氧化魔芋葡甘露聚糖对齐口裂腹鱼品质和脂肪代谢相关基因表达的影响

目的：研究日粮氧化魔芋葡甘露聚糖（oxidized konjac glucomannan,OKGM）对齐口裂腹鱼的品质和脂肪代谢相关基因表达的影响。方法：将初始体质量为80 g的齐口裂腹鱼随机分成5 组,分别饲喂质量分数为0（对照组）、0.4%、0.8%、1.6%、3.2% OKGM,养殖60 d后,考察OKGM对齐口裂腹鱼的品质和脂肪代谢相关基因表达的影响。结果：与对照组相比,日粮OKGM添加量为1.6%和3.2%能显著增加齐口裂腹鱼腹肌中蛋白质含量（P＜0.05）,添加量为0.8%时,会显著降低腹肌粗脂肪含量（P＜0.05）,OKGM添加量对齐口裂腹鱼肌肉中水分和粗灰分无显著影响（P＞0.05）;添加量对齐口裂腹鱼肌肉的pH值、失水率、羟脯氨酸含量、胶原蛋白含量的影响均无显著性差异（P＞0.05）;添加量为1.6%时能显著升高肌肉中过氧化物酶体增殖物激活受体-α（peroxisomeproliferator activated receptor-α,PPAR-α）mRNA 表达水平（P＜0.05）,添加量为0.8%能显著升高肝胰脏中PPAR-αmRNA表达水平（P＜0.05）;添加量为0.8%能极显著降低齐口裂腹鱼肌肉中脂肪酸结合蛋白（fatty acid bindingprotein,FABP）mRNA表达水平（P＜0.01）,添加量对肝胰脏中FABP mRNA表达水平的影响差异均不显著（P＞0.05）。结论：日粮中添加适量OKGM能改善齐口裂腹鱼的品质,调节脂肪代谢相关基因表达。     

改性魔芋葡甘露聚糖对齐口裂腹鱼脂质代谢及相关基因表达的影响

对比了两种改性魔芋葡甘露聚糖对齐口裂腹鱼生长性能、肝脏基础成分、血清生化指标及肝脏相关基因表达的影响,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)对齐口裂腹鱼血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(T-CHO)及甘油三酯(TG)进行分析,利用实时荧光定量PCR技术对鱼类脂肪合成和沉积过程的关键基因肝脏脂蛋白酯酶(lpl)、肝酯酶(hl)、脂肪合成酶(fas)相对表达量进行定量分析。结果表明:改性魔芋葡甘露聚糖种类、添加剂量以及两者交互水平对齐口裂腹鱼生长均无显著影响。在魔芋葡甘露聚糖硫酸酯(OKGMS)改性条件下,随着添加剂量的增加肝脏脂肪、血清LDL-C、T-CHO、TG含量显著降低,当添加质量分数1.6%OKGMS达到最低;在酸解魔芋葡甘露聚糖改性条件下(AOKGM),随着添加剂量的增加血清LDL-C、T-CHO、TG质量分数呈先降低后增加趋势,当添加质量分数0.8%AOKGM达到最低,均与对照组达到显著差异。与基础组相比,添加质量分数1.6%OKGMS、0.8%AOKGM血清HDL-C显著增加,肝脏lpl m RNA表达量分别增加7.7和2.7倍。     

两种多糖对齐口裂腹鱼生长、血脂及肌肉组成的影响

在齐口裂腹鱼日粮中添加高低剂量柠檬酸抗性淀粉（Citric acid-modified resistent starch,CARS）与低分子氧化魔芋葡甘聚糖（Low-molecular-weight Oxidized Konjac glucomannan,LM-OKGM）,测定生长指标、血清指标、肝脏及肌肉组成等,研究CARS与LM-OKGM对齐口裂腹鱼的影响。结果表明:两种多糖添加高剂量促生长效果优于低剂量,而LM-OKGM促生长效果优于CARS,其中H-LM-OKGM效果较显著（p<0.05）,增重率为20.76%,特定生长率为0.31%/d;添加高剂量两种多糖显著降低血清中TC、TG（p<0.05）,同时LM-OKGM能将血清中HDL-C含量从1.97 mmol/L增加到3.21 mmol/L（p<0.05）,而CARS仅增加到2.42 mmol/L（p>0.05）;CARS比LM-OKGM更显著的降低肝脏组织中的粗脂肪含量（p<0.05）;CARS对背肌粗脂肪含量没有显著影响（p>0.05）,但H-LM-OKGM将背肌肉中粗脂肪含量增加到2.69%（p<0.05）,L-LM-OKGM增加到2.01%（p>0.05）。综上,两种多糖均能够不同程度促进齐口裂腹鱼的生长、降低血脂、增加HDL-C含量,相比CARS,LM-OKGM能增加背肌脂肪沉积,以及更好的改善血脂,而CARS相比LM-OKGM能更好的预防齐口裂腹鱼患脂肪肝。      

