黄海希瓦氏菌多克隆抗体部分特性的分析

采用免疫学方法,以仿刺参Apostichopus japonicus"化皮病"病原菌——黄海希瓦氏菌Shewanella marisflavi AP629福尔马林灭活疫苗作为免疫原,对新西兰大白兔进行免疫,制备了高效价的多克隆抗体。通过间接酶联免疫、间接免疫荧光和免疫印迹等技术对多克隆抗体的部分特性进行了分析。结果表明:获得的多克隆抗体的效价为1∶32768;多抗与黄海希瓦氏菌标准菌株存在很强的阳性反应,与弧菌和气单胞菌、链球菌和大肠杆菌交叉反应很弱或不存在交叉反应;多抗不仅与菌体本身反应,与菌株表面的分泌物也发生特异性结合。免疫印迹结果显示,多克隆抗体与黄海希瓦氏菌AP629结合的抗原决定簇主要蛋白带有6条,相对分子质量分别为131 000、128 000、113 000、62 000、38 000和33 000,其中38 000和33 000蛋白条带的抗原性最强;与胞外产物结合的抗原决定簇清楚的蛋白条带主要有3条,相对分子质量分别为62 000、38 000和33 000,其中62 000蛋白条带的信号最强。     

噬菌体展示技术及其在病原微生物研究中的应用进展

噬菌体是能特异性地感染细菌的一类病毒,其基因数目少,结构相对简单,容易在分子水平上操控其基因。噬菌体展示技术是将外源肽或蛋白以融合蛋白形式表达并呈现在噬菌体衣壳表面的分子生物学技术。与传统的研究方法相比,噬菌体展示技术具有通量高、成本低、操作简单、耗时短等优点。本综述主要聚焦噬菌体展示技术在病原微生物抗原筛选、抗体制备和疫苗研制等方面的应用进展。     

太平洋鳕抗冻基因AFP4的原核表达及多克隆抗体的制备

为进一步研究太平洋鳕Gadus macrocephalus抗冻蛋白AFP4的功能,通过RT-PCR方法克隆得到太平洋鳕4型抗冻蛋白基因(AFP4)的开放阅读框(open reading frame,ORF),构建原核表达载体并优化表达条件,利用纯化的重组蛋白制备多克隆抗体,采用间接ELISA法检测抗体的效价,用Western-blot法分析重组蛋白的免疫原性。结果表明:AFP4基因编码区长度为375 bp,编码125个氨基酸;将AFP4基因的ORF与载体p ET-32a连接,构建重组体p ET-32a-AFP4,并将其转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中;经诱导、表达和条件优化,发现该重组体在37℃、0.01 mmol/L IPTG条件下诱导3 h获得最大的表达量;对该重组蛋白进行纯化,利用纯化的蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA法检测该抗体效价为1∶1 600 000;Western blot分析显示,重组蛋白可以与兔抗AFP4多克隆抗体发生特异性结合,表明该重组蛋白具有免疫原性。本研究结果可为深入研究太平洋鳕AFP4蛋白功能提供理论依据。     

太平洋鳕抗冻基因AFP4的原核表达及多克隆抗体的制备

为进一步研究太平洋鳕Gadus macrocephalus抗冻蛋白AFP4的功能,通过RT-PCR方法克隆得到太平洋鳕4型抗冻蛋白基因(AFP4)的开放阅读框(open reading frame,ORF),构建原核表达载体并优化表达条件,利用纯化的重组蛋白制备多克隆抗体,采用间接ELISA法检测抗体的效价,用Western-blot法分析重组蛋白的免疫原性。结果表明:AFP4基因编码区长度为375 bp,编码125个氨基酸;将AFP4基因的ORF与载体p ET-32a连接,构建重组体p ET-32a-AFP4,并将其转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中;经诱导、表达和条件优化,发现该重组体在37℃、0.01 mmol/L IPTG条件下诱导3 h获得最大的表达量;对该重组蛋白进行纯化,利用纯化的蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,采用间接ELISA法检测该抗体效价为1∶1 600 000;Western blot分析显示,重组蛋白可以与兔抗AFP4多克隆抗体发生特异性结合,表明该重组蛋白具有免疫原性。本研究结果可为深入研究太平洋鳕AFP4蛋白功能提供理论依据。     

