紫杉醇耐药卵巢癌细胞亚株的蛋白组学研究

目的: 建立卵巢癌细胞株与紫杉醇耐药卵巢癌细胞亚株的差异蛋白表达图谱,寻找对紫杉醇药物耐受的相关蛋白。方法: 以人卵巢浆液性囊腺癌细胞株(SKOV3)和对紫杉醇稳定耐药卵巢浆液性囊腺癌细胞亚株(SKOV3-TR30)为研究对象,应用双向电泳技术建立SKOV3与SKOV3-TR30的蛋白质差异表达图谱,并对图谱进行质谱分析。然后应用蛋白免疫印迹和免疫细胞化学方法对其中3个有差异的蛋白进行定量和定位检测。结果: (1)经过组内与组间3次重复,发现每次实验均有相似变化的差异点23个。其中与SKOV3细胞株相比,在SKOV3-TR30细胞株表达上调大于3倍的蛋白质点有16个(P<0.05),表达下调大于3倍的蛋白质点有7个(P<0.05)。(2)通过质谱分析和数据库搜索,其中7个蛋白点得到初步鉴定,分别为可溶性抗药性相关钙结合蛋白(Sorcin)、组织蛋白酶B前体(Cathepsin B)、调宁蛋白3、热休克蛋白27(HSP27)、波形纤维蛋白、尼克酰胺乙酰乙酸水解酶和血红蛋白β链。(3)蛋白免疫印迹结果显示,Sorcin、Cathepsin B及HSP27在SKOV3-TR30细胞中的表达显著高于SKOV3细胞株(P<0.05)。免疫细胞化学的结果表明,SKOV3及SKOV3-TR30均可检测到Sorcin、Cathepsin B及HSP27阳性表达的细胞,并且3个蛋白均分布在细胞浆内,以核周最为明显。结论: 低浓度紫杉醇诱导的上皮性卵巢癌耐药细胞亚株中存在细胞骨架相关信号转导分子表达上调,上调的细胞骨架相关信号转导分子在卵巢癌临床预示耐药与逆转耐药治疗中的作用值得进一步研究。     

体外沉默血管内皮生长因子对D-(-)-MTX/A549耐药细胞株迁移侵袭能力的影响

目的: 研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)基因沉默对D-(-)-MTX /A549耐药细胞株迁移和侵袭的影响及可能的分子机制。方法: 采用siRNA技术沉默D-(-)-MTX/A549耐药细胞株VEGF基因, 细胞划痕试验和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量PCR检测VEGF、MMP-2 mRNA,Western blot检测p-ERK1/2蛋白的表达。结果: VEGF siRNA序列及阴性对照成功转染至D-(-)-MTX/A549后,VEGF mRNA表达水平明显下降, 与阴性对照相比下降了2.29倍,差异具有统计学意义（P=0.002）,表明转染成功。阴性对照组与空白组差异无统计学意义（P>0.05）。转染后,D-(-)-MTX/A549迁移和侵袭能力明显下降（P值均<0.05）,D-(-)-MTX/A549耐药细胞 MMP-2 mRNA、p-ERK1/2的蛋白达也较阴性对照水平明显下降（P值均<0.05）。结论: 抑制VEGF基因表达可以抑制D-(-)-MTX/A549细胞的迁移和侵袭能力,这一过程可能涉及到MMP-2和p-ERK1/2信号通路。     

氧化前胡素对乳腺癌MCF-7/DOX细胞多柔比星耐药的抑制作用

目的：探讨氧化前胡素（oxypeucedanin, OPD）对人乳腺癌MCF-7/DOX细胞多柔比星耐药的影响并探究其可能机制。方法：体外培养MCF-7/DOX细胞,MTT法检测OPD对MCF-7/DOX细胞增殖的影响,并考察OPD最大无毒浓度与多柔比星不同浓度联用对MCF-7/DOX细胞增殖的影响。qRT-PCR检测OPD与多柔比星联用对MCF-7/DOX细胞MDR1、MRP1及甘油磷脂代谢酶AGPAT2、CHKA、CEPT1、DGKA、PCYT1A、PLA2G15 mRNA水平的影响。Western blot检测OPD与多柔比星联用对MCF-7/DOX细胞MDR1、MRP1、CHKA及CCTα蛋白表达的影响。结果：OPD 50 μg/mL与多柔比星联用作用于MCF-7/DOX细胞的IC50值低于多柔比星单独,其逆转倍数为1.56倍。与对照组比较,多柔比星组MCF-7/DOX细胞MDR1、MRP1和6种甘油磷脂代谢酶mRNA均下调（P<0.05或P<0.01）,MDR1、MRP1、CHKA和CCTα蛋白表达无显著变化（P>0.05）,OPD 50 μg/mL与多柔比星联用组上述基因和蛋白表达均显著下调（P<0.05）。与多柔比星组比较,OPD 50 μg/mL与多柔比星联用组MCF-7/DOX细胞上述基因表达进一步下调（P<0.05或P<0.01）,上述4种蛋白表达无显著变化（P>0.05）。 结论：OPD可增强MCF-7/DOX细胞对多柔比星的化疗敏感性,逆转耐药,可能与其抑制甘油磷脂代谢途径有关。     

