柠檬明串珠菌TD1产胞外多糖条件的响应面法优化及其抗氧化性研究

以柠檬明串珠菌（Leuconostoc citreum）TD1为供试菌,采用响应面法优化该菌株产胞外多糖（EPS）条件,并对其胞外多糖的 抗氧化性进行研究。 结果表明,菌株TD1产胞外多糖的最优条件为蔗糖109 g/L、Ca2+ 0.2 mmol/L、无水乙酸钠6.7 g/L。 在此优化条件 下,EPS含量为（57.58±2.04） g/L,是优化前（32.71 g/L）的1.76倍。分别测定上述发酵条件获得的粗EPS的抗氧化能力,结果表明,菌株 TD1所产的胞外多糖具有良好的体外抗氧化活性,随着浓度的增加清除能力亦增强,对超氧阴离子自由基、羟基自由基、DPPH自由 基和NO2清除率分别为（55.23±2.18）%、（95.34±2.33）%、（56.61±3.09）%和（5.32±0.18）%。     

肠膜明串珠菌胞外多糖合成的蛋白组学分析

以高产胞外多糖的肠膜明串珠菌BD3749为材料,通过双向电泳技术分析了产糖过程中的蛋白质组。结果表明,在产糖过程中有131个蛋白发生了明显变化(2倍以上),其中25个蛋白有显著改变(10倍以上)。初步的质谱鉴定表明,其中包含GH70家族的糖基转移酶、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶以及分子伴侣。肠膜明串珠菌胞外多糖的合成是一个复杂的过程,涉及众多基因在蛋白水平的变化。      

柠檬明串珠菌接种发酵竹笋过程中的化学成分变化

为探索不同发酵类型乳酸菌接种发酵的差异,将柠檬明串珠菌与植物乳杆菌分别接种发酵竹笋,测定竹笋发酵过程中总酸、pH值、乳酸菌总数、有机酸、游离糖和亚硝酸盐含量的变化.结果 表明:接种柠檬明串珠菌可以快速启动发酵,在24 h乳酸菌总数达到9.44 lg cfu/mL,迅速降低pH值,抑制腐败菌的生长,植物乳杆菌能够形成更低...     

明串珠菌发酵产甘露醇的研究进展

明串珠菌是韩国泡菜、德国泡菜和腌菜等发酵蔬菜中的优势细菌,保持产品的质量中起着重要作用,在各种乳制品中也有其的应用,因此近年来在内地对其的研究开始活跃。明串珠菌的发酵产甘露醇实现大规模工业化的潜力非常大,因此丰要论述了明串珠菌的甘露醇转化及相关代谢、发酵产甘露醇的研究。     

明串珠菌筛选与分类的研究进展

明串珠菌存在于蔬菜、饲料和多种发酵食品等各种植物材料中,在各种乳制品中有应用,因此近年来国内对它的研究开始活跃。文中论述了明串珠菌的生存环境、筛选方法、鉴定手段和分类,为分类学研究提供参考。     

明串珠菌的碳代谢调控研究进展

明串珠菌是韩国泡菜、德国泡菜和腌菜等发酵蔬菜中的优势细菌,保持产品的质量中起着重要作用,在各种乳制品中也有它的应用,因此近年来在内地对其的研究开始活跃.为明串珠菌的碳代谢调控研究提供第一手资料,该文综述了明串珠菌的碳代谢途径、发酵调控和基因表达调控.     

明串珠菌的基因研究进展

明串珠菌是韩国泡菜、德国泡菜和腌菜等发酵蔬菜中的优势细菌,保持产品的质量中起着重要作用,在各种乳制品中也有其的应用,因此近年来在内地对它的研究开始活跃。该文论述明串珠菌的有用蛋白质基因的克隆与异源表达、对明串珠菌的遗传转化和染色体改造、基因组等方面的研究进展,为今后的明串珠菌基因研究提供借鉴。     

明串珠菌电转化的优化

为了构建食品级基因工程受体菌,课题对明串珠菌的电转化条件进行了优化.以大肠杆菌-明串珠菌穿梭质粒pCW4为载体,以明串珠菌为受体,文章优化了细胞壁处理方式、电击参数、复苏时间等与电转化相关的因素.结果表明:用氨苄浓度0.7μg/mL的MRS培养基培养明串珠菌至OD600为0.5左右,以PBS作缓冲液,收获制成感受态细胞,与1μg DNA混合,在电场强度12 kV/cm、电阻200 Ω、电容25μF下电击转化,以含80 mmol/L MgCl2的MRS培养基复苏培养3h,得到最高的转化效率为1.75×105 cfu/μg DNA.     

