水稻磷肥精确定量试验研究

水稻移栽期秧苗含磷量最高,随着生育进程植株含磷量逐渐降低。水稻植株吸磷量抽穗期积累最大,磷素积累主要是水稻抽穗前期的茎叶的积累。P2施磷量已达到水稻植株含磷量和抽穗期磷素积累的需求,过多磷素造成浪费。当施磷量为8.6kg/亩时,可获得最佳产量589.7 kg/亩。     

黄瓜花叶病毒2b蛋白C末端无抑制局部RNA沉默的活性

目的:黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)编码的2b蛋白具有RNA沉默抑制子的功能,其C末端氨基酸序列非常保守。为了明确2b蛋白C末端保守序列在RNA沉默抑制中的作用,构建了CMV Q株系野生型2b及其C末端缺失突变体2bdelC的植物瞬时表达载体。通过农杆菌共渗滤法对野生型2b及其C末端突变体的沉默抑制子活性进行了分析。结果与结论:烟草接种叶片中野生型2b及其C末端突变体的Western blot检测表明,野生型2b蛋白与其C末端突变体在植物中积累水平变化不大,说明2b蛋白C末端氨基酸残基在维持2b蛋白在植物细胞中的稳定性方面无作用。在整株、细胞和分子水平上分别比较了野生型2b及其突变体2bdelC对共表达GFP的表达量影响,结果表明在所有的测定结果中二者均无明显地差异,说明2b蛋白C末端94-111位氨基酸在抑制局部RNA沉默上无生物学活性,讨论推测C末端应不存在与小RNA结合的结构域。     

梅毒螺旋体金属蛋白酶水解纤维蛋白原的活性研究

目的研究梅毒螺旋体金属蛋白酶Tp0751对细胞外基质纤维蛋白原的水解能力,为深入研究TP的致病机制提供实验依据。方法采用两点法构建H198A突变型及H202A突变型Tp0751基因,分别构建野生型和突变型Tp0751原核载体进行诱导表达;体外实验检测Tp0751野生型Tp0751蛋白、H198A Tp0751突变型蛋白、H202ATp0751突变型蛋白对纤维蛋白原的降解活性。结果成功表达并纯化了野生型Tp0751蛋白、H198A Tp0751突变体蛋白、H202A Tp0751突变体蛋白,各蛋白相对分子量大小约为26k D;纤维蛋白原在与野生型Tp0751蛋白作用约24h后被完全水解;与H198A Tp0751突变体蛋白作用约24 h后部分水解,尚有部分未被降解;与H202A Tp0751突变体蛋白作用约24h后几乎不被水解。结论野生型Tp0751蛋白具有水解纤维蛋白原的作用;Tp0751蛋白水解纤维蛋白原的活性可能与金属蛋白酶HEXXH域相关,影响Tp0751蛋白对纤维蛋白原的降解的活性位点可能是202位的H而不是198位的H。     

鼻咽癌相关新基因NPCEDRG突变型重组表达载体的构建及生物信息学分析

目的构建带His标签的突变型及野生型pcDNATM3.1/myc-HisB/NPCEDRG重组表达载体。方法以pcDNA3.1-NPCEDRG重组质粒为模板,采用聚合酶链式反应(PCR)技术扩增NPCEDRG基因编码区,利用PCR过程中的碱基错配,随机突变产生NPCEDRG的突变体,分别将野生型及突变型NPCEDRG基因编码区cDNA插入pcDNATM3.1/myc-HisB真核表达载体,双酶切鉴定,测序验证,生物信息学方法进行蛋白质结构预测。结果双酶切突变型及野生型pcDNATM3.1/myc-HisB/NPCEDRG重组表达载体,均产生519 bp长度的目的片断。测序结果证实,突变型NPCEDRG基因有两个点发生了突变,分别是T260-C260和T287-C287,但没有移码突变,在线生物信息学分析结果示其相应氨基酸序列改变为V73-A73和M82-T82;野生型NPCEDRG基因序列与Genebank已知序列一致。两个重组载体插入片段大小均为513 bp,插入方向及位置正确,能表达预期所要的融合蛋白。结论成功构建了带His标签的突变型及野生型pcDNATM3.1/myc-HisB/NPCEDRG重组表达载体,为深入研究NPCEDRG基因功能和揭示鼻咽癌发病分子机制提供实验手段。     

