芳樟醇对三文鱼源莓实假单胞菌的抑菌机理

本研究应用高通量测序技术分析不同贮藏期三文鱼的菌相变化,并分离、纯化、鉴定出1 株4 ℃贮藏环境下三文鱼的优势腐败菌——莓实假单胞菌MS 02（Pseudomonas fragi MS 02）。再以分离出的莓实假单胞菌MS 02为靶标菌,深入探究芳樟醇对其抑菌性能及其抑菌机理。结果表明：4 ℃贮藏三文鱼的菌相呈现动态变化的趋势,其中发光杆菌属、假单胞菌属、青枯菌属和不动杆菌属细菌在三文鱼贮藏中占主要地位。随着贮藏时间的延长,假单胞菌属的相对丰度逐渐增大,而莓实假单胞菌是三文鱼在贮藏期间增长速率最快的菌种。以分离鉴定出的莓实假单胞菌MS 02为研究对象,发现芳樟醇对其具有良好的抑菌效果,扫描电子显微镜观察结果表明芳樟醇能使细菌细胞膜产生凹陷褶皱,而电导率、OD260 nm、二乙酸荧光素荧光强度和碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,AKP）、钠钾ATP酶活力测定结果证明芳樟醇能破坏莓实假单胞菌的细胞膜和细胞壁的通透性和完整性,进而影响细菌细胞正常能量代谢,最终导致菌体死亡。     

机油降解菌的分离、筛选和鉴定

采用驯化、富集、平板划线等方法从厦门污水处理厂、福州祥坂污水处理厂的活性污泥和石油污染的土壤中分离、筛选到了3株机油降解菌。它们能够在以机油为唯一碳源的培养基中生长，对机油都有较强的降解能力。经形态观察和生理生化实验的初步鉴定，3株机油降解菌株分别为不动细菌属（Acinetobacter sp．）、假单胞菌属（Pseudomonas sp．）、动胶菌属（Zoogloea sp．）     

拮抗猕猴桃溃疡病致病菌的海洋细菌的筛选与鉴定

猕猴桃溃疡病是一种严重威胁猕猴桃生产的毁灭性细菌性病害,其致病菌为丁香假单胞菌（Pseudomonas syringae）。本实验旨在利用印度洋海泥中分离出来的115株海洋细菌,从中筛选出对丁香假单胞菌有拮抗作用的海洋细菌。运用滤纸片扩散法对海洋细菌进行初筛,得到33株具有拮抗丁香假单胞菌作用的海洋细菌,利用牛津杯法复筛,筛选出1株海洋细菌NO.357具有最优的抑制效果。对NO.357进行形态学鉴定和生理生化鉴定,通过16S r DNA序列测定和构建系统发育树,鉴定NO.357为低温甲基杆菌（Methylobacterium frigidaeris）。本实验为进一步研究海洋细菌对猕猴桃溃疡病致病菌的拮抗作用以及猕猴桃健康种植奠定基础。     

PET瓶装无气天然矿泉水中污染菌及其系统进化分析

目的：了解某一批次聚对苯二甲酸乙二醇酯（polyethylene terephthalate,PET）瓶装无气天然矿泉水产生异味的缘由。方法：首先采用膜过滤结合平板菌落计数法分离和计数污染菌,16S rRNA序列分析鉴定其为假单胞菌属（Pseudomonas spp.）,再采用假单胞菌属特异性rpoB引物进行梯度聚合酶链式反应优化扩增条件,产物进行测序和序列分析将污染菌鉴定到种。结果：这批产品的主要污染菌是一种2009年从南极分离鉴定的假单胞菌属新种P. extremaustralis。反接实验证实该菌能在天然矿泉水中生长繁殖,并产生刺激性异味。结论：P. extremaustralis部分细菌能够透过两级串联0.2 μm过滤器,耐受中、低压紫外杀菌工艺,耐低温和低氧压,能在无任何添加的PET瓶装无气天然矿泉水中生长并产生异味。     

白色类诺卡氏菌的分离鉴定及其抗菌活性初探

该研究对白色类诺卡氏菌（Nocardioides albus）进行分离鉴定,并通过温度、紫外、酸碱处理,以绿脓杆菌（Pseudomonas aeruginosa）、恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）、枯草杆菌（Bacillus subtilis）、暗黑微绿链霉菌（Streptomyces atrovirens）为指示菌,用琼脂打孔法进行抑菌实验;用药敏片法进行药敏实验,初步探讨分离菌株的药物敏感性以及抑菌性。结果表明,紫外作用30 min及温度对其抑菌性影响不大;强酸、强碱环境中白色类诺卡氏菌基本没有抑菌活性。白色类诺卡氏菌对抗生素较为敏感,药敏性较高。     

