姬松茸多糖的提取及其对D-半乳糖诱导衰老小鼠的免疫调节作用

建立姬松茸多糖(Agaricus blazei polysaccharides,ABP)的提取方法,并研究姬松茸多糖对D-半乳糖诱导的衰老小鼠免疫调节作用。采用水提醇沉法提取姬松茸多糖,通过单因素实验和正交试验筛选并优化姬松茸多糖的最佳提取工艺;采用D-半乳糖(400 mg/kg)构建衰老小鼠模型,将小鼠随机分为5组,空白对照组(CON)、模型组(MOD)、姬松茸多糖低剂量组(ABP-L,200 mg/kg/d)、姬松茸多糖中剂量组(ABP-M,400 mg/kg/d)、姬松茸多糖高剂量组(ABP-H,800 mg/kg/d);分别测定各组小鼠胸腺和脾脏指数;CCK-8法测定ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖转化;ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6含量。结果表明,姬松茸多糖最佳提取工艺为:提取温度100℃,提取时间3 h,料液比1∶20 g/mL,提取次数3次,此时姬松茸多糖的平均得率为8.814%±0.109%;与模型组相比,姬松茸多糖高剂量组显著提高小鼠脾脏(p0.01)和胸腺指数(p0.05),姬松茸多糖高剂量组极显著促进衰老小鼠脾细胞增殖(p0.01),增加衰老小鼠血清中TNF-α(p0.01)、IL-6(p0.01)含量。姬松茸多糖对D-半乳糖诱导的衰老小鼠模型具有免疫增强作用。     

姬松茸多糖增强免疫功能及抗疲劳作用的研究

探讨姬松茸多糖对小鼠免疫功能和抗疲劳作用的影响。成年小鼠40只随机分为对照组、姬松茸多糖低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只。分别以生理盐水、100、150、200 mg/kg浓度姬松茸多糖灌胃给药,持续10 d,对小鼠进行抗疲劳试验和相关免疫指标的测定。姬松茸多糖显著提高小鼠脾脏和胸腺指数(中剂量时P0.05;高剂量时P0.01);姬松茸多糖显著提高小鼠脾脏和胸腺指数,增加小鼠血清中IL-6和TNF-α的含量,提高CD4~+、CD8~+细胞计数;并能延长小鼠常压耐缺氧时间和负重游泳时间,提高小鼠血清中SOD活性,降低MDA含量。姬松茸多糖增强能够小鼠免疫功能和抗疲劳作用。     

姬松茸保健饮液的研制及其免疫调节功能评价

目的:研究姬松茸发酵保健饮液的制备方法并对其免疫调节活性进行评价.方法:将姬松茸液态深层发酵液浓缩后,与菌丝体提取液进行混合,再经精滤、调配、装瓶、杀菌、冷却等工序制得姬松茸保健饮液.采用昆明种小鼠经口灌胃方式给与5、10和30mg/kg·d三种多糖剂量的保健饮液,通过测定免疫器官重量、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞指数、鸡红细胞作免疫源的溶血素含量及小鼠外周血中淋巴细胞酶标记染色测定、2,4-二硝基氟苯诱发的迟发型变态反应来评价该保健饮液对小鼠免疫功能的影响.结果:姬松茸发酵保健饮液能增强小鼠的胸腺指数和脾指数,提高腹腔巨噬细胞的吞噬功能和溶血素含量,增强2,4-二硝基氟苯所致的迟发型变态反应,其最适作用剂量为10mg/kg·d.结论:姬松茸发酵保健饮液可以提高小鼠非特异性免疫、特异性免疫和细胞免疫功能.     

落葵多糖的免疫调节和肿瘤抑制作用

目的研究落葵多糖的免疫增强作用和肿瘤抑制作用。方法采用碳粒廓清试验验证落葵多糖对小鼠免疫吞噬功效影响,采用称重法测定落葵多糖对小鼠免疫器官的影响,采用S180肿瘤模型研究落葵多糖抑制肿瘤的功效。结果落葵多糖给予剂量12.5,50 mg/kg·d,可明显改变小鼠碳粒廓清指数;给予剂量50,100,200 mg/kg·d,对小鼠胸腺指数和脾指数均有较大影响;给予剂量300,500 mg/kg·d,显示出良好的抑瘤作用。结论落葵多糖能增强小鼠免疫功能、抑制S180荷瘤小鼠肿瘤生长,有较好的免疫调节功能。     

