桑黄多糖调控PI3K/AKT/mTOR通路抑制肝癌腹水荷瘤小鼠及对化疗的减毒增效作用

目的:研究桑黄多糖通过调控PI3K/AKT/mTOR通路对肝癌腹水荷瘤小鼠化疗的增效减毒作用。方法:SPF级雄性昆明种小鼠90只,随机分为正常组、模型组、环磷酰胺组、桑黄多糖组及桑黄多糖+环磷酰胺组。制备肝癌腹水荷瘤小鼠,各给药组分别给予30 mg/kg的环磷酰胺或（和）200 mg/kg的桑黄多糖,灌胃给药。正常组及模型组灌胃10 mL/kg的生理盐水。观察小鼠抑瘤率、肝脏、脾脏等指数、肿瘤组织内VEGF与炎性因子含量、PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白表达。结果:环磷酰胺组、桑黄多糖组及桑黄多糖+环磷酰胺组小鼠体质量、瘤体质量、肿瘤组织内血管内皮生长因子（VEGF）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素（IL）-6、PI3K、AKT及mTOR磷酸化水平均低于模型组,IL-1β水平高于模型组;桑黄多糖+环磷酰胺组小鼠体质量、抑瘤率、肿瘤组织内VEGF、TNF-α、IL-6、PI3K、AKT及mTOR磷酸化水平高于桑黄多糖组及环磷酰胺组,瘤体质量及IL-1β水平低于桑黄多糖组及环磷酰胺组(P<0.05)。结论:桑黄多糖联合环磷酰胺可有效抑制肝癌腹水荷瘤小鼠肿瘤的增殖,发挥减毒增效作用,其机制可能与下调PI3K/AKT/mTOR通路的表达有关。     

亚麻木酚素抑制C57BL/6小鼠Lewis肺癌生长及肺转移

目的: 观察亚麻木酚素（SDG）对C57BL/6小鼠Lewis肺癌生长及肺转移的影响,并探讨其可能机制。方法: 将Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠腋下,制备小鼠肺癌模型。灌胃给予SDG（0.11,0.33,1.00 g/kg）21 d后,剥离腋下瘤块并称重;摘取肺脏,计数肺表面转移瘤结节数;HE染色法观察肺组织病理学变化,免疫组化法检测肺组织基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9蛋白表达水平,RT-PCR法检测肺组织细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN) mRNA表达水平。结果: SDG能明显抑制C57BL/6小鼠腋下肿瘤生长及肺转移（P<0.01）,减轻肺组织病理改变,降低肺组织EMMPRIN mRNA和MMP-2、MMP-9蛋白表达水平（P<0.05或P<0.01）。结论: SDG显著抑制C57BL/6小鼠Lewis肺癌生长及肺转移,其机制与抑制EMMPRIN mRNA表达,进而抑制MMP-2、MMP-9蛋白表达有关。     

益气除痰方调控内质网应激蛋白ATF4、CHOP治疗肺癌机理研究

目的: 从内质网应激角度探讨益气除痰方治疗脾虚型肺癌的作用机制。方法: 建立脾虚Lewis肺癌小鼠模型,随机分为模型组（生理盐水）,化疗组（生理盐水+顺铂注射液 1 mg/kg）,益气除痰方低、中、高剂量组（2、4、8 g/kg）,联合用药组（益气除痰方 4 g/kg+顺铂注射液 1 mg/kg）,每组8只。每 3 d 测量小鼠体重和瘤体大小,14 d 后处死小鼠,称量瘤重、计算肺表面转移结节数,免疫组织化学法、RT-qPCR法检测肿瘤组织中ATF4、CHOP表达。结果: 与模型组比较,益气除痰方中、高剂量组均能明显抑制移植瘤生长,减少肺转移结节数,提高肺转移抑制率（P<0.01或P<0.05）;并能明显上调内质网应激蛋白ATF4、CHOP表达,其中联合用药组效果最好（P<0.01）。与化疗组比较,联合用药组ATF4、CHOP表达明显升高（P<0.05）。结论: 益气除痰方可能通过上调内质网应激蛋白ATF4、CHOP的表达介导细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。     

