HER-2/neu表位肿瘤疫苗研究进展

原癌基因HER-2/neu（human epidermal growth factor receptor type 2）在乳腺癌（20%～40%）、结直肠癌（54%～100%）、卵巢癌（25%）等多种肿瘤中有扩增或过表达,故HER-2/neu蛋白是肿瘤候选靶标抗原之一,且已被证明具有开发抗乳腺癌疫苗的潜力。目前针对不同类型的HER-2疫苗,包括全细胞疫苗、全序列蛋白疫苗、肽疫苗、树突状细胞（DC）相关疫苗以及基因疫苗等展开了一系列研究,并取得一定进展。该文通过检索百度学术,PubMed,Springer以及ScienceDirect数据库,对近年来HER-2/neu肿瘤疫苗的制备及其抗肿瘤活性机制的研究进展进行综述。HER-2/neu肿瘤疫苗经抗原递呈细胞(APCs)展示,能够有效地激活CD4+T和CD8+T,并诱导特异性抗肿瘤免疫应答反应,其结构及组成佐剂的改变、融合表达以及DC诱导等疫苗设计工艺改变,能够显著地提高疫苗的免疫活性和抗肿瘤活性。HER-2疫苗在临床试验研究中发现能够有效地降低抗体药物治疗所致的耐药性,反复用药以及其它化疗药物的严重毒副作用等缺陷,并有效稳定地发挥抗肿瘤活性,为肿瘤的治疗提供一个崭新的视角。     

塞来昔布联合放射治疗对异位裸鼠人鼻咽癌模型中肿瘤细胞增殖与凋亡的影响

目的: 探讨塞来昔布联合放射治疗对异位裸鼠人鼻咽癌模型中肿瘤细胞增殖与凋亡的影响。方法: 建立裸鼠人鼻咽癌皮下移植模型,成瘤后40只裸鼠随机分成4组,即对照组、塞来昔布组、放射治疗组、联合组（塞来昔布与放射治疗）,观察肿瘤大小,计算抑瘤率;采用RT PCR方法考察肿瘤中COX-2的mRNA表达,并用免疫组化法以Ki-67为指标测肿瘤细胞增殖水平,末端脱氧核苷转移酶标记法（TUNEL）测凋亡细胞。结果: 对照组、塞来昔布组、放射治疗组、联合组瘤体体积分别为（1880±358）、（1574±265）、（1258±262）、和（881±197）mm³;塞来昔布组、放射治疗组、联合组抑瘤率分别为16%、33%和53%。四组中Ki-67阳性率分别为44%、29%、22%和11%;肿瘤细胞凋亡指数（AI）分别为9%、22%、30%和38%;塞来昔布组、联合组肿瘤组织中COX-2 mRNA表达显著低于对照组和放射治疗组。 结论: 塞来昔布可显著抑制裸鼠人鼻咽癌模型中肿瘤细胞COX-2 mRNA表达,抑制肿瘤细胞Ki-67表达,诱导肿瘤细胞凋亡,与放射治疗联合应用可提高抗肿瘤效果。     

Clinical pathology significance of Survivin, p-Akt and estrogen receptor expression in hepatocellular carcinoma tissues

目的:研究原发性肝细胞癌组织和癌旁组织中存活素(Survivin)、磷酸化Akt(p-Akt)和雌激素受体(ER)表达及意义.方法:应用蛋白质印迹法检测52例原发性肝细胞癌和8例正常癌旁组织中Survivin、P-Akt和ER的表达.结果:肝细胞癌组织中Survivin和p-Akt表达明显高于癌旁组织,Survivin和p-Akt的表达与肝癌患者术后复发呈阳性相关(P＜0.05),且两者之间的表达也呈阳性相关(r=0.736,P＜0.01),而ER在两种组织中表达相仿,与肝癌患者术后复发无相关性,P＞0.05.多因素分析结果显示,肿瘤转移、Survivin和p-Akt阳性表达可作为肝癌复发的风险因子.结论:Survivin和p-Akt与原发性肝癌的发生发展关系极为密切,Survivin和p-Akt高表达者预后差,可作为肝癌预后的预测因子.     

