黑曲霉液体发酵纤维素酶的研究

在黑曲霉ＤＭ—１液体深层发酵所产纤维素酶系中，β－葡萄糖苷酶活性特别高。系统研究了ＤＭ—１菌株的摇瓶产酶条件及２５Ｌ发酵罐发酵工艺。２５Ｌ发酵罐试验结果表明，在通风量０．４～１．０ｖｖｍ、搅拌转速２５０～５００ｒ／ｍ、发酵温度３１℃及控制发酵液ｐＨ在４．０左右的条件下，发酵１０４小时，其β－葡萄糖苷酶活和ＣＭＣ分别为３３０和２４１ｍｇ葡萄糖／ｍｌ。发酵滤液经硫铵盐析沉淀、过滤或离心及干燥等过程得固体纤维素干酶粉。其中β－葡萄糖苷酶活为１３５００ｍｇ葡萄糖／ｇ，平均收率８０．２％。     

黑曲霉液体发酵桔粉产纤维素酶的研究

以桔粉为原料,以黑曲霉（Aspergillus niger）为发酵菌株,采用液体发酵法生产纤维素酶。通过单因素试验考查了麸皮和蛋白胨的比例（C/N）、装液量及接种量3个因素对产酶的影响,并在此基础上,通过正交试验确定了发酵产酶的工艺条件为：添加桔粉80 g/L,麸皮和蛋白胨质量比为1∶2、250 mL三角瓶装30 mL Mandels氏营养液、接种量3 mL,于30℃下培养72 h,纤维素酶产量达到1885.71 U/g。     

黑曲霉2277菌株产纤维素酶最佳液体发酵条件的研究

对黑曲霉2277菌株产纤维素酶最佳液体培养条件进行了研究。结果表明,黑曲霉2277最适液体培养条件为:稻草粉(碳源)6%,豆饼粉(氮源)1%,初始pH6.0～6.5,培养温度28℃～30℃,一级培养时间120h,二级培养时间76h～84h,接种量10%,250mL三角瓶装液量75mL,摇床转速150r/min。在最适培养条件下,以DNS法对酶活进行定量分析,测得发酵液中CMC酶活达92.1μg/mL·min;以滤纸崩溃度对酶活进行定性分析,滤纸在94h内完全分解。     

黑曲霉液体发酵分泌纤维素酶系特性的研究

在液体发酵条件下，以纤维素粉或麦麸为不同碳源时，黑曲霉纤维素酶系各组分最高酶活，比酶活及其形成时间均有较大差异，以混合碳源(1．0％纤维素粉 2．0％麦麸)最佳。葡萄糖能明显延长内切葡聚糖酶(C1)最高酶活形成时间，酵母膏对各组分酶均几乎无影响；葡萄糖浓度小于0．1％和大于0．05％时分别显著促进C1和抑制外切葡聚糖酶(Cx)的分泌，而不同浓度均促进β-葡萄糖苷酶(βG)分泌，分别降低C1及提高Cx和βG的比酶活；酵母膏降低Cx最高酶活及各组分比酶活，浓度小于0．4％时对C1和βG的分泌有明显促进作用。三种组分酶的分泌规律和酶系不同时期的均衡性极不相同，葡萄糖对C1和βG分泌规律有较明显的改变。     

黑曲霉液体发酵香菇残次品产纤维素酶的培养基优化

为了充分综合利用香菇资源,该实验以黑曲霉（Aspergillus niger）为菌种,对香菇残次品进行液体发酵,在单因素试验的基础上,以羧甲基纤维素酶活作为响应值,采用响应面法对黑曲霉产纤维素酶的液体发酵培养基组成进行优化。结果表明,最佳发酵培养基组成为：香菇与水的比例为1∶9（g∶mL）,麦芽糖添加量为0.9 g/L,蛋白胨添加量为0.7 g/L,酵母膏添加量为0.5 g/L。在此优化条件下,纤维素酶活比培养基优化前提高了22.5%。     

黑曲霉HD9478纤维素酶固体发酵条件的研究

通过激光诱变筛选，获得一株高产纤维素酶的突变株ＨＤ９４７８，在以稻草，麦麸为主要原料的固体培养基上进行发酵培养，所产纤维素酶的固体曲，以羧甲基纤维钠为底物的纤维素Ｃｘ酶活力为３５００Ｕｇ，以滤纸为底物的纤维素ＣＬ的酶活力的２６０Ｕ／ｇ，以水杨素为底物的β－葡萄糖苷酶活力为１２００Ｕ／ｇ，发酵培养的条件是培养基起始ｐＨ６．０～７．０，培养温度２８～３２℃，培养时间７２ｈ。三种酶作用的最适ｐＨ分别为３     

航天诱变黑曲霉菌株ZM-8产纤维素酶的固态发酵条件研究

以麦秸、麸皮为原料,利用固态发酵对航天诱变后筛选的黑曲霉ZM-8菌株生产纤维素酶的条件进行了研究.结果表明,最佳培养基配方为:小麦秸秆粉与麸皮质量比为8:2,(NH4) 2SO4为4%,料水比为1:2:最佳培养条件为:接种量为6%,初始pH值为6.5,培养温度为28℃,培养时间为96h.在以上的培养基和培养条件下,测定滤纸酶(FPA)、羧甲基纤维素酶(CMC)和β-葡萄糖苷酶的活力分别为7.90 U/g、24.99U/g、21.74U/g,比出发菌种分别提高了3.0倍、1.66倍、2.24倍.     

