辣根过氧化物酶固定化方法的探索及分析应用

1前言固定化酶是20世纪60年代开始发展起来的一项新技术,是酶工程的主要内容,它的发展很快。近年来人们已开始转向固定化酶在工业、医学、化学分析、环境保护、能源开发等方面的应用研究。目前,国际上采用的酶的固定化方法包括：吸附法、健合法、包埋法和交税法等。吸附法制备的固定化酶会导致酶的较大程度的失活。为了克服酶的流失、渗漏,提高酶的活性收率,本实验设计出了两种新的固定化方法：氧化铝吸附一海藻酸钠包埋法及氧化铝吸附-戊二醇交联一海藻酸钠包埋法,以辣报过氧化物酶（HRP）制备固定化酶,并应用于混样中L－Tyr和雨…     

纳米Fe3O4协同海藻酸钠固定化桑叶多酚氧化酶

探索磁性纳米Fe3O4协同海藻酸钠固定化桑叶多酚氧化酶.通过单因素和正交试验优化固定化条件,并采用电镜技术对固定化桑叶多酚氧化酶进行形态观察.试验结果表明最佳固定化条件为:按质量比3∶5加入磁粉纳米Fe3O4到4％海藻酸钠溶液里,在质量分数为1％氯化钙中包埋1.0h,再用质量分数为1.5％戊二醛交联1.5h,此条件下的酶活回收率为93.44％.通过与非磁性的海藻酸钠固定化酶的对比,磁性纳米Fe3O4复合海藻酸钠固定化酶包覆良好,酶活回收率提高了7.84％.     

超声波对固定化辣根过氧化物酶活性影响研究

为了研究超声波对固定化酶活性的影响,以固定化辣根过氧化物酶为对象,研究了不同超声波处理条件(超声功率,超声时间)以及超声条件下催化体系的pH、温度对固定化酶活性的作用。同时对超声波处理后固定化酶活的重复利用性进行测定。结果表明,超声波处理对提高固定化酶在高温、强酸碱条件下催化活性有一定帮助,最佳处理条件为:超声波功率50 W,超声时间30 min,pH 8,温度35℃,在此条件下,与未经超声波处理相比,固定化酶活性提高了17.6%,固定化酶重复利用性增强,经7次使用后,固定化酶催化活性是未经处理的1.8倍。     

辣根过氧化物酶生物降解五氯酚

采用辣根过氧化物酶催化降解五氯酚(PCP),探讨了pH值、温度、n(H2O2):n(PCP)和酶用量等因素对五氯酚去除率的影响.通过向反应体系中投加非离子型表面活性剂Tween-40,增强了辣根过氧化物酶的稳定性,延长了酶活性时间,并对其作用机理进行了探讨.实验表明非离子型表面活性剂Tween-40能够提高五氯酚的去除率,降低处理成本.     

固定化黄孢原毛平革菌合成木素过氧化物酶

用聚氨酯泡沫块固定黄孢原毛平革菌（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ）,在摇瓶条件下研究了合成木素过氧化物酶的特点和重要影响因素。固定化培养与游离菌线球培养相比,最高酶活提高６４％．固定化细胞重复利用４批仍保持较高的产酶活性。高剪应力对酶活有抑制作用。苯甲醇可以代替藜芦醇强化木素过氧化物酶的合成,其最佳浓度为５．２ｍＭ。利用自制的相相流化床反应器进行了间歇产酶试验,发现最佳通气     

辣根过氧化物酶在三种孔材料上的在线固定化研究

利用已建立的顺序注射紫外可见分析系统,以硅基介孔材料MCM-41、SBA-15和炭材料XC-72作为载体,研究和比较了辣根过氧化物酶(HRP)在3种无机孔材料上的在线吸附行为。结果表明,HRP在XC-72上的负载量和结合稳定性高于MCM-41和SBA-15,且以XC-72为载体制备的固定化HRP具有较高的活性和良好的操作稳定性。     

固定化黄孢原毛平革菌木素过氧化物酶的研究

用大孔吸附树脂进行黄孢原毛平革菌来源的木素过氧化物酶固定化试验,筛选出固定化效果较好的XAD7HP大孔树脂,研究了其固定化条件。结果表明,当树脂1.0g,酶液pH4.5,加酶量87.2U,吸附温度25℃,吸附4h,戊二醛质量分数0.2%,戊二醛处理时间120min,可获得最佳的固定化效果,固定化酶活力可达到16U/g(对载体)。     

漆酶的固定化研究

<正> 漆酶(EC.1.10.3.2)最先由Yoshida发现,经过近百年来的研究,特别是现代化科学仪器的大量分析测试,人们对它的认识在不断深化。关于漆酶的性质、催化特点和结构等已有文献综述。本文单就近年来固定化漆酶的研究概况作个介绍,以促进我国漆酶的开发利用。酶是生物体内的催化剂。如果没有酶,生物界将永远是一片死寂。但酶都是水溶性     

多巴胺包埋磁性SiO2固定化漆酶催化去除4-氯酚

以磁性纳米颗粒为载体,通过多巴胺(dopamine,DA)聚合原位包埋制备了磁性SiO₂固定化漆酶(Fe₃O₄@SiO₂-PDA-Lac)。结果显示纳米颗粒尺寸均匀,并且保持较高的饱和磁性。通过最优条件制备出的固定化漆酶在50℃放置6 h后,活性保持在63%,而游离酶仅保留18%。将固定化酶用于催化降解4-氯酚(4-CP),探究了溶液pH、漆酶浓度和ABTS[2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸铵)]对4-CP去除率的影响。固定化漆酶在反应最适pH时,4-CP去除率为84.3%,而游离酶仅为65.7%。当漆酶浓度为1.2 U·ml^-1时,反应8 h后,4-CP去除率可达95%,而游离酶的4-CP去除率仅82%。ABTS可促进固定化漆酶降解4-CP,当体系中加入50 μmol·L^-1 的ABTS,反应10 min后,固定化酶对4-CP去除率可达99%。固定化漆酶在重复使用10次后,4-CP去除率仍可达67%。     