鲜切苦菊、生菜和紫甘蓝上假单胞菌的分离鉴定及其噬菌体的初步筛选

鲜切蔬菜是人类摄取矿物质和维生素的重要来源,假单胞菌是鲜切蔬菜上的主要腐败菌.为了控制鲜切蔬菜中假单胞菌的污染,该研究采用假单胞菌培养基和16S rRNA基因序列分析,对鲜切苦菊、生菜和紫甘蓝中的假单胞菌进行分离鉴定,筛选得到2株铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginonas)、1株荧光假单胞菌(Pseu...     

冷却猪肉中特定腐败菌的靶向筛选

根据有氧包装冷却猪肉中特定腐败菌的种类特点和致腐特性,以假单胞菌（Pseudomonas sp.）和肠杆菌（Enterobacteriaceae）为目标菌建立筛选模型,同时结合简单的生理生化鉴定确保筛选方向。以托盘包装冷却猪肉贮藏末期腐败菌为菌源,用铬天青（chromeazurol S,CAS）嗜铁素检测平板法,从假单胞菌CFC选择性培养基上分离的116 株菌中筛选到86 株产嗜铁素的腐败菌;用氨基酸脱羧酶检测管从双层结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂（VRBDA）平板上分离的66 株菌中筛选到21 株产氨基酸脱羧酶腐败菌。采用根癌农杆菌（Agrobacteriumtumefaciens）为报告菌再从上述腐败菌中筛选出产N-酰基高丝氨酸内酯（N-acyl homoserine lactones,N-AHLs）的菌株（产嗜铁素的51 株,产氨基酸脱羧酶的19 株）。根据实验需要,选取其中部分菌株进行16S rDNA鉴定,最后得到产嗜铁素和AHLs的假单胞菌7 株,产氨基酸脱羧酶和AHLs的肠杆菌科菌4 株,为靶向抑菌防腐提供了研究基础。     

冷藏海鲈鱼优势腐败菌的筛选和鉴定

分离鉴定4 ℃冷藏条件下海鲈鱼的优势腐败菌,通过选择性培养基筛选获得单一菌株,对各菌株进行致腐能力的测定,确定冷藏海鲈鱼的优势腐败菌。对冷藏海鲈鱼的优势腐败菌进行菌落形态观察及部分生理生化实验、16S rDNA分子鉴定。结果表明,有4 株冷藏海鲈鱼优势腐败菌,其中1 株为草莓假单胞菌（Pseudomonas fragi）,1 株为腐败希瓦氏菌（Shewanella putrefaciens）,其余2 株为假单胞菌（Pseudomonas sp.）。在4 ℃冷藏条件下,草莓假单胞菌的致腐能力最强,其次是腐败希瓦氏菌和假单胞菌。     

PCR-DGGE法结合传统技术研究4℃冷链贮运条件下三文鱼菌相变化

为研究三文鱼在冷链贮运4 ℃条件下的细菌腐败机制,运用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳（polymerase chain reaction-denaturing gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE）技术、传统鉴定技术以及PCR技术分析了4 ℃冷链贮运条件下的三文鱼中腐败菌菌相变化规律,并通过产量因子测得各优势菌株致腐能力,从而确定特定腐败菌。DGGE指纹图谱显示,贮藏期间微生物多样性降低,假单胞菌属和希瓦氏菌属条带亮度却逐渐提高。这表明这两个属的微生物在三文鱼冷藏期间逐渐成为优势菌。通过分离和鉴定贮藏末期腐败三文鱼的优势腐败菌,本实验得到5 株优势腐败菌,分别为麦芽糖肉食杆菌（Carnobacterium maltaromaticum LMA28）、丁香假单胞菌（Pseudomonas syringae pv. syringae B728a）、荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens SBW25）、肉食杆菌（Carnobacterium sp. WN1359）和波罗的海希瓦氏菌（Shewanella baltica OS678）。将这5 株纯培养的腐败菌分别接种到无菌三文鱼中并冷藏一定时间后,各腐败菌的挥发性盐基氮（total volatile basic nitrogen,TVB-N）产量因子分别为1.26×10－7、1.25×10－7、1.36×10－7、1.08×10－7 mg TVB-N/CFU和1.03×10－7 mg TVB-N/CFU。这5 株腐败菌对三文鱼致腐败能力的顺序依次为荧光假单胞菌SBW25＞麦芽糖肉食杆菌LMA28＞丁香假单胞菌B728a＞肉食杆菌WN1359＞波罗的海希瓦氏菌OS678。     

