鲫鱼卵唾液酸糖蛋白对SAMP6小鼠骨丢失的保护作用

本文研究了鲫鱼卵唾液酸糖蛋白(Sialoglycoproteins of Carassius auratus eggs,Ca-SGP)对SAMP6小鼠骨丢失的保护作用。以雄性SAMP6小鼠为老年性骨质疏松症动物模型,连续灌胃Ca-SGP 150d后,检测血清骨代谢生化标志物,测定小鼠股骨矿化沉积率、胫骨骨密度及松质骨微结构。结果显示,经Ca-SGP(500mg/kg·bw)干预后,小鼠血清中骨生成标志物骨源性碱性磷酸酶的活性和I型前胶原羧基端前肽、骨钙素的含量得到显著升高(p0.01),骨吸收标志物抗酒石酸酸性磷酸酶和组织蛋白酶K的活性得到显著抑制(p0.01);胫骨骨密度提高10.92%(p0.01);松质骨骨体积分数、骨小梁数目及厚度均得到显著增加(p0.01),骨小梁间隙显著缩小(p0.01);骨矿化沉积率提高98.87%,差异显著(p0.01)。该研究表明Ca-SGP可改善老年性骨质疏松症小鼠低骨转换,提高骨密度,改善骨小梁结构,促进骨矿化,为开发抗骨质疏松症药物和功能食品提供了理论支持。     

鲫鱼卵唾液酸糖蛋白毒理学评价及对其蓄积靶器官的研究

目的:探究鲫鱼卵唾液酸糖蛋白的食用安全性及其在体内的蓄积靶器官。方法:采用急性毒性试验,Ames试验、骨髓微核试验、小鼠精子畸形试验等3项遗传毒性试验和大鼠90 d喂养试验对鲫鱼卵唾液酸糖蛋白进行毒理学评价;以体内唾液酸含量变化为追踪目标,ICR小鼠被连续灌胃鲫鱼卵唾液酸糖蛋白10 d后,按试剂盒法检测其脾、心、肾、肝、肌肉、脑、睾丸、卵巢及骨中唾液酸含量。结果:小鼠经口最大耐受剂量大于45 g/(kg bw),鲫鱼卵唾液酸糖蛋白属无毒级别,3项遗传毒性试验结果均为阴性,90 d喂养试验未见大鼠脏体比、血常规、血清及尿液生化指标出现明显异常;经鲫鱼卵唾液酸糖蛋白干预后,小鼠股骨、胫骨及腰椎中唾液酸含量显著上升(P0.01),其它器官唾液酸含量无显著变化。结论:鲫鱼卵唾液酸糖蛋白无急性毒性、遗传毒性及亚慢性毒性,骨组织为其蓄积靶器官。     

夏枯草黄酮对去卵巢大鼠骨质疏松的抑制作用

本研究通过干预去卵巢大鼠骨质疏松动物模型,探讨夏枯草黄酮对骨质疏松大鼠骨量、生物力学性能及骨代谢的影响。经夏枯草黄酮处理后,取血清检测血矿物质、护骨素(OPG)、碱性磷酸酶量(ALP)的含量变化,取各组股骨进行骨密度测定和骨组织形态检测,并用荧光定量PCR的方法检测Ⅰ型胶原、整合素β1与粘着斑激酶的mRNA表达。结果显示,夏枯草黄酮组ALP(3.03±0.22 IU/L)、破骨细胞数(0.23±0.05 1/mm2)、骨吸收周长百分数(14.94±5.12%)低于模型组(P0.05),而OPG量(186.34±44.21pg/mL)、骨密度、骨小梁相对体积(26.11±5.32%)和厚度(587.16±165.01?m)与模型组相比则有所增加(P0.05);表明夏枯草黄酮能够提升去卵巢大鼠的成骨细胞的功能,减缓骨吸收和骨代谢,促进骨形成,降低骨小梁损失,抑制骨量减少与骨强度降低,从而提升去卵巢大鼠的骨密度,最终对骨质疏松症起到了抑制作用。     

