高速逆流色谱法分离制备柿子中儿茶素及表儿茶素

采用HP2MGL大孔树脂对柿子中的儿茶素类物质进行初步分离,用高速逆流色谱进一步分离纯化柿子中的(-)-儿茶素、(-)-表儿茶素。结果表明,在以正丁醇-乙酸乙酯-水(体积比为1:2:3)组成的溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,转速800r/min,流速1mL/min的条件下进行HSCCC制备,经高效液相法测定,从58mg样品中分离出7.25mg(-)-儿茶素和0.43mg(-)-表儿茶素,纯度分别为98.3%和97.9%。     

超高压液相色谱测定茶叶中儿茶素等物质的含量

建立了茶叶中儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素和表儿茶素没食子酸酯含量的超高压液相色谱分析方法。利用75%的乙醇溶液超声提取茶叶后,选用ACQUITY UPLCTM BEHC C18柱,以乙腈与水之比为20∶80为流动相,通过二极管阵列检测器在280 nm波长处检测。该方法在质量浓度在1~100 mg/L范围内线性良好,相关系数为0.999 55~0.999 82,检出限(S/N=3)为0.485~1.75 mg/kg,相对标准偏差(RSD)为0.45%~1.3%,回收率为95.83%~108.33%。     

儿茶素单体分离制备方法

茶叶中含有丰富的儿茶素类物质,占茶叶干重12%～24%,是茶叶中最具生理活性和保健功效的物质。文中对目前国内外纯化制备儿茶素的常见方法进行了综述。常见的儿茶素制备方法包括纤维素柱层析、葡聚糖凝胶(Sephadex LH—20)、硅胶柱层析、吸附树脂柱层析和高速逆流色谱等方法。通过这些方法制备的儿茶素单体纯度不高,仍需结合结晶、制备型液相色谱技术或膜分离技术进行进一步纯化,从而才能获得高纯度的儿茶素单体。在儿茶素单体的制备方法中,每种方法都有相应的优缺点。Sephadex LH—20柱层析分离的量较大,但是分离时间较长,而且Sephadex LH—20柱填料昂贵;高速逆流色谱分离效果较好,得到的儿茶素单体的纯度较高,分离时间相对要短,但是目前市场上只有分析型,分离的量相对少;硅胶材料廉价,但是分离的效果不佳,且分离过程相对繁琐,单体制备量较小;吸附树脂柱层析分离已实现EGCG单体的工业化生产,但在其他儿茶素单体的分离制备上尚不成熟。     

花生衣多酚物质H PLC分析及表儿茶素、儿茶素含量测定

用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)法分析白、红两种花生衣中几种重要多酚物质并测定其中表儿茶素与儿茶素含量。色谱分析采用shim pack VP-ODS C-18反相色谱柱分离,流速为1.0 mL/min,柱温30℃。表儿茶素、儿茶素、绿原酸、鞣酸及没食子酸以乙腈-0.5%乙酸(10∶90,体积比)为流动相,分析波长为280 nm;槲皮素与芦丁以甲醇-0.5%乙酸(45∶55,体积比)为流动相,分析波长为360 nm。实验结果表明,白、红两种花生衣中均含有表儿茶素、绿原酸、槲皮素及芦丁。红花生衣中还含有少量儿茶素,其中表儿茶素含量比儿茶素高约7倍多。红花生衣中表儿茶素含量略低于白花生衣中含量。     

茶叶儿茶素单体的分离纯化及鉴定

将茶提取物（茶多酚）先经SephadexLH-20柱层析分离,脱除咖啡因和色素,并将其中7种儿茶素分成2个流分.再用半制备型HPLC分离纯化,得到7种儿茶素的单体化合物.用UV、IR、NMR及MS等方法鉴定和验证了其化学结构,7种单体儿茶素化合物的纯度均大于99%,总得率为66.7%,总回收率为82.1%.     

儿茶素和表儿茶素对动物血脂的影响

通过6组小白鼠每天灌胃或静脉注射1.5mg儿茶素[(-)catechin]或表儿茶素(Epicatechin)试验,探讨了儿茶素和表儿茶素在不同条件下对小白鼠血脂含量的影响。结果表明:无论是采用灌胃或静脉注射方法,儿茶素和表儿茶素均具有明显降低高脂血症小白鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)和升高高密度脂蛋白(HDL-C)的作用。且静脉注射的效果明显好于灌喂(P<0.05),儿茶素的作用好于表儿茶素,但未达到显著性差异。     

