鲫鱼卵唾液酸糖蛋白制备工艺优化及其促骨形成作用研究

以14种水产动物卵为原料,筛选出具有较高促前成骨MC3T3-E1细胞增殖活性的鲫鱼卵水溶性糖蛋白,采用响应面法优化了鲫鱼卵唾液酸糖蛋白(Sialoglycoprotein of Carassius auratus eggs,Ca-SGP)的提取工艺,并评价Ca-SGP对MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响。结果表明,14种水产动物卵中,鲫鱼卵糖蛋白唾液酸含量最高,且对MC3T3-E1细胞增殖率最高,分别为5.76%和145.71%;采用单因素和响应面试验优化得到制备Ca-SGP的最优提取工艺为:NaCl浓度为0.38 mol/L、提取时间为4.2 h、液料比为1:3.88 w/v,在此条件下,Neu5Ac得率的预测值为592 mg/100 g,验证值为588.47 mg/100 g。Ca-SGP对骨形成作用的研究结果表明,Ca-SGP显著提高MC3T3-E1细胞增殖至135.56%,显著提高COL I、OCN和OPN的分泌量,分别提高到32.23、261.46和85.89 ng/mL,显著提高成骨细胞矿化能力至241.67%,说明Ca-SGP具有显著促骨形成作用(P<0.05)。以上研究为寻找安全、有效抗骨质疏松功能因子提供新途径。     

鲫鱼卵唾液酸糖蛋白对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用

从鲫鱼卵中提取唾液酸糖蛋白,并探讨其对免疫功能低下小鼠免疫功能的作用。Balb/c小鼠连续皮下注射氢化可的松造成免疫功能低下模型,以不同剂量的鲫鱼卵唾液酸蛋白灌胃28d后,分别测定小鼠的抗体产生水平、T细胞免疫功能、非特异性免疫功能和血清IFN-γ/IL-4。结果显示,高剂量的鲫鱼卵唾液酸糖蛋白能显著升高免疫低下小鼠的血清溶血素水平(p0.01)和抗体细胞生成数(p0.01),增强脾淋巴细胞增殖能力(p0.01)和迟发型变态反应(p0.05),显著提高腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数(p0.01),改善碳廓清能力(p0.05)并升高血清中IFN-γ/IL-4水平(p0.01)。说明鲫鱼卵唾液酸糖蛋白对免疫功能低下小鼠具有显著的免疫调节作用。     

体外模拟胃肠道对鲫鱼卵唾液酸糖蛋白的降解作用

鲫鱼卵唾液酸糖蛋白(sialoglycoprotein from Carassius auratus eggs,Ca-SGP)是从鲫鱼卵中筛选分离出的一种新型唾液酸糖蛋白,具有改善骨代谢、调节免疫力等功效。然而Ca-SGP属于大分子质量(195.35 kDa)物质,其如何通过胃肠道被降解并利用的仍不清楚。本实验旨在研究胃肠液及大肠肠道菌群对Ca-SGP的降解作用,以期为深入探索Ca-SGP作用机理提供参考。本实验以唾液酸糖蛋白为研究对象,采用体外静态胃肠模拟系统,通过检测不同阶段的产物分子质量、pH值、唾液酸含量及还原糖质量浓度来研究胃肠液及大肠肠道菌群对Ca-SGP的降解作用。结果表明:经过胃肠道消化后Ca-SGP的分子质量减小,唾液酸含量减少,还原糖质量浓度增加,说明胃肠液对Ca-SGP有一定的降解作用,Ca-SGP糖链末端的活性因子唾液酸能够在胃肠消化酶的作用下发生脱落;Ca-SGP经过肠道菌群发酵后,分子质量不断减小,还原糖质量浓度降低,说明Ca-SGP能够不断被微生物发酵并且利用,发酵后溶液pH值呈现逐渐下降趋势,推测可能与产生短链脂肪酸等酸性物质有关。提示胃肠液对Ca-SG...     

鲫鱼卵唾液酸糖蛋白对SAMP6小鼠骨丢失的保护作用

本文研究了鲫鱼卵唾液酸糖蛋白(Sialoglycoproteins of Carassius auratus eggs,Ca-SGP)对SAMP6小鼠骨丢失的保护作用。以雄性SAMP6小鼠为老年性骨质疏松症动物模型,连续灌胃Ca-SGP 150d后,检测血清骨代谢生化标志物,测定小鼠股骨矿化沉积率、胫骨骨密度及松质骨微结构。结果显示,经Ca-SGP(500mg/kg·bw)干预后,小鼠血清中骨生成标志物骨源性碱性磷酸酶的活性和I型前胶原羧基端前肽、骨钙素的含量得到显著升高(p0.01),骨吸收标志物抗酒石酸酸性磷酸酶和组织蛋白酶K的活性得到显著抑制(p0.01);胫骨骨密度提高10.92%(p0.01);松质骨骨体积分数、骨小梁数目及厚度均得到显著增加(p0.01),骨小梁间隙显著缩小(p0.01);骨矿化沉积率提高98.87%,差异显著(p0.01)。该研究表明Ca-SGP可改善老年性骨质疏松症小鼠低骨转换,提高骨密度,改善骨小梁结构,促进骨矿化,为开发抗骨质疏松症药物和功能食品提供了理论支持。     