双氢青蒿素对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长的影响

目的:探讨双氢青蒿素对小鼠Lewis 肺癌移植瘤的抑瘤效应及其作用机制。方法:50只C57BL/6J 小鼠皮下接种3LL 细胞(2×10⁶), 随机分为5组, 分别为生理盐水组, 阳性对照顺铂组,双氢青蒿素高、中、低剂量组(150、100、50 mg/kg),检测各组小鼠的体重变化和抑瘤率, 应用流式细胞术进行瘤细胞的DNA 倍体分析。结果:双氢青蒿素中、高剂量组体重无生理盐水组增加明显, 其抑瘤率分别为53.50%及59.24%;流式细胞术检测双氢青蒿素能诱导肿瘤细胞凋亡, 并能影响肿瘤的细胞周期, G0G 期及G₂/M 期细胞数大量减少, 细胞被阻滞在S1期。结论:口服双氢青蒿素对Lewis 小鼠肺癌有明显的抑制作用, 可促进肿瘤细胞凋亡。     

姜黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注血管内皮生长因子和水通道蛋白4的影响

目的 初探姜黄素（Curcumin）对大鼠局灶性脑缺血再灌注后血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、水通道蛋白4 ( aquapo rin - 4, AQP - 4)表达的影响。方法 将72只大鼠随机分为: 假手术组;缺血再灌注组;姜黄素治疗组（100,300 mg?kg-1）。采用线栓法闭塞大鼠大脑中动脉（MCA）,制备大鼠局灶性脑缺血再灌注（MCAO）模型。再灌注48h,分别对各组大鼠进行神经功能缺损评分及其脑含水量的测定;检测血脑屏障通透性;ELISA法检测VEGF、AQP - 4的表达;运用HE染色观察其脑组织病理形态学。结果 姜黄素治疗组可显著降低脑含水量;减轻神经功能损伤和脑组织形态学改变;维持血脑屏障完整性;下调VEGF和AQP - 4的表达。在上述变化中,高剂量组表现最为明显。结论 姜黄素对脑缺血再灌注损伤具有保护作用,姜黄素的脑保护作用可能与其下调VEGF和AQP - 4的表达,改变血脑屏障(blood-brian barrier,BBB)的通透性有关。     

川芎嗪对小鼠 Lewis 肺癌的治疗作用

目的: 研究中药川芎嗪(TMP) 对实体肿瘤的疗效及其可能的作用机理。方法: 本研究运用 Lewis肺癌小鼠模型, 观察 TMP 对小鼠 Lewis 肺癌的疗效 、免疫功能、生存质量及不良反应的影响。结果: TMP治疗小鼠 Lewis 肺癌能抑制肿瘤的生长, 稳定病灶,提高荷瘤小鼠的生存质量, 改善免疫功能。结论: TMP 对小鼠 Lewis 肺癌有明显疗效, 其作用机理与其本身对 Lewis 肺癌实体瘤有抑制作用和提高荷瘤小鼠免疫功能有关。     

内质网应激介导的白藜芦醇对MPTP诱导的小鼠帕金森病模型的神经保护作用

目的: 探讨白藜芦醇对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的小鼠帕金森病模型的神经保护作用及与内质网应激的关系。方法: 将30只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,模型组和治疗组小鼠腹腔注射MPTP（30 mg/kg）诱导帕金森病模型,每3.5天1次,连续5周,共注射10次。治疗组在造模第一天开始予以白藜芦醇（20 mg/kg）灌胃治疗,每天1次,连续5周。5周后用旷场实验、游泳实验和转棒实验观察小鼠的行为学能力,免疫组化法观察小鼠黑质酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase, TH)、GRP78和CHOP 的阳性细胞的变化。结果: 与对照组相比,模型组小鼠出现明显的行为学障碍,黑质多巴胺能神经元明显减少（P<0.01）,说明造模成功;与模型组相比,白藜芦醇治疗组能显著改善小鼠的行为学障碍,抑制黑质多巴胺能神经元的凋亡,同时下调黑质GRP78和CHOP的表达（P<0.01）。结论: 白藜芦醇对MPTP诱导的小鼠帕金森病模型有神经保护作用,其作用机制可能与抑制内质网应激相关因子GRP78和CHOP的表达有关。     