柱色谱分离制备低乙酸乙酯儿茶素

儿茶素作为绿茶的标志性活性物质,它的提取和制备技术一直以来备受关注。本文在前人研究的基础上,以绿茶碎末为原料,经溶剂浸提、离心除渣、柱色谱分离、浓缩和真空干燥提取制备,通过对柱色谱分离条件的实验分析,找到最佳控制条件:用聚酰胺树脂对儿茶素进行分离纯化,最佳洗脱顺序为25%乙醇,乙酸乙酯:80%乙醇=2:1,生产出低乙酸乙酯的儿茶素。产品质量指标为:乙酸乙酯低于国际标准20mg/kg,儿茶素≥75%,EGCG≥55%,咖啡因2%,收率10%。     

二次柱层析制备高纯度表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)的工艺研究

以商品荼多酚为原料,先用聚酰胺柱层析预分离表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG),再用硅胶柱层析制备高纯度的EC-CG.采用此工艺条件,利用较低等级的商品茶多酚(70%TP)可以制备出纯度达98%以上的EGCG.     

HPLC法测定小儿泻速停颗粒中儿茶素和表儿茶素的含量

目的建立测定小儿泻速停颗粒中儿茶素和表儿茶素含量的HPLC方法。方法采用Shiseido Capcell Pak C18色谱柱（4．6mm×150mm,5μm）;流动相为Ⅳ,N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃（4：1）-0．04mol／L枸橼酸溶液（13：87）,流速1mL／min;检测波长280nm。结果阴性对照品与样品分离良好,儿茶素的线性范围为0．0646～1．6150μg,r=0．99996,表儿茶素的线性范围为0．0818～1．0225μg,r=0．99996。儿茶素的平均加样回收率为101．06％,RSD为1．71％;表儿茶素的平均加样回收率为99．13％,RSD为1．63％。样品溶液在8h内稳定。结论此方法简便、准确、可靠,可用于该制剂的质量控制。     

HPLC法测定小儿泻速停颗粒中儿茶素和表儿茶素的含量

目的建立测定小儿泻速停颗粒中儿茶素和表儿茶素含量的HPLC方法。方法采用Shiseido Capcell Pak C18色谱柱（4．6mm&#215;150mm,5μm）;流动相为Ⅳ,N-二甲基甲酰胺-四氢呋喃（4：1）-0．04mol／L枸橼酸溶液（13：87）,流速1mL／min;检测波长280nm。结果阴性对照品与样品分离良好,儿茶素的线性范围为0．0646～1．6150μg,r=0．99996,表儿茶素的线性范围为0．0818～1．0225μg,r=0．99996。儿茶素的平均加样回收率为101．06％,RSD为1．71％;表儿茶素的平均加样回收率为99．13％,RSD为1．63％。样品溶液在8h内稳定。结论此方法简便、准确、可靠,可用于该制剂的质量控制。     

高速逆流色谱分离制备北五味子中科罗索酸

建立通过高速逆流色谱从北五味子中快速分离科罗索酸的方法。将北五味子的乙醇提取物经AB-8大孔树 脂初步纯化后直接采用高速逆流色谱进行分离,并通过高效液相色谱法考察了粗提物在不同溶剂体系中的分配情 况。结果表明,最佳溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水（6∶5∶5∶4,V/V）,从150 mg粗提物中一次性分离制备得 到6.3 mg纯度为97.6%的科罗索酸。该方法分离效率较高,对科罗索酸在食品医药领域的应用具有重要意义。     

高速逆流色谱法分离制备蓖麻籽中的蓖麻碱

利用高速逆流色谱法对蓖麻籽中蓖麻碱粗提物进行纯化,以液相色谱对纯化结果进行检测,用质谱、核磁对纯化产物进行结构确定。去壳后的蓖麻籽经过石油醚- 乙醚(2:1,V/V)脱脂,以95% 乙醇索式提取,所得产物浓缩、冻干后得到蓖麻碱粗提物。采用三氯甲烷- 甲醇- 水(2:1:1,V/V)两相溶剂体系对粗提物进行高速逆流色谱纯化一次进样100mg,可得到74mg 样品。纯化所得主要组分经面积归一化法确定其纯度达到99.62%。质谱、核磁验证纯化产物为蓖麻碱。高速逆流色谱可用于大量制备高纯度蓖麻碱。     

pH精制区带逆流色谱分离制备红曲中的酸式莫那可林K

建立了pH精制区带逆流色谱分离制备红曲中功能成分酸式莫那可林K的新方法。首先用体积分数95%乙醇提取红曲中的莫纳可林K,然后经过碱化处理使内酯式莫那可林K转化为酸式,最后采用溶剂系统V(石油醚):V(乙酸乙酯):V(甲醇):V(水)=5:5:4:6,上相添加HCl(10mmol/L)作为固定相,下相添加氨水(10mmol/L)为流动相进行pH精制区带逆流色谱分离。分离所得的酸式莫那可林K经HPLC检测纯度,并用UV,ESI-MS和~1H-NMR鉴定其化学结构。从2.0g粗提物一次分离得到纯度为93.4%的酸式莫那可林K147mg。     