强化大豆异黄酮的营养蛋白粉对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用

目的:探讨强化大豆异黄酮的营养蛋白粉对去卵巢大鼠骨质疏松症的预防作用.方法:运用切除大鼠卵巢的方法建立骨质疏松症模型,50只大鼠随机分为 5 组.假性手术对照组(Sham),去卵巢酪蛋白对照组(Ovx),未强化大豆异黄酮组(O-SI),中剂量大豆异黄酮组(M-SI),高剂量大豆异黄酮组(H-SI).喂养 14 d 后,处死大鼠取血并分离股骨,测定骨密度(BMD)、骨钙、骨磷,并检测实验大鼠血清骨钙素(BGP)含量及血清抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)和碱性磷酸酶(AKP)活性.结果:强化大豆异黄酮的营养蛋白粉明显增加去卵巢大鼠的骨密度(P<0.01),骨钙(P<0.01),骨磷(P<0.01),并且可明显降低骨钙素含量(P<0.01)、及抗酒石酸酸性磷酸酶活性,增加血清碱性磷酸酶活性(P<0.01).结论:强化大豆异黄酮的营养蛋白粉对绝经后骨质疏松症具有明显的预防作用.     

乳铁蛋白对幼年大鼠骨健康影响

目的:研究乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)对幼年大鼠骨健康的作用。方法:将40 只4 周龄雄性SD大鼠随机分为对照组(0 mg/kg bw/d)、LF低剂量组(100 mg/kg bw/d)、LF中剂量组(500 mg/kg bw/d)和LF高剂量组(1000 mg/kg bw/d),连续喂养30 d后,测定幼年大鼠体重和脏体比变化、股骨骨密度(Bone mineral density,BMD)和骨微观结构变化、血清及股骨骨髓组织中抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate resistant acid phosphatase,TRACP)、基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、组织蛋白酶K(Cathepsin,CTSK)、核因子κB受体激活因子配体(Receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)和骨保护素(Osteocalcin,OPG)水平。结果:灌胃LF 30 d后,与对照组比较,LF剂量组幼年大鼠体重、脏体比增长趋势相近,差异不显著(P>0.05),LF中、高剂量组骨小梁数量(Trabecular bone number,Tb.N)、骨小梁厚度(Trabecular bone thickness,Tb.Th)、血清及股骨骨髓组织中OPG和OPG/RANKL水平显著增加(P<0.05),骨小梁分离度(Trabecular bone space,Tb.Sp)、TRACP、MMP-9、CTSK和RANKL显著降低(P<0.05)。结论:补充LF能够减少幼年大鼠骨吸收,增加骨形成和骨量,调节骨代谢平衡,促进骨健康。     

鲫鱼卵唾液酸糖蛋白对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用

从鲫鱼卵中提取唾液酸糖蛋白,并探讨其对免疫功能低下小鼠免疫功能的作用。Balb/c小鼠连续皮下注射氢化可的松造成免疫功能低下模型,以不同剂量的鲫鱼卵唾液酸蛋白灌胃28d后,分别测定小鼠的抗体产生水平、T细胞免疫功能、非特异性免疫功能和血清IFN-γ/IL-4。结果显示,高剂量的鲫鱼卵唾液酸糖蛋白能显著升高免疫低下小鼠的血清溶血素水平(p0.01)和抗体细胞生成数(p0.01),增强脾淋巴细胞增殖能力(p0.01)和迟发型变态反应(p0.05),显著提高腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率和吞噬指数(p0.01),改善碳廓清能力(p0.05)并升高血清中IFN-γ/IL-4水平(p0.01)。说明鲫鱼卵唾液酸糖蛋白对免疫功能低下小鼠具有显著的免疫调节作用。     