阿那其根醇提取物对两种炎症模型作用机制研究

目的: 研究阿那其根醇提取物(EERAP)对二甲苯致小鼠炎症模型和脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞炎症模型的影响。方法: 将50只小鼠,随机分为对照组(饮用水)、EERAP高剂量组(640 mg/kg)、中剂量组(320 mg/kg)、低剂量组(160 mg/kg)和阿司匹林组(120 mg/kg),采用二甲苯建立小鼠炎症模型,比较小鼠耳廓肿胀度及耳廓毛细血管通透性的变化,ELISA法测定各组炎症渗出液丙二醛(MDA)、超氧化歧化酶（SOD）的含量;LPS诱导RAW264.7细胞建立细胞炎症模型,ELISA法测定核转录因子kappa B（NF-κB）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。 结果: 在二甲苯致小鼠炎症模型中,EERAP高、中、低剂量组均能抑制小鼠耳廓肿胀度,减少小鼠耳廓毛细血管通透性,减少渗出率,与空白对照组比较均有统计学差异(P<0.01);EERAP高、中、低剂量组均能降低血清中MDA含量（P<0.05）,显著升高SOD含量(P<0.01);在LPS诱导的RAW264.7细胞炎症模型中,EERAP在3.125～200 μg/mL范围内可降低TNF-α含量,而在2 μg/mL时也可以降低细胞NF-κB含(P<0.05),与阿司匹林组无统计学差异。结论: EERAP可能是通过抑制MDA、TNF-α和NF-κB的生成,升高SOD的水平,起到抗炎、抗氧化作用。     

补阳还五汤联合依达拉奉对脑缺血后细胞凋亡及survivin和caspase-3表达的影响

目的: 探讨补阳还五汤和依达拉奉联用对脑缺血再灌注损伤的作用及缺血后细胞凋亡和凋亡相关因子survivin、caspase-3的影响,明确其可能的神经保护机制。方法: 改良线栓法建立小鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。90只小鼠随机分5组：假手术组;模型组;补阳还五汤（BYHWD）组（10 mL/kg,ig）;依达拉奉（ED）组（3 mg/kg,iv）;补阳还五汤+依达拉奉（BYHWD+ED）组（BYHWD 10 mL/kg,ig + ED 3 mg/kg,iv）。1、3、7 d分别观察各组小鼠神经功能缺损评分。7 d后,用TUNEL法检测缺血周围神经细胞的凋亡情况;用Western blot检测小鼠大脑皮质缺血区存活素(survivin)蛋白、半胱氨酸蛋白酶(caspase 3)的定量表达。结果: 缺血再灌注后1、3、7 d,神经功能评分随着时间延长有减少趋势;同一时间点,模型组评分最高,联合用药组评分最低（P<0.01）。脑缺血再灌注7 d后,各组小鼠脑凋亡细胞指数增多（P<0.01）,survivin和caspase 3蛋白表达均有上调（P<0.01）。用药后,各药物组凋亡细胞指数减少,survivin蛋白表达有上调,而caspase 3蛋白表达有下调(P<0.01),以BYHWD+ED联合用药组较单药组改变更明显（P<0.05）。结论: 补阳还五汤与依达拉奉联用比单药使用可更有效地促进凋亡抑制基因survivin的表达和抑制凋亡诱导基因caspase 3的表达,从而抑制神经细胞凋亡,协同发挥脑保护作用。     

