胰岛素在氟诱导成骨作用中的地位

采用实时PCR测试了投氟大鼠的骨组织成骨和胰岛素受体等基因表达情况,采用免疫组化技术观察了胰岛分泌胰岛素情况,以及采用生化方法检测血清中的胰岛素、血糖和血脂等变化,利用体外成骨细胞染氟考察了胰岛素受体在成骨细胞内表达及氟联合胰岛素对骨髓间充质干细胞的成骨作用影响。结果表明:给予低剂量氟3个月后,大鼠骨组织碱性磷酸酶、骨钙素、Runx2(Runt相关转录因子)及胰岛素受体表达显著提高,而高氟组成骨标志基因碱性性磷酸酶、骨钙素、Runx2也明显提高,说明给予大鼠氟3个月能够诱导成骨;给与低剂量氟从1个月到3个月后,大鼠血清的胰岛素浓度明显提高,高氟作用3月后,胰岛素分泌降低,这与高剂量氟给氟3月大鼠胰岛素受体表达明显下降相一致。体外实验中,ρ(F-)=2mg/L和8mg/L氟明显促进了成骨细胞内抗胰岛素受体荧光抗体的强度,而且10μg/mL胰岛素联合ρ(F-)=1mg/L和4mg/L能够刺激成骨细胞活性。氟ρ(F-)=1mg/L和4mg/L刺激了成骨细胞碱性磷酸酶的活性。体内氟中毒大鼠模型实验结果表明,低剂量氟作用3个月刺激成骨作用的同时,伴随着胰岛素分泌增强,并促进成骨细胞内胰岛素受体表达增多,体外实验也表明了胰岛素刺激成骨细胞增生的作用,这些实验数据说明胰岛素参与了低剂量氟诱导成骨作用机制。     

丹红注射液对脂多糖诱导THP-1巨噬细胞促炎因子分泌的影响及机制

目的观察丹红注射液对脂多糖(LPS)诱导的THP-1巨噬细胞促炎因子分泌的影响,并探讨其机制。方法 160 nmol/L佛波酯孵育THP-1巨噬细胞24 h后分为对照组、脂多糖组、丹红组和脂多糖+丹红组,酶联免疫吸附法检测培养液中促炎因子的含量,Western blot检测核因子κB(NF-κB)、p65和Toll样受体4(TLR4)的蛋白表达水平。结果丹红注射液明显抑制LPS诱导的巨噬细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β)释放,下调核因子NF-κB和TLR4的表达。结论丹红注射液抑制脂多糖诱导的炎症反应,可能与其抑制TLR4和NF-κB的表达有关。     

泛素连接酶在骨形成调节中的作用

泛素-蛋白酶体系统是维持细胞内蛋白质稳态和功能的重要调节途径，泛素化参与调节细胞的增生、分化和存活，泛素化调节异常可导致代谢性骨病、肿瘤等疾病的发生。越来越多的证据表明泛素-蛋白酶体系统参与调控成骨细胞功能和骨形成。泛素连接酶（E3 ubiquitin ligases，E3）作为泛素和底物蛋白之间的衔接分子可特异性识别底物，在骨形成相关蛋白调节和骨转换过程中具有重要的意义。既往研究表明E3连接酶通过介导酪氨酸激酶受体、信号蛋白和转录因子等参与成骨细胞增生、分化、存活和骨形成的调节。Smurf1、Cbl和SCF^β-TrCP等E3连接酶可特异性介导Runx2、MEKK2、JunB、β-catenin、Gli2、ATF4等成骨细胞分化重要调节蛋白的降解，抑制成骨功能。E3连接酶作为促进骨形成和减少骨丢失理想的治疗靶标，具有广阔的研究前景。本文对E3连接酶在骨形成调节中的作用及机制进行回顾和总结。     

NLRP3/NF-κB通路在慢性前列腺炎的变化和意义

为探讨慢性前列腺炎患者中核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)样受体家族3 (NLRP3)炎症小体介导的核因子κB(NF-κB)信号通路的表达及变化。采用酶联免疫吸附法(Elisa)检测血清中NLRP3、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1 (Caspase 1)、Toll样受体4(TLR4)和NF-κB的表达。采用Real-Time PCR检测患者血清中NLRP3、人细胞凋亡相关斑点样蛋白(PYCARD)、Caspase 1、NF-κB mRNA表达。与健康对照组相比,慢性前列腺炎患者血清炎性因子NLRP3、TLR4和NF-κB含量显著升高,L-Iβ、IL-18、TNF-α和Caspase 1含量显著增高,NLRP3、PYCARD、Caspase 1、NF-κB mRNA含量显著增高。说明检测患者血清中NLRP3/NF-κB信号通路有利于了解患者慢性前列腺炎状态并协助前列腺炎患者的疾病监测。     

基于TLR4/NF-κB信号通路探讨醒脑静改善反复缺血-再灌注脑损伤小鼠学习记忆能力的作用研究

目的:探讨醒脑静通过TLR4/NF-κB信号通路改善反复缺血-再灌注(I/R)脑损伤小鼠学习记忆能力的作用。方法:将50只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组,醒脑静低、中、高剂量组,制备大鼠脑反复I/R损伤模型。造模成功2 h后,醒脑静低、中、高剂量组分别给予醒脑静注射液1、5、10 mL/kg进行腹腔注射,1次/d,连续给药7 d。假手术组和模型组腹腔给予等容量生理盐水。用Morris水迷宫实验检测小鼠的学习记忆能力,对脑组织进行TTC染色,检测脑组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、TLR4、NF-κB和IκBα表达。结果:与假手术组相比,模型组小鼠逃避潜伏期的时间和脑梗死体积均显著升高,脑组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、TLR4、NF-κB和IκBα表达均显著升高,穿越平台次数显著降低(P<0.05);与模型组相比,各醒脑静治疗组小鼠逃避潜伏期的时间和脑梗死体积均显著降低,脑组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、TLR4、NF-κB和IκBα表达均显著降低,穿越平台次数显著增加(P<0.05),且随药物剂量增大而变化(P<0.05)。结论:醒脑静能减小脑梗死体积,改善反复脑I/R损伤小鼠学习记忆能力,其机制可能与抑制脑组织中TLR4/NF-κB信号通路,减轻炎症刺激有关。     