明串珠菌在食品行业的研究进展

基于明串珠菌的一般特性,对明串珠菌在发酵制品等传统食品和功能食品中的研究进展情况进行介绍,概述了其做为有益菌的应用价值,同时从来源、危害、检测和控制方面综述了制糖工业中明串珠菌的防控研究情况。     

明串珠菌在食品行业的研究进展

基于明串珠菌的一般特性,对明串珠菌在发酵制品等传统食品和功能食品中的研究进展情况进行介绍,概述了其做为有益菌的应用价值。同时从来源、危害、检测和控制方面综述了制糖工业中明串珠菌的防控研究情况。     

食窦魏斯氏菌NCU034005与柠檬明串珠菌NCU027003对泡菜代谢物及风味的影响

在灭菌后的泡菜原材料中分别接种食窦魏斯氏菌NCU034005与柠檬明串珠菌NCU027003,室温纯种发酵7d,期间检测泡菜液中挥发性物质与非挥发性物质(葡萄糖、有机酸、氨基酸等)、pH、风味物质香气活度值。结果表明:食窦魏斯氏菌NCU034005与柠檬明串珠菌NCU027003纯种发酵泡菜中pH不同程度下降,两株乳酸菌对碳水化合物、有机酸与氨基酸的代谢能力不同;主成分分析表明食窦魏斯氏菌NCU034005与柠檬明串珠菌NCU027003纯种发酵泡菜中的代谢物与风味存在显著差异,且有自身的代表性标志代谢物与风味因子。食窦魏斯氏菌NCU034005与柠檬明串珠菌NCU027003对泡菜代谢物与风味有显著影响。     

肠膜明串珠菌BD3749亚种水平的鉴定及其生长特性研究

对肠膜明串珠菌BD3749进行亚种水平的鉴定,探索其在食品工业中的应用前景。利用分子生物学及生化鉴定的手段对高产胞外多糖的肠膜明串珠菌BD3749进行了亚种水平上的鉴定;通过测定其在番茄汁培养基中生长过程的OD595、p H值动态变化以及对其中蔗糖的利用来评价其生长状况;通过对其生长过程中的胞外多糖产量的分析评价其发酵产物作为膳食补充剂的潜力;使用不同装液量培养模拟不同的氧压力强度,研究氧胁迫强度对胞外多糖产量的影响,并据此对其产胞外多糖的条件进行了优化。经鉴定BD3749为肠膜明串珠菌肠膜亚种,属于食品中可以使用的菌株。在此基础上研究了该菌株在番茄汁中的发酵及产胞外多糖性能,BD3749在番茄汁培养基中生长旺盛,其合成的胞外多糖主要为不溶性多糖。通过不同装液量发酵实验考察了通氧量对BD3749不溶性多糖产量的影响,并对BD3749在番茄汁培养基中的产多糖量进行了初步优化,在优化条件下,不溶性多糖的产量可达14.5 g/L。BD3749属于食品中可以使用的肠膜明串珠菌肠膜亚种,其能以番茄汁为基质生长并合成大量胞外多糖,在食品工业中具有重要应用价值。     

肠膜明串珠菌HDE1的分离鉴定及其胞外多糖抗氧化和牛奶凝结特性研究

为了拓展产乳酸菌胞外多糖的来源,获得来源明确、产量稳定、具有优良生物学特性的乳酸菌胞外多糖。本研究从自制橘子发酵液中利用产黏菌落法分离筛选得到一株高产胞外多糖的乳酸菌,综合形态学观察及16S rDNA序列分析结果、API 50 CHL试验,对其进行鉴定,利用抗氧化及牛奶凝结试验研究了该乳酸菌胞外多糖的抗氧化及牛奶凝结等特性。结果表明,本研究获得了一株肠膜明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）,该菌株16S rDNA序列片段长度为1444 bp,GenBank登录号为OM302141。菌株HDE1胞外多糖的总糖、蛋白质、糖醛酸含量分别为41.73%±1.74%、0.29%±0.03%和7.69%±0.42%。该胞外多糖在浓度为3 mg/mL时展现出良好的抗氧化活性,当胞外多糖浓度为5 mg/mL时DPPH自由基清除能力达到50.00%±0.05%,ABTS+自由基清除能力达到40.00%±0.02%,H₂O₂-自由基清除能力超过了50%,羟基自由基清除能力达到49.96%±0.03%,胞外多糖的总还原力为38.82%±0.09%。牛奶凝结研究结果表明,HDE1在36 h能够使添加3%（w/v）蔗糖的脱脂牛奶完全凝结。这些结果表明菌株HDE1胞外多糖具有良好的抗氧化和牛奶凝结特性,在食品、医药及益生领域展现出良好应用潜力。     

