TritonX-100-硫酸铵双水相体系分离地榆根总黄酮

目的:研究利用双水相体系萃取地榆根总黄酮提取的最佳工艺条件。方法:探讨了Triton X-100质量分数,硫酸铵质量分数,黄酮粗提液质量分数、Na Cl质量分数和p H等因素对总黄酮萃取率的影响,并采用Box-Benhnken实验确定了最佳实验条件。结果:双水相萃取黄酮最佳条件为,确定双水相体系组成15%Triton X-100/15%硫酸铵,黄酮粗提液质量分数12%、Na Cl质量分数0.5%、p H6,地榆根总黄酮前萃取率达到80.02%;反萃取的最佳条件:取1.5m L黄酮萃取上相和2m L乙酸丁酯混合,反萃取率为80.03%。结论:采用双水相萃取地榆根总黄酮简单、易行,生产成本低,在中药提取中具有良好应用前景。      

TritonX-100-硫酸铵双水相体系分离地榆根总黄酮

目的:研究利用双水相体系萃取地榆根总黄酮提取的最佳工艺条件。方法:探讨了Triton X-100质量分数,硫酸铵质量分数,黄酮粗提液质量分数、Na Cl质量分数和p H等因素对总黄酮萃取率的影响,并采用Box-Benhnken实验确定了最佳实验条件。结果:双水相萃取黄酮最佳条件为,确定双水相体系组成15%Triton X-100/15%硫酸铵,黄酮粗提液质量分数12%、Na Cl质量分数0.5%、p H6,地榆根总黄酮前萃取率达到80.02%;反萃取的最佳条件:取1.5m L黄酮萃取上相和2m L乙酸丁酯混合,反萃取率为80.03%。结论:采用双水相萃取地榆根总黄酮简单、易行,生产成本低,在中药提取中具有良好应用前景。     

乙醇-硫酸铵双水相体系提取桃花总黄酮及其抗氧化性能

以桃花为主要原料,采用乙醇-硫酸铵双水相体系进行总黄酮提取工艺研究。在单因素实验基础上,以硫酸铵质量分数、液料比、提取温度、提取时间这4个因素作为自变量,以黄酮得率为指标,通过响应面法对桃花总黄酮提取工艺进行优化。以DPPH·、OH·和O₂^?·清除率为指标,对桃花总黄酮的抗氧化能力进行评价。结果表明,黄酮提取的最佳工艺参数为:硫酸铵质量分数15.2%,提取时间26 min,液料比27.8:1(mL/g),提取温度51℃。在此条件下,黄酮得率理论值可达45.64%,验证值为45.65%,与理论值十分接近。抗氧化实验结果表明,桃花总黄酮表现出较强的自由基清除能力,当浓度为0.56 mg/mL时,DPPH·清除率为94.21%,当浓度为0.672 mg/mL时,OH·和O₂^?清除率分别为91.23%和80.65%。响应面法优化双水相提取桃花总黄酮工艺合理可行,模型能较好地预测黄酮得率,得到的黄酮具有良好的抗氧化性能,可进一步开发利用。     

聚乙二醇-硫酸铵双水相体系分离纯化黄花蒿黄酮的研究

采用聚乙二醇-硫酸铵双水相体系分离纯化黄花蒿黄酮。通过单因素实验考察聚乙二醇平均分子量、（NH4）2SO4质量分数、聚乙二醇质量分数、pH和体系温度等对分配系数、萃取率的影响,并通过正交实验对萃取工艺条件进行进一步的优化,获得最佳工艺条为:双水相体系组成30%PEG600-25%（NH4）2SO4,体系温度45℃,体系pH为3。在此条件下,黄花蒿黄酮主要分布在上相,分配系数为21.86,萃取率达到96.33%。      

乙醇-硫酸铵双水相体系萃取坛紫菜多糖

探究不同系线长度的乙醇-硫酸铵双水相体系对坛紫菜多糖萃取的影响。采用浊点滴定法绘制乙醇-硫酸铵双水相相图,选取不同系线长度体系,测定其对紫菜多糖分配情况。结果表明：在乙醇质量分数27%、硫酸铵质量分数18%（即系线长度为40）、体系相比R为1.1时,紫菜多糖的回收率可达79.8%,分配系数K为0.23;其蛋白去除率明显高于传统醇沉法（双水相萃取多糖蛋白含量为1.20%,醇沉多糖蛋白含量为6.17%）,且具有较好的脱色效果,可用于紫菜多糖的分离纯化。     

异丙醇-硫酸铵双水相体系分离甜玉米芯多糖

以甜玉米芯为原料,采用超声波辅助异丙醇-硫酸铵双水相体系分离甜玉米芯多糖。对影响分离甜玉米芯多糖的主要因素:异丙醇体积分数、硫酸铵用量和超声时间进行单因素研究,以多糖回收率作为响应值进行响应曲面设计分析,建立二次回归模型,优化分离条件。结果表明超声波辅助双水相体系分离甜玉米芯多糖的最佳工艺条件为:异丙醇体积分数36%、硫酸铵浓度0.25 g/m L、超声处理时间25 min。在最佳的优化条件下,甜玉米芯多糖回收率为98.98%。异丙醇-硫酸铵双水相体系分离甜玉米芯多糖具有较好的脱蛋白和脱色效果,可用于甜玉米芯多糖的分离纯化。      