两种多糖对齐口裂腹鱼免疫性能的影响

探讨OKGM、OKGMS两种多糖对齐口裂腹鱼免疫性能的影响,将齐口裂腹鱼随机分为7组,两种多糖添加剂量分别为质量分数0.4%、0.8%、1.6%,饲喂60 d,测定齐口裂腹鱼血清免疫及抗氧化指标,并采用RT-PCR技术检测组织MyD88、IRF7基因相对表达量。结果表明,OKGMS1.6组能显著提高齐口裂腹鱼血清IgM活性、ACH50含量;OKGMS0.4、OKGMS0.8、OKGM0.4、OKGM0.8组均能显著降低血清MDA的含量;OKGMS与OKGM均能提高血清SOD活性;OKGMS能上调齐口裂腹鱼肠道MyD88基因mRNA相对表达量及肝脏、脾脏、中肾IRF7基因mRNA相对表达量;OKGM能上调肠道、头肾、中肾MyD88基因mRNA相对表达量及肠道、肝脏、脾脏、中肾IRF7基因mRNA相对表达量。结果表明：适量添加OKGM、OKGMS能提高齐口裂腹鱼抗氧化活性及免疫性能。     

两种多糖对齐口裂腹鱼生长、体组成及血清生化指标的影响

目的：研究水溶性氧化魔芋葡甘露聚糖（oxidized konjac glucomannan,OKGM）及水不溶性抗性淀粉（resistant starch,RS）RS4对齐口裂腹鱼生长性能、体组成及血清生化指标的影响。方法：选取平均体质量为（87.58±5.16） g的健康齐口裂腹鱼450 尾,随机分为5 组,每组3 个重复,每个重复30 尾。各组分别饲喂在基础饲料中添加0%（质量分数,下同）的OKGM及RS4型抗性淀粉（C组）、1.6%的OKGM（OKGM1.6组）、3.2%的OKGM（OKGM3.2组）、1.6%的RS4型抗性淀粉（RS41.6组）、3.2%的RS4型抗性淀粉（RS43.2组）的饲料,饲喂60 d后,测定齐口裂腹鱼的生长指标、体组成及血清生化指标。结果：与C组相比,OKGM1.6组齐口裂腹鱼的体质量增加率、特定生长率、蛋白质效率最高,饵料系数最低（P＜0.05）,RS41.6组和RS43.2组齐口裂腹鱼的体质量增加率、特定生长率、蛋白质效率变化不大,RS43.2组饵料系数降低（P＜0.05）;OKGM组肌肉粗蛋白含量增加（P＞0.05）,OKGM3.2组齐口裂腹鱼的肌肉和肝胰脏粗脂肪含量最低（P＜0.05）,鱼体肌肉水分、粗灰分含量不受OKGM及RS4添加量的影响（P＞0.05）;OKGM1.6组齐口裂腹鱼的血清甘油三酯水平显著降低（P＜0.05）,高密度脂蛋白胆固醇水平升高（P＜0.05）;RS43.2组齐口裂腹鱼的血清总胆固醇、甘油三酯水平均降低（P＜0.05）,高密度脂蛋白胆固醇含量升高（P＜0.05）。结论：当OKGM添加量为1.6%时,能改善齐口裂腹鱼生长状况,提高蛋白质效率,降低肌肉及肝胰脏粗脂肪含量,调节血脂水平。     

