新疆石榴皮中抑菌物质的分离纯化及成分初探

试验以新疆喀什地区石榴皮为研究对象,以其抑菌活性为跟踪指标,通过系统萃取、硅胶柱层析、薄层层析、生物自显影等方法对石榴皮中抑菌物质进行分离纯化及成分初探。结果表明,系统分离各萃取相中,正丁醇萃取部分和萃取后剩余部分抑菌效果较好;静态和动态试验表明:以95%乙醇-甲醇-V(甲醇)︰V(乙酸)(3︰1)-蒸馏水-V(蒸馏水)︰V(乙酸)(3︰1)作为洗脱剂可将抑菌物质逐级分离,并且95%乙醇、甲醇、V(甲醇)︰V(乙酸)(3︰1)洗脱剂所得洗脱液的抑菌活性较强;95%乙醇洗脱剂所得流分的最佳展开剂为V(正丁醇)︰V(甲醇)=3︰7;溶剂和薄层板定性试验初步判断,95%乙醇洗脱剂所得流分中可能存在的抑菌物质为:生物碱、黄酮、酚类、物质E,在该展开剂中的Rf值分别为:0.545,0.550,0.585和0.632;其中,物质E表现出非常强的抑菌活性。     

酸枣壳木醋液的精制及保鲜效果研究

本实验采用旋转蒸发仪减压蒸馏精制木醋液,维持压强在0.01MPa条件下,分别收集低于75、75~90和90~100℃三个温度段的组分,并利用GC-MS分析精制前后的主要成分,并将精制后的木醋液稀释进行保鲜实验研究,测定樱桃西红柿的腐烂率、失水率和还原糖含量等指标。GC-MS分析表明,原木醋液中含有的主要化学成分为酸类、酮类、酚类、醇类和吡啶等。其中,乙酸含量最高,其次为酮类和苯酚。减压蒸馏精制木醋液,低于75℃温度段所含有机酸含量最多,pH较低。保鲜实验显示,浓度为5.0g/L的木醋液可以降低樱桃西红柿在贮藏过程中的失水率和腐烂率,对樱桃西红柿具有较好的保鲜效果。     

细辛超临界CO_2萃取物抑菌活性研究

本文研究了细辛超临界CO_2萃取物的抑菌活性。结果表明:细辛超临界CO_2萃取物对细菌、酵母、霉菌都有一定的抑菌作用,在酸性环境和碱性环境中效果较好,对大多数细菌、酵母、霉菌的MIC不超过1.56g/L。高温长时间处理和低温长时间处理对萃取物抑菌活性影响较大,但高温瞬时处理对萃取物抑菌活性影响不大。     

茶多酚的制备及其抑菌活性的研究

以精制绿茶粉为原料,制备茶多酚。采用滤纸片法和平板计数法研究了制备所得的茶多酚对供试细菌和酵母的抑菌活性及茶多酚浓度、与菌种作用时间、pH值、温度和氯化钠浓度对抑菌活性的影响。结果表明:茶多酚对细菌有较强的抑菌活性,而对供试的酵母抑制作用不明显;茶多酚对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为6.25%、12.5%、25%;茶多酚的浓度越高,与菌种作用时间越长,抑菌活性越强;在弱碱性环境中的抑菌活性最强;一定温度内处理不影响茶多酚的抑菌活性;氯化钠能增强茶多酚的抑菌活性。     

不同精制程度枣核木醋液挥发性成分分析

利用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法(HS-SPME-GC-MS)联用技术对以枣核为原料的粗提木醋液、精制木醋液和食用级木醋液进行分析,测定其挥发性成分,探究不同精制程度枣核木醋液的成分差异。结果表明,经HS-SPME-GC-MS共检测出43种挥发性成分,粗提、精制和食用级木醋液各检测出40,33和39种成分,公有挥发性物质为21种,分别占出峰面积的85.06%,88.97%和80.20%。主要挥发性有机成分组成种类无明显差异,主要为酚类、酸类、酮类和醛类;有机物相对含量随加工精度的不同,存在差异。     

覆盆子黄酮萃取分析

覆盆子黄酮是覆盆子中主要活性成分之一,具有抑菌、抗氧化、抗感染等生理活性。本实验利用HPLC法对覆盆子黄酮提取液二次萃取剂进行筛选,经HPLC分析可知,脂类的二次萃取效果好于氯仿和正丁醇,脂类萃取中,乙酸乙脂萃取后,出峰个数最多,且单物质峰与峰之间分开效果良好,单物质峰出峰时间有4种,4种标准品相似,相比之下,乙酸乙脂萃取效果好于其它萃取剂。     