LPS诱导小鼠急性肺损伤TLR4及TNF-α表达

目的:研究脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤机制。方法:实验分为正常对照组、模型组及抗体组;正常对照组小鼠腹腔腔内注射等量0.9%Na Cl。模型组腹腔内注射LPS(4 mg/kg)。抗体组在造模前8~10 h,应用小鼠Toll样受体4/髓样分化蛋白2(TLR4/MD2)复合物抗体腹腔内注射50μg。各组均在造模5 h后留取血和肺组织,采用细菌内毒动态浊度法检测血浆LPS的含量,HE染色判定小鼠肺组织病理变化,RT-PCR测定小鼠肺组织TLR4基因表达,Western-blot测定TLR4蛋白表达;ELISA检测小鼠血清中TNF-α的水平。结果:和正常对照组比较,模型组及抗体组小鼠血浆内毒素含量显著升高(P<0.05),模型组小鼠肺组织HE染色呈ALI表现;和模型组比较,抗体组TLR4 m RNA、蛋白及TNF-α的表达明显下调(P<0.05)。结论:急性肺损伤机制可能与LPS和TLR4受体结合介导TNF-α信号途径相关。     

高裂度地震带复杂崩坡堆积体人工挖孔桩施工技术研究

结合公司实际施工项目,针对人工挖孔桩施工,详细介绍了高裂度地震带复杂崩坡堆积体人工挖孔桩施工技术的施工工艺流程与操作要点以及关键技术,通过实际工程的应用验证了此技术的可靠性,具有很好的推广应用价值。     

人工挖孔桩的承载力及施工优势分析

人工挖孔桩因其施工过程中易发生事故而倍受争议。是否应该彻底放弃人工挖孔桩？文章通过对人工挖孔桩和钻孔桩在承载力和施工各方面的对比分析,阐述了人工挖孔桩的工程应用优势,对于提高人工挖孔桩的竞争力具有积极意义。     

日本建筑抗震技术的新进展

<正> 随着超高强混凝土和钢筋、预应力技术、各种减震装置的开发与推出以及设计、计算技术的不断进步,具有高抗震性能的高层和超高层建筑在地震多发的日本国仍在不断涌现。一栋号称世界最高的超高层"免震住宅"已出现在日本的新川崎,又名为都市型住宅新建工程。该住宅楼高135m,总建筑面积为108 000 m~2,由7栋7～41层"免震建筑"构成。地下停车场与人工地基一体化。"免震装置"设在人工地基与一层梁之间,构建成"中间免震建筑群"。免震构法采用了由承包施工的大成建设公司自行开发的"混合TASS构法",核心技术为天然积层橡胶与弹性滑动支承的结合。此外,混凝土柱采用了80～100 MPa超高强混凝土,并与预应力梁相组合。图1为这幢超高层建筑的施工外貌。     

"避让"方式在边坡工程治理中的应用

以某建筑工程基坑边坡治理设计为例,将地质灾害治理中的"避让"方式引入人工边坡治理,合理利用已有的地质灾害治理及边坡治理经验及理论。设计过程中将边坡治理中的"避让"与建筑平竖设计、消防要求、人防设置、环境融入等进行有机结合。总结"避让"方式在边坡工程治理中的"方案选型、应用原则、应用方式、应用效果"等方面的实践经验。     

建筑桩基单桩承载力不同计算方法研究

为了研究高层建筑桩基础工程检测技术应用的准确性与实用性,用ABAQUS模拟了桩基工程单桩竖向极限承载力,并结合桩基检测技术进行了对比分析。结果表明,桩周土沉降变形分布呈"马蹄铁"形,并随着距离的增大而减小;高应变动力试验法比静荷载试验法在用时、便携和资源节省方面有优势,并结合有限元法解释了不同方法所得值有误差的原因。     

