黑曲霉固体发酵三七药材的皂苷变化研究

为研究黑曲霉发酵三七药材过程中皂苷类成分的化学变化,利用黑曲霉对三七药材进行固体发酵,根据高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱（HPLC-Q-TOF-MS/MS）联用的检测结果,对三七发酵产物的总皂苷类成分进行分析和鉴定,并探讨了皂苷含量变化。结果表明,黑曲霉可以高效的转化三七药材中皂苷类成分。三七药材经黑曲霉发酵之后,人参皂苷Rb1几乎全部转化生成其他物质,在发酵产物中已未检出,三七皂苷R1和人参皂苷Rg1大幅度减少,三七皂苷R2、人参皂苷Rh1、Rd等含量明显增加,并且在三七发酵产物中检出了稀有人参皂苷F1、Rh4、Rg3、CK、三七皂苷Rh16和T5。     

基于UPLC-Triple-TOF MS/MS对巴氏杀菌乳中磷脂成分的分析

基于超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间高分辨质谱(ultra-high performance liquid chromatography-triple quadrupole-time of flight tandem mass spectrometry,UPLC-Triple-TOF MS/MS)法对巴氏杀菌乳中的磷...     

高效液相色谱-Q-Exactive四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱在食品药品安全分析中的应用概述

食品药品基质复杂,食药安全分析需要更加准确可靠和方便快捷的检测方法和技术。Q-Exactive-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱的出现,使得液相色谱-质谱联用技术拥有更高的分辨率和质量精度,分析速度更快,适用于各种基质的食品药品的安全分析。本文介绍了高效液相色谱-Q-Exactive-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术的特点,根据样品的基质进行分类,对近年来高效液相色谱-Q-Exactive-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术在食品药品安全分析中的应用进行了概述。     

液相色谱-串联质谱法测定样品中地西泮残留量的不确定度分析

通过采用氨化乙腈和酸化乙腈提取,QuEChERS吸附剂净化,液相色谱-串联质谱法（Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry,LC-MS/MS）测定样品中地西泮含量。对《出口动物源食品中多类禁用药物残留量检测方法 液相色谱-质谱/质谱法》（SN/T 3235—2012）标准方法中测定地西泮的不确定度来源进行分析,并得出LC-MS/MS法测定地西泮浓度的扩展不确定度,为结果的符合性判定提供了依据。     

南酸枣皮果酒的化学成分和体外生物活性研究

该试验采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(ultra performance liquid chromatography quadrupole time-of-flight-tandem mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MS/MS),进行南酸枣皮果酒的化学成分指认.运用紫外分光光度...     

地道云南知竹酒活性成分含量测定

建立超高效液相色谱-串联质谱(ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法同时测定地道云南知竹酒中9种活性成分(甜菜碱、没食子酸、芦丁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、黄芪...     

6种家畜乳脂肪SFC-Q-TOF-MS指纹特征及建模可行性

为探索家畜乳脂肪质谱指纹特征和建立真实性判别模型,采集蒙古马、荷斯坦牛、双峰驼、山羊、牦牛和水牛乳代表性样品56份,超临界流体色谱-四极杆-飞行时间质谱仪（Supercritical Fluid Chromatograph Quadrupole Time of Fight Mass Spectrometry,SFC-QTOF-MS）电喷雾电离源正离子模式（ESI+）采集质谱。按乳甘油三酯（triacylglycerols,TAGs）480～910 m/z质谱范围,截取总基峰色谱图（Base Peak Ion chromatogram,BPI）和总质谱图（Mass Spectrum,MS）数据,并进行主成分分析（Principal Component Analysis,PCA）。结果表明,6种家畜乳以物种聚类距离符合物种分类学规律;有机和非有机牛乳分开聚类。乳脂肪质谱指纹可建立家畜乳的物种判别模型,并有望建立有机和非有机饲养模式判别模型。     

超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱快速测定乳及乳制品中21种真菌毒素

建立利用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱联用技术同时测定乳及乳制品中21种真菌毒素的方法.乳及乳制品经酸化乙腈提取后,采用Captiva-EMR Lipid净化柱净化,以C18色谱柱进行色谱分离,质谱采用全扫描/数据依赖的二级扫描模式(full scan data-dependent MS/MS acqu...     

