鳕鱼皮胶原蛋白肽的功能特性及抗氧化活性

以鳕鱼皮胶原蛋白肽为实验材料,研究其吸水性、保水性、乳化性等功能特性,并且进行了体外抗氧化实验。结果表明鳕鱼皮胶原蛋白肽具有较好的吸水性、保水性、吸油性和起泡性,具有一定的乳化性和较弱的泡沫稳定性。体外抗氧化实验结果显示,鳕鱼皮胶原蛋白肽对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基均有一定的清除效果,且清除率与样品溶液的浓度存在剂量依赖关系;浓度为30mg/mL时,胶原蛋白肽对DPPH·、·OH和O2-·的抑制率分别可达到73.84%、85.76%、64.09%。分级后,分子量1ku以下的胶原蛋白肽对DPPH·和·OH的清除能力最强,30mg/mL时清除率达到84%和90.97%;分子量5ku以上的胶原蛋白肽对O2-·清除能力最强,30mg/mL时清除率达到74.02%。     

鳕鱼皮胶原蛋白肽的功能特性及抗氧化活性

以鳕鱼皮胶原蛋白肽为实验材料,研究其吸水性、保水性、乳化性等功能特性,并且进行了体外抗氧化实验。结果表明鳕鱼皮胶原蛋白肽具有较好的吸水性、保水性、吸油性和起泡性,具有一定的乳化性和较弱的泡沫稳定性。体外抗氧化实验结果显示,鳕鱼皮胶原蛋白肽对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基均有一定的清除效果,且清除率与样品溶液的浓度存在剂量依赖关系;浓度为30mg/mL时,胶原蛋白肽对DPPH·、·OH和O2-·的抑制率分别可达到73.84%、85.76%、64.09%。分级后,分子量1ku以下的胶原蛋白肽对DPPH·和·OH的清除能力最强,30mg/mL时清除率达到84%和90.97%;分子量5ku以上的胶原蛋白肽对O2-·清除能力最强,30mg/mL时清除率达到74.02%。      

固态发酵法制备罗非鱼皮胶原蛋白肽及其抗氧化活性研究

以罗非鱼鱼皮为原料,利用枯草芽孢杆菌固态发酵(solid-state fermentation,SSF)制备胶原蛋白肽。以胶原酶酶活力为评价指标,优化产酶发酵条件,并对发酵产物进行氨基酸组成分析、超滤分离及体外抗氧化活性的研究。结果表明,最佳发酵条件为培养基初始pH值为7,种子液菌龄为14 h,加水量为10 mL,发酵温度为35℃,发酵时间为24 h,在此条件下胶原酶酶活力为90.05 U/mL,水解度高达41.73%。经超滤分离得到3种不同分子质量(molecular weight,MW)范围的胶原蛋白肽组分:TSCP-a(M_W> 10 kDa)、TSCP-b(M_W5 k～10 kDa)、TSCP-c(M_W<5 kDa)。其中TSCP-c的抗氧化活性最高,其羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(·O₂^-)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1-diphenyl-2-picrylhydrazy,DPPH)自由基清除率的半抑制浓度(half inhhibitory co...     

羟脯氨酸小肽的体外抗氧化活性

羟脯氨酸作为胶原蛋白的特征成分,其在肽序列中可使胶原衍生低聚肽对肽酶或蛋白酶产生高度抗性,口服后经过胃肠消化吸收至血液中仍能以肽的形式存在.羟脯氨酸小肽可在肠上皮细胞膜部位被完整吸收,并在血浆达到较高的水平,具有良好的吸收率和生物利用度以及更稳定、高效的生物活性.本实验以15条羟脯氨酸小肽为研究对象,采用1,1-二苯基...     

鮟鱇鱼皮中胶原蛋白的提取及性质研究

采用0.5 mol/L醋酸提取,结合NaCI沉淀法从鮟鱇鱼皮中提取酸溶性胶原蛋白(ASC).并对鮟鱇鱼皮胶原蛋白与Sigma公司的牛跟腱I型胶原蛋白(BATC)进行比较,探讨二者在热变性温度、溶解度、黏度及氨基酸组成等方面的差异.SDS-PAGE结果显示ASC有2条α链(α1和α2链)、β链和γ链,表明该胶原为典型的I型胶原蛋白.DSC分析显示两种胶原的热变性温度分别为22.09℃和38.13℃.氨基酸组成分析结果是亚氨基酸含量ASC低于BATC,分别为14.69%和21.59%;甘氨酸含量相近,分别占所有氨基酸总数的40.05%和38.97%.溶解度结果显示ASC和BATC分别在pH 3和pH 4时达到最大值,在pH 7时两者都呈现最小溶解度;NaCl含量对两者溶解度的影响相同,当其含量低于2%时对溶解度的影响不明显,而随着NaCl舍量的增加,溶解度迅速下降.     