植物乳杆菌CCFM8610对去卵巢大鼠骨质疏松症的改善作用

绝经后骨质疏松因雌激素缺乏会引起肠道菌群失调、肠道屏障受损、肠道通透性增加、宿主免疫力降低。目前治疗骨质疏松的药物长期使用大多具有较强的副作用,因此亟待寻求新的安全有效、长期干预的膳食途径。过往动物实验和临床试验表明,1株泡菜中分离得到的植物乳杆菌CCFM8610具有恢复肠道屏障损伤、调节肠道免疫系统、促进宿主细胞代谢等潜在功能,该研究旨在进一步探讨植物乳杆菌CCFM8610对骨质疏松症的改善作用。通过建立摘除双侧卵巢诱导骨质疏松的大鼠模型,证明植物乳杆菌CCFM8610可以显著改善去卵巢大鼠的骨结构指标,改善去卵巢大鼠骨代谢的高转换率;并调节肠道屏障,降低骨质疏松症大鼠血清炎症因子活性来抑制骨吸收。因此植物乳杆菌CCFM8610可通过增强肠道屏障功能和调节机体免疫系统有效缓解去卵巢大鼠骨质疏松症,为骨质疏松的防治开辟新路径。     

鮟鱇鱼骨多糖对去卵巢肥胖大鼠血脂的作用

目的:研究鮟鱇鱼骨多糖对去卵巢大鼠骨质疏松的作用,以确定鮟鱇鱼加工下脚料的使用价值,为进一步利用这一资源奠定基础。方法:通过切除大鼠双侧卵巢,建立去卵巢肥胖的动物模型;灌胃鮟鱇鱼骨多糖后处死大鼠,检测大鼠体重及脏器系数的变化情况,测定血清总胆固醇,甘油三酯,高密度脂蛋白,低密度脂蛋白的水平。结果:各给药组大鼠体重增长缓慢。总胆固醇,甘油三酯,低密度脂蛋白及动脉硬化指数手术组明显高于假手术组,鱼骨多糖组明显低于模型组。高密度脂蛋白和抗动脉硬化指数手术组显著低于假手术组,鱼骨多糖组显著高于模型组。各给药组大鼠肝脏、脂肪系数在不同程度上均低于模型组。结论:鮟鱇鱼骨多糖能明显抑制去卵巢大鼠体重的增加,降低血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白,增加高密度脂蛋白,是一种很好的保健材料。     

蒲公英提取物改善大鼠类风湿性关节炎的作用机制

本文研究了蒲公英提取物对类风湿性关节炎模型大鼠的作用机制。通过建立类风湿性关节炎模型,对大鼠进行病理学观察,并对治疗效果的相关指标如检测白介素-17(Interleukin-17,IL-17)、白介素-23(Interleukin-23,IL-23)、白介素-1(Interleukin-1,IL-1)、hs CRP、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)IL-1β、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、护骨素(Osteoprotegerin,OPG)、核因子KB配体受体激活因子(RANKL、RANK)水平进行检测。研究结果表明:高剂量蒲公英组大鼠足跖肿胀度(6.42±1.06)低于模型组大鼠足跖肿胀度(15.18±2.65)(p0.05),扭体(9.0±2.0)、缩足次数(8.5±1.5)高于模型组扭体(2.2±0.4)、缩足次数(2.4±0.5)。高剂量蒲公英组大鼠的IL-17、IL-23、IL-1、hs CRP、IL-1β、TNF-α等水平均低于模型组大鼠(p0.01)。高剂量蒲公英组大鼠的OPG(0.42±0.06)、RANKL(0.52±0.08)、RANK蛋白表达(0.45±0.05)显著低于模型组OPG(1.18±0.15)、RANKL(1.35±0.46)、RANK蛋白表达(1.23±0.45)(p0.01)。研究结果说明蒲公英提取物通过调控OPG/RANKL/RANK信号通路,抑制炎症因子水平表达,能显著改善风湿性关节炎模型大鼠的治疗效果。     

