发酵液中透明质酸的分离纯化

考察分离纯化条件对发酵液中透明质酸(HA)提取率的影响。结果表明,采用乙醇和十六烷基吡啶(CPC)相结合的办法来提取HA,提取率较高;适宜的提取条件为温度30℃p,H为7。提取物和HA标准品有着相同的吸收峰,说明该发酵产物呈极为典型的HA红外吸收谱图,证明该提取物即为透明质酸。     

发酵液中提取透明质酸的研究进展

从发酵液中分离提纯透明质酸是发酵法生产透明质酸的关键步骤之一,文中综述了国内外研究从发酵液中提取透明质酸的各种方法以及发展前景.     

膜技术纯化大豆糖蜜发酵液的研究

利用膜技术去除大豆糖蜜发酵液中的蛋白质和脂肪成分,并通过纳滤浓缩发酵液,提高低聚糖的纯度。通过单因素变量法,即超滤膜截留分子量、透析比、pH和反应温度的变化对大豆蜜糖发酵液中蛋白、脂肪的去除效果进行了研究。研究结果表明:超滤膜截留分子量为10000Da,透析比为3:1,pH=7.0,反应温度为室温的条件下对大豆蜜糖发酵液中蛋白质和脂肪去除效果最好。     

发酵液中透明质酸含量快速检测方法研究

对十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)溶液与透明质酸(HA)溶液反应体系进行了全波长扫描,绘制了不同波长下的标准曲线,并对反应时间和温度对反应体系的影响分别进行了比较。研究表明,随着反应时间延长,反应体系的吸光度逐渐升高,但当反应时间固定后,在可见光区反应体系能较好的遵循朗伯-彼尔定律,并且不受温度的影响。依据此原理,建立了发酵液中HA含量的快速测定方法,即CTAB比浊法,并与Bitter-Muir法进行了比较。结果表明,CTAB比浊法的准确度、精确度、灵敏度均优于Bitter-Muir法,并且具有快速、安全等特点。反应体系中除了蛋白质以外,葡萄糖、KH2PO4、MgSO4对CTAB比浊法测定的影响很小,因此,应尽量减少反应液中蛋白质的含量,以提高测定准确度,而上述杂质对Bitter-Muir法测定HA含量均有较大影响。     

食品添加剂生产中的膜技术应用

对于发酵型食品添加剂,发酵料液及发酵废水中含有残留的菌丝体、糖或蛋白质、悬浮微粒和有机盐等杂质。在生产中,利用分离膜技术不仅可以将发酵料液澄清,回收残渣使其得到综合利用,增加经济效益;还可以使发酵废水得到有效的处理以避免环境污染。本文主要介绍膜分离技术在味精、维生素C、柠檬酸、黄原胶生产中的应用。      

食品添加剂生产中的膜技术应用

对于发酵型食品添加剂,发酵料液及发酵废水中含有残留的菌丝体、糖或蛋白质、悬浮微粒和有机盐等杂质。在生产中,利用分离膜技术不仅可以将发酵料液澄清,回收残渣使其得到综合利用,增加经济效益;还可以使发酵废水得到有效的处理以避免环境污染。本文主要介绍膜分离技术在味精、维生素C、柠檬酸、黄原胶生产中的应用。     

透明质酸发酵液的絮凝预处理研究

通过测定过滤滤饼常数、透光率及处理前后透明质酸浓度 (CHA)的变化 ,分析讨论了用絮凝法预处理透明质酸发酵液的合理性。实践证明 :透明质酸发酵液经絮凝预处理后 ,不仅可以大大改善发酵液的固液分离效果 ,同时其滤清液的纯度亦有一定幅度的提高 ,在超滤过程中污染程度明显减少 ,渗透通量增加     

发酵液中透明质酸提取的新方法

以氯仿为除菌介质 ,在温度为 2 8℃ ,pH值为 7.5及搅拌直径比为 2 / 3条件下 ,从发酵液中提取透明质酸 (HA) ,其提取率大于 97.5% ,纯度大于 97.3% .     

膜技术分离纯化南瓜果胶的工艺研究

利用提取糖分后的南瓜渣进行果胶的提取,采用膜分离技术改进传统工艺,对南瓜提取液进行除杂浓缩,再经过醇沉精制,最后通过真空干燥得到果胶产品。试验结果显示,经过膜除杂和浓缩后的果胶溶液,不仅能减少后续乙醇的使用量,而且还能提高果胶的纯度。因而采用此工艺可降低成本,提高经济效益。     

发酵液中透明质酸含量的快速估测方法

为快速估测出发酵液中透明质酸含量,对发酵液中透明质酸含量与菌体量、浊度、粘度、电导率、还原糖含量进行相关性分析及偏相关性分析,选择与透明质酸含量相关性最为显著指标构建一元线性回归、二次项曲线回归以及BP神经网络数学模型,并对模型估测发酵液中透明质酸含量进行验证。结果表明:在显著性水平P<0.01下,发酵液浊度、电导率与透明质酸含量不存在相关性;菌体量与透明质酸含量存在虚假性相关;粘度及还原糖含量与透明质酸含量显著相关,系数分别为0.984、-0.869,粘度与透明质酸含量相关性最为显著,可作为估测发酵液中透明质酸含量的唯一指标;利用三种数学模型对发酵液中透明质酸含量进行估测验证表明BP神经网络模型的估测最为准确,方差仅为1.89×10^-2,通过测定发酵液粘度可快速准确估测出发酵液中透明质酸含量。     

