利用枯草芽孢杆菌发酵玉竹可以明显提高玉竹多糖的提取效率。通过发酵产生的玉竹多糖,具有更强的抗氧化能力。     

绿豆多糖制备及抗氧化特性研究

采用响应面法对绿豆仁中多糖碱液提取工艺进行优化,在此基础上进一步开展分离纯化及抗氧化特性研究。结果表明,碱法提取绿豆多糖(Alkali extraction mung bean polysaccharides,AEMP)最佳工艺参数为碱液浓度0.02 mol/L,液料比20∶1 mL/g,提取温度50℃,提取时间3 h,最终AEMP得率9.70 mg GE/g DW。进一步采用DEAE-2纤维柱和SephadexG-100凝胶柱分离纯化绿豆多糖,得到一个中性组分AEMP-1和一个酸性组分AEMP-2。抗氧化特性结果表明AEMP及其纯化组分对羟自由基和DPPH自由基均有良好清除效果,AEMP-2抗氧化活性最强,对羟自由基和DPPH自由基半数抑制浓度IC50值分别为4.71 mg/mL和1.03×10-1mg/mL。表明绿豆多糖具有良好的抗氧化特性。     

杨树桑黄胞外多糖的分子结构及抗氧化活性

对杨树桑黄胞外多糖(EPS)的相对分子质量、结构及抗氧化活性进行了研究。利用凝胶过滤法分离纯化EPS并测定多糖的相对分子质量,红外分析EPS结构的异头碳类型,GC/MS分析EPS的单糖组分,SEC/MALLS结合粘度法分析EPS的分子构象,利用·OH自由基和·DPPH自由基的清除率测定EPS的抗氧化活性。结果表明:杨树桑黄EPS分离纯化得到两个组分(Fr-Ⅰ和Fr-Ⅱ),其相对分子质量分别为627 500和55 000;红外分析可知,Fr-Ⅰ为含有α-和β-构型共存的吡喃型甘露糖苷酸性杂多糖,Fr-Ⅱ为含有α-吡喃型甘露糖苷酸性杂多糖;气质分析结果表明,Fr-Ⅰ和Fr-Ⅱ所含单糖组分为核糖、木糖、葡萄糖醛酸、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和半乳糖醛酸;SEC/MALLS结果表明,EPS分散性很低,在水溶液中以球形构象存在,是一种高度紧密且具有分支结构的多糖聚集体。抗氧化测定表明,EPS质量浓度为10 mg/mL时,对·OH自由基的清除率为38.58%;质量浓度为5 mg/mL时,对·DPPH自由基的清除率高达59.17%,表现出良好的抗氧化活性。     

软枣猕猴桃多糖的分离纯化及抗氧化活性测定

对微波辅助提取的软枣猕猴桃多糖进行分离纯化并对各纯化组分的抗氧化活性进行测定。利用DE-AE-纤维素阴离子交换层析对软枣猕猴桃多糖进行初步分离,得到1个水洗组分和3个盐洗组分;利用Sephade-xG-100、G-200凝聚柱层析对其进行进一步分离纯化。结果表明:4个组分都为均一多糖且都不含有蛋白质;软枣猕猴桃多糖对DPPH自由基和羟基自由基具有一定的清除能力,对超氧阴离子自由基的清除能力很弱,盐洗组分的抗氧化活性明显优于水洗组分;0.1盐洗组分(0.1 mol/L NaCl溶液洗脱的组分)、0.2盐洗组分(0.2 mol/L NaCl溶液洗脱的组分)、0.3盐洗组分(0.3 mol/L NaCl溶液洗脱的组分)、Vc清除DPPH自由基的IC50分别为0.57、1.61、1.18、0.03 mg/mL;清除羟基自由基的IC50分别为1.5、5.6、2.7、0.2 mg/mL;0.1盐洗组分为软枣猕猴桃多糖中主要的抗氧化活性组分。     