荸荠皮抑菌活性成分微波提取工艺及抑菌特性

为了研究荸荠皮抑菌活性成分,利用微波辅助提取技术提取荸荠皮中的抑菌活性成分,以抑菌效果为评价指标,研究了微波功率、微波时间、乙醇体积分数和液固比等因素对抑菌效果的影响。提取物用石油醚萃取,研究了石油醚萃取相对枯草芽孢杆菌和酿酒酵母的最低抑菌浓度,并考察了温度、p H和紫外线等对石油醚萃取物抑菌活性的影响。通过正交试验确定的荸荠皮抑菌活性成分最佳提取工艺为:微波功率250 W、微波时间4 min、乙醇体积分数50%、液固比25∶1 mL/g。石油醚相对枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度为0.062 5 mg·mL~(-1),对啤酒酵母的最低抑菌浓度为0.25 mg·mL~(-1);石油醚相抑菌活性成分在一定范围的温度、pH和紫外线照射时间等条件下依然能保持较好的抑菌活性。     

荷叶超临界CO2萃取物抑菌活性研究

本文研究了荷叶超临界CO2萃取物的抑菌活性。结果表明荷叶超临界CO2萃取物对细菌、酵母、霉菌都有一定的抑菌作用,在酸性环境和碱性环境较为显著,对大多数细菌、酵母、霉菌的MIC不超过1.56g/l。高温长时间处理对萃取物抑菌活性影响较大,但高温瞬时处理对萃取物抑菌活性影响不大。     

山楂核抗氧化、抑菌活性物质的筛选和UPLC-Q-TOF/MS分析活性物质的化学成分

为了研究山楂核醇提物抗氧化和抑菌活性的有效物质及活性化学成分,通过评价DPPH、ABTS和羟自由基清除率、Fe3+还原能力和抑菌圈直径研究山楂核醇提物不同极性溶剂(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水)萃取物质的抗氧化和抑菌活性,通过超高效液相色谱与飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF/MS)分析活性物质。结果表明,乙酸乙酯萃取物质在清除DPPH和ABTS自由基、Fe3+还原能力方面优于其他部位;水萃取物质在清除羟自由基能力方面表现最好,乙酸乙酯萃取物质次之;在抑菌活性方面,相同生药浓度下仅有乙酸乙酯萃取物质对金黄色葡萄球菌具有抑菌活性。通过UPLC-Q-TOF/MS从最佳活性物质乙酸乙酯萃取物质鉴定出10个成分,主要为木脂素和醛类成分。由此可知乙酸乙酯萃取物质有较好的体外抗氧化活性和抑菌活性,推测其可能活性成分为木脂素类和醛类成分。     

荷叶超临界CO2萃取物抑菌效果稳定性研究

研究荷叶超临界CO2萃取物的抑菌稳定性,结果表明:荷叶超临界CO2萃取物对细菌、酵母、霉菌都有一定的抑菌作用,偏酸环境抑菌效果较稳定,常温、低温、光照及高温短时加热处理后其抑菌效果还较稳定,高温长时间加热后其抑菌效果减弱。     

生姜与醋泡姜抗氧化、抑菌和抗肿瘤活性比较研究

本文研究了生姜和醋泡姜的姜油和姜乙醇提取物的抗氧化、抑菌和抗肿瘤作用的活性差异。以抗坏血酸为对照,评价两类姜提取物的抗氧化活性(DPPH自由基、ABTS+自由基、羟自由基(·OH)清除能力和总还原能力);以96孔板微量稀释法比较了两类姜提取物对几种常见致病菌的抑菌活性;同时研究了两类姜提取物对HCT116(人结肠癌细胞)、HepG2(人肝癌细胞)、Skov3(卵巢癌细胞)等肿瘤细胞的抗癌效果。结果表明:醋泡姜的抗氧化活性总体上好于生姜,其中醋姜油对羟自由基(·OH)的清除能力(IC₅₀为0.28 mg/mL)明显强于生姜油(IC₅₀为0.42 mg/mL);生姜和醋泡生姜提取物都有一定的抑菌作用,醋姜油的抑菌效果稍好于生姜油,其中最好的是醋姜油对金黄色葡萄球菌的抑制作用(156.25 μg/mL);抗肿瘤活性基本相当。本研究结果表明,醋泡姜在抗氧化、抑菌功能上一定程度优于生姜。     

山西老陈醋类黑精的分离及其抑菌活性

为探究老陈醋类黑精的抑菌作用,采用超滤和尺寸排阻色谱法将山西老陈醋冻干粉（Shanxi aged vinegarextract,SAVE）分离成不同分子质量的水提物和类黑精部分,采用NaCl解离法将醋类黑精解离为类黑精骨架和小分子复合物两部分,用比浊法测定各组分对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌活性。结果表明：SAVE中的类黑精具有显著的抑菌活力（P＜0.05）,类黑精对SAVE的抑菌性发挥了主要作用;类黑精中分子质量在3～5 kD的组分抑菌活力最强,其对3 种受试菌的最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）均为5 mg/mL;类黑精组成中的小分子复合物比类黑精骨架部分具有更强的抑菌活性。     