酶解法去除透明质酸发酵液中蛋白质

为有效降低透明质酸的蛋白质质量分数,通过单因素试验和响应面优化试验对酶解法去除透明质酸发酵液中蛋白质进行研究。在蛋白酶的筛选实验中,结果表明,胰蛋白酶处理后的蛋白质质量分数最低,并确定了胰蛋白酶酶解的最适条件:酶解p H 8.4、酶解温度50℃、酶用量44 000 U/g、酶解时间6 h。在此条件下透明质酸的蛋白质质量分数为6.75%,蛋白质去除率为66.25%。经过硅藻土进一步后处理,得到透明质酸产品蛋白质质量分数小于0.1%,蛋白质去除率达到99%以上,符合医药级透明质酸标准。     

丁二酸发酵液的膜分离过程研究

通过微滤、超滤等膜分离技术对丁二酸发酵液进行了分离纯化,考察了温度、压力差、pH值、循环流速等因素及操作方式对丁二酸分离的影响。丁二酸发酵液经稀释后可直接进行微滤操作,微滤的优化工艺条件为:pH5.0,40℃,△P=0.03MPa,循环流速0.71m/s,采用间歇反冲可降低膜污染程度,维持较高通量;微滤除菌率达99.6%,蛋白质去除率87%,脱色率92%。将得到的微滤液在20℃,pH5.0,△P=0.05MPa,0.83 m/s循环流速下进行超滤,滤液透光率≥60%,蛋白质质量浓度仅5mg/L。经2步膜分离,蛋白质去除率达99.45%,丁二酸收率达93%。     

磁聚复配物对L-乳酸发酵液的预处理研究

对用磁聚复配物预处理L-乳酸发酵液进行了研究,讨论了pH值、复配物用量、搅拌速度与时间、温度、磁场强度对絮凝效果的影响。实验结果显示,在pH5~6,40 mg/L壳聚糖与100 mg/L Fe3O4复配,200r/min下搅拌5 min,35~55℃,外加磁场(0.5T)作用1 min的情况下,发酵液的絮凝率达到了98.5%,表明磁聚复配物对L-乳酸发酵液中的蛋白质具有优良的絮凝能力,且更大的优势在于显著提高了固液分离的速度。     

陶瓷膜在甘油发酵液除菌中的应用

将陶瓷膜应用于甘油发酵液的除菌操作中,考察了操作参数和清洗方法对膜通量的影响。结果表明,在压差0.1MPa、温度30℃、pH值7.0和错流速度3.5m/s条件下操作,有利于提高膜通量;发酵液过滤后,先以质量浓度为1%的NaOH和质量浓度为0.2%的NaClO混合液清洗膜40min,再以质量浓度为0.5%的HNO3溶液清洗5min,膜通量可迅速恢复。因此,陶瓷膜在甘油发酵液的除菌中是高效可行的。     

重组大肠杆菌全细胞催化法生产N-乙酰神经氨酸

N-乙酰神经氨酸具有多种生物学功能,在食品添加剂和药物合成等方面有着重要的应用。为了降低成本,作者利用重组大肠杆菌,并以含有N-乙酰葡萄糖胺的发酵液为底物进行全细胞催化生产N-乙酰神经氨酸。结果表明,在温度为30℃、转化液初始pH为6.5、底物丙酮酸浓度为1.38 mol/L、Triton X-100添加质量分数为0.4%、菌体OD₆₀₀为30的条件下在5 L发酵罐等条件下进行全细胞转化,可以得到N-乙酰神经氨酸180 mmol/L,摩尔转化率为65.45%。用阴离子树脂对产物进行初步分离纯化,经高效液相色谱分析证实纯化后产品为高纯度N-乙酰神经氨酸,其纯度为98.3%,结晶回收率为42.5%。作者建立并优化了一种以含有N-乙酰葡萄糖胺的发酵液为底物直接进行全细胞催化生产N-乙酰神经氨酸的工艺流程,既节约了成本,又具有可持续发展的优势。     

旋光法测定发酵液中2-酮基-D-葡萄糖酸

通过测定发酵液的旋光度及其葡萄糖质量浓度,计算发酵液中2- 酮基-D- 葡萄糖酸的质量浓度,并考察该方法实际应用的可行性。结果表明：对照品溶液的旋光度、2- 酮基-D- 葡萄糖酸质量浓度和葡萄糖质量浓度之间存在良好的线性关系,R2 ＞ 0.9999;该方法精密度、稳定性和重现性良好,2- 酮基-D- 葡萄糖酸的平均回收率为102.60%,RSD 为2.17%(n=5)。该方法可用于发酵液中2- 酮基-D- 葡萄糖酸的定量检测。