鮟鱇皮胶原蛋白肽最佳制备工艺及自由基清除活性研究

研究提取鮟鱇（Lophius litulon）胶原蛋白肽的最佳制备工艺,测定鱼皮基本成分和多肽的氨基酸组成,探讨鮟鱇多肽组分体外自由基清除效果。结果表明,鱼皮中粗蛋白占28.1%;胃蛋白酶添加量1%,料液比1∶20,酶解时间6h,酶解温度5℃时,羟脯氨酸提取率为11.67%,鮟鱇胶原蛋白肽提取效果最佳;鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽在232nm处有紫外吸收峰,胶原肽中Gly（甘氨酸）占36.61%,Pro（脯氨酸）和Hyp（羟脯氨酸）总含量占16.86%,Phe（苯丙氨酸）、Cys（半胱氨酸）、His（组氨酸）三者含量均低于1.1%;鮟鱇鱼皮胶原蛋白肽具有较强的还原能力且对O-2·（超氧阴离子自由基）、DPPH·（二苯基苦酰肼基自由基）、·OH（羟自由基）具有一定的清除效果,清除能力与胶原蛋白肽的浓度呈正相关,浓度为10mg/mL时,对·OH、DPPH·、O-2·自由基的清除率和Fe3+还原力分别为70.48%、68.78%、48.33%和0.676。      

鮟鱇鱼皮胶原蛋白酶提取最优工艺研究与结构表征

为了研究提取鮟鱇鱼皮胶原蛋白的最优工艺,以鮟鱇鱼皮为研究对象,通过选取液料比、加酶量和酶解时间3个变量进行单因素试验,再根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,在单因素基础上采用三因素三水平响应面分析法(RSM),制备胃蛋白酶酶促溶性胶原蛋白(PSC)并对其进行理化性质分析。结果表明：鮟鱇鱼皮胶原蛋白最优提取工艺条件是4℃、液料比18:1、加酶量3%、提取时间48h,此条件下鮟鱇鱼皮胶原蛋白提取率为2.11%;氨基酸分析得鱼皮中Arg和Tyr含量分别为16%和18%;差示扫描量热仪(DSC)测定PSC的热收缩温度为48.9℃;SDS-PAGE电泳显示胶原蛋白基本保留了三股螺旋结构;电子显微镜(SEM)扫描显示PSC呈多孔网状结构。     

大口黑鲈鱼皮胶原蛋白肽的制备及抗氧化活性研究

目的：探究酶种类对胶原蛋白肽抗氧化活性的影响。方法：从大口黑鲈(Micropterus salmoides)鱼皮中提取胶原蛋白,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶酶解胶原蛋白,得到碱性蛋白酶酶解胶原蛋白肽(APP)、中性蛋白酶酶解胶原蛋白肽(NPP)、木瓜蛋白酶酶解胶原蛋白肽(PP)、胰蛋白酶酶解胶原蛋白肽(TP),比较其总抗氧化活性、还原活性、对DPPH·、·OH 和O-2·清除能力以及亚铁离子螯合能力和脂质氧化抑制活性。结果：4种蛋白酶酶解胶原蛋白肽都具有抗氧化活性,且抗氧化能力与胶原蛋白肽浓度呈正相关,其中APP的抗氧化活性最佳,总抗氧化活性和还原活性分别为1.725和0.958,对DPPH·和O-2·清除率分别为56.35%和38.41%。结论：碱性蛋白酶酶解的胶原蛋白肽抗氧化活性更佳。     