酶的固定化技术

酶是一种高活性的生物催化剂,虽然其在酶生物燃料电池和传感器等方面的应用十分广泛,但酶在工业上的广泛应用一直受到很多限制,因为酶在水溶液中一般很不稳定.酶的固定化技术与合理设计、酶生物传感器的结构仍然是酶生物燃料电池和传感器领域今后研究的重要方向.如果通过酶的固定化技术的改进能使酶在使用过程中提高其稳定性,保持催化活性将使酶生物传感器得到更大的发展.     

过氧化物酶-4与胃癌发生发展的相关性

目的分析过氧化物酶-4(peroxidase-4,Prx4)与胃癌发生发展的相关性。方法利用甲基硝基亚硝基胍(N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导正常胃黏膜细胞GES-1构建癌变细胞模型,通过细胞形态、增殖率、迁移能力及集落形成能力的改变,确定MNNG最适浓度及最适诱变时间;经划痕试验、MTT法、集落形成试验、Western blot法和RT-PCR法进一步检测Prx4与胃黏膜上皮细胞恶性转化过程及转化细胞发展过程的相关性。结果MNNG最适浓度为8×10~(-5) mol/L,最适诱变时间为16 h。细胞恶性转化过程中呈现出细胞相对增殖率、迁移能力、集落形成能力整体升高的趋势;Prx4蛋白表达水平在0～16 h逐渐升高,16～24 h有所下降,而此时Prx4基因mRNA转录水平明显升高。转化细胞发展过程中呈现出细胞相对增殖率、迁移能力、集落形成能力整体逐渐升高的趋势;随着培养时间的增加,Prx4蛋白表达水平逐渐降低,Prx4基因m RNA转录水平无明显变化;但培养24 h时,恶性转化细胞mRNA基因转录水平显著高于正常胃黏膜细胞和胃腺癌细胞(P 0. 01)。结论正常胃黏膜细胞GES-1诱变16 h时已基本发生转化。细胞水平上,Prx4在转化过程中高表达,因此,Prx4主要参与并促进细胞转化过程。     

氯过氧化物酶催化过氧化氢氧化水溶性偶氮染料的降解

水溶性偶氮染料的脱色降解是印染行业废水处理的技术瓶颈。研究水溶液中加入H₂O₂,氯过氧化物酶高效催化氧化偶氮染料（橙黄Ⅳ和皂黄）的主要发色基团的性能,探讨影响染料降解率的主要因素pH、温度、H₂O₂用量、氯过氧化物酶用量、染料初始浓度和反应时间等。结果表明,加入H₂O₂,氯过氧化物酶对橙黄Ⅳ和皂黄具有较好的脱色降解效果,橙黄Ⅳ在5 min的脱色率达91.02%,皂黄在7 min的脱色率达88.83%。通过液质联用技术测定了橙黄Ⅳ染料降解的中间产物及最终产物,并以此对降解途径进行初步推测。     

固定化酶研究进展

固定化酶有许多优点,尤其是稳定性和可重复使用性使其在许多领域得到广泛应用.固定化酶技术是一门交叉学科技术,目前已得到长足的发展.介绍了固定化酶制备的传统方法以及一些新方法,同时对酶在一些性能优良的载体上的固定进行了综述.     

固定化辣根过氧化物酶的电化学和电催化特性

用海藻酸钠(SA)将辣根过氧化物酶(HRP)固定到热裂解石墨电极表面,制备了HRP-SA膜修饰电极。研究发现包埋在SA膜中的辣根过氧化物酶可与电极直接传递电子,在缓冲溶液中可得到一对辣根过氧化物酶辅基血红素Fe(Ⅲ)/Fe(Ⅱ)电对的可逆氧化还原峰。其式电势随溶液pH值增加而负移,且呈线性关系,这说明辣根过氧化物酶的电子传递过程伴随有质子的转移。并考察了HRP-SA膜修饰电极对氧气、双氧水、一氧化氮的电催化性质。     

Fe3O4-A12O3磁性固体酸催化乳酸丁酯的合成研究

将磁性基质Fe3O4与Al2O3进行结合制备了Fe3O4-Al2O3磁性固体酸,将其作为乳酸丁酯合成的催化剂,对于乳酸丁酯合成工艺条件进行了研究,结果表明适宜的制备条件为:焙烧温度为550℃,n(Al2O3):n(Fe3O4)=4,焙烧时间为4h,酯化反应时间为3h,醇酸比为3,催化剂的用量为0.20g.该固体酸有良好的回收和重复使用性能,红外分析表明在固体酸中Fe3O4与Al2O3发生了紧密地结合,产物为乳酸丁酯,比表面积测试表明磁性固体酸中的Fe3O4抑制.Al2O3晶粒的增长,使A12 O3粒度变小.     

酶固定化载体及固定化方法最新研究进展

游离酶在工业生产等实际应用中存在着性质较不稳定、耐酸碱性弱、耐热性不强等诸多的局限性,对游离酶进行固定化是克服上述的不足的有效手段.本文将对常见的固定化载体(有机载体材料、无机载体材料和复合载体材料)和固定化方法(吸附法、包埋法、离子结合法、交联法和热处理法)以及一些新型固定化方法和新载体研究进展进行系统的深入介绍,并...