替吉奥胶囊联合放疗治疗乳腺癌的临床疗效及对肿瘤标志物、人类表皮生长因子受体-2、中期因子水平的影响研究

目的: 探究替吉奥胶囊联合放疗治疗乳腺癌的临床疗效及对肿瘤标志物、人类表皮生长因子受体-2（HER-2）、中期因子（MK）水平的影响。方法: 抽取2010年1月至2016年5月本院收治的64例乳腺癌患者,通过随机数表法分组,各32例。对照组采用三维适形放疗,研究组联合采用三维适形放疗+替吉奥胶囊,共治疗2个疗程。统计对比两组临床疗效、不良反应发生率,分析治疗前后两组肿瘤标志物［癌胚抗原（CEA）、CA125、CA153］及MK、HER-2水平变化情况。结果: 研究组治疗有效率（50.00%）、肿瘤控制率（81.25%）高于对照组（25.00%、53.13%）,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗前两组CEA、CA125、CA153水平对比差异无统计学意义（P>0.05）,经治疗,两组各指标水平较治疗前降低,且研究组CEA、CA125、CA153水平均低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;治疗前两组HER-2及MK水平对比差异无统计学意义（P>0.05）,经治疗,两组各指标水平较治疗前降低,且研究组HER-2及MK水平均低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;两组均未出现IV度不良反应,研究组白细胞减少、腹泻、呕吐恶心发生率（34.38%、34.38%、37.51%）与对照组（31.24%、37.51%、34.37%）对比,差异无统计学意义（P>0.05）。结论: 替吉奥胶囊联合放疗治疗乳腺癌效果显著,可改善血清肿瘤标志物、HER-2及MK表达水平,且安全性较高,值得推广。     

左炔诺孕酮宫内节育系统治疗无排卵型功能失调性子宫出血的疗效

目的:观察左炔诺孕酮宫内节育系统（LNG-IUS）治疗无排卵型功能失调性子宫出血（DUB）的疗效及其对子宫内膜血管内皮细胞生长因子（VEGF）、雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）的影响。方法: 将2015年6月至2016年9月本院收治的78例DUB患者,随机分为对照组和观察组,每组39例。在常规治疗基础上,对照组予去氧孕烯炔雌醇片口服,观察组予LNG-IUS治疗。比较两组治疗前与治疗12月后血红蛋白水平（HGB）、血清雌二醇（E2）、孕酮（P）、垂体分泌卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）激素水平及子宫内膜厚度,采用SP免疫组化检测两组治疗前及12个月后子宫内膜腺体和间质中的VEGF、ER、PR的阳性表达。比较两组的临床疗效、不良反应。结果: 观察组的控制出血及完全止血时间均显著短于对照组,差异均有统计学意义（P<0.01）。治疗后,两组的血红蛋白水平均较治疗前显著升高（P<0.01）,子宫内膜厚度显著减少（P<0.01）,E2均较治疗前显著降低,P显著升高,且观察组改善程度较对照组更加明显,差异亦有统计学意义（P<0.01）。观察组患者治疗后的子宫内膜腺体及间质中的VEGF阳性率显著高于治疗前,ER、PR阳性率显著低于治疗前（P<0.01）。且治疗后观察组的VEGF阳性率高于对照组,ER、PR阳性率低于对照组（P<0.01）。观察组的总有效率为94.9%,显著高于对照组的79.5%（P<0.05）。两组的不良反应发生情况无统计学差异（P>0.05）。结论:LNG-IUS治疗DUB能更好的通过调节子宫内膜ER、PR、VEGF的表达,达到临床治疗效果,且较口服去氧孕烯炔雌醇片更加简便、有效、安全。     