建始地区酸豇豆盐水细菌多样性及乳酸菌分离鉴定

该研究采用MiSeq高通量测序技术对酸豇豆盐水的细菌多样性进行了解析,并通过纯培养方式分离了其中的乳酸菌。结果发现,细菌以硬壁菌门（Firmicutes）和变形菌门（Proteobacteria）为主,平均相对含量分别为84.41%和10.52%;细菌属以乳酸杆菌属（Lactobacillus）、魏斯氏菌属（Weissella）、葡萄球菌属（Staphylococcus）、假单胞菌属（Pseudomonas）和片球菌属（Pediococcus）为主,平均相对含量分别为57.02%、9.33%、7.07%、4.73%和3.40%;发现44个操作分类单元（OTU）存在于所有样品中,所包括序列占总序列数的25.06%,其中有6个、11个和13个分别被鉴定为假单胞菌属（Pseudomonas）、魏斯氏菌属（Weissella）和乳酸杆菌属（Lactobacillus）,所含序列平均含量分别为4.61%、4.97%和14.46%;通过纯培养共分离出了13株乳酸菌,其中12株被鉴定为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）。由此可见,乳酸杆菌为建始地区酸豇豆盐水中的优势细菌,且乳酸杆菌主要为植物乳杆菌。     

1-MCP处理对杏鲍菇采后生理和结构变化的影响

以杏鲍菇为试材,分别研究1-甲基环丙烯（1-methylcyclopropene,1-MCP）的不同剂量及不同处理时间对杏鲍菇采后质量损失率、多酚氧化酶（PPO）活性及菇体断面微细结构的影响。结果表明：当1-MCP的剂量为0.3 μL/L时,质量损失率和PPO活性在贮藏末期分别较对照组下降了5.94%和37.38%,菇体断面微细结构较贮藏初期变化最小;当1-MCP的处理时间为24 h时,质量损失率和PPO活性在贮藏末期分别较对照组下降了5.42%和33.98%,贮藏前后菇体断面微细结构变化最小。实验证明了1-MCP的最适处理剂量为0.3 μL/L、最适处理时间为24 h。最适条件下的1-MCP处理能有效地减缓果实质量损失率和褐变程度,减小菇体断面微细结构变化,有利于延长杏鲍菇的贮藏期,具有明显的保鲜效果。     

响应面法优化酶法制备杏鲍菇蛋白及其营养评价

为确定纤维素酶法提取杏鲍菇蛋白的最佳工艺,并评价所得蛋白的营养价值,在单因素试验的基础上,选择液料比、加酶量（以原料干粉计）、pH值和酶作用温度为影响因素,以蛋白得率为响应指标,利用Box-Behnken进行响应面分析,利用氨基酸系数法来评价杏鲍菇蛋白的营养价值。结果表明：杏鲍菇蛋白提取的最佳工艺为：液料比35∶1（V/m）、加酶量2.6%、pH 7.2、酶解温度60 ℃,此条件下的杏鲍菇蛋白得率达10.68%;按此方法所得的杏鲍菇蛋白的必需氨基酸与非必需氨基酸比值（essential amino acids/nonessentia amino acids,EAA/NEAA）为0.65,必需氨基酸与总氨基酸比值（EAA/total amino acids,TAA）为0.40,氨基酸比值系数分（score of ratiocoefficient,SRC）为75.02。该工艺操作简单,所得蛋白品质较高,可用于工业生产杏鲍菇蛋白产品。     

不同包装膜对杏鲍菇冷藏品质和贮藏效果的影响

比较5 种不同包装膜对杏鲍菇冷藏品质及理化特性的影响,以确定最适杏鲍菇冷藏的包装膜。结果表明,在4 ℃贮藏条件下,各种保鲜膜均不同程度地保持了杏鲍菇冷藏期间的感官品质,降低了杏鲍菇贮藏期间多酚氧化酶活性和丙二醛含量,延缓了可溶性蛋白、VC和可溶性总糖含量下降,同时保持较高的超氧化物歧化酶活性、过氧化氢酶活性和过氧化物酶活性,其中以高压低密度聚乙烯（low density polyethylene,LDPE）效果最佳。因此,LDPE能够有效抑制贮藏期间杏鲍菇品质劣变,降低营养价值的损失,提高综合贮藏品质,延长货架期时间至15 d,为薄膜包装杏鲍菇应用提供参考,并为商业延长杏鲍菇的贮藏期限提供理论依据。     