鮟鱇鱼皮酶溶性胶原蛋白对自由基的清除作用

采用胃蛋白酶从鮟鱇鱼皮中提取胶原蛋白,分析胃蛋白酶酶溶性胶原蛋白的氨基酸组成和超微结构,并研究体内外清除自由基机理。结果表明:胃蛋白酶酶溶性胶原蛋白的超微结构呈均匀网状分布,是良好的药物载体,体外清除自由基效果呈质量浓度依赖性,当质量浓度为10 mg/L时,清除超氧阴离子自由基(O2-·)和羟自由基(·OH)能力最强。体内实验显示其能显著抑制小鼠皮肤中丙二醛生成,提高超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和羟脯氨酸含量,当剂量为100 mg/(kg·d)时最好。提示该胶原蛋白具有体内外清除自由基作用,其氨基酸组成、超微结构与清除自由基能力有关,提取的鮟鱇鱼皮酶溶性胶原蛋白清除自由基活力接近于提取的胶原蛋白肽。     

不同方法提取鮟鱇鱼皮胶原蛋白的比较和分析

为高效获得胶原蛋白,以鮟鱇鱼鱼皮为原料,以风味蛋白酶添加量、碱性蛋白酶添加量、超声时间、酶解时间、酶解温度和pH值为试验因素,采用超声-双酶法和双酶法提取胶原蛋白,利用正交试验确定胶原蛋白的最佳提取工艺并对结果进行比较分析,得出较好的提取方法。结果表明,超声-双酶法提取胶原蛋白最佳提取工艺为:风味蛋白酶添加量3 000 U/g,碱性蛋白酶添加量5 000 U/g,超声时间70 min,酶解时间5 h,酶解温度50℃,在此条件下得到胶原蛋白提取率为(8.86±0.64)%;双酶法提取胶原蛋白最佳提取条件为:风味蛋白酶添加量5 000 U/g,碱性蛋白酶添加量5 000 U/g,酶解温度55℃,p H8.0,在此条件下得到胶原蛋白提取率为(4.55±0.20)%,其中风味蛋白酶添加量比超声-双酶法多2 000 U/g,且胶原蛋白提取率比超声-双酶法低4.31%。综上可知,选取超声-双酶法提取鮟鱇鱼皮胶原蛋白。     

鮟鱇鱼皮硫酸皮肤素的提取

采用复合酶解法提取鮟鱇鱼皮中硫酸皮肤素,通过正交试验法和响应面分析法对提取过程中各个条件进行选择与优化,确定最佳提取工艺为:鮟鱇鱼皮原料加入2.5%的复合酶[m(木瓜蛋白酶)∶m(胰酶)=1∶2],按液料比(mL:g)26∶1加入蒸馏水,76℃下提取19 h,3倍体积乙醇沉淀,冷冻干燥后得到硫酸皮肤素粗品。     

鮟鱇鱼肝抗氧化肽的酶法制备及对羟自由基的清除作用

以脱脂鮟鱇鱼肝为原料,以水解度及对羟自由基的清除活性为考察指标,用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶及胰蛋白酶进行单酶解筛选试验。以水解度及对羟自由基的清除作用为指标,应用二次正交旋转组合设计试验研究加酶量、酶解时间、pH值及温度对制备鮟鱇鱼肝抗氧化肽工艺的影响。综合考虑水解度和对羟自由基的清除活性因素,最终确定碱性蛋白酶酶解鮟鱇鱼肝制备抗氧化肽的最佳工艺条件是:加酶量3000U/g,酶解时间6h,pH8.5,酶解温度55℃。该条件下制备的鮟鱇鱼肝抗氧化肽产物水解度和对羟自由基的清除分别为69.52%、76.74%。     

三酶法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽及活性研究

为了探索制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的最佳工艺,在碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解的基础上,以酶解温度、酶解时间、酶解pH值和酶与底物质量比([E]/[S])为试验因素,以水解度和DPPH自由基清除率为响应值,采用响应面分析法优化Orientase 20A酶的酶解条件。结果表明:最优工艺参数为:酶解温度为41.74℃、pH3.97、酶解时间为6h、[E]/[S]为1.5%,酶解液水解度和DPPH自由基清除率的预测值分别为9.42%和35.01%,验证值分别为9.57%和35.21%。响应面对酶解法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的酶解条件的优化是可行的,可以用于实际预测。抗氧化活性实验表明,酶解肽具有较强的清除DPPH自由基和ABTS+.能力,其IC50值分别为10.78mg/mL和8.26mg/mL。     