负载MAGE-A3抗原的树突状细胞与细胞因子诱导杀伤细胞共培养对子宫内膜癌肿瘤干细胞及恶性进展的影响

目的：探究负载黑色素瘤相关抗原基因A3（MAGE-A3）的树突状细胞（DC）与细胞因子诱导杀伤细胞（CIK）对子宫内膜癌肿瘤干细胞及恶性进展的影响。方法：采集人外周血分离单个核细胞,利用细胞因子分别诱导生成DC和CIK;MAGE-A3孵育DC后与CIK共培养,流式细胞仪检测DC-CIK、MAGE-A3-DC-CIK的表型;流式细胞仪分选子宫内膜癌细胞系Ishikawa的CD133+干细胞,以子宫内膜癌干细胞作为靶细胞,分别以CIK、DC-CIK及MAGE-A3-DC-CIK作为效应细胞,MTT法检测效靶比为10∶1、20∶1、40∶1的细胞杀伤活性,ELISA法检测联合培养细胞上清液中IFN-γ、IL-2、IL-12、IL-17水平,Annexin V-FITC/PI双染法检测子宫内膜癌干细胞凋亡;建立子宫内膜癌干细胞移植瘤裸鼠模型,尾静脉注射DC-CIK或MAGE-A3-DC-CIK,观察裸鼠肿瘤生长情况,每隔2 d测量瘤体大小,21 d后取肿瘤组织,电子天平称重,HE染色观察肿瘤组织病理形态学变化,免疫组织化学染色检测肿瘤组织内Ki-67表达。结果：分离获得细胞表面CD80、CD86、HLA-DR表达分别达到88%、86%和90%的DC;MAGE-A3-DC-CIK组细胞表面CD8+CD3+、CD56+CD3+比例均高于DC-CIK组（P<0.01）;经磁珠分选后获得CD133+细胞比例高达90.23%的子宫内膜癌干细胞;与CIK组和DC-CIK组比较,MAGE-A3-DC-CIK组在不同效靶比下对子宫内膜癌干细胞的杀伤能力升高,细胞上清中IFN-γ、IL-2、IL-12及IL-17的分泌水平升高,培养液上清处理的子宫内膜癌干细胞凋亡率增加,差异均具有统计学意义（P<0.01）;同时,与对照组和DC-CIK组比较,MAGE-A3-DC-CIK组移植瘤裸鼠的肿瘤体积小,肿瘤重量轻,肿瘤组织内细胞稀疏,Ki-67阳性细胞率减小,差异均具有统计学意义（P<0.01）。 结论：负载MAGE-A3的DC与CIK联合培养能促进CIK成熟,提高对子宫内膜癌干细胞的杀伤性,并抑制移植瘤裸鼠的恶性进展。     

Research expression biological significance of p27,Skp2 and E-cad in invasion carcinoma of breast

目的:探讨乳腺浸润性导管癌细织中p27、Skp2和E-cad的表达及其生物学意义.方法:采用微阵分析免疫组化法检测p27、Skp2和E-cad在浸润性导管癌细织、淋巴结转移灶与乳腺良性病变中的表达强度.结果:浸润性导管癌组织中p27和E-cad的表达强度低于乳腺良性病变,x2分别为13.648、63.163,P值均＜0.05;Skp2的表达强度高于乳腺良性病变,x2=17.150,P＜0.05.在浸润性导管癌组织中Skp2+/p27低指数与核异形性、组织学分级和癌巢分化程度及淋巴结转移情况具有相关性,x2分别为12.634、6.397、8.750、23.768,P值均＜0.05,与间质纤维化程度、年龄和肿物大小无相关性,x2分别为1.325、0.281、3.748,P值均＞0.05.浸润性导管癌淋巴结转移灶的E-cad表达强度低于原发瘤,x2=23.142,P＜0.05.结论:p27、Skp2和E-cad在乳腺肿瘤中与肿瘤分化程度、组织学分级和肿瘤转移有关.Skp2+/p27低指数和E-cad表达强度可能对乳腺癌患者的诊断及预后评估有意义.     

乳复宁颗粒调节乳腺增生症家兔激素水平以及VEGF蛋白表达变化的研究

目的: 研究乳复宁颗粒改善乳腺增生疾病症状的作用及机制。方法: 将48只家兔按体质量随机分为6组，每组8只，即正常对照组、模型对照组、乳癖消片组、乳复宁颗粒高、中、低剂量组。给予雌性未孕家兔注射苯甲酸雌二醇，建立乳腺增生病理模型，测定家兔乳房直径和乳头高度，并检测各组家兔血清中泌乳素（PRL）、雌二醇（E2）、孕酮（P）的含量，镜下观察乳腺组织病理形态学变化。同时测定家兔乳腺组织中血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达改变。结果: 乳复宁颗粒高、中剂量组可降低乳腺增生症家兔乳房直径和乳头高度（P<0.01），降低血清中PRL、E2的含量（P<0.01），增加血清中P的含量；减少乳腺小叶数、小叶腺泡数，减轻管腔扩张和乳腺间质纤维结缔组织增生；同时降低乳腺组织中VEGF的过度表达。结论: 乳复宁颗粒可能通过调整雌孕激素比例及降低VEGF的表达来改善乳腺增生的症状。     