沉默YAP基因提高伊马替尼耐药的人髓性白血病细胞K562药物敏感性的研究

目的: 探究沉默YAP基因后,提高伊马替尼耐药的K562细胞（K562/IMA）对于伊马替尼敏感性的作用及相关机制,为伊马替尼耐药的人髓性白血病治疗提供参考。方法: 采用小干扰RNA技术（siRNA）转染YAP的siRNA-YAP沉默K562/IMA的YAP基因。设置对照组（Control）、siRNA阴性对照组（siRNA-NC）和YAP siRNA组（siRNA-YAP）。采用RT-qPCR和Western blot法鉴定沉默后各组细胞YAP蛋白和mRNA的表达水平。CCK-8法检测各组细胞对于伊马替尼的敏感性,并计算半数抑制浓度IC50。流式细胞术检测各组细胞的凋亡率。Western blot法检测YAP、Bcl-2、Bax、cleaved-caspase-3、caspase-3、细胞色素C（Cyto-C）的表达水平,Transwell小室检测细胞转移侵袭能力。结果: YAP基因沉默后,siRNA-YAP组细胞中YAP的蛋白和mRNA表达水平显著低于Control组和siRNA-NC组,沉默效果较好。siRNA-YAP的IC50值显著低于Control组和siRNA-NC组,具有统计学意义（P<0.05）,而流式细胞术结果显示,siRNA-YAP组细胞在相同药物剂量下,凋亡率显著高于Control组和siRNA-NC组,具有统计学意义（P<0.05）。YAP沉默的K562/IMA细胞迁移侵袭能力显著下降。伊马替尼干预后,siRNA-YAP细胞中Bcl-2/Bax的水平下调,cleaved-caspase-3、caspase-3和Cyto-C的水平上调,相比Control组和siRNA-NC组,具有统计学意义（P<0.05）。结论: 沉默伊马替尼耐药的K562/IMA细胞中YAP基因,可以恢复肿瘤细胞对于伊马替尼的敏感性,可以促进线粒体凋亡途径的激活,导致耐药肿瘤细胞的凋亡。     

肿瘤细胞和耐药肿瘤细胞中FoxO3/Keap1/Nrf2通路的表达差异

目的: 检测FoxO3/Keap1/Nrf2信号通路在肿瘤细胞和耐药肿瘤细胞中的表达差异,探讨FoxO3/Keap1/Nrf2信号在肿瘤细胞耐药中的作用。方法: 构建肺癌A549耐药（A549/DDP）和结肠癌HCT-8耐药（HCT-8/5-FU）两种细胞株,耐药细胞对药物的敏感性用MTT法检测;分别用qRT-PCR、Western blot检测FoxO3/Keap1/Nrf2信号通路成员在非耐药和耐药肿瘤细胞中mRNA和蛋白的表达情况并进行比较。结果: A549/DDP的耐药性明显高于A549细胞（P<0.05),耐药倍数为5.25倍;HCT-8/5-FU耐药性显著高于HCT-8细胞（P<0.05）,耐药倍数为31.67倍;两种耐药细胞A549/DDP和HCT-8/5-FU中的FoxO3、Keap1和Akt基因的mRNA表达水平降低而Nrf2和Nqo1基因的mRNA表达水平升高;A549/DDP和HCT-8/5-FU细胞中的Keap1和FoxO3蛋白表达水平降低而p-Akt、Nrf2、Nqo1的蛋白表达水平升高。结论: FoxO3/Keap1/Nrf2信号通路与肿瘤耐药性有一定相关性,为深入研究该通路并探索降低肿瘤耐药性的治疗策略提供参考。     