乙醇/硫酸铵双水相体系提取蕨麻多糖及其抑菌抗氧化活性

利用乙醇/(NH₄)₂SO₄在水溶液中形成的双水相体系作为多糖提取剂,采用响应曲面结合BBD中心组合实验设计,优化了蕨麻多糖双水相提取工艺;以滤纸片扩散半径作为抑菌活性考察指标;采用硫酸亚铁-过氧化氢-水杨酸氧化法和焦性没食子酸自氧化化法考察蕨麻多糖对活性自由基的清除能力。实验结果表明,在最佳提取条件下(1∶35 (g/mL),55 ℃,60 min),蕨麻多糖得率(14.46%±0.12%);抑菌实验结果表明,蕨麻多糖对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌属于抑菌高敏感型,对枯草芽孢杆菌属于抑制中度敏感型;蕨麻多糖对三种菌的抑制作用说明,多糖具有一定的抑制细菌活性,且对于不同的菌种的抑制作用具有选择性。抗氧化活性研究表明,蕨麻多糖具有清除自由基的能力,对·OH及O₂^-·的清除率分别为(76.38%±0.21%)和(25.01%±0.14%);对应的极限浓度分别为3.6 mg/mL和3.0 mg/mL。以上实验结果说明,通过响应曲面优化结合BBD实验设计,能够确定蕨麻多糖提取因素与得率之间的二次函数模型,为多糖的提取提供了定性与定量评价指标;同时蕨麻的体外抑菌抗氧化活性表明,蕨麻多糖具有一定的体外抑菌抗氧化活性。     

聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取葡萄糖氧化酶的研究

采用聚乙二醇/硫酸铵[PEG/(NH4)2SO4]双水相体系对葡萄糖氧化酶的萃取进行了研究。以双水相系统的上、下相的酶活、比酶活、相比R、分配系数K和萃取率Y等为参数,探讨了PEG质量分数、不同PEG浓度和不同硫酸铵浓度对葡萄糖氧化酶在PEG/(NH4)2SO4双水相系统中分配行为的影响。实验结果表明:葡萄糖氧化酶在25%的PEG4000和10%硫酸铵的双水相体系中可获得较高的萃取率达81.11%,分配系数为0.134。      

聚乙二醇/硫酸铵双水相体系萃取葡萄糖氧化酶的研究

采用聚乙二醇/硫酸铵[PEG/(NH4)2SO4]双水相体系对葡萄糖氧化酶的萃取进行了研究。以双水相系统的上、下相的酶活、比酶活、相比R、分配系数K和萃取率Y等为参数,探讨了PEG质量分数、不同PEG浓度和不同硫酸铵浓度对葡萄糖氧化酶在PEG/(NH4)2SO4双水相系统中分配行为的影响。实验结果表明:葡萄糖氧化酶在25%的PEG4000和10%硫酸铵的双水相体系中可获得较高的萃取率达81.11%,分配系数为0.134。     

响应面法优化乙醇/硫酸铵双水相体系萃取洋葱黄酮的研究

以洋葱为原料,以黄酮提取率为主要指标,对乙醇/硫酸铵双水相体系萃取洋葱黄酮进行研究。通过单因素试验,考察了乙醇质量分数、硫酸铵质量分数、洋葱粉加量对双水相萃取洋葱黄酮分配情况及提取率的影响。并采用Box-Behnken中心组合试验和响应面分析,对洋葱黄酮提取条件进行优化。试验结果表明,乙醇/硫酸铵双水相体系萃取洋葱黄酮的最佳条件为:乙醇质量分数32.1%,硫酸铵质量分数20.4%,洋葱粉加量0.45g,在此条件下,洋葱黄酮的提取率达3.74%。     

双水相萃取分离葡萄籽中原花青素

采用双水相萃取葡萄籽中原花青素,首先研究双水相萃取体系组成、辅助萃取方法、萃取策略对原花青素萃取效果的影响,并采用正交试验对原花青素萃取条件进行优化。结果表明,双水相萃取体系组成为无水乙醇/硫酸铵,辅助萃取方法为微波辅助法,萃取策略为乙醇+水+葡萄籽微波处理后加入硫酸铵,条件为无水乙醇/硫酸铵萃取体系为质量分数30%无水乙醇/质量分数20%硫酸铵,加入葡萄籽质量分数为3%,pH为4.0,微波功率100 W,微波时间5 min,在该条件下,葡萄籽中原花青素的萃取率为94.1%,得率为25.8mg/g;     