禾谷镰刀菌Homeobox转录因子FgHtf1敲除突变体基因差异表达分析

禾谷镰刀菌是引起小麦赤霉病的主要病原真菌。分生孢子在侵染过程中起关键作用。先前研究表明同源异型盒(Homeobox)转录因子FgHtf1特异调控分生孢子的产生。为明确其调控产孢的分子机制,本研究采用高通量RNA测序技术(RNA-Seq),对ΔFghtf1突变体菌株和野生型PH-1菌株进行测序,结果显示其中591个基因转录上调,549个基因下调。对这些基因进行功能预测并聚类分析发现:上下调基因中分别有约30%和22%参与新陈代谢和能量转运。运用荧光定量PCR,检测10个基因的表达,验证了RNA-Seq的结果是可靠的。运用同源重组方法敲除明显下调的基因FGSG_10565和FGSG_07629,表型分析结果显示,相比野生型,ΔFGSG_10565和ΔFGSG_07629的生长速率和产孢量均不变,说明两个基因的表达受FgHtf1调控,但功能上不直接参与分生孢子的形成。     

6月份气温变化与寒地水稻生育转换和抽穗时期相关规律研究技术总结

黑龙江寒地水稻属早熟粳稻型,生育期短,具有感温性、重叠型和非蓄积性。本文中主要研究6月份气温与水稻生育转化和抽穗时期的相关规律,为今后指导水稻生产提供理论依据。     

水稻病害的发生与防治

<正>1.水稻白叶枯病水稻白叶枯病是水稻中、后期的重要病害之一,发病轻重及对水稻影响的大小与发病早迟有关,抽穗前发病对产量影响较大。1.1发病症状:白叶枯病主要在叶子上表现症状,有叶缘型和凋萎型。叶缘型常见于分蘖末期至孕穗期发生,病菌多从水孔侵入,病斑从叶尖或叶缘开始发生黄褐或暗绿色短条斑,沿叶脉上、下扩展,病、健交界处有时呈波纹状,以后叶片变为灰白色或黄色而枯死。籼稻病斑为黄褐色,为灰     

水稻病虫害综合防治要点

水稻纹枯病又称云纹病,是水稻生产上的一种常发性、普发性病害,水稻苗期至穗期各生育阶段均可发生,一般从分蘖期开始染病,孕穗到抽穗期形成发病高峰,到蜡熟期逐渐停止蔓延。由于栽培技术的不断改进和过量施用氮肥等原因,使水稻纹枯病发生为害日益加重,已上升为水稻生产上的主要病害,一般病株率15%~40%,减产10%~30%;严重者病株率达50%~100%,减产50%以上,出现不能抽穗和植株腐烂等情况。为了有效控制纹枯病的发生,保证水稻稳产高产,现将水稻纹枯病综合防治要点介绍如下。     

拟南芥CAM5基因对愈伤组织形成的影响

愈伤组织形成是植物组织培养的重要阶段。钙调素含量在愈伤组织形成过程中发生变化,但钙调素是否参与愈伤组织形成仍不清楚。为此,本文分析了一个钙调素基因CAM5的组织表达模式,结果发现,CAM5基因在拟南芥植株的根、茎、叶、花及幼苗中均有表达。此外,鉴定了拟南芥CAM5基因的纯合突变体cam5,并观察其叶柄外植体在愈伤组织诱导过程中的表型,结果发现,在愈伤诱导培养基中培养20d,与野生型相比,突变体的叶柄外植体膨大比较明显。进一步分析显示,培养20d后,突变体外植体的鲜重比培养前增加了39倍,而野生型仅增加了16倍。这些结果暗示CAM5基因参与了愈伤组织形成。     

水稻高产栽培与病害防治技术

<正>水稻是一年生禾本科植物,稻穗及稻谷高温、多湿、短日照,对土壤要求不严,水稻土最好。穗分化至灌浆盛期是结实关键期;营养状况平衡和高光效的群体,对提高结实率和粒重意义重大。一、高产栽培技术1.培育壮秧由于旱育苗床的培肥效果和控水效果,导致床土容量和含水量降低,空隙度增加,含氧量提高,对幼苗生长发育十分有利,稀播才能育成壮秧,壮秧返青快,分蘖早,为水稻高产打下基础。