AND SO ON,AND

…aporia is not something negative, not something which in fact paralyses us. but on the contrary it is an ordeal, a test, a crucial moment through which we have to go, even if we are stuck, we have to experience this moment of aporia in order to make a decision, in order to take responsibility, in order to have a future, and so on and so forth.¹     

高与低,快与慢,新与旧

城市美是城市规划的任务。本文讨论高低层建筑的部局 ,速度与视觉的关系以及集体记忆的形成     

岩爆及其判据和防治

 岩爆研究可以追溯到18世纪上半叶。迄今为止,虽然诸多科研成果已经问世,但岩爆仍然是一个世界性难题。作为一般性的论述,首先提供一些背景材料,涉及到国内外一些工程实例、研究方法等。然后,叙述国际范围内常用的一些岩爆判据和岩爆分级方法;论述岩爆的预测和预报;对岩爆防治,包括应力解除钻孔、注水湿化和锚固等方法进行综述。最后,对锦屏二级水电站辅助洞发生的岩爆实例进行重点介绍,并在综合已有资料的基础上对岩爆判据、分级及防治等提出意见和建议。     

滑坡分析及防治的研究现状及展望

总结了国内外滑坡研究的现状,分析了目前存在的主要问题,为进行滑坡形成机理、分析防治等研究提供了综合性的指导和建议。     

管治及城市与区域管治——一种新制度性规划理念

管治 (Governance)作为一种在政府与市场之间进行权利平衡再分配的制度性理念 ,已经愈来愈成为全球性的共同课题 ,并迅速渗透到城市与区域规划的具体行动中来。文章探究了管治概念的由来与本质 ,分析了管治理念在城市与区域规划中的体现 ,也客观评价了其局限性 ,为我国相应的研究与实践提供了先期借鉴     

雅致而不失浪漫,朴实又透着天真——王小工作品评论

＂勒柯布西耶式的粗框眼镜,黑色的鸭舌小帽,谈起建筑时激情洋溢的神情和浑厚的音色……＂这是建筑师王小工在我脑海中最初的一些印象片段,后来有幸与王小工在一起共事,对他和他的建筑作品便也有了进一步解读的机缘。     

延续与开创:EMBT的前世今生

2012年6月21日,西班牙已故建筑师、EMBT建筑事务所创始人恩里克·米拉耶斯基金会于巴塞罗那成立。为庆祝该基金会的成立,同时也为纪念恩里克·米拉耶斯逝世十二周年(2012年7月3日),本刊特邀西班牙建筑师、米拉耶斯生前好友弗朗西斯科·佩纳先生为本刊EMBT专辑撰稿。此文原文为西班牙语,经本刊编辑部翻译成中文和英文。文中注释为本刊编译者加注。     

关于目前招投标中存在的问题及对策

目前在招投标活动中,业主单位常采取一系列手段保护自身利益,违规操作,明招暗定,搞虚假招标。投标单位为了竞争取胜,也采取了一些违规行为,扰乱建筑市场秩序。有些地方监督部门不严格监督招投标各方的行为。文章分析问题产生的原因及带来的危害性,提出了相应的对策,力求引起社会各界的高度重视,不断改进和完善我国招投标管理制度。     

能耗、生物气候建筑与建筑师

在生态设计的时代 ,建筑师如何考虑能耗问题至关重要。在此 ,讨论了建筑能耗 ,建筑设计中的能耗与生态环境之间的关系 ,以及如何提高建筑能效。生物气候建筑是追求舒适、健康、高效率、低能耗的绿色建筑 ,是通向可持续的未来建筑。     

中小学楼梯事故分析与防治

近几年，在全国发生的中小学生拥挤踩踏事故中，83％发生在楼梯间，事故多是由楼梯问内学生拥挤导致栏杆倒塌引起的，故楼梯栏杆设计时不能仅在建筑设计中做构造处理，更应对其进行受力分析和强度、刚度验算。