控制酶解黄粉蛋白制备富含“条件必需氨基酸”—谷氨酰胺（Gln）活性肽营养液的研究（Ⅱ）Gln活性肽的制备工艺和最佳工艺条件的确定

确定了Gln活性肽的水解用酶和最佳酶解条件,采用复合酶A和胃蛋白酶两次酶解工艺制备Gln活性肽,复合酶A的选用条件为pH8.5、［S］2%、［E］9万u/100g黄粉、DH10、温度40℃;胃蛋白酶的条件为pH2.0、［E］2万u/100g黄粉、16h、温度37℃。酶解液通过超滤(COMW5000)、反渗浓缩(10kg/cm     

中性蛋白酶和碱性蛋白酶对玉米蛋白水解作用的研究

本实验研究了中性蛋白酶和碱性蛋白酶分别作用和共同作用对玉米蛋白粉中玉米蛋白的水解效果.结果表明,中性蛋白酶水解玉米蛋白的较佳水解条件是:酶浓度3544U/g、pH7.0、温度55℃、水解时间(t)为2h,碱性蛋白酶水解玉米蛋白粉的较佳水解条件是:酶浓度840U/g、pH8.0、温度55℃、水解时间2h.采用中性蛋白酶和碱性蛋白酶复合水解玉米蛋白比单一酶水解的效果好,水解液的水解度达到20%以上.     

双酶复合水解对玉米肽醒酒活性的影响

采用碱性蛋白酶与风味蛋白酶复合水解玉米蛋白粉制备玉米醒酒肽。研究水解温度,水解时间,酶底比与pH 4个因素对玉米蛋白在水解过程中羟基自由基(·OH)抑制率的影响,通过响应曲面分析方法优化其水解工艺,结果表明:最佳酶解条件为温度55℃、底物质量浓度5g/100mL、pH8.5,按3%的酶与底物比加碱性蛋白酶水解2h后,调整pH至6.95,温度为49.3℃,之后再按4.11%的酶与底物比加风味蛋白酶水解1.6h,·OH抑制率为55.45%。     

酶解虾壳蛋白制备ACE 抑制剂的工艺优化

以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明：碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。     

响应面法优化玉米黄粉蛋白的酶解工艺

利用pH-stat法测定碱性蛋白酶和中性蛋白酶对玉米黄粉蛋白的水解度,通过Box-Benhnken响应曲面法优化水解条件。根据单因素试验结果设计中心组合试验,以水解度为指标,采用响应面分析法确定最优水解工艺参数。结果表明：蛋白酶水解的最适条件为酶解pH11.10、酶解温度55.00℃、底物质量浓度112g/L、碱性蛋白酶与中性蛋白酶酶活单位比值5:1、加酶量48000U/g、酶解时间120min;在此条件下,玉米黄粉蛋白水解度实测值为30.23%,模型的预期值为30.84%。采用复合酶水解可提高玉米黄粉蛋白水解度,且工艺简单。     

Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味酶酶解大豆分离蛋白及脱苦工艺优化

以大豆分离蛋白为原料,选用Alcalase 2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶对大豆分离蛋白进行酶法水解及脱苦工艺研究。以水解度和苦味分值为考察值,对酶解工艺进行优化,确定最佳条件。结果表明:Alcalase2.4L碱性内切酶最佳酶解条件为加酶量14 000 U/g、酶解温度60℃、酶解pH8.5、底物质量分数5%,酶解时间2h,最终水解度为45.34%,此时水解液苦味值为4。Flavourzyme风味蛋白酶对水解液进行二次水解的最优酶解条件为加酶量300 U/g、酶解温度55℃、酶解pH 7.0、酶解时间3 h,此条件下大豆分离蛋白水解液苦味值最低为1.2。Alcalase2.4L碱性内切酶和Flavourzyme风味蛋白酶水解大豆分离蛋白使水解度得到较大提高的同时也解决了水解液的苦味问题。     

玉米多肽制备工艺的优化

采用碱性蛋白酶水解玉米蛋白为玉米多肽,对影响碱性蛋白酶水解玉米蛋白的主要因素进行了探讨,通过单因素分析和正交试验筛选出最佳工艺参数。研究结果表明：酶水解玉米蛋白的最佳条件为：pH值9.0、底物浓度[S]5.0%、酶底物浓度比（E/S）3.0%、水解温度50℃、水解时间1h。     

