碱性磷酸酶检测方法研究进展

碱性磷酸酶（ALP）广泛的存在于人体内,它可以控制多种生物体内的生物过程,目前已经广泛地被的应用于临床、生物、医学等各个领域。作为一个与多种疾病有关的生物标志物和研究实验的主要工具酶,对ALP进行分析的经典方法已经不能满足新类型样品对灵敏度、精度、抗干扰性和广泛针对性的需求。因此,为了更好的研究检测ALP的方法,我们阐述了国内外最新的ALP提取方法和检测技术,同时将这些研究的主要优缺点进行了总结和比较。最后,我们对ALP检测技术的发展前景和研究趋势进行了探讨,希望为今后的工作提供一些启示。     

海参肠碱性磷酸酶的提取及粗酶的特性研究

碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)是最重要的磷酸酶之一,在生物体内直接参与磷酸基团的转移和代谢过程。本文研究了海参肠碱性磷酸酶粗酶的提取,并分析了其酶学特性。经含有0.2%Triton X-100的Tris-HCl缓冲液(pH 8.9)浸提、正丁醇处理、70%硫酸铵沉淀和超滤等步骤获得海参肠ALP粗酶,纯化倍数达到2.74倍,得率为63.32%。ALP粗酶的最适反应pH为11.0,在pH 10.0～12.0稳定性较好;最适反应温度为45℃,在20～45℃具有很高的稳定性。金属离子Mg2+(1～30mmol/L)、Zn2+(<10mmol/L)对海参肠ALP粗酶具有显著的激活作用;Fe3+、Fe2+、Cu2+和Mn2+(10mmol/L)可明显抑制该酶活力。EDTA-Na2、DTT、Na2WO4及Na2HPO4对海参肠ALP粗酶有明显的抑制作用,抑制程度依次为:EDTA-Na2>DTT>Na2WO4>Na2HPO4。     

提高碱性磷酸酶在E.coli胞内表达的可溶性及活性

以E.coli DH5a基因组为模板PCR扩增得到无信号肽的碱性磷酸酶基因片段,与胞内融合表达型T栽体连接得到重组质粒,转化表达宿主E.coli BL21(DE3)和E.coli origami(DE3),经0.1 mM IPTG诱导表达,超声破碎细胞后,SDS-PAGE分析可溶性,融合蛋白在E.coli origami(DE3)中的可溶蛋白含量比E.coli BL21(DE3)中高.融合蛋白的可溶部分经Ni2+螯合亲和纯化,纯化后E.coli origami(DE3)中蛋白活性比E.coli BL21(DE3)中明显提高,达到1 614.3U/mg蛋白.     

超细粉的性质、制备及应用

目的 综述了超微粉末的宏观性质、制备方法以及近年来在各个领域的应用。方法 检索分析国内外相关资料。结果 分析论述了超微粉末的制备方法和它的应用前景。结论 超微粉末是二十一世纪材料学研究的热点，随着制备技术的不断发展，有很好的应用前景。     

二氧化氯制备的动力学研究

详细研究了由氯酸钠、双氧水和硫酸制备二氧化氯的动力学特征 .实验数据表明该反应硫酸、双氧水和氯酸钠的反应级数都比较低 ,反应的活化能也比较低 .由实验求得的反应速率为反应器的设计奠定了基础     

产高温碱性蛋白酶菌株筛选及酶学性质研究

从高温堆肥土样中筛选到一株高产蛋白酶的菌株,经鉴定为Bacillus subtilis,命名为I15.对最适产酶发酵条件进行了优化,并研究了发酵产蛋白酶的酶学性质.结果表明,玉米淀粉和豆饼粉是该菌发酵产蛋白酶的最适经济碳氮源;该蛋白酶属高温碱性蛋白酶,具有很强的热稳定性和酸碱稳定性.另外,突出的性质是该蛋白酶对表面活性剂和温和型去垢剂具有超强的耐受性,将具有广阔的市场前景.     