假肠膜明串珠菌HDL-3胞外多糖的分离纯化及结构性质分析

从东北自然酸菜发酵液中分离筛选出一株高产胞外多糖（exopolysaccharides,EPS）的乳酸菌,通过16S rDNA分析将该菌株鉴定为假肠膜明串珠菌（Leuconostoc pseudomesenteroides）HDL-3。利用该菌株进行发酵产EPS、分离纯化EPS,并解析EPS的结构和性质。结果表明,EPS是由α-(1,6)糖苷键连接而成的线性葡聚糖,分子量为1.581×106 Da。EPS呈现表面光滑、有光泽、紧凑的片状非晶体结构。溶解率和持水率分别为98.63%±1.03%和401.30%±4.92%。此外,该EPS表现出非牛顿流体的剪切稀释特征,粘度与浓度呈正相关、与温度和pH呈负相关,不仅对大豆油、葵花籽油和苯具有较强的乳化能力,还对DPPH和ABTS自由基具有良好的清除能力。     

一种制备高存活性肠膜明串珠菌冻干制剂的方法

为制备高活性冻干粉,通过响应面法对BD1710菌株的培养条件进行优化,结果显示:当培养时间为29.5 h,培养温度为29.5℃,初始p H值为7.3,蔗糖浓度为16.8%时,菌株BD1710冻干存活率可达92.44%,与理论值基本一致,并显著优于传统工艺的冻干保护效果(76.81%)。推测可能是BD1710合成的胞外多糖以及培养基中的天然冻干保护剂为冻干过程中的微生物细胞提供了主要的细胞保护。因此,发酵后直接冻干可作为制备高活性肠膜明串珠菌制剂的一种简易手段。     

假肠膜明串珠菌胞外多糖的分离纯化及其抗氧化特性研究

从东北自然酸菜发酵液中筛选得到一株高产胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)的乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB),经生理生化试验、形态学观察及分子生物学试验鉴定该菌株为假肠膜明串珠菌(Leuconostoc pseudomesenteroides)。以该菌株为供试菌进行发酵产糖及分离纯化EPS,并采用7种方法测定纯EPS的抗氧化能力。结果表明,Leu. pseudomesenteroides能够产生(38.42±2.15)g/L的EPS,且表现出良好的体外抗氧化活性,清除能力随着浓度的增加而增强,DPPH·、·OH、O~(2-)·、H_2O_2、和NO_2~-清除率及Fe~(2+)螯合能力分别为(65.34±3.54)%、(78.24±3.52)%、(77.48±2.45)%、(82.78±3.76)%、(38.34±3.28)%和(92.37±2.34)%。     

明串珠菌的稳定高效电转化

明串珠菌电转化的再现性差、效率稍低,因此重新优化了电转化方法。以pCW4为载体,明串珠菌为受体菌,固定接菌量和氨苄浓度,优化了PBS溶液的pH值、LiAc-DTT孵育时间、溶菌酶的量和孵育液中蔗糖浓度。利用MRS(含质量浓度0.48 mg·L-1氨苄)培养明串珠菌(初始OD600为0.048),OD600为0.5左右时收集菌体,用LiAc-DTT溶液(含100 U·mL-1溶菌酶、浓度0.5 mol·L-1蔗糖)孵育20 min,再用pH值为6.9的PBS洗涤和电转化,得到较高的转化率,为2.47×105μg-1DNA。     

辣白菜中明串珠菌的筛选及鉴定

从辣白菜中分离筛选益生菌一明串珠菌.通过对其生理生化特性的研究以及16S rDNA序列的系统发育树分析确定其分类地位.结果表明属于肠膜明串珠菌,命名为kimshi 001,在NCBI上的登录号为FJ655776.     

提取明串珠菌质粒方法的优化

明串珠菌的基因操作在食品发酵工业和改善食品产品研发中具有很多潜在的应用价值.明串珠菌质粒可以构建成为乳酸细菌的载体.采用普通的方法提取明串珠菌质粒效果不佳,因此以O'sullivan 的方法为基础,对提取明串珠菌质粒的流程进行了优化.结果表明,采用6 mL菌液和分别为800,1600,1200 uL的3种提取液,用STE去除杂质,用试剂盒离心柱纯化,从而获得的质粒DNA的量较大,纯度较高.     

明串珠菌引起果味饮料酸败原因

造成果味饮料酸败的原因之一是由于明串珠菌(Leuconostoc Citrovum Hucker et Pederson)的污染,本文报告了利用扫描电子显微镜对经过取样培养的明串珠菌研究的初步结果。1989年夏季,省内一些饮料产品连续出现污染,造成经济损失、我们先后从工厂和市场取8种碳酸型果味饮料,在特定细菌培养基上取样培养,呈现典型菌落,经过高倍显微镜和电于显微镜检查发现明串珠菌污染是共有特征,明串珠菌污染是引起果味饮料酸败的主要原因,现将研究结果报告如下: