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目的探讨Tollip转染人肝癌细胞系HepG2215细胞对HBsAg和HBeAg分泌的影响及其机制,为乙型肝炎的治疗寻找新的靶点。方法含HA标签的重组表达质粒pCMV-HA-Tollip经EcoRⅠ和KpnⅠ双酶切鉴定后,采用脂质体LipofectamineTM2000转染HepG2215细胞,共设4个转染组:脂质体转染对照组(15μl脂质体)、空质粒转染对照组(6μg空质粒、15μl脂质体)、空质粒重组质粒共转染组(3μg空质粒、3μg pCMV-HA-Tollip、15μl脂质体)及重组质粒转染组(6μgpCMV-HA-Tollip、15μl脂质体),转染48 h后,收集细胞,经Western blot检测AKT、p-AKT、NF-κB以及HA标签蛋白的表达;收集上清,ELISA法检测HBsAg和HBeAg的水平。结果重组质粒pCMV-HA-Tollip经双酶切鉴定构建正确。空质粒重组质粒共转染组和重组质粒转染组均有HA标签蛋白的表达,而脂质体转染对照组和空质粒转染对照组无HA标签蛋白表达;与空质粒转染对照组比较,空质粒重组质粒共转染组和重组质粒转染组中NF-κB和p-AKT蛋白的表达明显降低(P<0.01),而AKT蛋白的表达无明显变化(P>0.05);空质粒重组质粒共转染组和重组质粒转染组细胞上清中HBsAg和HBeAg的含量明显低于空质粒转染对照组(P<0.01),对HBsAg的抑制率分别为24%和41%,对HBeAg的抑制率分别为13%和31%。结论 pCMV-HA-Tollip重组质粒在HepG2215细胞中能有效抑制HBsAg和HBeAg的分泌,其机制可能与抑制AKT的磷酸化和下调NF-κB的表达有关。 相似文献
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应用篮式生物反应器和新型载体连续培养CHO-C_(28)细胞HBsAg的表达 总被引:1,自引:1,他引:1
应用篮式生物反器,以聚酯纤维为载体连续灌流培养乙肝重组CHO-C_(28)细胞,观察细胞生长和HBsAg的表达。结果灌流速度提高到每天3.5倍工作体积,收液中HBsAg的RPHA效价在维持期为1:256~1:1024。在细胞生长旺盛时,可提高转速使溶解氧(D.O.)控制在20%~30%。在收液中,由于细胞残渣少,既可避免灌流系统堵塞,又有利于提纯。 相似文献
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利用体外转录信使RNA(IVT mRNA)进行疫苗接种、基因治疗已经成为医学领域的热点。在全球SARS-CoV-2大流行期间,信使RNA(mRNA)药物研发备受关注。成熟的mRNA需要5’帽来保证mRNA的稳定和基因表达。在这项研究中,我们研究了mRNA的体外转录,探讨了不同mRNA加帽方法,包括酶法加帽、抗反向帽类似物(ARCA)加帽以及三核苷酸帽类似物Clean Cap加帽,并尝试了使用多个新型ARCA结构对m RNA进行加帽修饰,为mRNA药物制剂的研发打下了一定的基础。 相似文献
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张丽 《中国生物制品学杂志》2003,16(3):188-189
<正> 《中华人民共和国药品管理法》中明确规定体外诊断试剂为药品,但体外诊断试剂与治疗和预防用药品相比有其特殊性,在产品注册、上市后管理、使用说明书、包装标签等方面都不同于治疗用药品。 相似文献
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不同肟类N—甲基氨基甲酸酯的杀虫活性和离体胆碱酯酶抑制作用的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
文中测定了一系列α-氰基甲酮肟和三氟甲基苯基甲酮肟类N-甲基氨基甲酸酯的杀虫活性和抑制胆碱酯酶活性。α-氰基烷基甲酮肟类N-甲基氨基甲酸酯具有极好的杀虫活性和抑制胆碱酯酶活性,而α-氰基苯基甲酮肟类衍生物仅仅呈现抑制胆碱酯酶活性。三氟甲基苯基甲酮肟类N-甲基氨基中甲酸酯甲具有力的杀虫活性和胆碱酯 相似文献
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硝苯地平口服渗透泵片的制备及其体外释药特性 总被引:8,自引:3,他引:8
研制了单室单层硝苯地平口服渗透泵片 ,考察了片剂配方和主要制备参数、实验条件参数对药物释放速率的影响。在大量实验基础上 ,对硝苯地平口服渗透泵片的配方和制备参数进行优化 ,所确定的最优片芯配方为 (以片为基准 ) :硝苯地平 30mg ,β 环糊精 98 3mg ,聚环氧乙烷10mg ,聚乙烯吡咯烷酮 2 1 2 5mg ,渗透活性物质 14 0 4mg ;最佳孔径为 5 0 0 μm。依据最优方案制备的硝苯地平口服渗透泵片经体外释放度测定表明 ,在 2 1h内该渗透泵制剂形态稳定 ,具有良好的零级释放特性 相似文献
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《应用化工》2022,(8):2182-2186