磷酸化南极磷虾肽调控Wnt/β-连接蛋白通路改善大鼠骨质疏松症

目的:研究磷酸化南极磷虾肽(PP-AK P)对双侧去卵巢骨质疏松症模型大鼠的改善作用及其机制。方法:采用双侧卵巢切除法建立骨质疏松症大鼠模型,将SD大鼠随机分为5组:假手术组(生理盐水)、模型对照组(生理盐水)、阳性对照组【阿伦磷酸钠1 mg/(kg·d)】和磷酸化南极磷虾肽低、高剂量组【400,800 mg/(kg·d)】,灌胃12周后,分别检测血清骨代谢相关指标、骨密度及骨组织形态学;测定Wnt/β-连接蛋白信号通路关键基因m RNA和蛋白的表达。结果:磷酸化南极磷虾肽能显著下调去卵巢骨质疏松症大鼠血清中骨源性碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(OCN)和骨形态发生蛋白(BMP-2)的分泌(P0.01),降低血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)和I型胶原羧基端交联肽(CTX-I)水平(P0.01),降低去卵巢大鼠骨代谢的高转换率;显著提高模型大鼠股骨骨密度(P0.01),并能显著增加骨小梁厚度和面积,降低骨小梁间距,改善骨组织微观结构;q RT-PCR检测结果表明,磷酸化南极磷虾肽能显著降低LRP-5b、β-连接蛋白、RUNX2、OSX m RNA的表达水平;免疫印迹检测结果表明,磷酸化南极磷虾肽能显著降低LRP-5b、β-连接蛋白总蛋白、β-连接蛋白核蛋白及RUNX2蛋白的表达。结论:南极磷虾肽能显著改善双侧去卵巢大鼠骨质疏松症,其作用机制与下调Wnt/β-连接蛋白通路,降低骨质疏松症大鼠高骨转换速率有关。     

大豆甙元抑制去卵巢大鼠骨矿丢失和相关元素关系的研究

目的:研究大豆甙元对去卵巢引起的骨质疏松大鼠骨矿物质和相关元素含量的影响。方法:实验用40只三月龄雌性清洁级大鼠,分为4组。其中去卵巢+己烯雌酚组(OVX-E)、去卵巢+大豆甙元组(OVX-D)大鼠每日分别灌胃己烯雌酚或大豆甙元,另二组大鼠仅灌胃等量蒸馏水。饲喂三个月后(90d)处死,收集血和骨样,分别测定钙(Ca)、磷(P)、锌(Zn)、镁(Mg)、锰(Mn)和碱性磷酸酶(ALP)等指标。结果去卵巢后雌性大鼠血清Ca、P、Zn、Mg含量无明显变化,但灌胃己烯雌酚或大豆甙元的去卵巢大鼠血清P、Zn、Mg含量则较假手术组(Sham)和去卵巢组(OVX)大鼠显著降低(p＜0．01,p＜0．05)。与OVX组相比,OVX-E和OVX-D组大鼠骨骼Ca、Zn含量得到改善;血清和胫骨钙磷比(Ca:P)的显著升高,分别为增加36．4%和48．6%(p＜0．01),接近Sham组。结论:研究进一步证实大豆甙元在改善骨密度的机理之一是,通过减少血清P、Zn、Mg吸收,提高Ca的吸收利用率,有利于Ca和Zn在胫骨中沉积,而增强骨密度。但血清碱性磷酸酶的表达主要与内源性雌激素水平有关。     

一种含姜黄食品对去卵巢模型鼠骨组织的影响

目的:探讨一种含姜黄食品对去卵巢模型鼠骨组织变化的影响。方法:采用双侧去卵巢法制备去卵巢诱发骨质疏松大鼠模型,将动物分为假手术组、模型对照组、含姜黄受试物组和不含姜黄受试物组,连续喂养90 d,测定各组大鼠体重变化、血清中骨保护素(Osteoprotegerin,OPG)及核因子Κ-β受体活化因子配体(Receptor Activator for Nuclear FactorΚ-βLigand,RANKL)水平、大鼠股骨长度以及骨组织形态学检测。结果:喂养90 d后,姜黄组大鼠体重增长趋势与假手术组较为接近(p0.05)。姜黄组大鼠血清OPG水平、股骨长度、骨小梁厚度以及成骨细胞数显著高于模型对照组(p0.01),RANKL水平、骨小梁间隙以及破骨细胞数显著低于模型对照组(p0.01)。姜黄组与不含姜黄组比较,大鼠血清中OPG、骨小梁厚度高于不含姜黄组(p0.05),RANKL、骨小梁间隙低于不含姜黄组(p0.05);姜黄组大鼠股骨长度及成骨细胞数显著高于不含姜黄组(p0.01),破骨细胞数显著少于不含姜黄组(p0.01)。结论:实验结果表明,此含姜黄食品对去卵巢模型鼠骨组织退变有一定的抑制作用。     