姜黄素对大鼠子宫内膜异位症影响的实验研究#br#

目的：分析姜黄素对大鼠子宫内膜异位组织转录因子Twist1、Twist2、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、Syndecan-1表达的影响。方法：选取SPF级雌性SD大鼠采用自体内膜移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型，将造模成功的30只大鼠随机分为模型组、低剂量姜黄素组（25 mg·kg-1·d-1）、中剂量姜黄素组（50 mg·kg-1·d-1）、高剂量姜黄素组（100 mg·kg-1·d-1）、孕三烯酮组（0.5 mg·kg-1·d-1），每组各6只，设立5只大鼠假手术组为空白对照组，记录各组大鼠异位内膜组织体积；采用免疫组化法检测各组大鼠子宫内膜异位组织Twist1、Twist2、E-cadherin、Syndecan-1表达的变化。结果：与模型组相比，姜黄素各剂量组和孕三烯酮组大鼠异位组织体积明显较低，差异具有统计学意义（P<0.05）；Twist1阳性主要定位于细胞核中，Twist2阳性主要定位于细胞质中，E-cadherin、Syndecan-1阳性染色主要定位于上皮细胞膜上，少见于个别细胞质。与模型组相比，姜黄素各剂量组和孕三烯酮组Twist1、Twist2、Syndecan-1评分均明显降低，E-cadherin评分明显升高（P<0.05），低中剂量姜黄素组Twist1、Twist2、Syndecan-1评分明显高于孕三烯酮组，E-cadherin评分低于孕三烯酮组（P<0.05），高剂量姜黄素组Twist1、Twist2、E-cadherin、Syndecan-1评分与孕三烯酮组比较差异无统计学意义（P>0.05）。 结论：姜黄素可降低子宫内膜异位组织中Twist1、Twist2、Syndecan-1的表达，升高E-cadherin的表达，抑制模型大鼠异位内膜的生长，以达到治疗的目的。     

姜黄素预处理对大鼠肢体缺血再灌注肺损伤时血红素加氧酶-1的影响

目的: 探讨姜黄素预处理对大鼠肢体缺血再灌注肺损伤时血红素加氧酶-1(HO-1)的影响。方法: 建立大鼠肢体缺血 2 h 再灌注 3 h 肺损伤模型。60只大鼠随机等分为5组:假手术组(Sham)、姜黄素组(Cur)、缺血再灌注组(I/R)、姜黄素+缺血再灌注组(Cur-I/R)和锌原卟啉IX(ZnPP)+姜黄素+缺血再灌注组(ZnPP-Cur-I/R)。ZnPP-Cur-I/R组于缺血前 24 h 经腹腔注射ZnPP 20 mg/kg,Cur 组、Cur-I/R组和ZnPP-Cur-I/R组分别于缺血前 2 h 经腹腔注射姜黄素 200 mg/kg,其余各组给予等容量生理盐水。除Sham组和Cur组外,其余各组行肢体缺血再灌注。观察肺组织病理学变化,测定肺组织损伤评分、湿/干重比(W/D)、中性粒细胞(PMN)数目和HO-1 mRNA及其蛋白表达的情况。结果: 与Sham组比较,I/R组肺组织损伤较重,肺损伤评分、W/D及PMN计数升高,HO-1 mRNA及其蛋白表达上调(P＜0.01);与I/R组比较,Cur-I/R组肺组织损伤减轻,肺损伤评分、W/D及PMN计数降低,HO-1 mRNA及其蛋白表达上调(P＜0.01);与Cur-I/R组比较,ZnPP-Cur-I/R组肺组织损伤加重,肺损伤评分、W/D及PMN计数升高,HO-1 mRNA及其蛋白表达下调(P＜0.01)。结论: 姜黄素预处理可通过上调肺组织HO-1的表达减轻大鼠肢体缺血再灌注肺损伤。     