碱性蛋白酶酶解绿豆蛋白制备低聚肽工艺优化

采用碱性蛋白酶酶解绿豆蛋白,通过单因素试验方法优化酶解条件,经测定水解度考察了酶解过程中p H、温度、底物浓度[S]、酶用量[E/S]、酶解时间等因素对绿豆蛋白酶解效果的影响。通过L_9(3~4)正交试验设计,确定碱性蛋白酶酶水解的最适反应条件为:pH 8.5,温度65℃,底物浓度9%,酶用量5%,水解时间240 min。该条件下绿豆蛋白的水解度可达31.55%。     

牛骨酶解工艺及其酶解液中游离氨基酸的分析研究

本实验以牛骨为原料,以水解度为牛骨蛋白酶解液酶解程度的指标,确定了木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶双酶分步水解牛骨的工艺条件:将粉碎粒度为10mm 20mm的牛骨碎片,在2kg/cm2的高压蒸汽压下蒸煮3h,降温至50℃,后调节pH6.5,后加入木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶双酶分步水解,通过正交试验确定了木瓜蛋白酶酶解工艺:酶解温度为50℃,pH为6.5,酶解时间为3h,E/S为4000U/g;碱性蛋白酶酶解工艺:酶解温度为65℃,pH为8.5,酶解时间为3h,E/S为7000U/g。并对酶解液前后的氨基酸种类和含量进行了比较,酶解后较酶解前多了苯丙氨酸和色氨酸,各氨基酸含量较酶解前明显增加,为牛骨蛋白水解液制备肉味香精提供了依据。     

两种蛋白酶对米渣蛋白的酶促降解作用

碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶均可水解从米渣中提取的蛋白质,前者酶解米渣蛋白的效率明显优于后者。通过分析底物浓度、酶用量、溶液酸碱度、酶解温度和时间对酶促降解米渣蛋白效率的影响,得出碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶各自水解米渣蛋白的最适条件,即碱性蛋白酶作用底物的浓度、酶的用量、溶液pH、酶解温度和时间分别为0.6%、50U/ml、8.5、45℃和4h;木瓜蛋白酶则依次为0.9%、300U/ml、6.0、70℃和4h。      

玉米ACE抑制肽水解酶的筛选及酶解条件的优化

酶解玉米蛋白粉(蛋白含量为70%)制备血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽,通过酶的筛选实验确定了AS.1398中性蛋白酶作为最佳水解酶,在此基础上,进行pH、温度、底物浓度、加酶量[E]∶[S]的单因素实验,并且确定4种因素的参数值进行L9(34)正交实验,采用体外检测ACE抑制率和肽得率为指标来确定最佳工艺条件。研究结果表明,选用AS.1398中性蛋白酶作为水解酶,水解时间在2h时,pH7.0,温度50℃,底物浓度5%,加酶量[E]∶[S]为1.5∶100,得到的最大ACE抑制率为85.65%,肽得率为58.64%。     

碱性脂肪酶产生菌的筛选及产酶条件的优化

通过固体平板法从含油脂土样中筛选出一株产碱性脂肪酶活力较高的菌株 ,鉴定为解淀粉芽孢杆菌。此菌最佳产酶条件为 :1%淀粉为碳源 ,2 %黄豆粉和 2 %玉米粉为氮源 ,培养基起始 pH 7.0 ,3 0℃培养 72h。对发酵液性质进行初步研究发现 ,此酶最适反应温度为3 7℃ ,最佳反应 pH为 8.5。 0 .0 1mol/LCa2 + 和K+ 对酶有激活作用 ,而Cu2 + 和Fe3 + 则对该酶有抑制作用。     

瑞士乳杆菌蛋白酶水解乳清蛋白制备A C E 抑制肽的条件优化

目的：本实验以WPC-80 乳清浓缩蛋白为原料,对瑞士乳杆菌蛋白酶水解乳清蛋白产生血管紧张素转移酶(ACE)抑制肽工艺条件进行研究。方法：通过单因素条件和响应面方法研究水解pH 值、水解温度、酶与底物比、底物浓度和水解时间对水解度和ACE 抑制率的影响。结果：研究发现,五个工艺条件对ACE 抑制肽的产生都有影响,通过响应面法分析,确定瑞士乳杆菌蛋白酶酶解乳清蛋白的最佳水解条件为：[E]/[S] 0.6%、底物浓度6%、pH9.18、温度38.90℃,时间8.0h,在此条件下水解,产物ACE 抑制率达到92.21% ,IC50 为0.375mg/ml,水解度为18.76%。结论：应用响应面方法优化水解工艺条件是可行的。     