二氧化氯制备的动力学研究

详细研究了由氯酸钠、双氧水和硫酸制备二氧化氯的动力学特征。实验数据表明该反应硫酸、双氧水和氯酸钠的反应级数都比较低，反应的活化能也比较低。由实验求得的反应速率为反应器的设计奠定了基础。     

高地芽孢杆菌碱性蛋白酶酶学性质研究

对高地芽孢杆菌(Bacillus altitudinis)PY41所产碱性蛋白酶的酶学性质进行了研究.研究得出该蛋白酶的最适反应pH值为9.5,最适反应温度为50℃,米氏常数Km值为15.5 mg/mL,最大反应速度vmax为24.57μg/(min·mL).金属离子Ag+和Hg2+对该蛋白酶的抑制作用非常显著,使蛋白酶酶活降低了约90%,Mn2+对蛋白酶酶活具有明显的激活作用,使蛋白酶酶活力提高了18%.     

超细粉的性质、制备及应用

目的　综述了超微粉末的宏观性质、制备方法以及近年来在各个领域的应用 .方法　检索分析国内外相关资料 .结果　分析论述了超微粉末的制备方法和它的应用前景 .结论　超微粉末是二十一世纪材料学研究的热点 ,随着制备技术的不断发展 ,有很好的应用前景 .     

P17菌株产生磷酸酶的影响因素及其定域研究

巨大芽孢杆菌P17菌株能够有效地改善植物对土壤中磷素营养的吸收状况,磷酸酶在该过程中发挥着重要作用,本文旨在研究该菌株在溶磷过程中磷酸酶的定域及其活性影响因素,以深入探讨该菌株的作用机制.该研究在摇瓶条件下分别比较了P17菌株的生物量及其产生磷酸酶的活性;进而根据磷酸酶的诱导特性研究了不同发酵条件对该菌株产生磷酸酶活性的影响,确定了磷酸酶在巨大芽孢杆菌P17菌株细胞内的定域情况.结果表明P17菌株在以葡萄糖为碳源、以黄豆粉、胰蛋白胨等复合氮源为氮源时磷酸酶活性最高;其定域试验证实酸性磷酸酶和碱性磷酸酶均属于胞外酶,阐明了该菌株促进植物磷素营养吸收的作用机制.     

镉对大肠杆菌生长代谢作用的微量热研究

以大肠杆菌为模型生物，用微量热法研究了镉对大肠杆菌生长代谢作用的影响，并与比浊法进行了比较。实验表明：2种方法结果相近，镉可抑制大肠杆菌的生长，而且镉的浓度越高，对大肠杆菌生长代谢的抑制作用越强。微量热法较传统的比浊法具有独到之处，对于了解镉的生物效应及其对细胞作用的生理特征具有重要的意义。     

松材线虫纤维素酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

采用PCR技术克隆了松材线虫纤维素酶的编码基因BXC46,克隆基因与已报道的纤维素酶基因BXC10（GenBank登录号：FJ598020.1）的同源性高达99%,将其克隆到表达载体pET-15b上构建了表达载体pET-15b-BXC。将该重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）菌株构建工程菌,SDS-PAGE分析表明,IPTG诱导了纤维素酶在工程菌中表达。采用Ni2＋-NTA树脂亲和层析部分纯化了重组松材线虫纤维素酶,DNS法进行的活性测定表明,部分纯化的重组蛋白具有纤维素酶的活性,其最适温度为45℃,最适pH为4.0。     

碱性酚醛树脂自硬砂工艺性能试验及研究

分析测试了酯硬化碱性酚醛树脂自硬砂工艺性能及各种因素的影响。     

聚氨酯矫形材料的制备与性能的研究

本文对聚氨酯矫形材料的制备方法与性能进行了研究。选择了适宜的催化剂和稳定剂体系,使材料具有较短的固化时间和较长的贮存稳定性。村料的力学性能及对x射线的穿透能力均优于石膏绷带。     