miR-222、MBD2在胃癌患者中的表达及对铂类化疗敏感性的影响

目的:研究miRNA-222与甲基化CpG结合结构蛋白2（MBD2）水平在胃癌组织中的表达水平及其对铂类化疗敏感性的影响。方法:选择2016年2月至2017年5月在本院就诊的75例原发性胃癌患者作为研究对象。检测患者癌组织及癌旁组织中miR-222、MBD2表达水平；分析miR-222、MBD2水平与胃癌临床病理参数的相关性。将miR-222 inhibitor转染至胃癌SGC-7901细胞中，RT-PCR和Western blot分别检测转染后细胞中miR-222和MBD2的表达水平，MTT法、流式细胞术分别检测转染对细胞增殖、凋亡的影响。结果:胃癌组织中miR-222的阳性表达率显著高于癌旁组织（P<0.05）。胃癌组织中miR-222相对表达量显著高于癌旁组织（P<0.05）。胃癌组织中MBD2的阳性表达率显著低于癌旁组织（P<0.05）。miR-222及MBD2表达水平与分化程度、TNM分期有明显相关性（P<0.05）。转染miR-222 inhibitor的各组SGC-7901细胞中miR-222表达水平均显著低于空白对照组（Control组）和miR-NC组（NC组）（P<0.05）。转染miR-222 inhibitor的各组细胞中MBD2 mRNA和蛋白表达水平显著高于Control组和NC组（P<0.05）。转染miR-222 inhibitor的各组细胞的增殖率显著低于Control组和NC组（P<0.05），且miR-222 inhibitor+顺铂（Cisplatin，CDDP ）组的细胞增殖率显著低于miR-222 inhibitor组及CDDP 组，细胞凋亡率显著高于miR-222 inhibitor组及CDDP 组（P<0.05），且与CDDP联合运用能够更明显地抑制肿瘤细胞的增殖率，促进细胞的凋亡。结论:miR-222在胃癌组织中表达明显上调，MBD2显著下调，其表达高低与胃癌分化程度、TNM分期有明显相关性。miR-222可增强 CDDP 对胃癌的化疗敏感性，其可能通过抑制胃癌中的靶基因MBD2发挥作用。     

睑板腺癌中MMP-2的表达及其临床意义

目的: 探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metallop roteinase-2,MMP-2)在睑板腺囊肿和睑板腺癌组织中的表达差异及其与睑板腺癌临床病理特征的关系和临床意义。方法: 采用免疫组化SP法检测睑板腺囊肿和睑板腺癌组织中MMP-2、血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况,以CD34标记检测肿瘤内的微血管密度(microvessel density, MVD),分析MMP-2与临床病理因素、VEGF、MVD的关系。结果: MMP-2在睑板腺癌组织中阳性表达率高于睑板腺囊肿(56% vs 20%),差异具有统计学意义(P﹤0.05),而VEGF表达在睑板腺癌和睑板腺囊肿中差别无统计学意义;MMP-2蛋白表达与肿瘤复发和局部浸润有关 (P﹤0.05),与患者年龄、组织学分级、病理类型和病程无关 (P﹥0.05)。MMP-2阳性的肿瘤组织内MVD明显高于MMP-2阴性肿瘤(P﹤0.05),VEGF的表达与MMP-2无相关性(r=-0.049,P=0.748)。结论: MMP-2在睑板腺癌中高表达,可能通过非VEFG依赖途径促进肿瘤的血管生成,进而参与肿瘤浸润和复发。     

靶向药物曲妥珠单抗联合化疗对人类表皮生长因子受体2阳性局部晚期乳腺癌患者临床疗效研究

目的: 观察曲妥珠单抗联合化疗对人类表皮生长因子受体2(HER-2)阳性的局部晚期乳腺癌(LABC)临床治疗结果。方法: 将228例HER-2阳性手术无法切除的晚期乳腺癌病例随机分到曲妥珠单抗辅助疗法+化疗组或单纯化疗组。其中115例接受曲妥珠单抗+化疗,113例单纯接受化疗,经过10个疗程治疗后,观察两组患者中临床和病理的完全缓解人数及符合手术要求的人数。结果: 数据显示与单纯化疗相比,曲妥珠单抗+化疗组病例对治疗的临床完全缓解病例(cCR)(化疗+曲妥珠单抗组89%,单纯化疗组77%)、病理学完全缓解(pCR)病例(两组分别为43%和23%)以及乳房和腋下淋巴结完全缓解(tpCR)病例(分别为39%和20%)比例更高,同时可以使更多的患者获得手术和保留乳房的机会。结论: 曲妥珠单抗联合化疗药物治疗HER-2过度表达的局部晚期乳腺癌均有较好的临床疗效,是治疗晚期乳癌并延长生存时间的一种新方法。     

