水相体系酶法制备甘油磷脂酰乙醇胺的研究

研究了水相体系中脂肪酶Thermo 4S-3水解大豆粉末磷脂制备甘油磷脂酰乙醇胺(L-α-GPE)的可行性,探讨了反应条件对磷脂酰乙醇胺(PE)转化率和L-α-GPE得率的影响.确定脂肪酶Thermo4S-3催化制备L-α-GPE的最佳反应条件为:pH 7,底物质量浓度5 mg/mL,反应温度40℃,酶添加量30 U/mL,CaCl2添加量3.33 mg/mL,反应时间6h.在最佳反应条件下,PE转化率为95.5％,L-α-GPE得率为93.6％.     

醇相体系制备高纯甘油磷脂酰胆碱的研究

探讨了在醇相体系中甲醇钠催化制备甘油磷脂酰胆碱(L-alpha glycerylphosphorylcholine)的可行性,建立了磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine)和L-α-GPC的HPLC-ELSD检测方法,研究了温度、料液比、甲醇钠添加量、反应时间对PC转化率和GPC得率的影响。利用Design Expert软件对工艺参数进行优化,得最佳条件:温度35℃、料液比3/20(g/mL)、甲醇钠添加量2 mL、反应时间1.5 h,GPC得率为88.2%。极差分析结果,反应条件对GPC得率影响的顺序为:甲醇钠添加量>温度>反应时间>料液比。大豆粉末磷脂的醇解反应液经过硅胶柱色谱纯化,最终可以得到纯度为99.8%的L-α-GPC,回收率78.4%,这为工业级规模制备高纯L-α-GPC提供了一种好的思路和方法。     

脂肪酶Bakezyme LFP水解大豆粉末磷脂研究

以酸值为指标,通过单因素实验和正交实验确定了脂肪酶Bakezyme LFP在水相中水解大豆粉末磷脂的最佳工艺条件为:反应温度为50℃,反应时间为8h,p H为5.0,加酶量为8%,底物质量浓度为25mg/m L。在该工艺条件下,大豆磷脂水解产物酸值为65.2mg KOH/g。利用气相色谱-质谱联用仪分析了水解前后大豆磷脂的脂肪酸组成,结果表明水解后饱和脂肪酸含量明显下降,不饱和脂肪酸含量明显增加,说明脂肪酶Bakezyme LFP主要水解大豆磷脂1位上脂肪酸,具有磷脂酶A1的特性。利用高效液相色谱分析水解前后大豆磷脂的磷脂酰乙醇胺（PE）和磷脂酰胆碱（PC）含量,结果表明大豆磷脂中PE、PC发生水解,生成溶血磷脂。      

有机相酶促粉末磷脂制备溶血磷脂的研究

选用磷脂酶A1为工具酶,以响应面为数值分析方法,在正己烷有机相中进行了大豆粉末磷脂水解制备溶血磷脂研究。探讨了反应时间,反应温度,加酶量,底物浓度,加水量,pH对其反应的影响。结果表明,溶血磷脂制备优化条件为:反应时间12.1 h,反应温度45℃,加酶量3%,底物浓度20.8%,加水量23.8%,pH 6。该条件下验证得溶血磷脂酸值(KOH)为77.8 mg/g。所得产物中磷脂酰胆碱和1-酰基-溶血磷脂酰胆碱含量分别为15.51%和3.99%,且2-酰基-溶血磷脂酰胆碱相对含量为19.6%。     

树脂柱色谱纯化甘油磷脂酰胆碱

研究了树脂柱色谱纯化甘油磷脂酰胆碱(L-α- GPC)的可行性,通过树脂筛选,确定D001大孔阳离子交换树脂为最佳纯化树脂,并对纯化工艺条件进行了优化.通过静态实验得到最优条件:上样质量浓度1.52 mg/mL,样品溶液pH为7,吸附时间300 min,解吸液为去离子水.在静态实验的基础上,进行了树脂柱色谱纯化L-α - GPC的动态实验,对吸附流速、解吸液和解吸流速进行优化.动态实验最优条件:吸附流速2 mL/min,解吸液为去离子水,解吸流速2 mL/min.依据动态实验最优条件,最终L -α- GPC的纯度为96％,回收率为54.1％,这表明树脂柱色谱纯化L-α - GPC的方法是经济、方便、可行的.     