芝麻叶多糖的提取及抗氧化活性研究

目的:探讨芝麻叶水溶性多糖的提取条件及其抗氧化活性。方法:采用三因素三水平正交试验设计,研究提取温度、提取时间和料液比等因素对芝麻叶水溶性多糖提取率的影响,并对芝麻叶水溶性多糖清除O2-.、.OH、DPPH.自由基的能力进行研究。结果:芝麻叶水溶性多糖的提取条件是:料液比1∶10,提取温度75℃,提取时间45 min。抗氧化试验结果表明,芝麻叶水溶性多糖具有较好的抗氧化活性,其清除O2-.、.OH、DPPH.的IC50值分别为0.0250、0.2031、2.0510 mg/mL。芝麻叶水溶性多糖是一种效果好、安全性高的新型天然抗氧化物质,值得深入研究其生理功能并开发功能产品。结论:获得芝麻叶水溶性多糖的最佳提取条件,在该条件下芝麻叶多糖的得率为4.32%。芝麻叶水溶性多糖具有较明显的体外抗氧化能力。     

软枣猕猴桃多糖的体外抗氧化活性

利用水提醇沉法提取软枣猕猴桃粗多糖,经脱蛋白、脱脂,软枣猕猴桃粗多糖的提取率为1.41%。利用DEAE-52纤维素离子交换层析对软枣猕猴桃多糖进行初步分离,得到4种软枣猕猴桃多糖组分。利用SephadexG-200凝胶柱层析对组分Ⅱ和Ⅲ实现了完全分离。通过测定清除自由基能力,评价软枣猕猴桃多糖组分Ⅱ的抗氧化活性。结果表明:软枣猕猴桃多糖对DPPH自由基及烷基自由基(R)有较强的清除能力,IC50值分别为0.497、0.547mg/mL。在受试范围内,随软枣猕猴桃多糖质量浓度的增加,清除能力增强,当软枣猕猴桃多糖质量浓度达到1mg/mL时,其对DPPH自由基及R的清除率分别达到86.4%、87.1%,与VC的清除率相近。软枣猕猴桃多糖对羟自由基(OH)有一定的清除能力,IC50值为0.668mg/mL。其清除能力随多糖质量浓度的增加而有所增加,但其对OH的清除率较VC有一定的差距。软枣猕猴桃多糖对O-2.的清除率较低,清除能力较弱。由此可见,软枣猕猴桃多糖具有较强的抗氧化活性。     

水溶性大豆多糖对羟基自由基抑制作用的研究

利用Fenton反应,研究了水溶性大豆多糖抑制羟基自由基的性质,实验结果表明:随着水溶性大豆多糖溶液浓度的增加,其抑制羟基自由基的能力增强,抑制羟基自由基的稳定性也相应增加;水溶性大豆多糖溶液的质量百分数为0.08%时,·OH的清除率可在200s内维持在95%以上,当水溶性大豆多糖溶液的质量百分数上升至0.20%时,·OH的清除率可在20d内维持不变,对·OH的清除丰在95%以上,达到稳定状态.     

不同提取方法对槐米多糖抗氧化活性的影响

利用超声辅助提取法和热水浸提法分别提取槐米多糖,苯酚硫酸法测定多糖含量,采用还原能力、超氧阴离子自由基(O-2·)的清除能力、DPPH有机自由基的清除能力、羟自由基(·OH)的清除能力作为体外抗氧化作用评价的四个指标,并与VC、BHT进行比较。结果表明:超声波提取多糖得率比热水浸提法提高了21.6%;在0.125~2.0mg/m L浓度范围内,对自由基清除作用:VC>超声提取多糖>水提多糖>BHT。其中,超声提取多糖对O-2·(清除率,70.78%)和·OH(清除率,75.34%)的清除力略高于水提多糖(清除率分别为62.28%和70.45%),低于VC的清除力(清除率分别为98.21%和94.53%)。由此可见,槐米粗多糖有一定的抗氧化活性,而且不同提取方法得到的槐米多糖的抗氧化活性不同。     