落葵多糖的免疫调节和肿瘤抑制作用

目的:研究落葵多糖的免疫增强作用和肿瘤抑制作用.方法:采用碳粒廓清试验验证落葵多糖对小鼠免疫吞噬功效影响,采用称重法测定落葵多糖对小鼠免疫器官的影响,采用S(180)肿瘤模型研究落葵多糖抑制肿瘤的功效.结果:落葵多糖给予剂量12.5,50mg/kg·d,可明显改变小鼠碳粒廓清指数;给予剂量50,100,200mg/kg·d,对小鼠胸腺指数和脾指数均有较大影响;给予剂量300,500mg/kg·d,显示出良好的抑瘤作用.结论:落葵多糖能增强小鼠免疫功能、抑制S(180)荷瘤小鼠肿瘤生长,有较好的免疫调节功能.     

白首乌多糖的免疫活性研究

目的:研究了白首乌多糖(RCBPs)体外对兔子淋巴细胞转化及体内对正常小鼠免疫功能的影响.方法:将RCBPs分为2、4、6g几三个剂量组,分别加入含有兔血的营养瓶内,通过观察T淋巴细胞的转化情况,研究多糖体外免疫功能状况;另将RCBPs分为高、中、低三个剂量组(150、100、50mg/kg·d),连续给小鼠灌胃7d,并进行小鼠体内免疫功能测试.结果:RCBPs各剂量组,均能极显著地(p<0.01)促进PHA诱导的家兔T淋巴细胞在体外的增殖能力;RCBPs能提高小鼠的胸腺和脾脏指数、巨噬细胞的吞噬功能、增强小鼠迟发型超敏反应、加速碳粒的清除.结论: 自首乌多糖具有免疫调节活性.     

姬松茸多糖对大鼠脾脏细胞因子mRNA表达的影响

研究姬松茸多糖对大鼠脾脏细胞因子mRNA表达的影响,探讨姬松茸多糖对大鼠的免疫调节机理。选用45日龄SD大鼠,随机分为2组,每组8只,雌雄各半,分别为对照组、多糖组。多糖组,每天每只100mg/kg多糖灌胃;对照组,灌等量的生理盐水。饲养60d后,采集脾脏,采用荧光定量RT-PCR法分析其细胞因子IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γmRNA的相对表达量,结果表明:与对照组相比,多糖组脾脏IL-1β、TNF-αmRNA的表达量分别上升14.3%、17.2%,差异显著(P<0.05);IL-2、IL-6、IFN-γmRNA的表达量分别上升31.0%、72.6%、20.5%,差异极显著(P<0.01)。说明姬松茸多糖可增加大鼠脾脏细胞因子的表达量,进而提高免疫作用。     

白玉菇多糖对免疫抑制型小鼠的免疫调节作用

目的:研究白玉菇多糖对免疫抑制型小鼠脾脏、胸腺的免疫调节作用。方法:经超声波辅助热水浸提及Sevage法去蛋白得到白玉菇精多糖(RPHM)。将小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组、RPHM低剂量组(30 mg/kg bw/d)、RPHM中剂量组(60 mg/kg bw/d)、RPHM高剂量组(120 mg/kg bw/d),每天同时间段进行灌胃,灌胃15 d,建立环磷酰胺(CPA)免疫抑制型小鼠模型。取小鼠脾脏、胸腺,测定其体重、脏器指数;血清细胞因子、单核-巨噬细胞吞噬能力;外周白细胞、红细胞和血小板计数并观察脾脏、胸腺的形态学。结果:与模型组相比,RPHM中剂量组(60 mg/kg bw/d)、高剂量组(120 mg/kg bw/d)可明显提升免疫抑制型小鼠的毛色、活动情况、身体状况、食欲、体重、脾脏指数和胸腺指数、单核-巨噬细胞吞噬功能、骨髓造血功能等指标;也可在一定程度上提高免疫抑制型小鼠IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-α的水平,并改善IL-6的分泌异常情况;还可明显改善免疫抑制型小鼠脾脏、胸腺的病变,改善结构完整度。结论:RPHM对免疫抑制型小鼠的脾脏和胸腺有明显的免疫调节作用。     