扶正康复合剂联合顺铂抑制胃癌SGC7901细胞荷瘤裸鼠肿瘤增殖作用的实验研究

目的:探讨扶正康复合剂联合顺铂抑制小鼠移植性胃癌的增殖作用。方法:将28只裸鼠随机分为4组：模型对照组，扶正组，顺铂组，顺铂+扶正组，每组7只。皮下注射胃癌SGC7901细胞株，建立胃癌荷瘤裸鼠模型，顺铂及扶正康复合剂连续给药7 d，称取体重及瘤重，计算抑瘤率，并利用PCR法和免疫组化法分别检测瘤体内细胞凋亡靶点（Bcl-2、Bax、Survivin）和血管新生促进因子（VEGF）的mRNA和蛋白的表达情况。结果:在抑瘤率方面，与模型对照组相比，各组裸鼠瘤重均有不同程度的减轻（P<0.05），且顺铂+扶正组抑瘤率最高（66.67%）。在细胞凋亡方面，扶正康复合剂联合顺铂能明显上调Bax的表达，下调Bcl-2、Survivin和VEGF的表达（P<0.05）。结论:扶正康复合剂联合顺铂具有抑制肿瘤增殖的作用。     

血管内皮生长因子受体抑制剂SU5614对甲苯二异氰酸酯诱导哮喘模型小鼠治疗作用的研究

目的: 探讨血管内皮生长因子(VEGF)受体抑制剂SU5614对甲苯二异氰酸酯(TDI)诱导哮喘模型小鼠的治疗作用。方法: BALB/C小鼠随机分为3组:对照组,模型组和SU5614组。采用TDI制备哮喘小鼠模型,观察SU5614对模型小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)VEGF的表达情况、肺组织病理学变化,气道反应性和气道血浆渗出的变化。结果: 免疫细胞学分析结果表明,模型组小鼠BALF中VEGF表达明显增加,而SU5614组VEGF表达则明显降低;病理组织学发现模型组肺组织病理学炎症反应明显,而SU5614组炎症反应则明显减轻;模型组气道反应性明显增高,而SU5614组则明显降低(P<0.05);模型组气道血浆渗出明显增加,而SU5614组则明显减少(P<0.05)。结论: SU5614不仅抑制BALF中VEGF活性,也能抑制炎性细胞的迁移,降低气道高反应性和减少气道血浆渗出。     

抗FGF-2纳米抗体抑制碱烧伤诱导大鼠角膜血管新生

目的：研究抗成纤维细胞生长因子（FGF-2）纳米抗体对碱烧伤诱导的大鼠角膜血管生成的治疗作用。方法：将SD大鼠分为：假手术组（Sham），模型组（Model，直径为3 mm的浸有1 mol/L NaOH溶液圆形滤纸贴于大鼠眼角膜中央处30 s，制备大鼠碱烧伤血管生成模型）和治疗组（Treatment，术后7天至21天用3 mg/mL的抗FGF-2纳米抗体溶液滴眼，每日3次，每次10 μL，共14天）。通过体视显微镜和CD31免疫组织化学染色计算大鼠角膜血管生成情况。实时荧光定量PCR、酶联免疫吸附测定和免疫组织化学染色3种方法检测抗血管内皮生长因子（VEGF）和FGF-2的mRNA和蛋白表达水平。结果：（1）血管：治疗组较模型组的面积显著减少，血管管腔较窄（P<0.05），在药物干预14天后，差异最为显著；（2）FGF-2的mRNA和蛋白表达水平：模型组与治疗组的结果相近（P>0.05）；（3）VEGF的mRNA和蛋白表达水平：治疗组显著高于模型组（P<0.05）。此外，假手术组的持续给药也使得VEGF表达显著增加（P<0.05）。 结论：抗FGF-2纳米抗体可抑制由碱烧伤诱导的角膜血管新生，但也使得正常大鼠角膜或病理大鼠角膜的VEGF表达水平代偿性升高。     

