水力空化作用强化月桂酰氯酰化大豆蛋白工艺的研究

在水力空化作用下,以大豆蛋白为原料,利用月桂酰氯酰化修饰大豆蛋白。设计了产生水力空化作用的强化反应装置,利用单因素实验对水力空化压力、水力空化时间、水力空化温度、料液比对月桂酰氯酰化大豆蛋白产物产率的影响进行了研究。采用响应面实验优化了工艺条件,测定了月桂酰氯酰化大豆蛋白产物的表面活性性能。结果表明:水力空化强化月桂酰氯酰化大豆蛋白最优工艺条件为水力空化压力0.32 MPa、水力空化时间56 min、水力空化温度57℃、料液比1.75∶1,在此条件下,产率为96.5%,酰化产物表面活性性能优越。     

杏鲍菇超氧化物歧化酶部分酶学性质研究

研究了杏鲍菇不同部位超氧化物歧化酶（SOD）活力的差异,以及pH、温度、金属离子和有机试剂对SOD酶活性的影响。结果表明:菌盖和菌褶SOD酶活力显著高于菌柄,外皮高于心部;杏鲍菇SOD在p H5⁸范围内活性稳定,具有良好的耐热性;Cu²⁺、Zn²⁺、Fe²⁺和Mn²⁺对SOD酶活力具有不同程度的激活作用,其中Cu²⁺的激活作用最突出;甲醇、乙醇和正丁醇对SOD活性的影响均为低浓度激活、高浓度抑制,而丙酮则表现出抑制作用。可见杏鲍菇SOD酶活力受到p H、温度、金属离子和有机溶剂等多种因素的影响。      

碱性蛋白酶酶解提取羊血血红素工艺条件优化

以羊血为试材,血红素得率为指标,在加酶量、酶解pH、酶解温度和酶解时间等单因素实验基础上,采用正交实验优化工艺参数。结果表明最佳反应参数为碱性蛋白酶加酶量8000U/g血红蛋白、酶解pH8.5、酶解温度55℃、酶解时间4h,在此条件血红素得率达到85.3%,即1L羊血可提取3.93g血红素。该法所得产品的安全性高,适合工业化生产。      

金属离子对羊血超氧化物歧化酶活性的影响

以离子交换层析法制备的羊血SOD（Superoxide dismutase）为原料,加入不同浓度的Na+、K+、Ba2+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+、Fe2+等金属离子,25℃保温4h后,利用邻苯三酚自氧化法测定SOD酶活力,并计算相对酶活力。结果表明:不同金属离子在不同浓度下对羊血SOD酶活的影响不同。Na+对SOD酶活影响不大;K+、Ca2+、Fe2+在体外对羊血SOD具有激活作用,且Fe2+作用明显,相对酶活力可达378.98%;Ba2+、Mg2+在低浓度下对SOD影响不大,在高浓度下有一定的激活作用,但不同浓度激活效果不同;Zn2+、Cu2+在体外对羊血SOD表现有抑制作用,但二者的抑制程度不同。      

金属离子对羊血超氧化物歧化酶活性的影响

以离子交换层析法制备的羊血SOD(Superoxide dismutase)为原料,加入不同浓度的Na+、K+、Ba2+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+、Fe2+等金属离子,25℃保温4h后,利用邻苯三酚自氧化法测定SOD酶活力,并计算相对酶活力。结果表明:不同金属离子在不同浓度下对羊血SOD酶活的影响不同。Na+对SOD酶活影响不大;K+、Ca2+、Fe2+在体外对羊血SOD具有激活作用,且Fe2+作用明显,相对酶活力可达378.98%;Ba2+、Mg2+在低浓度下对SOD影响不大,在高浓度下有一定的激活作用,但不同浓度激活效果不同;Zn2+、Cu2+在体外对羊血SOD表现有抑制作用,但二者的抑制程度不同。     

糖类对羊血超氧化物歧化酶活性的影响

目的：研究糖类对羊血超氧化物歧化酶(SOD)活性影响关系。方法：以离子交换层析法制备的羊血SOD为原料,加入不同浓度的麦芽糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、D-葡萄糖、D-果糖、D-木糖和D-甘露糖,25℃分别保温4、24、48、72h和96h后,利用邻苯三酚自氧化法测定SOD酶活力,并计算相对酶活力。结果：海藻糖对羊血SOD有明显的激活和保护作用,高浓度的麦芽糖和低浓度的乳糖有一定稳定作用,其余糖类对SOD活性影响不大。结论：不同糖类在不同浓度下对羊血SOD活性影响不同。     