猪皮胶原蛋白酶解及其酶解产物的抗氧化活性

以新鲜猪皮为原料,利用Alcalase水解胶原蛋白,并对影响Alcalase水解过程的各个因素进行研究,通过对水解度和超氧阴离子自由基(O2－ ·)清除率的测定,确定Alcalase水解猪皮胶原蛋白的最适条件;研究在最适条件下制备的不同质量浓度的猪皮胶原蛋白酶解液对DPPH自由基和O2－ ·的清除效果。结果表明：Alcalase水解猪皮胶原蛋白的最适条件为：pH7.5、温度55℃、酶与底物比6000U/g、底物质量浓度40mg/mL,水解时间4h;在此水解条件下,水解度达到9.55%,O2－ ·清除率达到60.11%;在相应质量浓度10～50mg/mL范围内,猪皮胶原蛋白酶解液的DPPH自由基最大清除率为95.06%,IC50为3.89mg/mL;O2－ ·最大清除率为65.89%,IC50为16.43mg/mL。猪皮胶原蛋白酶解液具有较强的自由基清除能力。     

安康鱼肠中胶原蛋白与多糖的提取与保湿性

胶原蛋白经改性可作为皮革的复鞣剂开发利用,具有绿色环保、安全无毒害等特点。用酶法从废弃的安康鱼鱼肠中提取了胶原蛋白和多糖,研究了样品的预处理及胶原蛋白和多糖提取的最佳条件。胶原蛋白的最佳提取条件是:pH 1.9、料液比1∶10、胃蛋白酶的添加量为1%、酶解时间4 h、酶解温度10℃,其提取率为11.3%;多糖的最佳提取条件是:料水比1∶5、温度90℃、提取时间2 h,其提取率为1%。用提取的胶原蛋白和多糖涂抹皮肤,测试了保湿性,胶原蛋白和多糖的含水量分别为38.40%和37.20%。     

鮟鱇鱼骨对去卵巢骨质疏松大鼠的影响

目的：通过研究鮟鱇鱼骨粉对去卵巢大鼠骨质疏松的作用,确定鮟鱇鱼加工下脚料的使用价值,方法：雌性SD大鼠60只,按体质量随机分为6组,即假手术组、模型对照组、阳性对照组(乳酸钙1000mg/(kg·d))及鱼骨高(6636mg/(kg·d))、中(2100mg/(kg·d))、低(665mg/(kg·d))3个剂量组。手术后12d,持续灌胃12周后,测定股骨长度、股骨质量、子宫形态以及血清中Ca、P和碱性磷酸酶(APL)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)的水平。结果：各剂量组大鼠与模型对照相比股骨质量升高,所有大鼠的股骨长度、血清Ca和血清P水平差异无显著性,模型对照组的血清碱性磷酸酶水平APL、AST、ALT与假手术组相比明显升高(P＜0.05或P＜0.01),而各剂量组的APL、AST、ALT水平与假手术组差异不显著。同时各剂量组可以促进子宫内膜腺体发育和内膜上皮无纤毛细胞上的微绒毛生长。结论：鮟鱇鱼骨可改善去卵巢大鼠的血清生化指标,并促进子宫内膜腺体发育和内膜上皮无纤毛细胞上的微绒毛生长。     

大鲵皮胶原蛋白制备工艺优化及其抗氧化活性研究

选择大鲵皮中胶原蛋白得率为指标,研究适宜的有机酸浸提液种类和提取温度,并考察酸浓度、料液比和提取时间三个因素对胶原蛋白提取得率的影响。在单因素基础上,通过正交试验优化了大鲵皮胶原蛋白的提取工艺。并采用DPPH法与水杨酸法对大鲵皮中胶原蛋白进行抗氧化活性研究。结果表明,大鲵皮胶原蛋白的最佳提取条件为:盐酸浸提液浓度为0.4 mol/L、提取温度为35℃、料液比为1:15(g:mL)、提取时间为24 h,在该条件下,大鲵皮胶原蛋白得率为40.2%。该条件下得到的胶原蛋白对DPPH自由基、羟基自由基的IC₅₀值分别为9.96和7.79 mg/mL。研究显示,酸法浸提大鲵皮中胶原蛋白得率较高,且具有较好抗氧化活性,为大鲵皮的开发应用提供了理论依据。