飞龙掌血多糖清除自由基活性的研究

目的：研究飞龙掌血多糖的抗氧化活性。方法：采用Fenton法、DPPH法测定飞龙掌血多糖清除羟基自由基（.OH）、二苯代苦味酰肼自由基（DPPH.）的能力,以VC为对照。结果：质量浓度在0.2～0.4mg/mL范围内,飞龙掌血多糖随浓度增大,清除.OH能力增强,且0.4mg/mL时清除率高达73.7%;质量浓度在5×10-3～5×10-1mg/mL时,对DPPH.的清除率为13.5%～79.5%,清除作用与浓度呈正相关,当浓度为0.5mg/mL时,清除率高达79.5%。结论：飞龙掌血多糖具有较强的体外抗氧化性能,对.OH、DPPH.具有明显的清除作用。     

碱溶性茯苓多糖的抗氧化作用

以九资河茯苓为原材料制备碱溶性茯苓多糖,通过傅里叶红外光谱和紫外可见分光光谱扫描对其结构进行初步表征,并评价其对超氧阴离子自由基、羟基自由基和DPPH自由基的清除能力。结果表明,碱溶性茯苓多糖显示出多糖的典型特征吸收峰为β型多糖;其体外抗氧化能力整体随碱溶性茯苓多糖浓度的升高而增大,当碱溶性茯苓多糖浓度为1.0 g/L时,超氧阴离子自由基和羟基自由基清除率达到最大,分别为63.27%和62.32%,且在此浓度下碱溶性茯苓多糖具有最大还原能力,吸光值为0.51;多糖浓度为0.8 g/L时,DPPH自由基清除率达到最大值,为61.21%。综上所述,碱溶性茯苓多糖具有良好的体外抗氧化能力,具有深入研究及开发的潜力和价值。     

蜜环菌水溶性多糖的抗氧化活性研究

目的:通过蜜环菌水溶性多糖对·OH、O2-·和DPPH·三种自由基清除作用,评价其抗氧化性能,为蜜环菌药物制剂的活性研究及其产品的质量检测标准提供重要参考。方法:经热水浸提、除蛋白等步骤分离纯化到水溶性多糖,以抗坏血酸和TBHQ为对照,采用分光光度法评定其抗氧化特性。结果:蜜环菌水溶性多糖对三种自由基均有不同程度的清除活性,对三种自由基的清除能力是DPPH·>·OH>O2-·,当清除率达到90%以上时,清除DPPH·、·OH和O2-·的所需的多糖浓度分别为1.0、5.0、6.0mg·mL-1,蜜环菌多糖的清除能力显著。结论:蜜环菌水溶性多糖在体外具有较明显的抗氧化活性,在实验浓度范围内,抗氧化效果与浓度呈显著的线性相关。作为一种重要的天然活性物质,蜜环菌多糖的抗氧化活性和抗衰老作用将具有较高的应用价值。     

水溶性大豆多糖的超声辅助酶法提取条件及抗氧化活性

研究超声辅助酶法提取水溶性大豆多糖的工艺参数,并对提取的多糖进行体外抗氧化活性评价。单因素试验和四元二次通用旋转组合设计试验结果表明：当过100目筛的豆渣粉末在料液比1:25(g/mL)、超声功率700W、超声温度50℃、豆渣粉中纤维素酶添加量30U/g的最佳提取工艺条件下提取20min时,水溶性大豆多糖得率最高,为9.32%;提取获得的水溶性大豆多糖对·OH、O2·和DPPH自由基清除率呈明显的量效关系。     

南通坛紫菜多糖的黏度性质及其抗氧化活性

以南通洋口港坛紫菜为原料,利用水提法从紫菜中提取紫菜多糖,通过Sevage法除蛋白、活性炭脱色对其进行纯化。利用流变仪测定浓度、温度以及剪切速率对紫菜多糖黏度的影响探讨其黏度性质,并采用清除.OH自由基、O2-.自由基和DPPH.自由基模型对其体外抗氧化活性进行评价,并与VC进行了比较。结果表明:紫菜多糖溶液的黏度随着浓度和温度的升高而升高,随着剪切速率的增加而降低,多糖溶液表现为"非牛顿型流体",且具有"假塑性";紫菜多糖对.OH自由基、O2-.自由基以及DPPH.自由基都具有一定的清除能力,随着多糖溶液质量浓度的增大而增加,其中对O2-.自由基清除能力相对较强,当紫菜多糖溶液质量浓度为5 mg/mL时,对羟基自由基、超氧阴离子自由基、DPPH自由基的清除率分别为53.4%、78.9%和43.1%,但是与VC相比,紫菜多糖的抗氧化作用较弱。     