酸解氧化魔芋葡甘聚糖对齐口裂腹鱼肠道微生物的影响

探讨了氧化魔芋葡甘露聚糖酸解产物对齐口裂腹鱼肠道微生物的影响。选取平均体质量为81±2.64 g健康齐口裂腹鱼360尾,随机分为4组(每组3个重复,每个重复30尾),分别为对照组(饲喂基础饲料)、LOKGM-0.8%组(基础饲料+0.8%LOKGM)、LOKGM-1.6%组(基础饲料+1.6%LOKGM)和LOKGM-3.2%组(基础饲料+3.2%LOKGM),试验期75 d(驯养期15 d,正试期60 d)。采用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术对齐口裂腹鱼后肠肠道内容物细菌16S rDNA V3可变区进行菌群多样性分析,利用实时荧光定量PCR技术对肠道中嗜水气单胞菌及芽孢杆菌的数量进行定量分析。结果表明:与对照组相比,LOKGM-1.6%与LOKGM-3.2%组后肠肠道菌群多样性显著增加(P0.05),LOKGM-0.8%组无显著影响(P0.05);LOKGM-0.8%组齐口裂腹鱼前肠和中肠嗜水气单胞菌的数量显著减少(P0.05),前肠芽孢杆菌的数量显著增加(P0.05);LOKGM-1.6%组前中后肠嗜水气单胞菌数量均显著减少(P0.05),中肠与后肠芽孢杆菌数量显著增加(P0.05);LOKGM-3.2%组前肠和后肠嗜水气单胞菌的数量显著减少(P0.05),前肠和中肠芽孢杆菌数量显著增加(P0.05)。由此得出:氧化魔芋葡甘露聚糖酸解产物能够改善齐口裂腹鱼的肠道菌群结构,有利于保持鱼体健康。     

齐口裂腹鱼生长、肌肉品质和脂蛋白脂酶及脂肪酸合成酶基因表达的研究

目的：研究不同生长阶段齐口裂腹鱼的生长状况、肌肉品质和脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase,LPL）及脂肪酸合成酶（fatty acid synthetase,FAS）的基因表达。方法：分别选取齐口裂腹鱼幼鱼（137.8±1.7） g（S组）、亚成鱼（312.4±11.8） g（M组）、成鱼（500.9±31.4） g（L组）,测定形体指标、脏器指数和肌肉主要营养成分含量,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应测定LPL及FAS的基因表达水平。结果：与S组相比,M组、L组肥满度、肝体比、肠脂比、水分含量均有所降低（P＜0.05）,粗蛋白、粗灰分含量变化不大;L组肌间脂肪（intermuscular fat,IMF）含量最低（P＜0.05）;而S组、M组与L组肝胰脏中LPL mRNA及FAS mRNA表达水平均基本高于肌肉（P＜0.05）,且L组肝胰脏中LPL mRNA及FAS mRNA表达水平均最低（P＜0.05）,M组肌肉中LPL mRNA及FAS mRNA表达水平最高（P＜0.05）。结论：齐口裂腹鱼的肌肉主要营养成分含量在成鱼阶段有所降低,且IMF含量与LPL mRNA及FAS mRNA表达水平呈一定正相关。     

饲料蛋白水平及鱼粉蛋白含量对齐口裂腹鱼生长、体组成及消化酶活性的影响

试验探讨了不同蛋白水平(CP)及鱼粉蛋白含量(FP)对齐口裂腹鱼生长及体组成的影响。分别设5个蛋白水平(30%、32.05%、37%、41.95%、44%)和5个鱼粉蛋白水平(0%、5.86%、20%、34.14%、40%)。以CP、FP作为试验因素。按照二因子二元二次正交旋转组合设计,分为16个试验组,每组设3个重复。每个重复30尾鱼[(11.45±0.39)g]。经过50 d养殖试验。结果表明,不同蛋白水平及鱼粉蛋白含量对齐口裂腹鱼幼鱼生长有显著影响(P<0.05)。CP 37%,FP40%时,试验鱼的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、饲料蛋白质效率(PER)最大(分别为103.31%、1.42%/d和145.74%),CP 44%,FP 20%时,试验鱼的饵料系数(FCR)最低(为1.97)。以WGR、SGR、PER、FCR为指标,利用二元回归分析表明,齐口裂腹鱼生长性能最优时饲料CP、FP分别为39.94%～42.54%,30.67%～45.47%;对齐口裂腹鱼体组成分析表明,不同的饲料CP、FP对鱼体粗灰分和水分影响不显著(P>0.05),但对鱼体粗蛋白和粗脂肪有显著的影响(P<0.05);适宜的饲料CP、FP能有效改善齐口裂腹鱼消化酶的活性,提高对营养物质的吸收利用率。综合考虑各生长指标、肌肉营养成分、消化酶活性及各指标间的相关性和成本因素,建议在实际生产配方中齐口裂腹鱼幼鱼饲料中蛋白水平及鱼粉蛋白质量分数分别以39.94%～42.54%,30.67%～45.47%为宜。     