RNAi抑制DNA甲基转移酶1的表达对胃癌细胞p16基因的影响

目的:运用RNAi（RNA interference）抑制胃癌细胞株BGC-823中DNA甲基转移酶1（DNA methylation transferase 1,DNMT1）基因的表达,当DNMT1基因沉默后观察p16基因的表达情况。 方法:以DNMT1的mRNA核苷酸序列,构建siRNA质粒1、2、3和阴性对照siRNA质粒b,胃癌细胞培养后经脂质体转染。对DNMT1基因行Q-PCR检测其mRNA表达水平及Western blot检测其蛋白表达水平,确认其表达下调后筛选出最佳干扰质粒。以同样的方法检测胃癌细胞最佳干扰组、阴性对照组和空白对照组的p16基因的表达情况,以确认抑制DNMT1基因表达后对胃癌细胞p16基因的影响。结果:RNAi可有效抑制胃癌细胞株BGC-823中DNMT1基因的表达。对转染后的胃癌细胞DNMT1基因检测mRNA及蛋白表达情况,结果显示,转染siRNA2的胃癌细胞中DNMT1的表达明显低于其他转染组、阴性对照组及空白对照组（P＜0.05）,由此筛选出最佳干扰质粒siRNA2。用同样的方法检测胃癌细胞最佳干扰组（siRNA2）、阴性对照组和空白对照组的p16基因表达情况。结果显示,最佳干扰组的mRNA（1.6727±0.2242）及蛋白（0.9227±0.0337）表达水平均高于阴性对照组（1.0025±0.0877）、（0.5440±0.0229）和空白对照组（0.4729±0.0940）、（0.4767±0.0774）（P＜0.05）。结论:用RNAi可以抑制胃癌细胞DNMT1基因的表达从而使p16基因去甲基化,使p16基因恢复表达。     

柚皮素对K562/A02细胞MDR1 mRNA/P gp的影响及机制研究

目的: 研究柚皮素对MDR1 mRNA与P-糖蛋白（P-gp）表达的影响及其分子生物学机制。方法: 将不同浓度的柚皮素（50、100、250、500 μmol/L）单独或联合阿霉素 （5 μmol/L）作用于K562/A02细胞48 h,RT-PCR法检测MDR1 mRNA的表达水平,Western-blot法检测P-gp的表达水平,并以NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）为对照,比较柚皮素与PDTC间的差异。结果: 系列浓度柚皮素作用于K562/A02细胞48 h后能显著抑制MDR1 mRNA（IC50=460.3 μmol/L）及P-gp的表达 （IC₅₀=286.3 μmol/L）,抑制作用随浓度的增加而增强;无毒剂量的柚皮素抑制强度与PDTC相近（P＞0.05）;经阿霉素诱导后二者抑制效应仍然相仿（P＞0.05）。结论: 柚皮素明显抑制K562/A02细胞MDR1 mRNA及P-gp的表达,可能与PDTC的作用机制相同,即限制IκB-α磷酸化,阻抑NF-κB的活化,从而抑制MDR1的转录,导致MDR1 mRNA及P-gp的表达量下调,最终使得药物外排转运效应下降。     

姜黄素通过调控组蛋白乙酰化修饰上调乳腺癌MCF-7和MCF-7/DOX细胞中MDR1表达

目的:从组蛋白乙酰化修饰角度探讨姜黄素上调乳腺癌MCF-7和MCF-7/DOX细胞中多药耐药基因1（multidrug resistance protein 1,MDR1）表达水平的作用机制。方法: CCK-8（Cell Counting Kit-8）法观察姜黄素对MCF-7和MCF-7/DOX细胞生长增殖以及多柔比星敏感性的影响;Real time PCR和Western blot方法检测姜黄素处理前后两种细胞中MDR1 mRNA和蛋白质表达水平的变化;染色质免疫共沉淀技术（chromatin immunoprecipitation assay,CHIP）检测姜黄素对两种细胞中MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4乙酰化水平的影响。结果: 不同浓度姜黄素处理72 h对MCF-7和MCF-7/DOX细胞的生长增殖有显著抑制作用,其IC50值分别为22.03 μmol/L和27.46 μmol/L;10 μmol/L姜黄素处理72 h可显著提高两种细胞多柔比星敏感性,多柔比星IC50值分别下降了57.14%和54.52%（P<0.05）;姜黄素处理MCF-7和MCF-7/DOX细胞后,MDR1在mRNA水平分别上调(32.90±0.96）和（5.70±0.55）倍（P<0.05）,在蛋白质水平分别上调（2.26±0.18）与（2.90±0.21）倍（P<0.05）;CHIP结果显示姜黄素对两种细胞中MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4的乙酰化水平均有显著上调作用。结论:姜黄素在增强MCF-7和MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性的同时,可通过调控MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4的乙酰化水平而上调MDR1的表达。     