鲫鱼卵唾液酸糖蛋白制备工艺优化及其促骨形成作用研究

以14种水产动物卵为原料,筛选出具有较高促前成骨MC3T3-E1细胞增殖活性的鲫鱼卵水溶性糖蛋白,采用响应面法优化了鲫鱼卵唾液酸糖蛋白(Sialoglycoprotein of Carassius auratus eggs,Ca-SGP)的提取工艺,并评价Ca-SGP对MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响。结果表明,14种水产动物卵中,鲫鱼卵糖蛋白唾液酸含量最高,且对MC3T3-E1细胞增殖率最高,分别为5.76%和145.71%;采用单因素和响应面试验优化得到制备Ca-SGP的最优提取工艺为:NaCl浓度为0.38 mol/L、提取时间为4.2 h、液料比为1:3.88 w/v,在此条件下,Neu5Ac得率的预测值为592 mg/100 g,验证值为588.47 mg/100 g。Ca-SGP对骨形成作用的研究结果表明,Ca-SGP显著提高MC3T3-E1细胞增殖至135.56%,显著提高COL I、OCN和OPN的分泌量,分别提高到32.23、261.46和85.89 ng/mL,显著提高成骨细胞矿化能力至241.67%,说明Ca-SGP具有显著促骨形成作用(P<0.05)。以上研究为寻找安全、有效抗骨质疏松功能因子提供新途径。     

虾壳中复合钙粉的制备工艺优化及大鼠对其吸收效果的评价

为研究虾壳中复合钙粉的制取工艺及评价大鼠对其吸收效果,以南美白对虾虾壳为研究对象,采用胰蛋白酶-柠檬酸法制取钙粉,进而以缺钙为模型研究大鼠对复合钙粉的吸收效果。结果表明：采用胰蛋白酶-柠檬酸制取复合钙粉的最佳工艺为加酶量2.5×103 U/g、酶解pH 8.0、酶解时间1.5 h、酶解温度45 ℃,此时,蛋白水解度为57.24%;柠檬酸浓度0.35 mol/L、柠檬酸用量20 mL、处理时间1.5 h时,钙溶出率为85.78%;制取的复合钙粉中钙含量为19.6%,总氨基酸含量为18.3%。复合钙粉质地细腻,呈淡褐色,无异味。动物实验表明,从虾壳中制取的复合钙粉的大鼠钙吸收效果显著（P＜0.05）,灌胃剂量66.5 mg/（kg•d）（以钙含量及大鼠体质量计）的复合钙粉能明显提高大鼠血清钙、磷水平,促进大鼠正常生长。胰蛋白酶结合柠檬酸能有效地从虾壳中制取复合钙粉,其吸收效果优于相同钙含量的碳酸钙。     