磷脂酶D催化合成磷脂酰丝氨酸的工艺研究

本文研究了磷脂酶D催化合成磷脂酰丝氨酸的工艺,实验结果表明有机相和水相比例、磷脂酰胆碱(PC)浓度、反应温度、水相pH以及反应时间都对磷脂酰丝氨酸的制备有一定的影响。通过正交实验优化利用磷脂酶D催化合成磷脂酰丝氨酸的最佳工艺为:有机相和水相的比例为4/4、PC浓度为75mg/mL、反应温度为40℃、水相pH值为4.0、反应时间为12h,在此工艺条件下磷脂酰丝氨酸得率为:68.9%。     

脂酶催化下大豆粉末磷脂与全氢化大豆油酯交换反应的研究

本文利用脂酶的特异性催化作用,研究了正己烷体系中,大豆粉末磷脂与全氢化大豆油的酯交换反应。利用碘值和产率为指标,考察了酶的种类及用量、底物摩尔比、温度、时间等因素对酯交换反应的影响,通过单因素和正交试验优化了大豆粉末磷脂与全氢化大豆油酯交换反应条件。发现在25%磷脂酶A1(以磷脂质量为基准)催化下,摩尔比4:1的全氢化大豆油和大豆粉末磷脂的正己烷溶液(磷脂浓度为0.20 g/mL),在50 ℃下反应24 h,得到产率为72.9%的改性磷脂。与原料磷脂相比,改性磷脂的碘值由89 g /100 g降至52 g /100 g,脂肪酸组成变化较大,硬脂酸含量约为原料磷脂的9倍,不饱和脂肪酸亚麻酸和亚油酸含量降低了约一半,实现了大豆粉末磷脂的结构修饰。     

水相体系酶法制备甘油磷脂酰胆碱的研究

研究了脂肪酶（Thermo4S-3）在水相体系中制备甘油磷脂酰胆碱（GPC）的可行性,并探讨了脂肪酶水解条件对GPC得率的影响。实验结果表明脂肪酶（Thermo4S-3）可以实现豆粉末磷脂的水解反应,具有制备甘油磷酸胆碱（GPC）的工业应用前景。正交实验优化结果如下:反应温度40℃,底物浓度33.3g/L,酶添加量30U/mL,CaCl2添加量2g/L。利用HPLC-ELSD进行定量分析,GPC得率达到96.5%。LC-MS/MS定性分析,GPC的结构与标样分析的一致。      

溶血磷脂乳化稳定性研究

研究大豆粉末溶血磷脂乳化稳定性,并与原料大豆粉末磷脂进行比较;结果表明,在不同的pH、温度、离子强度、油水比条件下,大豆粉末溶血磷脂乳化稳定性远优于大豆粉末磷脂。     

磷脂酶A1催化大豆粉末磷脂水解工艺研究

利用磷脂酶A1对大豆粉末磷脂进行水解,研究了反应温度、加酶(PLA1)量、反应时间、加水量及搅拌速度对磷脂酶A1水解大豆粉末磷脂的影响.通过单因素试验确定的最佳反应条件为:反应温度60℃,加酶量8%,反应时间8 h,加水量5 mL,搅拌速度500 r/min.在此条件下产物酸价可以达到101.4mgKOH/g.     

酶法制备甘油磷酸胆碱的研究

研究了水相体系中磷脂酶A<,1>水解大豆粉末磷脂制备甘油磷酸胆碱(GPC)的可行性,探讨了反应条件对磷脂酰胆碱(PC)转化率和GPC得率的影响.确定磷脂酶A<,1>催化制备GPC的最佳反应条件为:在pH 7的150 mL磷酸盐缓冲溶液中,粉末磷脂添加量5 g、CaCl2添加量0.50 g、酶添加量0.50 mL,温度55 ℃,反应时间6 h;利用LC-MS分析最佳条件下的反应液,得到PC转化率为98%,GPC得率达到95%;同时验证了在磷脂酶A<,1>催化制备GPC的过程中生成的溶血磷脂(LPC)Sn-2位不饱和脂肪酸发生了酰基转移,转移到Sn-1位.     

利用脂肪酶从大豆浓缩磷脂中回收油脂的研究

对酶法从大豆浓缩磷脂中回收油脂进行了研究,以脂肪酶 Lecitase Ultra (EC3.1.1.3) 为催化剂,利用其高度特异性磷脂酶A1活力,催化大豆浓缩磷脂水解反应,释放包含的油脂,从而达到回收油脂的目的.反应的最佳条件为:底物浓度60%,温度45℃,加酶量500 mg/kg,反应时间12 h,初始pH 5.0.在最佳条件下,回收油脂得率可达125%.     

大豆溶血磷脂的制备及其对面包品质的影响

利用液态磷脂酶A1,在水相中催化水解大豆粉末磷脂制备溶血磷脂,得出最佳反应条件为:磷脂与溶剂比为15%、加酶量6%、pH=5.0、反应温度50℃、反应时问8h,此条件下反应得磷脂酸值为79.46mg KOH/g.并研究了溶血磷脂对面包焙烤品质的影响,发现溶血磷脂的用量在0.60%～1.0%范围内能有效增大面包体积;硬度值测定结果表明,溶血磷脂对延缓面包老化有显著效果.     