黄连素对HepG2细胞CYP3A4和P-gp的影响和作用机制研究

目的: 阐明黄连素即盐酸小檗碱(berberine hydrochloride,BBR)对人肝癌细胞HepG2中细胞色素P450 3A4(CYP3A4)、多药耐药基因(MDR1)在mRNA和蛋白水平表达的影响,初步探讨黄连素对CYP3A4和P-糖蛋白(P-gp)的影响及其作用机制。方法: 采用MTT法检测不同浓度的BBR(1~100 μg/mL)对HepG2细胞活力的影响;并在BBR对HepG2细胞毒性较小的浓度范围进行实验,实验分为空白对照组、不同浓度BBR组、诱导剂利福平(Rif)组以及不同浓度BBR和Rif共同给药组,与对数期HepG2细胞孵育48 h后,提取细胞RNA和总蛋白,分别采用荧光定量PCR法(QRT-PCR)、Western blot法检测HepG2细胞中CYP3A4、MDR1、孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)、视黄醛X受体(retinoid X receptor,RXR)在mRNA水平的表达和CYP3A4、P-gp在蛋白水平的表达。结果: BBR在1~40 μg/mL 浓度范围内对HepG2细胞毒性小,细胞活力大于80%,超过 40 μg/mL 时对细胞毒性大,细胞存活率低。Western blot结果表明,与空白对照组比较, 0.1、0.5 和 2 μg/mL BBR对HepG2细胞CYP3A4和P-gp蛋白的表达有诱导作用(P<0.05),但10、40 μg/mL BBR对HepG2细胞CYP3A4和P-gp蛋白的表达有显著性抑制作用(P<0.01)。QRT-PCR结果表明,与空白对照组比较,10、20和 40 μg/mL BBR均对HepG2细胞PXR、CYP3A4、MDR1 mRNA的表达有显著抑制作用(P<0.05);但 10 μg/mL BBR对RXR mRNA无显著性影响(P>0.05),20、40 μg/mL BBR对RXR mRNA有显著的抑制作用(P<0.05)。结论: 黄连素对CYP3A4和P-gp有双向作用,低剂量时诱导,高剂量时抑制,并且其作用很有可能通过PXR信号通路实现。     

miR-29a/HMGB1信号通路在高糖高脂诱导的心肌细胞纤维化中的作用

目的：探究miR-29a/HMGB1信号通路在高糖高脂（hyperglycemia and hyperlipidemia, HGHL）诱导的H9C2细胞纤维化过程中的作用。方法：使用含葡萄糖（33 mmol/L）和棕榈酸酯（500 μmol/L）的DMEM培养基干预H9C2细胞24 h用于后续实验。共有8个实验分组,分别为NC组、HGHL组、miR-NC组、mimics组、inhibitor组、pc-HMGB1组、si-HMGB1组和miR-29a mimics+pc-HMGB1组。流式细胞术检测各组H9C2细胞的凋亡率。Western blot实验检测各组H9C2细胞内转化生长因子-β1（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）、过氧化物酶体增殖剂激活受体γ（PPARγ）和高迁移率族蛋白B1（HMGB1）的表达量。RT-qPCR检测各组细胞中miR-29a以及TGF-β1、CTGF、MMP-9、PPARγ、HMGB1 mRNA的表达水平。划痕实验检测各组H9C2细胞的迁移能力。结果：HGHL干预后,H9C2细胞的凋亡率显著增加（P<0.05）,细胞迁移能力显著增强（P<0.05）,细胞内TGF-β1、CTGF和MMP-9 mRNA表达水平显著增加（P<0.05）,PPARγ mRNA的表达水平显著降低（P<0.05）,相应蛋白的表达量也随mRNA的变化发生改变（P<0.05）,此外H9C2细胞内miR-29a的表达水平也显著降低（P<0.05）。转染miR-29a mimics后,H9C2细胞因HGHL干预引起的凋亡率增加受到显著抑制（P<0.05）,细胞的迁移能力也受到显著抑制（P<0.05）,细胞内TGF-β1、CTGF和MMP-9蛋白表达量和mRNA表达水平相较于HGHL组显著降低（P<0.05）,PPARγ蛋白表达量和mRNA表达水平显著增加（P<0.05）。转染miR-29a inhibitor后促进了HGHL诱导的H9C2细胞纤维化过程。miR-29a负调控HMGB1蛋白及其mRNA在H9C2细胞内的表达,双荧光素酶报告基因实验结果显示HMGB1是miR-29a的下游靶基因。转染si-HMGB1与转染miR-29a mimics对HGHL诱导的H9C2细胞纤维化作用类似。同时转染miR-29a mimics与pc-HMGB1对HGHL诱导的H9C2心肌细胞纤维化无显著影响。 结论：HGHL干预后显著增加H9C2细胞的凋亡率,增强其迁移能力和纤维化的过程。同时HGHL干预显著下调miR-29a在细胞内的表达水平,miR-29a通过负调控HMGB1在细胞内的表达进而影响HGHL诱导的H9C2细胞纤维化。     