鲜切草鱼鱼腩保鲜剂筛选与货架期

以鲜切草鱼鱼腩为原料,选取17 种平皿体系条件下对假单胞菌抑菌效果好的保鲜剂对草鱼鱼腩进行保鲜处理,通过感官初筛选出对产品色泽、味道、组织形态、组织弹性影响小的保鲜剂;研究不同初筛得到的保鲜剂处理后冷鲜草鱼肉贮藏期间品质变化,并根据微生物生长曲线构建微生物生长一级模型,通过模型参数的变化定量反映抑菌剂对微生物生长的抑制作用,综合考虑保鲜剂对冷鲜鱼腩品质以及抑菌特性影响,选出草鱼鱼腩处理的最佳保鲜剂;并结合气调包装（50% CO2＋50% N2）研究保鲜处理后草鱼鱼腩的货架期。结果表明：没食子酸、柠檬酸、鞣酸、磷酸三钾、ε-聚赖氨酸、植酸处理后鱼腩颜色正常,保持原有鱼香味,组织形态和弹性无不好影响;ε-聚赖氨酸处理后品质优于其他组,并在草鱼鱼腩基质上有较好抑菌特性,确定ε-聚赖氨酸为草鱼鱼腩最佳保鲜剂;经ε-聚赖氨酸处理的鲜切鱼腩结合气调包装后置于4 ℃贮藏时的货架期可达13 d,能较长时间保持鲜切草鱼鱼腩的品质。     

鲢鱼新鲜度对鱼糜凝胶品质的影响

通过对4 ℃条件下鲢鱼死后10 h感官特性、pH值和僵直指数的变化过程以及鲢鱼死后不同时间鱼肉的挥发性盐基氮（total volatile basic nitrogen,TVB-N）值和Ca2＋-ATP酶活性变化的检测,研究鲢鱼肉新鲜度对鱼糜凝胶品质的影响。结果表明：鲢鱼在死后2～3 h开始进入僵直期,鱼体僵直指数升高,pH值下降;随着鲢鱼死后时间的延长,鱼肉的TVB-N值显著升高,Ca2＋-ATP酶活性显著降低。采用死后不同时间的鲢鱼肉制作的鱼糜凝胶,其凝胶强度、保水性和白度均有显著差异,其中以新鲜鲢鱼为原料制作的鱼糜凝胶的凝胶强度最高,而鱼糜凝胶的保水性和白度在鱼肉的僵直期最差。     

花椒精对卵巢切除大鼠脂质代谢的影响

目的：探讨花椒精对卵巢切除大鼠脂质代谢的影响。方法：将40 只雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为5 组,其中1 组进行伪切除手术（Sham）作为对照组,另外4 组进行双侧卵巢切除手术（ovariectomy,OVX）,恢复饲喂一周后,分为空白组和灌胃花椒精高（15 mg/kg）、中（10 mg/kg）、低（5 mg/kg）剂量组。灌胃4 周后解剖,检测大鼠血脂、肝脂及小肠和粪便中胆汁酸含量等指标。结果：灌胃花椒精可降低血清中甘油三酯（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoproteincholesterin,LDL-C）和非高密度脂蛋白胆固醇（non-high density lipoprotein cholesterol,non-HDL-C）的浓度（p＜0.05）,升高HDL-C的浓度;降低肝脏中脂肪、TC、TG的含量（P＜0.05）;增加大鼠排便量、促进小肠内容物和粪便中胆汁酸以及粪醇、胆固醇等中性固醇的排泄,且存在明显的剂量效应。结论：花椒精可改善卵巢切除SD大鼠因雌性激素缺乏而引起的高脂血症,可能与促进胆汁酸和中性固醇的排泄有关。     

明日叶查耳酮对Ⅱ型糖尿病大鼠脂代谢的影响

目的：研究明日叶查耳酮和游泳运动对Ⅱ型糖尿病大鼠脂代谢的影响。方法：注射链脲佐菌素诱导成年雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠糖尿病模型,观察补充明日叶查耳酮、游泳运动、游泳运动结合补充明日叶查耳酮,以及阳性药物二甲双胍对糖尿病大鼠血清甘油三酯（triglyceride,TG）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein,HDL）、游离脂肪酸（free fatty acid,FFA）水平的影响,以及对肝脏内脂素（visfatin）mRNA、甘油-3-磷酸酰基转移酶-1（glycerol-3-phosphate acyltransferase-1,GPAT-1）mRNA、肉碱棕榈酰转移酶-1（carnitine palmitoyl transferase-1,CPT-1）mRNA相对表达量的影响。结果：与糖尿病组比较,各干预组大鼠的TG 、TC、LDL、FFA水平显著下降,HDL水平显著升高;各干预组大鼠肝脏visfatin mRNA、GPAT-1 mRNA相对表达量显著下降;肝脏CPT-1 mRNA相对表达量则均显著升高。结论：明日叶查耳酮有很好的改善糖尿病大鼠脂代谢的能力,并且与游泳运动产生协同效果。     