大豆溶血磷脂的制备及其对面包品质的影响

利用液态磷脂酶A1,在水相中催化水解大豆粉末磷脂制备溶血磷脂,得出最佳反应条件为:磷脂与溶剂比为15%、加酶量6%、pH=5.0、反应温度50℃、反应时间8h,此条件下反应得磷脂酸值为79.46mgKOH/g。并研究了溶血磷脂对面包焙烤品质的影响,发现溶血磷脂的用量在0.6%～1.0%范围内能有效增大面包体积;硬度值测定结果表明,溶血磷脂对延缓面包老化有显著效果。      

冷冻结晶法纯化制备高纯度磷脂酰乙醇胺

为解决工厂低磷脂酰胆碱(PC)含量大豆粉末磷脂的积压问题,以及获得高纯度的磷脂酰乙醇胺(PE),以用碱性乙醇从低PC含量大豆粉末磷脂中提取的粗PE产品为原料,通过冷冻结晶法纯化制备高纯度PE。在单因素实验的基础上,以PE含量为指标,通过响应面实验对冷冻结晶纯化条件进行了优化。结果表明,PE的最佳冷冻结晶纯化条件为：料液比1∶40,冷冻时间21.5 h,冷冻温度-25℃,乙醇体积分数94%,乙醇碱浓度为94%乙醇与25%氨水体积比100∶8。在最佳条件下,产品PE含量为76.56%,PE回收率为81.25%。因此,冷冻结晶法纯化工艺可用于制备高纯度PE。     

高纯度磷脂酰肌醇的提取工艺研究

以低磷脂酰胆碱(PC)含量大豆粉末磷脂为原料,建立以碱性乙醇为溶剂结合冷冻纯化制备高纯度磷脂酰肌醇(PI)的方法。在单因素实验的基础上利用响应面优化实验确定PI的最佳提取条件为:冷冻时间17 h,冷冻温度-20℃,提取温度40℃,料液比1∶27,98%乙醇与25%氨水体积比100∶4,提取时间40 min,提取次数3次。在最佳条件下,产物PI含量为82.62%,得率为14.29%。     

大豆粉末磷脂的酶解工艺及产物性能研究

研究了放线菌型磷脂酶A2在水相中酶解大豆粉末磷脂的工艺条件,确定了最佳工艺组合为底物浓度10%,Ca2 浓度10mmol,温度40℃,初始pH值7.5,水解时间19h,磷脂转化率达43.3%;同时从宏观和微观两角度对酶解磷脂的乳化性能进行了研究,结果表明:酶解磷脂的乳化稳定性约为粉末磷脂的3倍,相同乳化能力下用量可减少50%,达到氧化平衡时的过氧化值为粉末磷脂的41.0%。     

柱色谱法分离甘油磷脂酰胆碱的研究

通过大豆粉末磷脂水解获得甘油磷脂酰胆碱(GPC)混合物,然后从3种典型的离子交换树脂中筛选出D113树脂作为分离GPC的主要树脂,研究了不同pH的解吸液对柱色谱分离GPC的影响。研究表明,不同条件下各组分的洗脱曲线和GPC纯度具有较明显的变化,pH接近7的情况下,在整个解吸过程中GPC纯度均较理想。解吸液通过特定的阴离子交换树脂的进一步纯化,所得产品经过HPLC分析,GPC的干基含量为97.11%。     

大豆粉末磷脂微波真空干燥工艺研究

利用微波真空干燥技术干燥大豆粉末磷脂.设计大豆粉末磷脂干燥的微波真空干燥工艺,确定大豆粉末磷脂微波真空干燥的工艺参数范围,优化干燥工艺条件.在温度为60℃,微波功率为80 mA(255 W),干燥时间为20 min时,大豆粉末磷脂产品的干燥百分率为51.69%,大豆粉末磷脂中的丙酮不溶物为98.5%.     

酶法合成共轭亚油酸型磷脂的研究

在非水相体系中利用固定化脂肪酶为催化剂,将共轭亚油酸酰基转移到磷脂分子中,合成富含共轭亚油酸(CLA)的改性磷脂。选用的三种常用的固定化脂肪酶中Lipozyme RM IM催化效率最高,最佳反应条件为:CLA乙酯与大豆粉末磷脂的摩尔比为4∶1,反应温度45℃。对反应产物中的CLA含量进行检测分析表明,48h后其含量可以达到31.3%。进行分离处理后,检测该产品的理化指标。