紫杉醇与环磷酰胺分别联合铂类药治疗卵巢癌的对比研究

目的:比较紫杉醇联合铂类药物(TP 方案) 与环磷酰胺加铂类药物(CP 方案) 治疗Ⅲ、Ⅳ期卵巢上皮癌的疗效。方法:化疗方案每一疗程采用2 d 疗法, 每种药物d 1 或d 2 给药, 采用大剂量单次给药。对24 例Ⅲ、Ⅳ期卵巢上皮癌给予TP 方案化疗:紫杉醇剂量为135 mg·m^-2, 溶于5 %GS 500 ml 中,静滴, 3 h, d 1;顺铂(DDP) 75 mg·m^-2, d 2(或卡铂按AUC =5 计算所得的剂量), 前3 ～ 4 个疗程采用腹腔给药, 以后均静脉给药。30 例对照组病人采用环磷酰胺加铂类药为主的CP 方案。环磷酰胺(CTX)600 mg·m^-2, 静注, d 1;阿霉素(ADM) 40 ～60 mg·m^-2, 静注, d 1;长春新碱(VCR) 2 mg, 静注,d 1;DDP 60 ～ 80 mg·m^-2 (或卡铂, 剂量按AUC =5 计算) 。铂类药物用药时间、途径及水化均与TP 方案相同。结果:TP 方案化疗组CR 为8 例, PR 为10例, 总有效率为75 %;CP 方案对照组CR 4 例, PR 8例, 总有效率为40 %, TP 方案化疗组有效率显著高于CP 方案化疗组(P <0.05) 。TP 治疗组中位生存期为41.5 个月, 高于CP 对照组的32.6 个月(P <0.01) 。结论:TP 方案治疗Ⅲ、Ⅳ期卵巢上皮癌疗效显著优于CP 方案。     

小分子干扰RNA抑制HLX1表达对急性髓系白血病细胞侵袭的影响及机制探讨

目的: 探讨小分子干扰RNA（siRNA）抑制人同源异型盒基因（H2.0-like homeobox,HLX1）表达对急性髓系白血病细胞系U937细胞增殖与侵袭能力的影响。方法: 利用HLX1特异的siRNA瞬时转染U937细胞,通过实时定量（RT-PCR）与蛋白印迹法（Western blot）分别测定HLX1的mRNA及蛋白质的表达水平,应用细胞体外增殖实验法（MTT）与体外侵袭实验观察siRNA抑制HLX1表达后的U937细胞增殖与侵袭变化。 结果: 相对于空白对照组,HLX1特异的siRNA转染24 h后可抑制U937细胞HLX1 mRNA表达,抑制率为（70.0±2.7）%（P<0.01）;转染48 h后可有效抑制HLX1蛋白质表达,抑制率为（81.0±3.1）%（P<0.01）;转染组U937细胞增殖能力显著下降（P<0.01）,转染组穿过基质胶的U937细胞数（22.0±2.3）显著低于空白对照组（66.0±5.0）(P<0.01), p-21活化激酶1（PAK1）蛋白表达水平显著下降(P<0.01)。结论: siRNA下调HLX1表达水平可显著抑制急性髓系白血病细胞的增殖与侵袭能力。     