曲霉菌酶学性质的研究

研究本实验室保存的2种曲霉my-1及my-2的特性，讨论了时间、温度、pH对曲霉菌产酶的影响，并对酶的适宜反应温度、pH及酶的热稳定性和pn稳定性进行了探讨。     

酶的人工修饰

酶的人工修饰可改变酶的理化性质和生物活性,本文介绍了几种酶人工修饰的方法,分析了方法中存在的问题及其发展方向。     

几丁质脱乙酰酶菌株的筛选鉴定及酶学性质

利用平板变色圈法从土壤中筛选出一株产几丁质脱乙酰酶活力较高的菌株,命名为F2-7-3。为分离筛选出几丁质脱乙酰酶高产菌株、生物制备几丁质脱乙酰酶提供来源,并为进一步提高该菌株产酶能力及酶的活性提供研究基础,通过形态学观察、生理生化实验、16SrDNA测序分析等方法对该菌株进行了鉴定,并对其发酵产生的脱乙酰酶的酶学性质进行了研究。经鉴定该菌株为红球菌属。酶学性质研究表明,该酶反应的最适温度为50℃,最适pH为7.0,Mn2+、Ca2+及K+在低浓度下对酶促反应有激活作用。分析结果表明该菌产酶能力较强,具有良好的开发价值。      

几丁质脱乙酰酶菌株的筛选鉴定及酶学性质

利用平板变色圈法从土壤中筛选出一株产几丁质脱乙酰酶活力较高的菌株,命名为F2-7-3。为分离筛选出几丁质脱乙酰酶高产菌株、生物制备几丁质脱乙酰酶提供来源,并为进一步提高该菌株产酶能力及酶的活性提供研究基础,通过形态学观察、生理生化实验、16SrDNA测序分析等方法对该菌株进行了鉴定,并对其发酵产生的脱乙酰酶的酶学性质进行了研究。经鉴定该菌株为红球菌属。酶学性质研究表明,该酶反应的最适温度为50℃,最适pH为7.0,Mn2+、Ca2+及K+在低浓度下对酶促反应有激活作用。分析结果表明该菌产酶能力较强,具有良好的开发价值。     

脂溶性胭脂虫红色素的制备及表征

为拓宽胭脂虫红色素在食品及日化品等领域中的应用,以月桂酰氯为改性试剂对胭脂虫红色素的主要成分--胭脂虫红酸进行分子结构修饰,制得脂溶性胭脂虫红色素。通过单因素试验及优化验证,确定了最佳制备条件为：以1.0 g胭脂虫红色素为原料,N,N-二甲基甲酰胺、月桂酰氯的用量分别为15.3 mL、4.5 g,反应温度42.0 ℃,反应时长1 h。在此条件下,胭脂虫红色素的回收率为59.35%。通过紫外-可见分光光度计、傅里叶变换红外光谱仪对脂溶性胭脂虫红色素的结构进行表征,表明胭脂虫红色素和月桂酰氯发生了酯化反应,生成了胭脂虫红酸月桂酸酯,并可溶于食用玉米油中,且稳定性较好,20 ℃条件下溶解度为15.06 g/100 g。     

右旋糖苷修饰超氧化物歧化酶及其产物活性研究

右旋糖苷经高碘酸钠氧化及活化后,开环生成两个醛基,与超氧化物歧化酶(SOD)发生加成反应,从而对其进行修饰。修饰后的SOD可有效保持其原有活性,且热稳定性、酸碱稳定性及在乙醇中的稳定性均有所提高。采用红外光谱对其结构进行分析,证实SOD被右旋糖苷成功修饰。     

羊血中凝血酶粗品的提取

本文用有机溶剂沉淀法从羊血中提取凝血酶。同时探讨了醋酸浓度、pH值和激活时间、激活温度对凝血酶得率的影响,通过正交试验确定了最佳提取工艺条件:即激活温度30℃,醋酸浓度1%,pH值5.3,激活时间是1.5 h,并做了验证性试验验。     

响应面分析法优化羊血中SOD的热变性提纯工艺条件

利用响应面分析法(Response Surface Methodology)对羊血中SOD的热变性提纯工艺进行优化。在单因素实验基础上选取实验因素与水平,根据中心组合(Box-Benhnken)实验设计原理采用3因素水平的响应面分析法,依据回归分析确定各工艺条件的影响因子,以SOD的比活力为响应值作响应面和等高线。在分析各个因素的显著性和交互作用后,得出最佳工艺条件为:热变性温度55℃;热变性时间15min;0.01mol/lCuCl2的添加量2%。在最佳工艺条件下,SOD活性为1072.43U/mg蛋白。     