制备型高速逆流色谱分离纯化长松萝中的松萝酸

利用制备型高速逆流色谱分离纯化长松萝中的松萝酸,经过高效液相色谱、核磁共振检测,确定其纯度及结构。将长松萝破碎后用石油醚(60～90℃)回流浸提4h,浸提液经过滤浓缩后得到松萝酸粗提物。采用正己烷:乙腈:乙酸乙酯:水(8:7:5:0.8,V/V)的两相体系将所得的粗提物进行制备型高速逆流色谱的分离纯化,一次进样25mg,可得到11.2mg 样品。利用高效液相色谱检测该样品纯度达到99%。将得到的样品进行1H-NMR、13C-NMR检测确定其化学结构,并确定该样品为松酸。实验证明制备型高速逆流色谱可以成功地将长松萝中的松萝酸进行分离纯化。     

高速逆流色谱分离制备茶粕中茶皂素单体

目的：建立一种高效、快速的分离制备茶皂素单体的高速逆流色谱方法。方法：微波辅助提取茶皂素后,用D-101 大孔树脂初步纯化,所得粗品经高速逆流色谱分离纯化,乙酸乙酯- 正丁醇- 水(1:4:4,V/V,含体积分数3% 的乙酸)为两相溶剂系统,转速800r/min、流速1.5mL/min、检测波长267nm、进样量100mg,所得分离收集液经高效液相色谱法检测。结果：从茶皂素粗提物中分离得到纯度分别为99.1% 和94.5% 的两种茶皂素单体,经干燥称得其质量分别为11mg 和15mg。结论：该方法制备茶皂素单体简便、快速,所得产物的纯度高,为茶皂素的分离纯化提供了一种新途径。     

大孔吸附树脂对葵仁多酚的分离富集

针对酸液浸提葵仁后所得的多酚粗提液(主要含3-O-咖啡酰奎尼酸、4-O-咖啡酰奎尼酸和5-O-咖啡酰奎尼酸),研究大孔吸附树脂对其分离富集的工艺条件。考察9种大孔吸附树脂的吸附解吸性能,筛选出XDA-1树脂用于分离纯化。结果表明:经超滤初步纯化后,粗提液纯度可由4%提高到15%;将此超滤液进一步进行树脂吸附,其优化后的吸附工艺条件为进料液多酚浓度2.0mg/mL、pH 3.0、上样流速2BV/h、上样量30倍床体积(BV);吸附结束后,先采用10%(V/V)的乙醇进行部分去杂,然后用50%(V/V)的乙醇以4BV/h的流速进行洗脱收集。经树脂分离纯化后所得的多酚,其回收率为82.3%,纯度由15%提高到77%。联合超滤和大孔吸附树脂分离是一种从葵花籽提取液中回收CQA的高效经济方法。     

罗布麻中黄酮的超声波强化提取及高速逆流色谱分离纯化

本研究采用超声波强化提取罗布麻中总黄酮,选择乙醇浓度、超声功率、超声时间、料液比为因素进行正交试验优选出超声提取的最佳工艺条件:60%浓度乙醇,料液比为1:15,在300W的超声波下超声提取10min。此条件下,提取率达90%以上。将提取后的总黄酮应用高速逆流色谱进行分离纯化,两相溶剂系统为乙酸乙酯:乙醇:水:乙酸(4:1:5:0.25,V/V),进样量为150mg,得45mg纯度为98.6%的罗布麻甲素。     

高速逆流色谱分离制备胡椒中的胡椒碱

采用高速逆流色谱(high-speed countercurrent chromatography,HSCCC)法从胡椒中分离制备胡椒碱。HSCCC的溶剂系统条件为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:1:1:1,V/V)。从5g粗提物中可一次分离得到纯度为98.72%的胡椒碱单体1.58g,分离得到的胡椒碱结构经电喷雾质谱以及核磁共振氢谱(1H NMR)和碳谱(13C NMR)进行鉴定。该法制备量大、分离效率高,对胡椒碱在食品医药领域的应用具有重要意义。     

半制备高压液相色谱法制备罗汉果苷Ⅴ标准品

目的：通过半制备高压液相色谱分离技术,建立一种快速、稳定、高效制备高纯度罗汉果苷Ⅴ标准品的方法。方法：先采用树脂吸附脱色技术进行前处理,再通过半制备高压液相色谱分离制备罗汉果苷Ⅴ,色谱条件为Eclipse XDB-C18 色谱柱(9.4mm × 250mm,5μm) ,流动相为乙腈- 水,采用梯度洗脱,流速4mL/min,检测波长210nm,进样量36mg,柱温38℃。结果：分离得到的罗汉果苷Ⅴ的纯度为99.1%。结论：本方法具有操作简单、快速、稳定和产品纯度高等优点,可应用于实际样品的检测。