HMGB1在呼吸道合胞病毒支气管肺炎患儿中的作用及机制

目的 探讨高迁移率族蛋白1 (High-mobility group box 1, HMGB1)在呼吸道合胞病毒支气管肺炎患儿中的作用及相关机制。方法 选取2016年6月至2017年6月在云南省第二人民医院就诊的呼吸道合胞病毒支气管肺炎患儿和同期在本院做体检的健康儿童各46例分别作为试验组和对照组，收集外周血样品。通过酶联免疫吸附试验 (Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)的方法检测促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、hs-CRP以及HMGB1在试验组和对照组外周血中的表达情况。通过流式分析，检测对照组和试验组外周血单个核细胞中Toll样受体4 (Toll-like receptor, TLR4)和核转录因子 (Nuclear factor kappa B, NFκB)的表达量。在细胞水平上，用合胞病毒 (Respiratory syncytial virus, RSV)感染支气管上皮细胞NHBE后，利用Western blot检测HMGB1干扰组和对照组中TLR4、NFκB的表达，以及利用ELISA检测炎性因子的分泌情况。结果 试验组HMGB1、TLR4、NFκB和炎性因子 (IL-6、IL-8、TNF-α、hs-CRP)的表达水平均显著高于对照组。在细胞水平上发现合胞病毒可诱导支气管上皮细胞NHBE中HMGB1的表达和分泌，并增加TLR4、NFκB的表达，促进炎性因子的分泌IL-6、IL-8、TNF-α、hs-CRP。用HMGB1 shRNA干扰序列，干扰HMGB1的表达，发现TLR4的表达显著下调，炎性因子分泌减少。结论 HMGB1及其介导的TLR4/NFκB信号通路在呼吸道合胞病毒支气管肺炎患儿中高表达，特异性干扰HMGB1可抑制TLR4/NFκB信号通路，缓解呼吸道合胞病毒诱导支气管上皮细胞分泌炎性因子。     

骨质疏松症靶向治疗药物

骨质疏松症是以骨强度下降、骨折危险性增加为特点的疾病。骨转换失衡是骨质疏松症的主要病理生理机制。OPG/RANKL/RANK通路、Wnt/β连环蛋白通路、mTOR/自噬信号通路在调节骨转换中发挥重要作用。本文综述通过靶向抑制上述通路相关因子，发挥增加骨密度（bone mineral density，BMD）、改善骨微结构、降低骨折风险作用的治疗新药在骨质疏松症治疗中的研究进展。     

神经精神因素对骨代谢的影响

既往对骨质疏松症的研究着重于骨量的局部调控,近年的研究结果显示神经系统通过神经递质及其广泛的外周神经突触与内分泌激素共同调控骨的重建和平衡,提示骨代谢是整体意义上的调控。交感神经系统在骨量的调控中发挥重要作用,其在骨组织的效应器是成骨细胞β2肾上腺素能受体。中枢神经系统、瘦素和血清素均通过抑制或兴奋外周交感神经发挥对骨代谢的调控。     

成骨细胞分泌的新型厌食因子:脂质运载蛋白2

骨骼作为一种全新的内分泌器官,通过自分泌、旁分泌或远距分泌活性因子参与糖脂代谢、骨代谢、细胞增殖及认知等生命活动。最新研究发现,成骨细胞分泌脂质运载蛋白2 (lipocalin-2,LCN2)穿过血脑屏障,参与下丘脑LCN2-黑素皮质素受体-4 (melanocortin receptor-4,MC4R)-环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,c AMP)食欲调控通道以抑制食欲,进而影响能量代谢,但其作用机制尚未明确。既往研究发现,LCN2可在许多组织中表达,参与炎症、免疫调节、肿瘤及心血管疾病等多种生理病理活动。本文主要以LCN2相关文献为理论基础,整理归纳成骨细胞分泌LCN2的功能及作用机制,为肥胖症机制提供新的视角。     

钛合金微粒通过smad通路下调成骨细胞Runx2表达

目的探讨钛合金微粒(Ti-6Al-4V)对smad4、smad5、smad8影响,了解微粒对促骨形成信号通路影响。方法根据Ti-6Al-4V微粒浓度高低,将成骨细胞分为正常对照组(0μg/mL)、Ti-6Al-4V组(5、10、15μg/mL),采用RT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测培养72h成骨细胞smad4、smad5、smad8 mRNA和蛋白表达。结果培养72h后,与对照组比较,smad 4、smad5、smad8 mRNA水平下降,差异有统计学意义(P<0.05),smad4 mRNA水平随Ti-6Al-4V微粒浓度增加呈抑制作用,差异有统计学意义(P<0.05),smad4、smad5、smad8蛋白水平分别与其mRNA表达变化趋势一致。结论 Ti-6Al-4V微粒下调受体调节蛋白smad5、smad8和公用型蛋白Smad4表达,是Ti-6Al-4V微粒抑制核转录因子runx2表达关联因素之一。