益母草多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响作用研究

目的:观察益母草多糖对免疫抑制小鼠免疫器官、巨噬细胞廓清速度、溶血素生成的影响,评价益母草多糖对小鼠免疫抑制功能的作用效果。方法:将KM小鼠随机分为6个组,腹腔注射环磷酰胺建模,分别为正常对照组、模型对照组、茯苓多糖阳性对照组,益母草多糖低、中、高浓度组。连续灌胃14d后,进行小鼠碳粒廓清和溶血素实验,测定小鼠巨噬细胞的碳粒廓清指数K和吞噬指数6;测定小鼠血清中溶血素的含量;计算小鼠脾脏、胸腺系数。结果:益母草多糖能在一定程度上提高小鼠腹腔巨噬细胞的廓清能力及吞噬速度,增加血清中溶血素的含量,增加胸腺和脾脏指数,提高小鼠机体免疫能力。结论:益母草多糖有增强小鼠免疫功能的作用。     

南瓜及红甜菜多糖对小鼠免疫功能的影响

研究南瓜和红甜菜苷多糖对正常小鼠免疫功能调节作用的影响。利用超声提取法得到80%的乙醇粗提物,并绘制葡萄糖标准曲线,测定南瓜和红甜菜多糖含量分别为67.30%和85.82%。实验小鼠分为2组,将南瓜和红甜菜多糖配成(50 mg/kg.d),分别经胃灌注南瓜及红甜菜苷多糖,每天1次连续7 d,对照组小鼠用等量蒸馏水灌胃。于实验第8天进行小鼠体内免疫功能测试。结果表明:南瓜多糖和红甜菜多糖能提高小鼠免疫器官重量、巨噬细胞的吞噬功能及单核巨噬细胞对血流中碳粒的清除能力,红甜菜多糖的作用更加明显。南瓜多糖及红甜菜多糖具有免疫调节活性作用。     

阿魏侧耳胞外多糖对荷瘤小鼠免疫能力的影响

通过皮下注射小鼠腹水瘤细胞构建荷瘤小鼠模型,灌胃法给药,采用血液分析仪、细胞培养、酶联免疫吸附等设备和方法测定血液中白细胞和淋巴细胞数量、腹腔巨噬细胞吞噬能力、脾淋巴细胞增殖能力、免疫器官指数、血浆中肿瘤坏死因子-α含量等来研究阿魏侧耳胞外多糖对荷瘤小鼠免疫功能的调节作用。结果显示：与荷瘤对照组相比,灌胃100、200 mg/kg的阿魏侧耳胞外多糖可显著降低荷瘤小鼠瘤体质量（P＜0.05）、提高血液中白细胞和淋巴细胞数量（P＜0.05）、促进脾淋巴细胞的增殖（P＜0.05）,增加免疫器官指数（P＜0.05）和血浆中肿瘤坏死因子-α的含量（P＜0.05）;灌胃200 mg/kg的阿魏侧耳胞外多糖可以显著增强荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力（P＜0.05）。因此,一定浓度的阿魏侧耳胞外多糖可提高荷瘤小鼠的免疫能力。     

姬松茸保健酒的制备

本文以姬松茸菌丝体的深层发酵液为原料,研究了姬松茸保健酒的制备工艺。先将姬松茸菌丝体进行深层发酵、分离,并对分离后菌丝进行超声破碎30min,然后重新将菌丝体加入到分离后的发酵液中并添加193g／L庶糖进行发酵,其发酵参数为：酒精发酵酵母接种量为1．5％,发酵温度为26℃,后酵时间为6d。此工艺下制得的保健酒的酒精度为8-9°,粗多糖含量大于3．00％,总酸度为0．5g,L,酒质柔顺爽口,具有姬松茸独特的香气。     