乙醇/(NH_4)_2SO_4双水相体系提取红景天多糖及抑菌抗氧化活性研究

利用乙醇/(NH_4)_2SO_4在水溶液中形成的分相体系作为多糖提取试剂,采用响应曲面结合BBD中心组合试验设计软件,选择优化多糖提取率与响应因素之间的最佳提取模型参数;以琼脂法结合滤纸片扩散半径作为抑菌活性考察指标;采用硫酸亚铁-过氧化氢-水杨酸氧化法和邻苯三酚(焦性没食子酸)自氧化化法考察红景天多糖对活性自由基的清除能力。试验结果表明,在最佳提取条件下[1∶22.5(g∶mL),50℃,37.5 min],红景天多糖提取率16.64%;抑菌试验结果表明,红景天多糖对金黄色葡萄球菌的抑菌直径(21.1±0.09)mm,属于抑菌极敏感型,对大肠杆菌的抑制直径(16.4±0.02)mm,属于抑菌高敏感度型,对枯草芽孢杆菌的抑菌直径为(12.6±0.04)mm,属于抑制中度敏感型;红景天多糖对3种菌的抑制作用说明,多糖具有一定的抑菌活性,且对于不同的菌种的抑制作用具有特异选择性。抗氧化活性研究结果表明,红景天多糖具有清除自由基的能力,参考VC阳性对照组的清除率,红景天多糖对羟基自由基(·OH)及过氧负离子自由基(O_2~-·)的相对清除率分别为65.1%和51.2%,对应的极限浓度分别为2.0 mg/mL和2.5 mg/mL。以上试验结果说明,通过响应曲面优化结合BBD试验设计,能够确定红景天多糖提取因素与提取率之间的二次函数模型,为多糖的人工提取提供了定性与定量评价指标;同时红景天的体外抑菌抗氧化活性结果表明,开发具有抑菌抗氧化活性的食品及药品防腐剂具有一定的实际应用价值,为红景植物资源的合理配置及相关产品的多元化应用提供技术指导与试验数据参考。     

双水相体系萃取分离葡萄酒下脚料中葡萄皮蛋白质

采用响应面法对双水相体系分离葡萄酒下脚料中葡萄皮蛋白质条件进行优化.在单因素实验基础上,选取pH、NaCl质量分数、样品加入量和温度为影响因子,利用Box-Behnken中心组合进行四因素三水平的实验设计,以蛋白质萃取率为响应值,进行响应面分析.结果表明,葡萄皮蛋白质的最佳萃取条件:质量分数为22％聚乙二醇(PEG600)-20％(NH4)2SO4体系,萃取pH7.1,NaCl质量分数1.2％,样品加入量2.41mL,萃取温度35.2℃.在此条件下,葡萄皮蛋白质萃取率的理论值为31.66％,实测值为31.08％ .     

双水相体系萃取分离葡萄酒下脚料中葡萄皮蛋白质

采用响应面法对双水相体系分离葡萄酒下脚料中葡萄皮蛋白质条件进行优化。在单因素实验基础上,选取pH、NaCl质量分数、样品加入量和温度为影响因子,利用Box-Behnken中心组合进行四因素三水平的实验设计,以蛋白质萃取率为响应值,进行响应面分析。结果表明,葡萄皮蛋白质的最佳萃取条件:质量分数为22%聚乙二醇（PEG600）-20%（NH4）2SO4体系,萃取pH7.1,NaCl质量分数1.2%,样品加入量2.41mL,萃取温度35.2℃。在此条件下,葡萄皮蛋白质萃取率的理论值为31.66%,实测值为31.08%。      

双水相体系萃取分离葡萄籽多糖

采用Plackett-Burman (PB)试验、最陡爬坡试验、响应面设计法对双水相萃取分离葡萄籽多糖的条件进行优化.首先,采用Plackett-Burman设计从影响萃取率的5因素中筛选出PEG质量分数、硫酸铵质量分数和萃取温度3个显著影响因素.在此基础上,通过最陡爬坡试验逼近最大萃取率区域,然后通过响应面组合试验对显著因素进行优化.得到最佳萃取条件为:PEG2000质量分数为8.92％、(NH4)2SO4质量分数为16.41％、萃取温度为38℃,萃取率可达55.1％,与预测值56.075％接近.     

Separation of cultured strawberry cells producing anthocyanins in aqueous two-phase system

A rapid and simple selection method of high-yield cells has been desired to establish highly productive cell lines for useful secondary metabolites. For this purpose, a new attempt was made to partition cultured plant cells in a poly(ethylene glycol)-dextran aqueous two-phase system (ATPS). The applicability of the ATPS in partitioning cultured strawberry cells (designated FAW) was investigated. The result of single-step partitioning in the ATPS supplemented with 0.4 mmol/kg lithium sulfate showed that FAW cells cultivated for 7 d under light-irradiation were separated into two cell populations with significantly different anthocyanin content. Additionally, the analysis technique of microscopic cell images showed that cells accumulating a high level of anthocyanin were partitioned completely into the bottom phase in a partitioning experiment of FAW cells cultivated for 10 d under light-irradiation in the ATPS supplemented with 1.8 mmol/kg potassium phosphate buffer. These results indicated that cell partitioning in ATPS increased the intracellular anthocyanin content and that the cultured strawberry cell population was heterogeneous in terms of cell surface properties. This is the first report of partitioning based on the heterogeneity of the cell surface properties correlated with the intracellular secondary metabolism in cultured plant cells. Our results also suggested that the ATPS was appropriate as a large-scale method for selecting useful cell lines among the cultured plant cells.