LC-MS/MS技术在食品中农药多残留分析的应用进展

液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术在食品中多类农药的高通量、高效率筛查和确证分析方面发挥了重要作用。本文对基于四级杆滤质器的LC-MS/MS技术近年来在食品中农药多残留分析方面的应用进展进行了综述,重点讨论了液相色谱-低分辨串联质谱(三重四级杆串联质谱和四级杆线性离子阱串联质谱)以及液相色谱-高分辨串联质谱(四级杆飞行时间串联质谱和四级杆静电场轨道阱串联质谱)在多类农药多残留分析中的应用。     

HPLC-DAD-Q-TOF-MS在线筛选鉴定牛蒡中的抗氧化成分

建立高效液相色谱-飞行时间质谱联用在线筛选并鉴定牛蒡提取物中抗氧化活性成分的方法。样品经在线色谱柱分离后进行分流,一路与稳定的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼-甲醇溶液混合,实现在线筛选自由基清除剂;另一路进入二极管阵列检测器-串联三重四极杆飞行时间质谱,用于化合物的快速鉴别。负离子模式下,通过高分辨率质谱获得的相对分子质量结合化合物的紫外吸收特征,参考相关文献和部分对照品验证,从牛蒡乙酸乙酯相中筛选并鉴定出咖啡酸及衍生物19 种。本方法可实现快速定向筛选和鉴定食品及中药等复杂体系中的抗氧化活性成分。     

超高效液相色谱—串联质谱测定红烧老抽中六种合成色素的方法

建立了超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC/MS/MS)同时测定红烧老抽中日落黄、柠檬黄、苋菜红、胭脂红、诱惑红、亮蓝等6种合成色素的方法。样品用水稀释后经过聚酰胺粉柱子净化,采用超高效液相色谱-串联质谱进行分析。采用0.02mol/L乙酸铵和甲醇作为流动相,梯度洗脱,流速为0.2mL/min,在7min内实现6种合成色素的良好分离。串联质谱条件是正离子模式电离,采用多反应监测模式(MRM)。6种色素在10~1000μg/L的范围内线性良好。6种色素的方法最低检出限是10μg/kg,加标回收率在80.0%～93.4%之间,相对标准偏差在2.4%～6.8%之间(n=6)。本方法分析快速、定性准确、检出限低,应用到基质复杂的老抽类液体复合调味料的检测中效果较佳。     

高效液相色谱串联质谱法测定乳粉中低聚果糖

建立了测定乳粉中低聚果糖(蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖、蔗果六糖)的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法。乳粉样品用乙醇-水提取,上清液稀释后,采用XBridge TM Amide(3.5μm,4.6 mm×150 mm)柱,以乙腈-氨水溶液为流动相进行洗脱,电喷雾质谱负离子(ESI-),多反应监测(MRM)模式检测,外标法定量。该方法在0.5~20 mg/L范围线性良好(r0.9990,检出限最低为0.022 mg/kg)。分别在样品中添加标准物质1、5、10 mg/kg进行回收率实验,方法的回收率范围为90.8%~95.8%,相对标准偏差为3.6%~9.0%(n=6)。该方法样品前处理简单、快速,分析时间短,灵敏度、准确度和精密度均满足乳粉中低聚果糖的检测要求。     

蜂毒肽的分离纯化及结构鉴定

目的 对蜂毒肽进行分离纯化,并进行结构鉴定。方法 以意大利蜜蜂蜂毒为原料,经溶解、超声、浸提、过滤等,并制备C18液相色谱柱,对一次纯化采用的流动相、洗脱程序进行优化,对二次纯化时进样量、进样浓度进行选择,冻干后得到高纯度蜂毒肽。利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)和液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)进行分子量测定等定性研究,利用傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)进行二级结构表征,尝试利用低场核磁共振(nuclear magnetic resonance, NMR)技术对其氢谱定性解析,基于高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)的面积归一化法测定蜂毒肽纯度。结果...     