茯苓多糖与产地及炮制方法的关联性研究

共收集了云南、广西、贵州、湖南、安徽等5省区不同菌种和炮制方法的茯苓样品15份,脱脂后分别用0.9%NaCl水溶液、120℃热水、0.5mol/LNaOH水溶液和88%甲酸溶液从茯苓中提取出了6种多糖,并测定此6种多糖的含量以确定茯苓多糖含量与产地及炮制方法的关联性。对PCS4-A多糖组分进一步使用1HNMR测定了-(1→3)/β-(1→6)糖苷键的摩尔比。结果表明:茯苓中碱溶性多糖PCS3-B组分是茯苓多糖的主要组分,占总多糖的90%以上。比较茯苓多糖的含量,实际上是比较PCS3-B组分的含量差异。在所选择的产地范围内,以云南省的样品PCS3-B组分含量最高,其总多糖含量亦高。不同的炮制方法对茯苓多糖组分含量有较大影响,同一产地、同菌种、同一栽培条件下,烤制的茯苓,其主要组分PCS3-B的含量高于晒制的茯苓;但同一产地,同一炮制方法时,茯苓多糖的主要组分含量亦相差较大,表明产地并非影响茯苓多糖含量的决定因素,茯苓多糖含量可能还与菌种、培养基材等性质有关。茯苓多糖的PCS4-A组分的-(1→3)/β-(1→6)糖苷键的摩尔比与产地有很密切的关系,但与炮制方法无关,云南产地样品的分支化度最低。     

葱白多糖提取工艺优化及体外抗氧化活性研究

通过响应面分析,对水提法提取葱白多糖工艺进行了优化实验,并采用清除·OH(羟基)自由基模型、O2-·(超氧阴离子)自由基模型和DPPH(1,1-二苯基苦基苯肼)自由基模型评价了葱白多糖的抗氧化能力,并与抗坏血酸进行了对比.实验结果表明:各因素对多糖提取得率的影响程度由大到小依次为:提取温度>料液比>提取时间,最佳提取工艺条件为:提取温度83.35℃,料液比1:32.7,提取时间2.57h/次.葱白多糖具有较强清除·OH自由基、DPPH自由基作用,并与浓度呈一定依赖关系.葱白多糖清除O2-·自由基的能力较弱,清除率与多糖浓度的关系不明显.     

大枣多糖的提取工艺及抗氧化作用研究

通过设计正交试验优化水浸、超声和微波等方法提取大枣多糖的工艺,在优化条件下,3种方法大枣多糖提取率分别达到11.33%、12.40%、10.98%。体外抗氧化研究结果表明,0.075～0.135mg/mL大枣多糖对.OH自由基最大清除率分别为48.5%(微波法),47.1%(水浸法),28.2%(超声法)。3种方法获得的大枣多糖提取液均具有体外清除.OH的作用,并呈明显的量效关系,但不同提取方法获得的大枣多糖在抗氧化方面表现出较大的差异,说明提取工艺与其生物学效能密切相关。综合提取工艺、多糖提取率以及抗氧化作用效率,微波法提取大枣多糖效果最佳。     

美味牛肝菌多糖的抗氧化性

采用超氧阴离子自由基体系、羟基自由基体系,研究了美味牛肝菌多糖的抗氧化活性,并与Vc进行了比较。结果表明,美味牛肝菌多糖具有强的清除自由基能力,且随着浓度的增大其抗氧化作用亦增大。美味牛肝菌多糖浓度约为0.04mg/mL时,其清除.OH的能力与0.02mg/mLVc的能力相当;对浓度为0.1mg/mL的多糖溶液,其清除率达到71.78%。对于O2-.自由基,在浓度为0.04mg/mL时,抑制率达到79.34%。