鮟鱇鱼骨对去卵巢骨质疏松大鼠的影响

目的：通过研究鮟鱇鱼骨粉对去卵巢大鼠骨质疏松的作用,确定鮟鱇鱼加工下脚料的使用价值,方法：雌性SD大鼠60只,按体质量随机分为6组,即假手术组、模型对照组、阳性对照组(乳酸钙1000mg/(kg·d))及鱼骨高(6636mg/(kg·d))、中(2100mg/(kg·d))、低(665mg/(kg·d))3个剂量组。手术后12d,持续灌胃12周后,测定股骨长度、股骨质量、子宫形态以及血清中Ca、P和碱性磷酸酶(APL)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的水平。结果：各剂量组大鼠与模型对照相比股骨质量升高,所有大鼠的股骨长度、血清Ca和血清P水平差异无显著性,模型对照组的血清碱性磷酸酶水平APL、AST、ALT与假手术组相比明显升高(P＜0.05或P＜0.01),而各剂量组的APL、AST、ALT水平与假手术组差异不显著。同时各剂量组可以促进子宫内膜腺体发育和内膜上皮无纤毛细胞上的微绒毛生长。结论：鮟鱇鱼骨可改善去卵巢大鼠的血清生化指标,并促进子宫内膜腺体发育和内膜上皮无纤毛细胞上的微绒毛生长。     

丹参提取物对去卵巢模型大鼠骨质疏松的影响

采用去卵巢大鼠模型,分别用丹参提取物低剂量、中剂量、高剂量和雌激素对模型鼠进行干预,探讨丹参提取物对雌激素缺乏引起的大鼠骨质疏松的影响。将SD 大鼠分为假手术组、模型组、丹参提取物低、中、高剂量组和雌激素组,分别连续给药12 周,测定子宫系数、股骨湿重、干重、灰重,并观察股骨、胫骨形态学的变化情况。结果显示：与假手术组比较,模型组动物体质量显著增加（P＜0.01）,子宫系数、股骨湿重、干重、灰重显著降低（P＜0.05）,股骨、胫骨骨小梁稀疏、断裂、排序紊乱;与模型组比较,丹参提物物各剂量组和雌激素组的体质量均显著降低（P＜0.05）,子宫系数、股骨湿重、干重及灰重均显著增加（P＜0.05）,股骨、胫骨的骨小梁结构得到不同程度的改善。综上,丹参提取物可提高去卵巢大鼠骨质量,改善骨微结构,且对子宫的影响小于雌激素,对去卵巢大鼠所致骨质疏松具有明显的改善作用。     

海参皂苷对去卵巢小鼠骨密度的改善作用及机制

目的：研究海参皂苷对双侧去卵巢小鼠骨密度的影响及作用机制。方法：雌性健康C57BL/6J小鼠采用去卵巢术建立骨质疏松症模型,术后4 周,随机分为假手术组（生理盐水）、模型组（生理盐水）和低、高剂量海参皂苷组（分别为7.5、15.0 mg/kg mb）。连续灌胃90 d后,检测尿钙浓度、尿磷浓度、骨密度和骨矿化沉积率,评价海参皂苷对模型小鼠骨矿物质的影响;进一步通过测定ALP等成骨标志指标的mRNA表达情况,以及调控其表达水平的Wnt/β-catenin通路关键基因的mRNA表达情况,探究海参皂苷改善骨密度的分子机制。结果：尿液检测显示,海参皂苷能够显著降低尿钙、磷浓度（P＜0.05）,减少骨矿流失;双能X射线扫描及荧光双标记结果显示,海参皂苷能显著增加去卵巢小鼠骨密度,提高骨矿化沉积率（P＜0.05）;实时荧光定量聚合酶链式反应结果表明,海参皂苷显著降低Wnt/β-catenin通路中关键基因的水平（P＜0.05）,下调骨生成标志基因ALP、OCN、Col1a和BMP2的mRNA表达水平（P＜0.05）。结论：海参皂苷能通过抑制Wnt/β-catenin通路降低去卵巢模型小鼠代偿性增加的骨生成,并能够抑制骨矿流失,提高骨密度和骨矿化沉积,改善骨质疏松症。     

鲤、鲫卵的脂质和脂肪酸特性

鲤(Cyprinus carpio)、鲫(Carassius auratus)卵总脂分别为干基的16.90%和10.19%。两者脂质和脂肪酸组成总体比较接近。总脂中含较高的甘油三酯和极性脂,并含一定量的固醇及其酯。极性脂约占总脂的30%,主要为PC和PE,并含一定的心磷脂。两种鱼卵主要含C14～C22的19种脂肪酸,16:0和18:1含量最高,DHA等n-3族多烯酸和20:4n-6也较高,而EPA较低,P/S>>0.5。总脂中饱和、单不饱和、多不饱和脂肪酸的比例接近1:1:1,中性脂中C18、C20酸较多,极性脂中C22酸(DHA)较多。鲫卵18:2n-6较高,使得多烯酸含量稍高,胆固醇、磷脂含量及PC/PE和n-3/n-6稍低于鲤卵。研究表明:两种淡水鱼卵与其鱼肉相比,磷脂和胆固醇明显高,磷脂以PC为主,其次为PE;多烯酸稍高,其中DHA高而EPA低,并含20:4n-6。鲫卵PL的乳化稳定性低于相同浓度大豆磷脂的。其独特的脂质具有较大的研究利用价值。     