大米蛋白酶解制备抗氧化肽的研究

以大米蛋白为研究对象,比较了几种酶对大米蛋白的水解作用效果,确定了一种合适的酶源——精制中性蛋白酶。同时通过单因素试验和响应面分析,确定了采用精制中性蛋白酶制备大米蛋自抗氧化肽的最佳酶解条件为:[S]5.0%、[E]/[S]2.0%、pH7.0、温度37.5℃、时间4.16 h,该条件下制备的大米蛋白抗氧化肽对DPPH自由基的清除率为60.54%。     

麻疯树籽蛋白提取工艺的研究

采用碱提酸沉法对麻疯树籽粕中的麻疯树籽蛋白进行了提取研究。通过单因素试验和正交试验得到的最优工艺条件为:碱提料液比1∶11,pH8.5,温度55℃,时间100 min;酸沉pH4.4,温度55℃,时间40 min。在该工艺条件下,麻疯树籽蛋白提取率达到76.71%,分离物蛋白纯度达到81.18%。     

玉米酶法浸泡工艺的优化

玉米酶法浸泡是玉米淀粉生产中一种高效节能的浸泡工艺。以玉米为原料,通过单因素实验和正交实验,考察玉米酶法浸泡的浸泡时间、浸泡温度、加酶量和pH值对玉米浸泡效果的影响。实验结果表明,玉米酶法浸泡的最佳工艺条件为:浸泡时间4.0h、加酶量0.15ml/(100g玉米)、浸泡温度50℃、pH3.0。在该条件下,淀粉提取率提高到84.48%,与传统工艺相当;但成品中淀粉SO2质量分数0.013%,比传统工艺降低了27.78%。     

利用玉米胚内源酶富集γ-氨基丁酸工艺条件的研究

以脱脂玉米胚为原料,利用其中的蛋白酶和谷氨酸脱羧酶(GAD)富集γ-氨基丁酸。通过实验确定的富集工艺条件为:脱脂玉米胚与磷酸盐溶液(0.06mol/L、pH5.7)比例1∶40(g∶mL),反应时间5h,温度40℃,pH值5.7;同时添加600μmol/LCa2+可将GABA产量提高到4mg/g,比未富集时提高了10倍。另外,通过添加底物L-谷氨酸进行反应,脱脂玉米胚与磷酸盐缓冲液(0.08mol/L、pH5.7)比例为1∶40(g∶mL),VB6和CaCl2的添加量分别为3mmol/mol(Glu)和15mmol/mol(Glu),脱脂玉米胚与L-Glu质量之比为45∶1,40℃下反应6h,Glu的转化率可达100%,GABA产量为15mg/g,比未富集时提高40倍。     

复合酶降解高温蒸煮玉米秸秆研究

利用复合酶在其最优条件下降解高温蒸煮玉米秸秆,确定复合酶降解最优条件:0.8g底物(蒸煮秸秆0.6144g)加入30mlpH4.8柠檬酸缓冲液,调pH4.8,121℃灭菌20min,待冷却,无菌操作下加入20mg纤维素酶、10mg木聚糖酶、6mgβ–葡聚糖酶、1.3mg果胶酶,在50℃、100r/min条件下酶解16h,降解率为70.03%。此法降解率已非常接近玉米秸秆理论降解率(约74%),对玉米秸秆降解研究具有一定参考价值。     

玉米胚芽蛋白的碱法提取工艺及特性研究

对影响玉米胚芽蛋白提取量的因素进行了研究,通过单因素与正交实验法优化出最佳提取工艺;并对所得蛋白特性进行了探讨。结果表明:料液比、温度、pH等因素对蛋白提取率有明显影响,在pH9.5、料液比1∶12(g/mL)、温度50℃、时间4h时,玉米胚芽蛋白提取率最高,可达23.05%;玉米胚芽蛋白中氨基酸成分丰富,其中谷氨酸和精氨酸含量较高,分别为100g胚芽蛋白中含有6765.03mg和4265.81mg,且富含人体必需的八种氨基酸;此外,该蛋白具有良好的溶解性、起泡性、乳化性、持水性和持油性。