薛荔籽果胶对高脂膳食去势大鼠脂质代谢及盲肠内环境的影响

目的：研究薛荔籽果胶对高脂膳食去势大鼠脂质代谢及盲肠内环境的影响。方法：将40 只健康雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠随机分为5 组,其中1 组作为空白对照进行卵巢伪切除手术（Sham组）,另外4 组进行双侧卵巢切除手术（OVX组）,1 周后分为模型对照组和饲喂5%、10%、15%薛荔籽果胶低、中、高剂量组。喂养4 周后解剖测定大鼠血脂和肝脂含量、肝脏组织形态,以及盲肠内容物含水率和短链脂肪酸（shortchainfatty acids,SCFAs）含量等指标。结果：模型对照组大鼠的血脂以及肝脏质量、肝脏脂肪含量、每克肝脏中胆固醇、甘油三酯含量显著高于双侧卵巢伪切除组（P＜0.05）。薛荔籽果胶对双侧卵巢切除大鼠的血脂浓度几乎没有影响,而肝脏质量有升高趋势,但无显著性差异;同时能显著升高盲肠壁湿质量、盲肠壁表面积、盲肠组织湿质量和盲肠内容物湿质量（P＜0.05）;也能升高盲肠内容物中各SCFAs和总SCFAs含量,且具有明显的剂量关系。结论：薛荔籽果胶对高脂膳食引起高脂血症去势大鼠的血脂、肝脂没有降低效果,反而升高了肝脂水平,但在肠道方面,能改善高脂膳食去势大鼠肠道健康。     

活性化糙米富集γ-氨基丁酸的雾化液组分优化

通过单因素试验和正交试验,优化了糙米湿润活性化富集γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的雾化液p H值、VB6及Ca Cl2浓度,同时研究了最优条件下活性化糙米谷氨酸脱羧酶活力及主要物质含量变化。结果表明:最优培养条件为雾化液p H 3.5、VB6浓度2 mmol/L和Ca Cl2浓度10 mmol/L;在此条件下,活性化糙米中GABA含量可达7.67 mg/100 g,为原料糙米的2.74倍。随着活性化时间的延长,糙米中游离氨基酸、还原糖含量及谷氨酸脱羧酶活力呈现逐渐增加的趋势,可溶性蛋白及淀粉含量呈现逐渐下降趋势。相关性分析表明,GABA含量与谷氨酸、游离氨基酸、可溶性蛋白含量之间均显著相关。     

草鱼脆化过程中肌肉胶原蛋白、矿物质含量和脂肪酸组成变化

研究草鱼脆化过程中主要营养成分的变化规律,在草鱼脆化养殖过程中定期采样,比较研究不同脆化周期的鱼肉胶原蛋白、矿物质含量和脂肪酸组成变化。对不同采样期的鱼肉,采用石墨炉原子吸收光谱法测定肌肉矿物质含量,气相色谱-质谱联用技术测定肌肉脂肪酸组成。结果显示,普通草鱼肌肉的胶原蛋白含量为1.02 g/100 g,显著低于脆肉鲩。与普通草鱼相比,脆化后肌肉的钙、镁的含量分别增加了269.43%、46.05%,但铁、铜元素的含量分别下降了85.59%和23.08%,肌肉的锌、铬和镉含量差异不显著（P＞0.05）。不同脆化周期的肌肉中共检出17 种脂肪酸,多不饱和脂肪酸总量与饱和脂肪酸总量的比值为0.74～1.46,其中以普通草鱼最高。随着脆化时间的延长,肌肉的多不饱和脂肪酸总量、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸总量均有所下降。研究表明在草鱼脆化过程中肌肉胶原蛋白和钙、镁含量显著增加,铁、铜含量和多不饱和脂肪酸总量有所下降。