硒对杏鲍菇营养品质和抗氧化酶活性的影响

为了研究硒对杏鲍菇子实体硒含量、营养品质和抗氧化酶活性的影响,通过向培养料中添加Na2SeO3的方式培育富硒杏鲍菇。采用电感耦合等离子体质谱法测定富硒杏鲍菇子实体中的硒含量,分析硒在子实体中的分布情况,并且以普通杏鲍菇为对照,对富硒杏鲍菇的主要营养成分及抗氧化酶活性进行测定。结果表明：杏鲍菇子实体中的硒含量与培养料中硒含量成正相关性,当培养料中硒含量在40～50 mg/kg范围内时,杏鲍菇子实体对硒的生物富集因子最高,达到0.46～0.47,有机化率达到83.00%～84.00%,并且可溶性蛋白质含量和总糖含量与对照组相比分别显著提高了12.02%和25.76%（P＜0.05）,谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性显著增强（P＜0.05）。杏鲍菇子实体菌盖和菌柄的硒含量并没有显著性差异。本实验研究表明,适宜的施硒量可以提高杏鲍菇子实体中硒含量,有助于改善其营养品质和生理特性。     

气调处理对杏鲍菇货架期品质影响的多变量分析

以空气为对照（CK,21% O2＋0.03% CO2）,采用单因素方差分析、主成分分析、相关性分析、偏最小二乘回归分析、通径分析5 种数据分析方法,探讨了高体积分数CO2结合低体积分数O2的气调处理（controlledatmosphere,CA,30% CO2＋2% O2）对常温（20～25 ℃、相对湿度90%～95%）条件下销售的杏鲍菇品质的影响。单因素方差分析表明,CA可以抑制杏鲍菇质量减少,减缓其硬度、蛋白质含量、总糖含量下降,维持较低的相对电导率和pH值,使杏鲍菇获得较高的亮度及感官得分;主成分分析表明,CA对杏鲍菇颜色的影响最为显著,杏鲍菇货架前期与后期的总糖含量、硬度、蛋白质含量、相对电导率、pH值均有较大幅度变动;偏最小二乘与相关性分析表明,硬度、蛋白质含量、L*值、总糖含量、h值与品质表现出显著的正相关效应（P＜0.05）,而质量损失率、相对电导率、a*值、b*值与品质呈显著负相关（P＜0.05）;通径分析表明,L*值主要通过自身的直接作用和a*值、b*值、质量损失率的间接作用来影响杏鲍菇的品质,是作用于品质的主要因素。综上所述,CA对杏鲍菇品质的影响主要表现为色度的变化（L*、a*、b*值）,此外CA对杏鲍菇其他生理指标也产生一定影响。     

响应面试验优化超声-真空提取杏鲍菇多糖工艺

以杏鲍菇为原料,利用超声波和真空技术结合提取杏鲍菇多糖,研究料液比、超声功率、提取时间、提取温度及真空度等工艺条件对多糖提取效果的影响,并在单因素试验的基础上,通过响应面法优化超声-真空提取杏鲍菇多糖的最佳工艺条件。结果表明,超声-真空提取杏鲍菇多糖的最佳工艺条件为：料液比1∶30（g/mL）、超声功率420 W、提取时间28 min、提取温度65 ℃、真空度0.05 MPa。在此条件下,杏鲍菇多糖的得率为9.33%。同时,在相同条件下,对比分析了超声法和超声-真空法两种方式的提取效果,结果表明,当超声法提取多糖的得率为9.31%时,所需的提取时间为40 min,比超声-真空法的时间长了12 min。超声-真空技术结合提高了杏鲍菇多糖的提取效率。     