研究了槐米黄酮的纯化条件和体外抗氧化活性。结果表明,槐米黄酮经聚酰胺柱层析的最适纯化条件:黄酮上样液pH值6~7,质量浓度5 mg/mL,上样量1.5 BV,吸附流速1.0 mL/min,用3 BV去离子水清洗聚酰胺柱,4 BV解吸液80%乙醇溶液,解吸流速1.5 mL/min,聚酰胺树脂反复使用5次后进行再生处理。以Vc为阳性对照,槐米黄酮具有一定的体外抗氧化能力,其中在高浓度区间对·DPPH有较好的清除效果,且与Vc接近,对·O-_2和·OH都有一定的自由基清除能力,但效果稍差于Vc,对Fe-_2和·OH都有一定的自由基清除能力,但效果稍差于Vc,对Fe(3+)有较好还原力,且在较低和较高质量浓度范围内好于Vc。 相似文献
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镁肥在荔枝和柑橘上的施用效应 总被引:1,自引:0,他引:1
土壤镁素已逐渐成为提高广东水果产量和品质的重要障碍因子。本文研究了镁肥对荔枝和柑橘类水果的施用效应。田间试验结果表明:在土壤缺镁的情况下,配施适量镁肥可使荔枝增产11.4%~33.3%,增收10.8%~37.5%;在土壤镁硫均缺乏的条件下,荔枝施用硫钾镁肥增产增收效果优于氯化镁。柑适施镁肥比不施镁肥处理显著提高产量,果实品质提高,增收效果好。沙田柚配施不同种类镁肥,以硫酸镁的增产增收作用最好,碳酸镁增产作用次之,但由于成本较高,增收效果不及硫钾镁肥。 相似文献
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荔枝核主要含酸性化合物,挥发油,碳水化合物等化学成分,其主要药效有降血糖,调血脂,抑制乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)等,干燥对荔枝种的发芽率,活力指数和湿度会产生影响,荔枝种应在80%NO2/20%O2的条件下贮藏。 相似文献
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防晒剂Parsol1789光分解抑制的研究 总被引:8,自引:0,他引:8
Parsol 1789是一种良好的UVA吸收剂 ,能充分吸收 32 0~ 40 0nm的紫外光 ,目前仍是使用频率较高的防晒剂 ,但光照会使之大幅分解 ,而使防护能力下降。为抑制Parsol 1789的光分解 ,增强其光稳定性 ,本文选用黄酮类化合物作抑制剂进行抑制实验。研究发现 ,有些黄酮类化合物 (如芦丁 )对Parsol 1789的光分解有较好的抑制作用 ,光分解的最大抑制率可达 93.8%。 相似文献
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以过硫酸铵为引发剂,采用水溶液聚合法,合成马来酸酐(MA)、丙烯酰胺(AM)和甲基丙烯酸甲酯(MMA)三元共聚物。经红外分析测试证实所得产品为三元共聚物。选择两种共聚物和AA/AMPS对常见无机垢进行阻垢分散实验,聚合物具有低剂量效应,对抑制碳酸钙、硫酸钙和磷酸钙垢沉积效果显著,同时分散氧化铁性能较好。 相似文献
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采用Box-Behnken响应曲面优化设计对荔枝皮吸附去除水中染料孔雀绿(MG)的影响因素(如吸附时间、吸附剂用量、pH值)进行研究,建立了去除率和上述因素之间的二次多项式模型,得到荔枝皮吸附孔雀绿的最佳吸附条件为:温度25℃、吸附时间122.31min、吸附剂用量2.81g/L、pH=6.75、MG浓度为100mg/L,最优条件下荔枝皮对孔雀绿的吸附去除率可以达99.75%。用Langmuir和Freundlich方程对吸附等温线进行拟合,其中Langmuir方程拟合效果最好,其最大吸附量为142.86mg/g,且吸附过程符合假二次动力学模型。此外,热力学结果表明,荔枝皮对孔雀绿的吸附属于自发的吸热过程。结合吸附-解吸循环实验和对吸附的FT-IR表征,表明荔枝皮是一种极具潜力的高效的吸附剂,能有效去除水中的孔雀绿离子。 相似文献
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表面活性剂在芡实栲胶提取中作用的初步研究 总被引:3,自引:0,他引:3
邓宇 《化学工业与工程技术》2002,23(2):1-2
研究了表面活性剂在芡实栲胶提取中的作用。试验条件为 :6 5 %的乙醇水溶液 ,原料呈粒度为 0 .3cm方块 ,浸提温度 6 0℃ ,浸出时间 2h ,乙醇水溶液中的水使用蒸馏水 ,加入适量的表面活性剂 ,浸提液呈中性 ,结果可得栲胶 9% 相似文献
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通过电化学方法,测定了在冷却水中单纯加入钼酸钠、苯骈三氮唑、以及二者配合使用时的缓蚀效果。结果表明钼酸钠与苯骈三氮唑对碳钢具有力同缓蚀效应. 相似文献
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双乙酸钠抑制产黄青霉菌的效果观察 总被引:2,自引:0,他引:2
用PDA培养基于32℃培养时,当下述防霉剂浓度皆为0.3%,SDA比丙酸钙、山梨酸钾和苯甲酸钠对产黄青霉菌有更好的抑制效果;SDA抑制产黄青霉菌的适宜浓度为0.1%~0.2%。 相似文献