四种食品防腐剂对食醋中芽孢杆菌的抑菌效果研究

探讨食品中常用的两种化学防腐剂(苯甲酸钠、尼泊金乙酯)和两种天然防腐剂(Nisin和ε-聚赖氨酸)对导致食醋产膜的芽孢杆菌的抑制作用。本试验通过试管二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),琼脂平板扩散法中的打孔法测定抑菌圈。试验结果表明,四种防腐剂的抑菌效果大小为:Nisin>ε-聚赖氨酸>尼泊金乙酯>苯甲酸钠。Nisin抑菌效果最好,对1号,2号,3号芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌的抑菌圈分别达到20.1 mm,21.1 mm,21.3 mm,17.5 mm,MIC分别为1.25,1.25,0.625,0.625 mg/mL。     

菱角壳黄酮提取物抑菌活性评价及对冷鲜鸭肉中假单胞菌生长特性的影响

为探究菱角壳黄酮提取物的抑菌能力及其对冷鲜鸭肉中假单胞菌生长特性的影响,采用抑菌圈法、MIC值测定和液体中生长曲线来评价其对食品中常见微生物生长的抑制作用,建立假单胞菌经浓度为2.5 mg/mL的黄酮纯化物处理后的鸭肉基质中的一级生长预测模型。结果表明:菱角壳黄酮提取物对假单胞菌、金黄色葡萄球菌有明显的抑制作用,其中黄酮纯化物对假单胞菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果更好,抑菌圈直径分别为(47.01±0.43)、(45.06±0.35) mm;菱角壳黄酮提取物对热杀索丝菌有一定的抑制效果,对大肠杆菌、乳酸菌和酵母菌无抑菌效果。菱角壳黄酮粗提物和纯化物对假单胞菌的MIC值均为3.125 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的MIC值分别为12.000和3.125 mg/mL。采用对供试菌抑菌效果最好的菱角壳黄酮纯化物浓度(2.5 mg/mL)处理鸭肉,在不同温度下储藏,发现与10、15和20 ℃相比,0和5 ℃可将冷鲜鸭肉的货架期延长至8 d以上,并且通过建立假单胞菌在经浓度为2.5 mg/mL的菱角壳黄酮纯化物处理后的鸭肉基质中的一级模型可知,在0~15 ℃储藏时,菱角壳黄酮提取物作为保鲜剂的抑菌效果较好,能够有效延长食品保质期,但随温度升高,其抑菌能力逐渐减弱,这为菱角壳开发为天然抑菌剂提供了理论基础。     

超声辅助水蒸气蒸馏法提取蓝桉叶中精油的工艺优化及其抑菌活性研究

目的初步探明蓝桉叶精油最佳提取工艺及不同提取工艺条件下蓝桉叶精油得率与其抗菌活性的差异性。方法以桉叶油得率为评价指标,采用超声辅助水蒸气蒸馏法,通过单因素与正交试验确定桉叶油最佳提取工艺。并检验正交试验各组合桉叶油对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和黑曲霉的抑菌效果。结果桉叶油的最佳提取工艺条件为料液比1:4(g/mL),超声时间25min,超声功率200W,蒸馏时间5h,桉叶油得率为1.51%。而抑菌试验结果表明,不同提取工艺所得桉叶油的抑菌活性存在差异。对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌而言,料液比1:6(g/mL),超声时间30 min,超声功率180 W,蒸馏时间5 h时抑菌活性最强,抑菌圈直径分别为(11.92±0.20)mm(n=3)和(10.25±0.35)mm(n=3),对应的桉叶油得率为1.28%;对黑曲霉而言,料液比1:7(g/mL),超声时间30min,超声功率200W,蒸馏时间7h时抑菌活性最强,抑菌圈直径为(12.25±0.29)mm(n=3),对应的桉叶油得率为1.38%。结论精油得率与其抑菌活性无相关性,针对不同的目标微生物需要单独优化提取工艺来获得相应的微生物抑菌剂。     

溶菌酶酶解物的抗菌活性研究

目的:考察溶菌酶酶解物的抑菌能力,为扩展溶菌酶的应用提供理论依据。方法:采用胃蛋白酶对溶菌酶进行酶解,得到溶菌酶酶解物(Lysozyme hydrolysate,LH);采用二倍稀释法检测LH对几种常见食品腐败菌的抑菌能力;以金黄色葡萄球菌为受试菌种,通过抑菌圈实验探讨LH的抑菌活性,并与溶菌酶和乳酸链球菌素作比较。结果:LH对几种常见阳性菌都有很强的抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑制作用最强;未经热处理时,LH的抑菌活性略低于溶菌酶,而高于乳酸链球菌素;经热处理后,LH的抑菌活性高于溶菌酶和乳酸链球菌素。菌酶酶解物有望被开发成一种天然的食品防腐剂。     