The Compound Characteristics Comparison (CCC) approach: a tool for improving confidence in natural compound identification

ABSTRACT

Compound identification is the main hurdle in LC-HRMS-based metabolomics, given the high number of ‘unknown’ metabolites. In recent years, numerous in silico fragmentation simulators have been developed to simplify and improve mass spectral interpretation and compound annotation. Nevertheless, expert mass spectrometry users and chemists are still needed to select the correct entry from the numerous candidates proposed by automatic tools, especially in the plant kingdom due to the huge structural diversity of natural compounds occurring in plants. In this work, we propose the use of a supervised machine learning approach to predict molecular substructures from isotopic patterns, training the model on a large database of grape metabolites. This approach, called ‘Compounds Characteristics Comparison’ (CCC) emulates the experience of a plant chemist who ‘gains experience’ from a (proof-of-principle) dataset of grape compounds. The results show that the CCC approach is able to predict with good accuracy most of the sub-structures proposed. In addition, after querying MS/MS spectra in Metfrag 2.2 and applying CCC predictions as scoring terms with real data, the CCC approach helped to give a better ranking to the correct candidates, improving users’ confidence in candidate selection. Our results demonstrated that the proposed approach can complement current identification strategies based on fragmentation simulators and formula calculators, assisting compound identification. The CCC algorithm is freely available as R package (https://github.com/lucanard/CCC) which includes a seamless integration with Metfrag. The CCC package also permits uploading additional training data, which can be used to extend the proposed approach to other systems biological matrices.

List of abbreviations: Acidic: acidic moiety; aliph: aliphatic chain; AUC: area under the ROC curve; bs: best glycosidic structure; CCC: Compounds’ Characteristics Comparison; Cees: Carbons estimation errors; CO: Carbon to Oxygen ratio; Het: Heterocyclic moiety; IMD: Isotopic Mass Defect (and Pattern); LC-HRMS: Liquid Chromatography – High Resolution Mass Spectrometry; md: mass defect; MM: Monoisotopic Mass; MS: Mass Spectrometry; MSE: Mean Squared Error; nC: number of Carbons; NN: Nitrogen; pC: percentage of Carbon mass on the total mass; Pho: Phosphate; PLSr: Partial Least Square regression; ppm: parts per million; QSRR: Quantitative structure-retention relationship; RMD: Relative Mass Defect; ROC: Receiver Operating Characteristics; rRMD: residual Relative Mass Defect; RT: retention time; Sul: Sulphur; UPLC-ESI-Q-TOF-MS: Ultra Performance Liquid Chromatography – ElectroSpray Ionization –Quadropole – Time of Flight – Mass Spectrometry; VAT: Vitis arizonica Texas     

反相高效液相色谱电喷雾质谱法鉴定葡萄籽低聚原花青素

建立了采用LCESIMS对葡萄籽提取物中的多种低聚原花青素进行分析鉴定的方法。原花青素用体积分数60%乙醇水溶液从葡萄籽中提取并用聚酰胺柱层析精制后,以乙腈1%醋酸水溶液为流动相在ZORBAXSBC18柱上进行梯度洗脱分离,在电喷雾电离负离子模式下采用选择离子监测模式(SIM)将几种低聚体进行了选择性的分离。结果所检葡萄籽提取物中共含有(+)儿茶素、(-)表儿茶素和(-)表儿茶素没食子酸酯3种单体、8种非酯型和4种没食子酸酯型共12种二聚体及4种非酯型三聚体等。建立的方法可以较好地解决葡萄籽中各种低聚原花青素的定性检测,了解提取物中原花青素的成分。同时文中还对原花青素二聚体的质谱碎裂途径进行了讨论。     

酿造酱油与酸水解植物蛋白调味液特征挥发性组分对比分析

应用顶空固相微萃取——气质联用技术和内标物定量方法,对酿造酱油和酸水解植物蛋白调味液中挥发性成分进行分析,筛选二者的特征挥发性组分并进行比较。发现二者的特征挥发性组分存在明显差异,主要表现在酿造酱油中特征组分以醇类、酚类、酸酯类以及呋喃类和吡咯类杂环小分子化合物为主,而酸水解植物蛋白调味液中特征组分则以吡嗪类杂环小分子化合物为主。上述研究结果为进一步开展酱油风味分析评价工作及建立基于挥发性风味组分的酿造酱油和非酿造酱油鉴别检验方法打下了较好的基础。     