航天诱变黑曲霉菌株ZM-8产纤维素酶的固态发酵条件研究

以麦秸、麸皮为原料,利用固态发酵对航天诱变后筛选的黑曲霉ZM-8菌株生产纤维素酶的条件进行了研究。结果表明,最佳培养基配方为:小麦秸秆粉与麸皮质量比为8:2,(NH4)2SO4为4%,料水比为1:2;最佳培养条件为:接种量为6%,初始pH值为6.5,培养温度为28℃,培养时间为96h。在以上的培养基和培养条件下,测定滤纸酶(FPA)、羧甲基纤维素酶(CMC)和β-葡萄糖苷酶的活力分别为7.90U/g、24.99U/g、21.74U/g,比出发菌种分别提高了3.0倍、1.66倍、2.24倍。     

绿色木霉与黑曲霉混合发酵产纤维素酶的研究

为提高绿色木霉与黑曲霉混合发酵产纤维素酶的能力,进行了黑曲霉接种时间和混合发酵时间的优化。研究了绿色木霉与黑曲霉4株菌单独发酵及混合发酵产纤维素酶酶活的特点,调整黑曲霉NH11-1的接种时间与绿色木霉NM01进行混合发酵来寻找产酶能力最高的时间点。结果表明,黑曲霉NH11-1推迟48 h接种的混合发酵组产酶效果最佳。最佳混合发酵条件为30 ℃、200 r/min恒温振荡培养5 d,滤纸酶活力（FPA）达到242.80 U/mL,是出发菌黑曲霉NH11-1的2.66倍;β-葡萄糖苷酶活力（β-GA）达到297.35 U/mL,是出发菌绿色木霉NM01的1.94倍;β-GA与FPA的比值为1.22,符合纤维素酶水解天然纤维素的最佳比值范围（0.12～1.50）。     

热带牧草发酵生产纤维素酶的研究

主要讨论了种子培养过程中溶氧、pH、还原糖、酶活随时间的变化规律;研究以牧草为基质的纤维素酶发酵、对其培养基进行优化;探讨了氮源(硫酸铵)、疏松剂(麦糟与玉米芯混合物比例4∶1)的不同添加量对发酵的影响。     

黑曲霉产纤维素酶混合发酵条件的研究

为选出高产纤维素酶菌株,对不同菌株进行筛选,通过4种纤维素酶活力大小比较单一菌株与混合菌株的产酶能力。利用3,5-二硝基水杨酸（DNS）法测定各单一菌株及混合菌株的内切葡聚糖酶活、滤纸酶活、外切葡聚糖酶活和β-葡萄糖苷酶活,筛选最优组合,在单因素试验的基础上通过响应面试验确定最佳产酶条件。结果表明,混合菌最佳产酶条件：混合菌株D2∶D2-1=2∶1,发酵时间6 d,接种量6%,发酵温度28 ℃。优化后滤纸酶活力达到156.26 U/mL,较优化前的滤纸酶活（113.96 U/mL）提高了37.1%。     

发酵秸杆生产耐高温纤维素酶工艺条件的研究

对绿色木霉110发酵秸秆生产纤维素酶上艺条件进行了研究，通过正交试验和扩大试验，确定了绿色木霉固体发酵生产纤维素酶的最佳工艺条件为干料：水=1：1，原料配比（稻草：麸皮）为6：4，容器装料量7％，接种量3％，培养温度38℃，发酵周期72h，试验因素的影响顺序为水分〉原料配比〉装料量〉接种量。在最佳工艺条件下，产酶酶活超过25300U/g。     

甜高梁秸秆固态发酵生产燃料乙醇的工艺研究

利用选育的耐酸耐高温酵母Q-10,采用甜高粱秸秆固态发酵生产燃料乙醇。当接种量为5％、发酵温度34％、发酵起始pH4．0、糖化酶和纤维素酶用量分别为50U／g原料和20U／g原料、发酵周期4d时,乙醇产量达到6．5％（v／v）。小试试验乙醇产量达到6．4％（v／v）,工业试验乙醇产量达到6．0％（v／v）。     

黑曲霉固体发酵产菊粉酶的研究

利用黑曲霉固体发酵获得了菊粉酶的粗酶液,并采用单因素试验和正交试验相结合的方法对酶的发酵条件进行了研究。结果表明,菊粉酶的最适发酵条件：pH值为6．5,培养6d,装样量为20g,氮源为酵母膏,基质为麦麸,可达到内切酶56．31U／g（干重）,外切酶137．24U／g（干重）。     

黑曲霉固体发酵产菊粉酶的研究

利用黑曲霉固体发酵获得了菊粉酶的粗酶液,并采用单因素试验和正交试验相结合的方法对酶的发酵条件进行了研究。结果表明,菊粉酶的最适发酵条件：pH值为6．5,培养6d,装样量为20g,氮源为酵母膏,基质为麦麸,可达到内切酶56．31U／g（干重）,外切酶137．24U／g（干重）。     

黑曲霉产α-半乳糖苷酶发酵条件研究

对从黄酒麦曲中筛选得到的黑曲霉wx-07产α-半乳糖苷酶的发酵条件进行了研究。结果表明,蔗糖是产酶的最适碳源,胰蛋白胨是最适氮源,产酶的最佳发酵条件为在250mL三角瓶中装入75mL培养基,接种量约为106个/750mL孢子,30℃、150r/min振荡培养96h,α-半乳糖苷酶活力达到2.40U/mL,是优化前的约3.08倍。