菱角梗、菱角壳提取物抑菌活性及其活性成分分析

采用滤纸片扩散法研究菱角梗、菱角壳乙醇提取液及其不同溶剂萃取物的抑菌活性,并考察不同温度、pH、紫外辐照对菱角梗、菱角壳乙酸乙酯萃取物抑菌活性稳定性的影响,最后,采用高效液相色谱法和超高效液质联用法对菱角梗、菱角壳乙酸乙酯萃取物中的成分进行鉴定。结果表明:菱角梗、菱角壳乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和酿酒酵母菌的最小抑菌浓度分别为0.391、0.391、3.125 mg/mL和0.098、0.195、1.563 mg/mL,抑菌效果显示,菱角壳乙酸乙酯萃取物优于菱角梗乙酸乙酯萃取物,二者萃取物均对革兰氏阳性菌具有显著抑菌作用,且效果强于革兰氏阴性菌,对真菌的抑菌作用最弱;菱角梗、菱角壳乙酸乙酯萃取物在温度20~100℃、pH5~9和紫外光处理10~40 min时,均表现出良好的抑菌稳定性。经鉴定,菱角梗乙酸乙酯萃取物中含量最高的是没食子酸和1,2,6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖,含量为45.87%,菱角壳乙酸乙酯萃取物中含量最高的是1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖、槲皮素-3-O-半乳糖苷和1,2,6-三-O-没食子酰-β-D-葡萄糖,含量为57.84%。本文为菱角梗、菱角壳提取物作为抑菌剂的实际应用提供了参考。     

植物复合精油对5种稻谷霉变优势菌株抑菌作用研究

为了研究天然植物精油(百里香、丁香、肉桂)对霉变稻谷的抑菌效果,以5种稻谷霉变优势菌株为受试菌,以霉菌抑菌圈直径大小和最低抑菌浓度（MIC）为指标,通过混料设计方法建立复合精油抑菌模型,结合方差分析得到抑菌效果最佳的植物精油配比。研究结果表明,单一精油抑菌活性对亮白曲霉（A. candidus）,杂色曲霉（A. versicolor）和聚多曲霉（A. sydowii）为肉桂精油>丁香精油>百里香精油;对稻黑孢霉（N. oryzae）为肉桂精油=丁香精油>百里精香油;对布罗克青霉菌（P. brocae）为丁香精油=百里香精油<肉桂精油。当肉桂精油:丁香精油:百里香精油的体积比为55.2%︰26.9%︰17.9%时,3种植物精油对5种菌株抑制效果最佳,复合抑制值大于90.9%。     

核桃粕蛋白抑菌肽的制备工艺及纯化

为探究具有抑菌作用的核桃粕蛋白酶解抑菌肽的制备工艺,本实验以核桃仁经压榨提油后的副产物-核桃粕为原材料,利用酶解法制备核桃粕蛋白抑菌肽,优化制备工艺,进一步分离纯化,测试抑菌肽对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌的抑制效果,筛选出具有最佳抑菌效果抑菌肽组分。研究结果表明:响应面优化胃蛋白酶酶解核桃粕工艺最佳条件为:温度54℃,pH3.46,加酶量5475.71 U/g,蛋白质水解度最优,可达13.99%;利用超滤技术对酶解肽分离纯化,得到4种不同分子量的酶解肽,抑菌实验表明H-Ⅱ （分子量为3~10 kDa）范围的酶解肽抑菌效果显著高于其他分子量范围的酶解肽（P<0.05）。本研究为核桃粕的深入研究利用以及新型抑菌肽产品的开发提供了数据支撑。     

林蛙抗菌肽的制备及抑菌活性研究

目的超声波方法提取林蛙表皮多肽,对其氨基酸组成和抑菌活性进行分析。方法以p H 4.5醋酸-醋酸钠缓冲液为提取溶剂,超声波方法提取林蛙表皮多肽,超高效液相色谱(UPLC)方法分析其氨基酸组成,同时采用活菌计数和滤纸片方法测定其抑菌活性。结果超声波方法提取林蛙多肽,提取率为19.81%,多肽分子量在3000~5000 Da,该活性多肽作用2 min对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌抑菌率均可达85%以上,作用5 min抑菌率可达100%;其对4株菌抑菌圈直径均可达10 mm以上。结论采用超声波方法可以从中国林蛙皮中提取抗菌肽物质,该抗菌肽为碱性多肽,对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌均具有很强的抑菌活性。