杏鲍菇甲壳素对大鼠实验性脂肪肝的预防作用

为研究杏鲍菇甲壳素对脂肪肝的预防作用,采用给脂肪肝模型大鼠对其喂食不同浓度杏鲍菇甲壳素,以考来烯胺为阳性对照,饲养5 周后观察其血清中丙氨酸转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、天冬氨酸转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、总甘油三酯（total triglycerides,TG）水平,肝脏组织中的TC、TG、丙二醛（malonaldehyde,MDA）水平、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性及肝组织病理学变化情况。结果表明：杏鲍菇甲壳素能极显著性（P＜0.01）地降低大鼠血清中ALT、AST、TC、TG水平,显著提高肝脏组织中SOD活性（P＜0.05）、降低MDA活性,减轻肝组织脂肪性样变,减少TC、TG在肝组织中积累,并呈现剂量效应,并值得注意的是,与考来烯胺组相比,杏鲍菇甲壳素高剂量组的预防效果与之相近,无差异性（P＞0.05）。结论：杏鲍菇甲壳素具有预防脂肪肝形成的作用。     

不同干燥工艺对杏鲍菇品质和挥发性风味成分的影响

为研究不同干燥方式对杏鲍菇品质和挥发性风味的影响,优选杏鲍菇干燥模式,选用热泵、热风、真空冷冻和真空微波4 种干燥工艺对新鲜杏鲍菇进行干燥处理,分析不同干燥方式对杏鲍菇主要营养成分、色度、糖（糖醇）和挥发性风味成分的影响。结果表明：杏鲍菇总蛋白受干燥方式影响较小,总糖含量在真空微波干燥条件下最低（13.56%）,总酚含量（39.97 μg/g）和粗脂肪含量（1.27%）在真空冷冻干燥条件下最低,色度方面真空冷冻干燥能较好保持杏鲍菇色泽;杏鲍菇中含量丰富的海藻糖受干燥方式影响为：热泵＞真空冷冻＞热风＞真空微波干燥,主要的糖醇甘露醇含量变化为：热泵和真空冷冻＞热风和真空微波。杏鲍菇4 种干燥方式条件下共鉴定出68 种挥发性风味成分,热泵、热风和真空微波干燥后醛类物质相对含量均最高,主要风味成分为异戊醛、正己醛和2-甲基丁醛,真空冷冻干燥后醇类物质相对含量最高,主要为1-辛烯三醇,同时还检测出酯类、酮类、烃类、吡嗪类以及少量其他类物质,各风味成分相互作用形成不同的风味。对比不同干燥方式,真空冷冻干燥能较好保持杏鲍菇品质和风味,热泵干燥在经济性和稳定性方面可以做到较好的平衡。     

栽培基质对杏鲍菇子实体蛋白质营养价值的影响

分析不同配方瓶栽杏鲍菇培养基栽培所产子实体的基本成分和氨基酸组成,采用国际通用的评价方法对其蛋白质营养价值进行评价比较。结果表明：各配方栽培获得的杏鲍菇子实体中必需氨基酸占总氨基酸比例为46.4%～49.5%;单一木屑碳源的基质配方（配方7）栽培的子实体中蛋白质含量及营养指数最高,分别为20.62%和18.5;玉米芯与木屑复合碳源（碳源物质的质量分数为55%）配方（配方4、5）栽培子实体的蛋白质获得最高的氨基酸评分、化学评分及氨基酸比值系数分,分别为95.0,62.5及41.94;氮源物质的质量分数为22%且未添加豆粕及玉米粉配方（配方1）栽培的子实体中蛋白质有较高的必需氨基酸指数和生物价,分别为92.5和89.1;玉米粉或豆粕作为氮源物质能一定程度改善产品蛋白质营养价值。本研究为生产优质、高产的瓶栽杏鲍菇提供了理论依据。     

不同培养基对平菇营养成分、多酚含量及其抗氧化活性的影响

以8种不同组成的培养基培养的平菇为研究对象,测定不同培养基处理对平菇营养成分、多酚含量及其多
酚抗氧化活性（DPPH自由基、ABTS+•清除能力和还原力）的影响。结果表明：灰分、总糖和膳食纤维含量最高的
为培养基H组平菇（H代表平菇培养基编号,下同）,水分、粗蛋白和脂肪含量最高的分别为培养基C、F和B组的
平菇。氨基酸总量平均值最高的是培养基H组平菇。不同培养基处理组平菇之间同种矿物元素含量存在差异,甚至
出现较大差异。检出6 种共有脂肪酸成分,同种脂肪酸在不同平菇中含量不同。不同培养基处理组平菇之间多酚含
量存在差异,培养基E组平菇多酚含量最高;且多酚（游离酚,结合酚）各抗氧化指标随多酚质量浓度的增加而增
加,但不同培养基处理组平菇各抗氧化指标的差异性大小随多酚质量浓度的变化而改变。