鸡枞菌精多糖对酒精性损伤小鼠肾及免疫器官的抗氧化作用

目的：研究鸡枞菌精多糖（refined polysaccharide from Termitomyces albuminosus,RTAP）对酒精所致急性肝损伤小鼠肾、脾脏及胸腺的保护作用。方法：采用超声波辅助的热水浸提法提取鸡枞菌多糖,小鼠被随机分为正常组、模型组、阳性对照组（饲喂联苯双酯,150 mg/（kg·d））、RTAP各剂量组（100、200、400 mg/（kg·d））,连续灌胃30 d,正常组按等量生理盐水灌胃。第31天除了正常组外,给予50%乙醇（12 mL/kg）建立动物急性肝损伤模型。小鼠处死后取肾脏、脾脏、胸腺,测定各项抗氧化指标。结果：与模型组相比,RTAP各剂量组均能降低肾脏、脾脏及胸腺丙二醛含量,提高各器官超氧化物歧化酶活性、过氧化氢酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性及谷胱甘肽含量。结论：RTAP对酒精性损伤小鼠肾及免疫器官具有明显的抗氧化作用,其原理应该与其所具有抗脂质过氧化和清除体内过多的氧自由基作用有关。     

富锌培养对姬松茸生长代谢的影响

研究了锌对食药用菌姬松茸生长代谢的影响,考察了姬松茸耐锌能力和富集能力以及锌对姬松茸多糖和氨基酸代谢的影响.结果表明:液体培养姬松茸对锌的最适富集质量浓度为300mg/L,在锌质量浓度为300 mg/L以内,锌对姬松茸菌丝量、多糖、氨基酸均有促进作用.锌的有机化分析表明82.2％的ZnSO4在姬松茸菌丝内以有机锌的形式存在,氨基酸分析结果显示,富锌后菌丝体和发酵液必需氨基酸含量与对照相比分别提高了12.3％和3.6％.     

豆豉、腐乳蛋白质降解物限量标准研究

目的：测定豆豉、腐乳中包括挥发性盐基氮（total volatile basic nitrogen,TVB-N）值、三甲胺、硫化氢、生物胺在内的蛋白质分解产物含量,确定豆豉、腐乳中蛋白质的腐败程度,为生产更安全的豆豉、腐乳等发酵豆制品提供依据。方法：参考GB/T 5009.44-2003《肉与肉制品卫生标准的分析方法》、GB/T 5009.179-2003《火腿中三甲胺氮的测定》、GB/T 16489-1996《水质：硫化物的测定：亚甲基蓝分光光度法》及其他文献分别对样品中TVB-N值、三甲胺及硫化氢等进行测定。结果：豆豉中TVB-N值、总生物胺、腐胺、三甲胺及硫化氢的含量分别为8.20～372.72 mg/100 g、15.67～2 057.56 mg/kg、ND～276.03 mg/kg、0.26～10.43 mg/100 g及1.22～27.27 mg/kg;腐乳中的含量分别为95.33～652.94 mg/100 g、11.38～2 406.95 mg/kg、11.38～1 147.32 mg/kg、0.42～4.31 mg/100 g及0.27～3.72 mg/kg。结论：腐乳、豆豉中TVB-N、三甲胺、硫化氢、生物胺等腐败变质物质大量生成,影响此类食品的可食用性。可初步将TVB-N值、腐胺、总生物胺及三甲胺含量作为腐乳的腐败变质标志物;TVB-N值、总生物胺及三甲胺含量作为豆豉的腐败变质标志物,结合生产环节确定此类物质的限定值。     

姬松茸发酵种龄筛选及发酵动力学分析

研究了不同种龄对姬松茸液体发酵过程中菌丝体干质量、胞外多糖含量、蔗糖利用率的影响,并运用动力学分析的方法对姬松茸菌体发酵菌丝体干质量、胞外多糖含量、蔗糖利用率、溶氧进行相关分析。结果表明,4 d种龄的姬松茸发酵液的菌丝体干质量、胞外多糖含量和蔗糖利用率均优于其他种龄的姬松茸发酵液,且通过5 L发酵罐放大试验菌丝体干质量、胞外多糖含量、蔗糖利用率分别为1.417 g/100 mL、6.967 g/L、82.5%,较摇瓶发酵培养分别提高了45.37%、20.41%、5.87%。通过各发酵参数的相关性分析表明,姬松茸液体深层发酵菌丝体干质量、胞外多糖含量同蔗糖利用率、溶氧之间存在一定的相关性。     