RS4型抗性淀粉对齐口裂腹鱼生长、脂肪代谢及相关基因表达的影响

目的：研究RS4型抗性淀粉对齐口裂腹鱼生长性能、脂肪代谢以及相关基因表达量的影响。方法：将体质量75 g左右的齐口裂腹鱼随机分为RS4型抗性淀粉添加量为0%（对照组）、3.5%、7%、14%、28% 5 组。饲喂60 d,测定生长性能指标、血脂水平,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术检测各组肌肉及肝脏中过氧化物酶增殖体激活受体α（peroxisome proliferators activated receptors-alpha,PPARα）、脂肪酸结合蛋白（fatty acid-binding protein,FABP）mRNA表达水平。结果：添加RS4型抗性淀粉剂量为7%和14%时与对照组相比能显著增加齐口裂腹鱼的体质量、摄食率、特定生长率（P＜0.05）,添加剂量为28%时能够显著增加摄食率,但是对体质量和特定生长率没有显著的影响。添加剂量到达14%及以上时与对照组相比能够显著降低血脂水平及肌肉中心型脂肪酸结合蛋白（heart-fattyacid-binding protein,H-FABP mRNA）表达水平,且H-FABP与肌内脂肪呈正相关性。添加剂量达7%及以上时能够显著升高肌肉和肝脏中PPARα mRNA表达水平,降低肝脏中FABP mRNA表达水平。结论：适当的添加RS4型抗性淀粉能够促进齐口裂腹鱼的生长、并且调节脂质代谢相关基因的表达,降低了肠系脂肪及肌内脂肪沉积。     

柠檬酸甘薯淀粉对齐口裂腹鱼生长及肠道菌群的影响

目的：探讨饲料中添加柠檬酸甘薯淀粉（citrate sweet potato starch,CSPS）对齐口裂腹鱼生长及肠道微环境的影响。方法：选用平均体质量为（75.47±5.43） g的齐口裂腹鱼共180 尾,随机分为5 组,每组3 个重复,每个重复12 尾鱼。对照组饲喂基础日粮,实验组分别饲喂添加3.5%、7%、14%及28%的CSPS的日粮,连续饲喂60 d后解剖齐口裂腹鱼,称质量后计算饵料系数、摄食率、特定生长率,取出肠管测定肠道黏膜皱褶高度,并对肠道菌群进行聚合酶链式反应变性梯度凝胶电泳（polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE）分析。结果：7%及14%的剂量组的末质量、摄食率、特定生长率显著高于对照组（P＜0.05）;14%、28%剂量组前肠黏膜皱褶高度显著低于对照组（P＜0.05）。在中肠,对照组中肠道菌群与3.5%剂量组相似度最高。在前后肠,对照组与其他各剂量组肠道菌群相似度均较低,但50.0≤q＜75.0（中度相似）。结论：低剂量（7%）的CSPS能够促进生长,而高剂量（28%）会抑制生长,CSPS能影响齐口裂腹鱼的肠道菌群。     

魔芋葡甘聚糖及氧化魔芋葡甘聚糖对益生菌生长及乳糖代谢作用的体外研究

目的:采用体外发酵法,探究不同剂量魔芋葡甘聚糖(Konjac Glucomannan,KGM)和氧化魔芋葡甘聚糖(Oxidized Konjac glucomannan,OKGM)对奶粉中乳糖代谢的促进作用,为缓解乳糖不耐受症提出方便新颖的方法。方法:在奶粉中添加不同剂量的KGM、OKGM设置高、中、低剂量6个试验组和阴性对照组(不含KGM或OKGM)及阳性对照组(以乳酸菌替代KGM和OKGM)。在无菌条件下,取小鼠盲肠、回肠内容物并与各组混合,经体外厌氧发酵24 h,测定不同时段发酵液的菌落数量、pH、乳糖含量和乳糖酶活性。结果:与阴性对照组相比,回肠发酵液KGM中、高剂量组和OKGM低、高剂量组的乳酸菌数量均显著增加(P<0.05),盲肠发酵液KGM、OKGM各试验组的乳酸菌数量均显著增加(P<0.05)。KGM高剂量组、OKGM各剂量组的回肠发酵液乳糖酶活性相较于阴性对照组显著增强(P<0.05),OKGM高剂量组的盲肠发酵液乳糖酶活性显著高于阴性对照组(P<0.05)。乳糖含量测定结果显示,与阴性对照组相比,回肠发酵液KGM低剂量组、OKGM各剂量组的4 h乳糖含量显著降低(P<0.05),且发酵24 h后KGM中、高剂量组和OKGM各剂量组最终乳糖含量均显著降低(P<0.05);在盲肠发酵液中,各试验组4 h乳糖含量均显著低于阴性对照组(P<0.05),其中KGM中剂量组和OKGM中、高剂量组结果也显著低于阳性对照组(P<0.05),且24 h后KGM低、中剂量组和OKGM中、高剂量组乳糖含量均显著低于阴性对照组(P<0.05)。结论:添加KGM或OKGM的奶粉,可促进肠道内乳酸菌等益生菌的生长,通过增强盲肠和回肠中乳糖酶的活力,可明显降低奶粉中乳糖的含量(发酵4 h即有明显效果),促进乳糖代谢。     