基于肿瘤相关巨噬细胞的宫颈癌免疫学病理机制研究

目的:分析肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）在宫颈癌发病中的作用机制,明确其与Th1/Th2比值、Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg比值的相关性。方法: 以27例宫颈癌患者和53例宫颈上皮内瘤变（CINⅡ22例、CINⅢ31例）患者为研究对象,治疗前抽取患者空腹肘静脉血,采用流式细胞仪测定Th1/Th2、Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg比值,采用ELISA试剂盒测定血清IFN-γ、IL-4、IL-17A、IL-17F、TGF-β1、IL-10水平;术中留取病理组织,采用免疫组化实验测定TAMs CD68表达。结果: 宫颈癌患者外周血Th1/Th2与Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg比值低于CINⅢ,CINⅢ低于CINⅡ,各组之间的差异有统计学意义（P<0.05）。宫颈癌患者血清IL-4、TGF-β1、IL-10水平高于CINⅢ,CINⅢ高于CINⅡ,血清INF-γ、IL-17A、IL-17F水平低于CINⅢ,CINⅢ低于CINⅡ,各组之间的差异有统计学意义（P<0.05）。宫颈癌患者病灶组织TAMs CD68表达水平高于CINⅢ,CINⅢ高于CINⅡ,各组之间差异均有统计学意义（P<0.05）。相关性分析结果显示TAMs CD68表达水平与Th1/Th2比值、Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg比值及IL-17A水平呈负相关性,与IL-10、IL-4水平呈正相关性（P<0.05）。结论:宫颈癌TAMs与Th1/Th2、Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg密切相关,可能通过影响这两大体系的平衡介导宫颈癌的发生与发展。     

miR-106 b在乳腺癌组织中的表达及其增强乳腺癌细胞顺铂化疗敏感性的机制研究

目的:探讨miR-106 b在乳腺癌组织中的表达及其增强乳腺癌细胞顺铂化疗敏感性的机制。方法:随机选取2015年10月至2018年5月在本院进行手术切除的乳腺癌患者58例,取乳腺癌组织和癌旁组织提取细胞DNA,用荧光定量PCR的方法检测miR-106 b的表达量。购买乳腺癌MCF-7细胞系,构建促进miR-106 b表达的高表达组、抑制miR-106 b表达的低表达组细胞系。用不同浓度的顺铂处理,48 h后观察在体外和裸鼠皮下肿瘤的受抑制情况。荧光定量PCR法检测PTEN/PI3K/AKT信号通路相关基因的表达。结果:荧光定量PCR显示乳腺癌组织中miR-106 b的相对表达量高于癌旁组织（P<0.05）。在20、30和40 μmol/L浓度时,对照组和高表达组的相应浓度下的细胞抑制率均显著高于低表达组,对照组相应浓度下的细胞抑制率均显著高于低表达组（P<0.05）。在20、30和40 μmol/L浓度时,对照组和高表达组的相应浓度下的荧光强度均低于低表达组,且高表达组均显著低于对照组（P<0.05）。低表达组PTEN的相对表达量显著低于对照组,而高表达组PTEN的相对表达量显著高于对照组（P<0.05）。低表达组的PI3K和AKT的相对表达量显著高于对照组,高表达组的PI3K和AKT的相对表达量显著低于对照组（P<0.05）。结论:miR-106 b在乳腺癌中高表达,且表达量越高,乳腺癌细胞对顺铂的化疗敏感性越强。     

阿霉素对人乳腺癌细胞凋亡及去磷酸化RB 蛋白表达的影响

目的 探讨阿霉素(ADR) 体外诱导人乳腺癌化疗敏感细胞(MCF-7 S) 凋亡与去磷酸化RB 蛋白表达之间的关系。 方法 应用MTT 比色法检测ADR对体外培养的MCF-7 S 细胞增殖抑制作用, 同时应用末端标记(TUNEL) 法观测ADR 对MCF-7 S 细胞凋亡程度的影响。采用免疫细胞化学法检测去磷酸化RB 蛋白的表达水平。 结果 ADR 抑制MCF-7 S细胞增殖呈剂量依赖性, 半数抑制浓度(IC₅₀) 为0.128 mg·L^-1;ADR 作用组MCF-7 S 细胞的凋亡率(apoptotic rate, AR) 为0.261, 较对照组(0.045) 明显增高(P <0.01);ADR 作用组MCF-7 S 细胞的去磷酸化RB 蛋白表达量MOD(阳性细胞平均光密度) ×area(阳性面积相对比) 均数是987 ±207, 较对照组132 ±32 显著增高(P <0.01);ADR 能促进MCF-7 S细胞内去磷酸化RB 蛋白的表达。在ADR 作用组,MCF-7 S 细胞的凋亡率与去磷酸化RB 蛋白表达量呈正相关(P <0.05)。 结论 ADR 抑制MCF-7 S 细胞增殖和诱导MCF-7 S 细胞凋亡可能与细胞内去磷酸化RB 蛋白表达水平有关。