污水处理中大肠杆菌群数及其参数研究

依据污水处理厂的进水、曝气池、厌氧池、好氧池以及二沉池5个处理单元中水体的大肠杆菌群数以及常规水质参数（COD、SS、pH、温度）检测数据，分析了大肠杆菌群数与水体理化参数间的关系，得出以下结论：大肠杆菌生长的最适温度为25～40℃；有利于大肠杆菌生长的pH值在6．5-7．5之间，而最佳生长的pH值为7．2；COD值较高和SS含量高的水体中大肠杆菌群数也较多。     

苍术对鸡大肠杆菌耐药质粒消除作用的研究

在确定了致病性鸡源大肠杆菌EC012株耐药性的基础上,用中药苍术提取液对该菌株的耐药质粒进行了体内、体外消除试验,结果显示体内消除优于体外,最佳作用时间为72h,消除率分别为4.5%和1.2%.     

磁性纳米二氧化硅的制备与性能研究

纳米二氧化硅(nSiO2)微球因其比表面积大、表面吸附力强、其表面富含可供改性的化学官能团,并且稳定性高,目前已经广泛用于模板化包药、药物运载、药物缓释等领域.以磁性Fe3O4为核,采用共沉淀法制备出有核壳结构的磁性纳米二氧化硅(nMSiO2)微球,在药物传输以及荧光标记诊断方面可以实现磁导向,具有潜在的应用价值.在nMSiO2微球上接枝可以发荧光的异硫氰酸(FITC),可以实现磁引导的同时示踪.获得的nMSiO2微球利用磁性测试、X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)和红外光谱(FTIR)进行结构和性能的表征,结果表明,nSiO2微球包裹了磁性Fe3O4后,nMSiO2微球具备磁性,且其性能与纯nSiO2有了本质的差异,接枝异硫氰酸且能够发出荧光.     

硬脂酸玉米淀粉酯的制备及性能研究

以玉米淀粉为原料,硬脂酸为酯化剂,先用乙醇对淀粉进行非晶化处理,然后进行酯化反应制备硬脂酸玉米淀粉酯．考察淀粉中葡萄糖单元羟基（OH）与硬脂酸羧基（COOH）的摩尔比、反应温度、反应时间对硬脂酸淀粉酯取代度（DS）的影响,确定较适宜的反应条件：n（OH）：n（COOH）=2：1,反应温度为150℃,反应时间7h,得到产品的DS为0．0167．并对其黏度、凝沉性及透明度进行研究,结果表明：与原淀粉相比,硬脂酸淀粉酯的黏度减小,透明度和凝沉性增大．     

软麻油的制备及其性能

以豆油为原料,将其分别与一定浓度的硫酸、次氯酸钠溶液、浓硝酸等氧化剂进行部分氧化改性,从而改变豆油的结构与组成,改善其亲水性能,再加入乳化剂等助剂制得合格的苎麻纺织专用软麻油.根据用户对稳定性或水溶性的要求不同,分别用2.25 mol/L的稀硫酸或30%次氯酸钠溶液作为改性剂,对应的加入量按豆油与改性剂质量比为100:1或10:1,前者采用不加热下逐滴加入,而后者采用加入后煮沸的方法制得软麻油.达到减少乳化剂的用量,降低软麻油的生产成本的目的.     

锆酸盐人造岩石的制备及其浸出性能的研究

采用分析纯氧化铈(CeO2)、氧化锆(ZrO2)和氧化钙(CaO)、碳酸钙(CaCO3)、氟化钙(CaF2)为原料,经固相反应合成具有烧绿石结构的CaCeZr2O7。通过XRD、SEM、密度和显气孔率以及浸出率的测试,对锆酸盐矿物的合成以及对Ce的浸出性能进行了研究。结果表明,在1 500℃下保温3h用CaF2做钙质原料可得到浸出率较低的锆酸盐固化体样品,其密度和显气孔率分别为3.26g/cm3和32.4%,铈的归一化浸出率为7.14×10-6 g/(m2.d),对Ce的包容量可达24.38%。由于其包容量大等优良性能,可作为高放废物人造岩石固化的基材。