柠檬酸甘薯淀粉酯对齐口裂腹鱼肉品质的影响

目的：研究柠檬酸甘薯淀粉酯（citric acid-modified sweet potato starch,CSPS）对齐口裂腹鱼肉品质的影响。方法：将240 条体质量75 g左右的齐口裂腹鱼随机分为5 组,每组48 条。饲喂60 d,随机取每个池中8 条鱼测定齐口裂腹鱼鱼肉的品质指标。结果：齐口裂腹鱼饲料中CSPS添加量为14%和28%时能显著降低肌肉中脂肪含量（P＜0.05）;CSPS添加量为3.5%时能显著提高肌肉pH值,添加量为14%时可显著降低肌肉pH值（P＜0.05）;齐口裂腹鱼饲料中添加CSPS对鱼肌肉的蛋白质、灰分、水分、羟脯氨酸和胶原蛋白含量及失水率无显著影响（P＞0.05）;饲料中CSPS添加量为7%和14%时能够显著提高齐口裂腹鱼肌肉的硬度（P＜0.05）;CSPS添加量为28%时能够显著增加肌肉的黏附性（P＜0.05）;与对照组相比,CSPS添加量为14%时能够显著提高肌肉的胶着度（P＜0.05）;CSPS添加量为7%和14%能显著提高肌肉的咀嚼性（P＜0.05）;CSPS对齐口裂腹鱼肌肉的弹性、凝聚性和回复性无显著影响（P＞0.05）。结论：饲料中添加14%的CSPS能够降低齐口裂腹鱼肌肉中脂肪含量,提高肌肉的硬度、黏附性、胶着度和咀嚼性和肉质紧实度,改善鱼肉品质。     

RS4型抗性淀粉对齐口裂腹鱼脂肪代谢相关酶及相关基因表达的影响

目的：研究RS4型抗性淀粉对齐口裂腹鱼脂肪代谢相关酶及相关基因表达的影响。方法：将体质量75 g左右的齐口裂腹鱼随机按RS4型抗性淀粉添加量分为5 组：0%（对照组）、3.5%、7%、14%、28%。饲喂60 d,采用铜试剂法测定脂蛋白脂酶（lipoprotein lipase,LPL）、肝脂酶（hepatic lipase,HL）活性及游离脂肪酸（free fattyacids,FFA）含量,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time-polymerase chain reaction,RT-PCR）技术检测各组肌肉及肝脏中过氧化物酶增殖体激活受体γ（peroxisome proliferators activated receptor γ,PPARγ）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助活化因子（peroxisome proliferators activated receptor γ coactivator-1α,PGC-1α）mRNA表达水平。结果：RS4型抗性淀粉添加剂量在7%以上时能够显著的提高齐口裂腹鱼肝脏中脂蛋白脂酶和肝脂酶活性（P＜0.05）,使血清及肝脏中游离脂肪酸含量增加（P＜0.05）;添加量为3.5%对LPL、HL活性及FFA含量均无显著影响（P＞0.05）。添加量为7%和14%时能显著提高肌肉和肝脏中PPARγ和PGC-1α mRNA表达量（P＜0.05）。结论：适当的添加RS4型抗性淀粉能提高齐口裂腹鱼肌肉和肝脏中脂肪代谢相关基因mRNA表达水平,同时也能够增加齐口裂腹鱼肝脏中脂肪代谢相关酶的活性,促进甘油三酯的分解。