靶向作用TIMP-2调控人卵巢颗粒细胞的增殖能力

目的:探讨miR-106a对人卵巢颗粒细胞(KGN)增殖能力的调节作用,并初步探讨其可能的作用靶点。方法:采用细胞转染法调控miR-106a在颗粒细胞中的表达,RT-PCR法检测其表达水平。采用MTT法检测细胞的增殖活性,生物信息学预测miR-106a可能的靶基因并采用双荧光素酶实验验证,Western blot法检测靶蛋白的表达。结果:miR-106a在KGN细胞中表达显著高于正常卵巢上皮细胞(IOSE80),差异有统计学意义(P<0.05),抑制miR-106a表达后KGN细胞的增殖活性显著降低(P<0.05),双荧光素酶实验结果证实miR-106a可直接靶向作用于TIMP-2基因,Western blot结果显示过表达miR-106a后TIMP-2蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。结论:miR-106a可促进KGN细胞的增殖,与靶向降低TIMP-2表达水平有关。     

长链非编码RNA TSIX通过靶向miR-384调控人胰腺癌细胞增殖的研究

目的：观察长链非编码RNA（lncRNA）TSIX在胰腺癌组织及细胞中的表达,并探讨其对细胞增殖的影响及可能的机制。方法：采用qPCR 法检测 TSIX 在5种胰腺癌细胞株（BxPC-3、CAPAN-1、AsPC-1、 CFPAC-1和SW1990）、人正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7和7例胰腺癌组织及其癌旁组织中的差异性表达。生物信息学预测并分析与TSIX互补配对的miRNA及下游基因。用携带TSIX siRNA基因的重组慢病毒颗粒（LV-siRNA）感染SW1990细胞作为实验组,以阴性对照慢病毒颗粒（LV-NC）作为对照组。通过qPCR检测低表达TSIX对miR-384和Gab2 mRNA表达的影响,通过Western blot检测Gab2和PI3K/AKT通路蛋白的表达,通过流式细胞术、MTT比色法、集落形成实验检测低表达TSIX对SW1990细胞周期、活力及增殖的影响。结果：与胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7相比,TSIX在胰腺癌细胞株中均呈高表达（P<0.01）,其中在SW1990细胞中表达水平最高（P<0.01）。TSIX在胰腺癌组织中的表达水平高于其癌旁组织,差异有统计学意义（P<0.05）。SW1990细胞转染TSIX siRNA后,qPCR检测细胞中TSIX表达量明显降低（P<0.01）,miR-384表达升高（P<0.01）,Gab2的mRNA表达降低（P<0.01）;低表达TSIX能显著阻滞细胞周期、抑制细胞活力和集落形成能力（P<0.01）。结论：lncRNA TSIX在胰腺癌组织及细胞中高表达,低表达TSIX可抑制SW1990细胞的增殖,其机制可能为TSIX通过与miR 384互补配对调控Gab2基因的表达。     

重组人卵泡刺激素作用下卵泡黄素化颗粒细胞M-CSF及受体表达的临床差异

目的:比较使用重组人卵泡刺激素（r-FSH）后,患者卵泡黄素化颗粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）及其受体（M-CSFR）mRNA表达的差异,以探讨M-CSF及其受体对卵巢反应性的影响。方法: 接受体外受精治疗的96例多囊卵巢综合征（PCOS）患者和157例非PCOS患者,根据其使用r-FSH后反应性不同分为四组：即PCOS快、慢反应组和非PCOS快、慢反应组。收集成熟卵泡穿刺后黄素化颗粒细胞,采用SYBR Green荧光定量RT-PCR法检测颗粒细胞M-CSF、M-CSFR和管家基因GAPDH的mRNA表达,通过比较阈值法（CT值目的基因－CT值管家基因）进行基因相对定量。双独立样本t检验比较组间基因表达差异,并对差异有统计学意义的指标行Spearman相关分析检验。结果:各组患者r-FSH使用量无统计学差异（P>0.05）。PCOS患者整体与非PCOS患者整体比较,M-CSF和M-CSFR的mRNA定量均无统计学差异（P>0.05）。分组比较后,各组间M-CSF mRNA定量无统计学差异（P>0.05）。而PCOS慢反应组M-CSFR mRNA定量低于快反应组患者,差异有统计学意义（P=0.006）。对PCOS组颗粒细胞M-CSFR mRNA定量和r-FSH使用天数的Spearman相关分析提示,两者相关性有统计学意义（P=0.023）,相关系数0.511。 结论:PCOS卵巢慢反应患者对促排卵药物反应迟缓可能与其颗粒细胞M-CSFR表达减少有关。M-CSF及其受体参与影响卵巢对r-FSH的反应性。