豇豆中啶虫脒基体标准物质的研制

目的：建立豇豆中啶虫脒基体标准物质的研制方法。方法：将新鲜种植的空白豇豆样品粉碎、冻干、添加、混匀、二次冻干、粉碎、过筛、混匀、包装、Co60辐照灭菌。采用液相色谱—质谱串联方法进行检测,基体标准溶液定量校正。通过均匀性、稳定性检测合格后,采用实验室联合定值的方式进行测量定值。结果：该方法制备的样品易于贮藏、运输和稳定保存,均匀性、稳定性良好,其啶虫脒特性值为(0.283 7±0.008 5) mg/kg(k=2)。结论：试验制备的豇豆中啶虫脒基体标准物质符合国家计量技术规范中均匀性、稳定性要求,准确度良好,能够应用于检测过程中质量控制、分析仪器校准、检测方法确认评估等工作。     

超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法测定米炒人参炮制前后皂苷成分及其裂解规律的研究

目的 建立超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法（ultra performance liquid chromatography-quadrupole-orbitrap-mass spectrometry, UPLC-Q-Orbitrap-MS）检测分析方法。方法 采用Supelco C18色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,应用电喷雾离子源（ESI electro-spray ionization）,负离子全扫描模式采集一、二级质谱数据,扫描范围为150~2000 m/z。结合质谱数据库及相关文献信息,运用X Calibur2.2软件对米炒人参中皂苷类成分进行鉴定。以6种人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rb3进行模拟炮制,确定皂苷类成分裂解产物,明确皂苷成分的裂解规律。结果 从人参中检测出14个成分,鉴定出13种人参皂苷成分;米炒人参中检测出23个成分,鉴定出20种人参皂苷成分。通过比较人参米炒前后的皂苷类成分,发现米炒人参中存在人参中未检测到的8种稀有人参皂苷20(S)-Rg2、20(S)-Rh1、20(R)-Rh1、F2、20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、20(S)-Rs3、20(R)-Rs3。模拟炮制结果表明,人参皂苷Re脱去C-20糖基,转化为稀有人参皂苷20(S)-Rg2;人参皂苷Rg1脱去C-20位糖基,转化为稀有人参皂苷20(S)-Rh1、20(R)-Rh1;人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc脱去C-20或C-3位糖基,转化为稀有人参皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3或F2。结论 人参经米炒后,稀有人参皂苷成分增加,产生的稀有皂苷为原型皂苷发生苷键裂解而获得,模拟炮制可作为其裂解规律研究的有效方法。     

UPLC-MS/MS分析牛肉红朱橘成熟果实多酚类化合物积累特征

为探索贵州地方柑橘品种-牛肉红朱橘（NRH）多酚类化合物组成特征,以朱红橘（ZHJ）和红香柚（HXY）为对照,利用超高效液相质谱串联质谱技术（UPLC-MS/MS）和代谢组学方法,分析三个种质成熟果实积累特征。结果表明:共检测到493种物质,其中类黄酮（163种）最多,其次是酚酸（71种）。聚类热图、火山图、差异代谢物筛选、维恩图和KEGG功能注释等分析结果均表明,三个柑橘种质多酚类化合物种类和相对含量呈现种质特异性,遗传背景相似的NRH与ZHJ代谢物种类和相对含量更为接近,筛选到的差异代谢物较少;两者与HXY代谢物种类和相对含量差异较大,说明代谢物种类与种质类型间存在密切联系。本研究有助于了解地方柑橘种质多酚类化合物积累特征,为后期开发利用提供参考。     

气相色谱-电子轰击源质谱测定海产品中多溴联苯(醚)

海产品中多溴联苯残留现在已经成为新的食品安全危害因子,但是针对海产品中多溴联苯检测方法的研究还不多。针对海产品基质的特殊性,研究建立了样品的加速溶剂萃取仪(ASE)提取、多层硅胶层析柱净化前处理方法,采用定性离子和外标定量法建立了气相色谱-电子轰击源质谱(GC-EI/MS)法检测海产品中多溴联苯(PBBs)和多溴联苯醚(PBDEs)的定性和定量方法。所建立的十三种多溴联苯和多溴联苯醚GC-EI/MS方法的线性范围在10～200ng/mL,检出限在0.44～6.0ng/mL之间,具有较宽的线性范围和很高的灵敏度。通过添加回收实验表明,方法回收率在59.7%～97.2%之间,相对标准偏差(RSD)在1.0%～13.7%之间。