酶解鸡血球制备抗氧化肽的工艺优化和分析鉴定

为挖掘家禽血液潜在的抗氧化特性,以鸡血球为原料,筛选最佳蛋白酶酶解制备抗氧化肽,并对酶解工艺进行响应面优化。采用超滤、阳离子交换色谱、凝胶色谱及高效液相色谱对酶解物进行连续分离纯化,并用质谱进行结构鉴定。结果表明,酸性蛋白酶水解血球蛋白制备的酶解物具有最高的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力（＞80%）。其最佳酶解条件为酶用量2%、酶解温度45?℃、酶解时间3.0?h,该条件下的DPPH自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力和还原力分别为（98.31±0.66）%、（28.89±0.31）%和1.94±0.03。经系列分离纯化获得抗氧化活性最强的组分,其在质量浓度为0.1?mg/mL时,DPPH自由基清除能力和还原力分别为（87.16±1.59）%和0.21±0.01。经高效液相色谱-质谱联用技术鉴定,目标肽的氨基酸序列为MGQKDSYVGDEAQSKRGILT,分子质量为2?182.1?Da。     

羊骨抗氧化肽酶解法制备和响应面工艺优化

研究了羊骨抗氧化肽酶法提取工艺及其氨基酸组成.在单因素实验基础上,通过响应面分析法优化羊骨抗氧化肽的提取工艺,利用超滤分离获取不同截留相对分子质量的肽段,采用水杨酸法、DPPH法和铁离子还原法研究梯级肽的抗氧化活性并分析其氨基酸组成.结果表明,碱性蛋白酶为最优酶解蛋白酶,最佳酶解条件为pH 8.9、酶添加量6 400 ...     

葡萄糖苷酶制备冷水溶萝卜花青素修饰物的工艺优化和表征

用膜分离和XAD-4大孔吸附树脂分离得到纯化萝卜花青素,经红外光谱和质谱分析表明其主要成分为萝卜花青素双糖苷,在4℃冷水和65%乙醇溶液中的溶解率仅为46.43%和63.07%。以纯化萝卜花青素为起始原料,进行葡萄糖苷酶修饰,探讨p H值、葡萄糖苷酶/萝卜花青素质量比、反应温度对制备萝卜花青素酶修饰物的影响,确定了糖苷酶修饰萝卜花青素的工艺条件,并用正交试验法对其工艺条件进行优化。红外光谱和质谱分析表明,葡萄糖苷酶修饰萝卜花青素的水解反应具有高度专一性,萝卜花青素双糖苷中的糖苷键被成功水解,生成的萝卜花青素酶修饰物为萝卜花青素单糖苷。通过糖苷酶的修饰,萝卜花青素的冷水可溶性得到了明显地改善,修饰后的萝卜花青素在4℃冷水和65%乙醇溶液中的溶解率分别提高115.38%和58.55%。采用溴邻苯三酚红氧化法的抗氧化能力分析表明,通过糖苷酶的修饰,萝卜花青素抗氧化能力得到明显提高,萝卜花青素酶修饰物对羟自由基的清除能力明显高于萝卜花青素,但是略低于原花青素B2。而且萝卜花青素酶修饰物可抑制人体肝癌细胞MHCC97L的生长,用浓度为5~40μmol/L的萝卜花青素酶修饰物处理人体肝癌细胞MHCC97L 24~72 h,均可显著抑制该细胞的生长,抑制率随其剂量增加而增大。     

铜盐-热变性法分离提取羊血超氧化物歧化酶工艺条件优化

目的:优化铜盐-热变性法分离提取羊血超氧化物歧化酶(SOD)工艺。方法:采用单因素和正交试验,对影响SOD比活力的主要因素进行研究。结果:铜盐-热变性法分离提取SOD的最优工艺条件为热变性温度65℃、热变性时间15min、添加体积分数2.5%的10mmol/L CuSO4溶液,丙酮用量为溶血液的1.25倍,在此条件下得到的SOD比活力为2338.9U/mg。结论:此方法操作简单,成本低,适合工厂化生产。     

盒装羊血豆腐的研制

以新鲜的藏羊血为原料,通过单因素和正交试验对羊血豆腐的生产工艺进行了优化。结果表明:羊血与抗凝剂比例1∶2,凝固剂浓度为0.8%,凝固剂与羊血的比例为1∶4,灭菌温度80℃时,产品质地细嫩,气孔细小均匀,无大量水析出,富有弹性,颜色鲜艳,风味较好。