甘草次酸对小鼠急性放射性肺损伤的防治作用

摘要 : 目的 建立C57BL/6小鼠急性放射性肺损伤模型,观察甘草次酸对急性放射性肺损伤的干预作用。方法 成年C57BL/6雌性小鼠90只,随机分为三组,每组30只：(1)空白对照组：不照射+生理盐水10ml/（kg.d）灌胃;(2)单纯照射组：照射+生理盐水10ml/（kg.d）灌胃;(3)甘草次酸组（GA组）：照射+甘草次酸40mg /（kg.d）灌胃。IR组和GA组小鼠予6MV-X线12Gy全肺单次照射。照射后第2天、17天、30天随机从各组分别选取10只小鼠处死。取双侧肺组织行HE染色、Masson染色观察肺组织形态变化。结果 CG组小鼠肺组织结构正常。IR组小鼠肺组织在照射后第2天、17天以渗出为主,肺泡腔及间隔可见渗出、充血,伴有炎症细胞的浸润。照射后第30天,肺泡壁间隔增宽、肺泡结构变形、炎性细胞浸润,并可见胶原纤维沉积。GA组在不同时间点,肺泡炎及胶原沉积的情况均较IR组改善,任一时间点两组之间有显著性差异(P<0.05)。结论 C57BL/6小鼠全肺单次照射12Gy X射线可建立急性放射性肺损伤动物模型,甘草次酸可以减轻急性放射性肺损伤的炎症反应及改善胶原沉积。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠支气管上皮MRP1 mRNA及蛋白水平变化及化痰降气方逆转的作用

目的: 研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠支气管上皮MRP1 mRNA及蛋白水平变化及化痰降气方逆转的作用。方法: 采用烟熏复合木瓜蛋白酶雾化吸入法制备COPD大鼠模型,将造模后的大鼠随机分为治疗组和模型组,另以正常大鼠作为对照组。治疗组予以化痰降气方(生药 5.8 g/kg)i.g.治疗给药,2次/d,连续 15 d 后,分别采用RT-PCR、Western blot 技术检测各组大鼠肺支气管上皮MRP1 mRNA及蛋白水平的表达。结果: 化痰降气方治疗能明显改善COPD模型大鼠的肺功能;COPD模型组MRP1 mRNA及蛋白水平较正常对照组显著降低(P<0.01);与COPD模型组比较,化痰降气方治疗组MRP1 mRNA及蛋白水平显著升高(P<0.01)。结论: 化痰降气方能逆转COPD状态下MRP1 mRNA及蛋白水平表达的降低,这可能是其治疗COPD作用机制之一。     

靶向肿瘤新生血管唑来膦酸阳离子隐形脂质体抗肿瘤作用的研究

目的:研究APRPG（Ala-Pro-Arg-Pro-Gly）修饰的隐形唑来膦酸阳离子脂质体对荷前列腺癌PC-3裸鼠的抗肿瘤作用。方法: 构建荷前列腺癌PC-3裸鼠模型,比较研究唑来膦酸阳离子脂质体、APRPG修饰的隐形唑来膦酸阳离子脂质体对肿瘤体积增长的抑制作用,计算肿瘤抑制率,并通过免疫组化实验分析其对肿瘤相关因子血管内皮生长因子（VEGF）和分化抗原簇44（CD44）表达的影响。结果: 唑来膦酸阳离子脂质体、APRPG修饰的隐形唑来膦酸阳离子脂质体对荷前列腺癌PC-3裸鼠的肿瘤抑制率分别为31.81%、68.18%,后者的肿瘤抑制率明显高于前者（P<0.05）,免疫组化结果显示VEGF和CD44蛋白在模型对照组中表达呈强阳性,在唑来膦酸阳离子脂质体组中呈中度阳性表达,而在APRPG修饰的隐形唑来膦酸阳离子脂质体中表达较为微弱。结论:APRPG修饰的隐形唑来膦酸阳离子脂质体对前列腺癌PC-3裸鼠具有更强的肿瘤抑制率。