鲫鱼在冷藏过程中的鲜度变化(英文)

本实验利用感官评价、化学(TVBN值和pH值)和微生物(细菌总数)指标的分析,研究了鲫鱼在真空包装和非真空包装两种条件下贮藏于3±1℃时新鲜度的变化。实验结果表明贮藏在真空包装条件下能够延缓鲫鱼的腐败变质,贮藏过程中感官评分呈下降趋势,表明在两种贮藏条件下鲫鱼的新鲜度随时间延长而降低。贮藏过程中TVBN值都有升高,而非真空包装组样品中细菌生长的速度要高于真空包装组。     

高效液相色谱法检测鲫鱼不同组织中的胶原蛋白含量

为提高水产品胶原蛋白的利用率,采用柱前衍生-高效液相色谱法对鲫鱼鱼皮、鱼肉、鱼鳞、鱼鳔组织中的羟脯氨酸含量进行检测,再将羟脯氨酸含量换算成相应胶原蛋白的含量。鲫鱼样品经盐酸110 ℃水解18 h,丹磺酰氯衍生,采用高效液相色谱-紫外法进行检测。色谱柱：反相C18柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：A为甲醇,B为四氢呋喃-甲醇-0.05 mol/L乙酸钠（1∶15∶84,V/V）溶液,采用梯度洗脱;流速1 mL/min;柱温40 ℃;检测波长254 nm。结果表明：羟脯氨酸在20～400 μg/mL范围内呈现良好的关系（R2=0.999 8）,最低检测限为0.18 μg/g,不同水平的平均回收率为80.22%～83.33%,相对标准偏差范围为0.31%～1.84%。实际样品分析显示,鱼皮、鱼肉、鱼鳞、鱼鳔组织中胶原蛋白含量分别为106.62、24.75、166.94、115.05 mg/g。本实验建立的分析方法简便快捷、具有较好的灵敏度和可靠性,可用于水产品不同组织中胶原蛋白的定量分析。     

冷风变温干燥对半干鲫鱼片品质的影响

以鲫鱼为原料,利用冷风恒温干燥、降温干燥和升温干燥模式进行了干燥试验。通过对干燥曲线、产品质构特性、氧化值和挥发性气味物质各种指标的比较,发现不同的干燥模式对半干鲫鱼片最终品质的影响存在差异。恒温模式和升温模式的干燥速度低于降温模式,但最终产品的质构特征和产品挥发性物质种类上都优于降温模式。恒温模式和升温模式更适合半干鲫鱼片的干燥。     

鲫鱼贮藏鲜度评价物理特性指标的研究

以鲫鱼为研究材料,研究0、4、10、15℃贮藏中物理特性指标(僵硬指数和失水率)和化学指标(TVB-N、pH)的变化。研究结果表明:随贮藏温度的提高,鲫鱼各指标变化迅速,且贮藏后期变化更快。僵硬指数与各指标间的相关性较差,失水率与化学指标TVB-N和pH值之间也有一定的相关性,尤其是pH与TVB-N值之间的相关性更好,可用鱼肉pH值和失水率的变化快速评价鲫鱼贮藏过程中品质的变化。     

鲫鱼皮胶原肽对小鼠的促钙吸收作用

目的：研究胶原肽（collagen peptides,CPs）对小鼠的促钙吸收作用。方法：采用小鼠低钙膳食模型法, 以昆明雄性小鼠为实验动物,设置正常组、低钙模型组、碳酸钙组、CPs低剂量（500 mg/kg mb＋CaCO3）、高剂量 （1 000 mg/kg mb＋CaCO3）组、酪蛋白磷酸肽对照组,连续灌胃6 周,考察小鼠血清钙、磷、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活力、钙吸收率、各项骨指标及骨微观结构、骨小梁形态变化。结果：CPs低、高剂量组小 鼠的ALP活力显著低于低钙模型组（P＜0.05）,其骨长度、干质量指数、骨钙含量、骨矿物密度（bone mineral density,BMD）、骨矿物含量（bone mineral content,BMC）均显著高于低钙模型组（P＜0.05）,CPs低剂量 组可使喂食低钙饲料的小鼠的各项指标达到正常组小鼠的水平。CPs低剂量组小鼠的ALP活力显著低于碳酸钙组 （P＜0.05）,其骨钙含量、BMD、BMC均显著高于碳酸钙组（P＜0.05）,提示补充碳酸钙的同时补充CPs,其促钙吸 收效果更好。结论：CPs可提高小鼠钙吸收率,增加骨小梁数目及强度,促进骨骼生长,从而能有效促进钙的吸收。