超高效液相色谱法测定芒果中啶酰菌胺和吡唑醚菌酯

建立芒果中杀菌剂啶酰菌胺和吡唑醚菌酯残留检测的超高效液相色谱方法。芒果样品经乙腈提取,氨基(NH2)固相萃取柱净化,以乙腈和水为流动相梯度洗脱,采用双波长紫外检测器检测,外标法定量。结果表明:啶酰菌胺和吡唑醚菌酯含量分别在0.10~4.00μg/mL和0.02~1.00μg/mL质量浓度范围内与色谱峰面积呈现良好的线性关系,决定系数R2均大于0.999,方法的检出限均为0.002 mg/kg,分别从3个不同添加水平检测结果可以看出,方法的回收率在76.00%~103.00%之间,相对标准偏差为1.07%~13.28%。     

天冬种子油营养成分分析及镇静催眠作用观察

目的：研究天冬种子油的理化性质和营养成分含量,观察天冬种子油对小鼠的镇静催眠作用,并评价其急性毒性。方法：采用中国油脂标准方法测定天冬种子油基本营养成分和理化性质;气相色谱-质谱联用法分析不皂化物成分;原子吸收分光光度计（atomic absorption spectrometry,AAS）法检测矿质元素含量;以KM种小鼠为受试动物,研究天冬种子的镇静催眠作用,并考察其急性毒性。结果：天冬种子油水分含量为1.87 g/100 g、灰分含量为0.15 g/100 g、粗脂肪含量为96.6 g/100 g、VE含量为405.55 μg/g;不皂化物主要为烷烃类化合物（17%）和甾醇类化合物（41.8%）;天冬种子油中含量较高的矿质元素有钠（297.92 μg/g）、镁（216.88 μg/g）、钙（145 μg/g）;天冬种子油4.65 g/kg和2.33 g/kg剂量组对小鼠自主活动有明显抑制作用,且能显著增加阈下剂量戊巴比妥钠小鼠睡眠只数;一次性灌胃最大给药量40 mL/kg（37.24 g/kg）,连续观察14 d,未见死亡或体质量、活动等异常。结论：天冬种子油含有丰富的营养成分,具有安神镇静的作用,并且安全性较高。     

甘草多糖对单核细胞增生性李斯特菌体内外生长的影响

目的：探讨甘草多糖对单核细胞增生性李斯特菌（Listeria monocytogenes,Lm）体内外生长的影响。方法：采用平板计数法和荧光显微镜、分光光度法及Bliss法分别分析甘草多糖对Lm生长速率和生物被膜形成的影响及计算细菌对小鼠半数致死量（median lethal dose,LD50）。观察低剂量（1 mg/kg）、中剂量（10 mg/kg）和高剂量（100 mg/kg）甘草多糖对感染100×LD50 Lm小鼠的保护力。小鼠感染0.01×LD50的Lm后1、7、14、21、28、35 d剖杀小鼠,检测脾脏、肝脏和肺脏中Lm分布的消长情况。结果：低质量浓度时（10、20、50 μg/mL）,甘草多糖随着质量浓度增加对Lm标准菌株10403S生长速率和生物被膜形成的促进作用呈上升趋势;但高质量浓度时（100、200 μg/mL）这种促进作用逐渐降低。Lm口服感染小鼠的LD50为2.70×108 CFU。高剂量甘草多糖对于100×LD50的Lm感染可提供50%的保护力。0.01×LD50的Lm感染小鼠,随着甘草多糖质量浓度增加小鼠脾脏、肝脏和肺脏的细菌量逐渐减少。结论：低质量浓度甘草多糖在体外对Lm的生长具有促进作用,但随着质量浓度增高促进强度逐渐降低,而甘草多糖可以提高小鼠抵抗Lm感染的能力。     

姬松茸多糖铁(Ⅲ)合成方法的研究

采用姬松茸多糖(ABMP)和三氯化铁(FeCl3)为原料合成姬松茸多糖铁(Ⅲ)(ABMP-Fe(Ⅲ))复合物,在单因素实验设计基础上,设计正交实验优化合成工艺,通过红外光谱、X射线光电子能谱(XPS)和X射线衍射(XRD)对ABMP和ABMP-Fe(Ⅲ)的理化性质进行初步分析。结果表明,姬松茸多糖铁为无定型红棕色粉末,易溶于水,与Fe3+形成稳定的配合物,不存在游离Fe3+,ABMP-Fe(Ⅲ)合成的最佳条件为:柠檬酸三钠:姬松茸多糖=1:2、pH8、时间2 h、温度70 ℃,其中合成的姬松茸多糖铁(Ⅲ)中铁含量为(16.24±0.44)%。